微生物的代謝調(diào)控與發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)培訓(xùn)

第四章發(fā)酵機制無氧呼吸無氧呼吸，又稱厭氧呼吸，是一類呼吸鏈末端的氫受體為外源無機氧化物（個別為有機氧化物）的生物氧化。這是一類在無氧條件下進行的產(chǎn)能效率較低的特殊呼吸。其特點是底物按常規(guī)途徑脫氫后，經(jīng)部分呼吸鏈遞氫，最終由氧化態(tài)的無機物（個別是有機物延胡索酸）受氫。（1）硝酸鹽呼吸

又稱反硝化作用。硝酸鹽在微生物生命活動中具有兩種功能，其一是在有氧或無氧條件下所進行的同化性硝酸鹽還原作用，亦即微生物利用硝酸鹽作為其氮源營養(yǎng)物的作用；其二是在無氧條件下，微生物利用硝酸鹽作為呼吸鏈的最終氫受體，這是一種異化性的硝酸鹽還原作用共同特點是硝酸鹽都要經(jīng)過一種含鉬的硝酸鹽還原酶將其還原為亞硝酸。硫酸鹽呼吸是一種由硫酸鹽還原細菌（或稱反硫化細菌）把經(jīng)呼吸鏈傳遞的氫交給硫酸鹽這類末端氫受體的一種厭氧呼吸。這是一種異化性的硫酸鹽還原作用。通過這一過程，微生物就可在無氧條件下借呼吸鏈的電子傳遞磷酸化而獲得能量。硫酸鹽還原的最終產(chǎn)物是H2S，自然界中的大多數(shù)H2S是由這一反應(yīng)產(chǎn)生的。與硝酸鹽還原細菌不同的是，硫酸鹽還原細菌都是一些嚴(yán)格依賴于無氧環(huán)境的專性厭氧細菌

（4）碳酸鹽呼吸是一類以CO2或重碳酸鹽作為無氧呼吸鏈的末端氫受體的無氧呼吸。根據(jù)其還原產(chǎn)物的不同，可分為兩種類型，一類是產(chǎn)甲烷菌產(chǎn)生甲烷的碳酸鹽呼吸，另一類為產(chǎn)乙酸細菌產(chǎn)生乙酸的碳酸鹽呼吸。能量轉(zhuǎn)移幾個概念底物水平磷酸化氧化磷酸化光合磷酸化第二節(jié)微生物的合成代謝一、糖類的生物合成二、脂肪酸的生物合成三、氨基酸和核苷酸的生物合成氨基酸的生物合成方式：氨基化作用；轉(zhuǎn)氨基作用；糖代謝的中間產(chǎn)物為前體合成氨基酸。第三節(jié)分解代謝和合成代謝間的聯(lián)系分解代謝的功能在于保證正常合成代謝的進行，而合成代謝又反過來為分解代謝創(chuàng)造了更好的條件，兩者相互聯(lián)系，促進了生物個體的生長繁殖和種族的繁榮發(fā)展。中間代謝產(chǎn)物的重要性如果在生物體中只進行能量代謝，則有機能源的最終結(jié)局只是產(chǎn)生ATP、H2O和CO2，這時便沒有任何中間代謝物可供累積，因此，合成代謝也不可能正常進行。相反，如果要進行正常的合成代謝，又須抽走大量為分解代謝正常進行所必需的中間代謝物，結(jié)果也勢必影響具有循環(huán)機制的分解代謝的正常運轉(zhuǎn)。一、兼兼用代代謝途途徑凡在分分解代代謝和和合成成代謝謝中具具有雙雙重功功能的的途徑徑，就就稱兼兼用代代謝途途徑。。EMP、HMP和TCA循環(huán)環(huán)是重重要的的兼用用代謝謝途徑徑。①在兼兼用代代謝途途徑中中，合合成途途徑并并非分分解途途徑的的完全全逆轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)。②在分分解與與合成成代謝謝途徑徑中，，在相相應(yīng)的的代謝謝步驟驟中，，往往往還包包含了了完全全不同同的中中間代代謝物物。③③在真真核生生物中中，合合成代代謝和和分解解代謝謝一般般在細細胞的的不同同區(qū)域域中分分隔進進行，，原核核生物物因其其細胞胞結(jié)構(gòu)構(gòu)上的的間隔隔程度度低，，故反反應(yīng)的的控制制主要要在簡簡單的的酶分分子水水平上上進行行。二、代代謝物物回補補順序序所謂回回補順順序，，又稱稱補償償途徑徑或添添補途途徑，，就是是指能能補充充兼用用代謝謝途徑徑中因因合成成代謝謝而消消耗的的中間間代謝謝物的的反應(yīng)應(yīng)。這樣，，當(dāng)重重要產(chǎn)產(chǎn)能途途徑中中的關(guān)關(guān)鍵中中間代代謝物物必須須被大大量用用作生生物合合成的的原料料時，，仍可可保證證能量量代謝謝的正正常進進行。。微生物物的代代謝調(diào)調(diào)控與與發(fā)酵酵生產(chǎn)產(chǎn)微生物物有著著一整整套可可塑性性極強強和極極精確確的代代謝調(diào)調(diào)節(jié)系系統(tǒng)，，以保保證上上千種種酶能能正確確無誤誤、有有條不不紊地地進行行極其其復(fù)雜雜的新新陳代代謝反反應(yīng)。。一、微微生物物代謝謝過程程中的的自我我調(diào)節(jié)節(jié)1、控控制營營養(yǎng)物物質(zhì)透透過細細胞膜膜進入入細胞胞2、通通過酶酶的定定位控控制酶酶與底底物的的接觸觸3、控控制代代謝物物流向向其中以以調(diào)節(jié)代代謝流流的方式式最為為重要要，它它包括括兩個個方面面，一是““粗調(diào)調(diào)”，，即調(diào)調(diào)節(jié)酶酶的合合成量量，二二是““細調(diào)調(diào)”，，即調(diào)調(diào)節(jié)現(xiàn)現(xiàn)成酶酶分子子的催催化活活力，兩者者往往往密切切配合合和協(xié)協(xié)調(diào)，，以達達到最最佳調(diào)調(diào)節(jié)效效果。。利用微微生物物代謝謝調(diào)控控能力力的自然缺缺損或通過過人為為方法法獲得突突破代代謝調(diào)調(diào)控的變異異菌株株，可可為發(fā)發(fā)酵工工業(yè)提提供生生產(chǎn)有有關(guān)代代謝產(chǎn)產(chǎn)物的的高產(chǎn)產(chǎn)菌株株。一、酶酶活性性的調(diào)調(diào)節(jié)酶活性性的調(diào)調(diào)節(jié)是指在在酶分分子水水平上上的一一種代代謝調(diào)調(diào)節(jié)，，它是是通過過改變變現(xiàn)成成的酶酶分子子活性性來調(diào)調(diào)節(jié)新新陳代代謝的的速率率，包包括酶活性性的激激活和和抑制制兩個方方面。。（一））調(diào)節(jié)節(jié)方式式：1、酶活性性的激激活：：在代謝謝途徑徑中后后面的的反應(yīng)應(yīng)可被被較前前面的的反應(yīng)應(yīng)產(chǎn)物物所促促進的的現(xiàn)象象；常常見于于分解解代謝謝途徑徑。2、酶活性性的抑抑制：：包括：：競爭爭性抑抑制和和反饋饋抑制制。概概念念：反反饋：：指反反應(yīng)鏈鏈中某某些中中間代代謝產(chǎn)產(chǎn)物或或終產(chǎn)產(chǎn)物對對該途途徑關(guān)關(guān)鍵酶酶活性性的影影響。。一、酶酶活性性的調(diào)調(diào)節(jié)凡使反反應(yīng)速速度加加快的的稱正反饋饋；凡使反反應(yīng)速速度減減慢的的稱負反饋饋（反饋饋抑制制）；；反饋抑抑制——主主要表表現(xiàn)在在某代代謝途途徑的的末端端產(chǎn)物物過量量時可可反過過來直直接抑抑制該該途途徑中中第一一個酶酶的活活性。。主要要表現(xiàn)現(xiàn)在氨氨基酸酸、核核苷酸酸合成成途徑徑中。。特點：：作用用直接接、效效果快快速、、末端端產(chǎn)物物濃度度降低低時又又可解解除，是可逆逆的。。第一個個酶（有活活性））第一個個酶（無活活性））終產(chǎn)物物終產(chǎn)物物（調(diào)調(diào)節(jié)物物）結(jié)合在在調(diào)節(jié)節(jié)中心心酶活性性的抑抑制主要是是反饋饋抑制制，它它主要要表現(xiàn)現(xiàn)在某某代謝謝途徑徑的末末端產(chǎn)產(chǎn)物（（即終終產(chǎn)物物）過過量時時，這這個產(chǎn)產(chǎn)物可可反過過來直直接抑抑制該該途徑徑中第第一個個酶的的活性性，促促使整整個反反應(yīng)過過程減減慢或或停止止，從從而避避免了了末端端產(chǎn)物物的過過多累累積。。反饋抑制的的類型1．直線式代代謝途徑中中的反饋抑抑制反饋抑制的的類型2、分支代代謝途徑中中的反饋抑抑制：在分分支代謝途途徑中，反反饋抑制的的情況較為為復(fù)雜，為為了避免在在一個分分支上的產(chǎn)產(chǎn)物過多時時不致同時時影響另一一分支上產(chǎn)產(chǎn)物的供應(yīng)應(yīng)，微生生物發(fā)展出出多種調(diào)節(jié)節(jié)方式。主要有：同同功酶的的調(diào)節(jié)，順順序反饋饋，協(xié)同反反饋，積累累反饋調(diào)節(jié)節(jié)等。（1）同功酶調(diào)節(jié)節(jié)同功酶是指能催化化相同的生生化反應(yīng)，，但酶蛋白白分子結(jié)構(gòu)構(gòu)有差異的的一類酶，，它們雖同同存于一個個個體或同同一組織中中，但在生生理、免疫疫和理化特特性上卻存存在著差別別。同功酶的主主要功能在在于其代謝謝調(diào)節(jié)。在在一個分支支代謝途徑徑中，如果果在分支點點以前的一一個較早的的反應(yīng)是由由幾個同功功酶所催化化時，則分分支代謝的的幾個最終終產(chǎn)物往往往分別對這這幾個同功功酶發(fā)生抑抑制作用。。協(xié)同反饋抑抑制（concertedfeedbackinhibition）定義：分支支代謝途徑徑中幾個末末端產(chǎn)物同同時過量時時才能抑制制共同途途徑中的第第一個酶的的一種反饋饋調(diào)節(jié)方式式。合作反饋抑抑制（cooperativefeedbackinhibition）定義：系指兩種末末端產(chǎn)物同同時存在時時，可以起起著比一種種末端產(chǎn)物物大得多的的反饋抑制制作用。積累反饋抑抑制（cumulativefeedbackinhibition）每一分支途途徑末端產(chǎn)產(chǎn)物按一定定百分比單單獨抑制共共同途徑中中前面的的酶，所以以當(dāng)幾種末末端產(chǎn)物共共同存在時時它們的抑抑制作用是是積累的的，各末端端產(chǎn)物之間間既無協(xié)同同效應(yīng)，亦亦無拮抗作作用。順序反饋抑抑制（sequentialfeedbackinhibition）一種終產(chǎn)物物的積累,導(dǎo)致前一一中間產(chǎn)物物的積累，，通過后者者反饋抑抑制合成途途徑關(guān)鍵酶酶的活性，，使合成終終止。酶活力調(diào)節(jié)節(jié)的機制1.變構(gòu)構(gòu)酶理論：：變構(gòu)酶為一一種變構(gòu)蛋蛋白，酶分分子間構(gòu)象象的變化影影響酶活。。其上具有有兩個以上上立體專一一性不同的的接受部位位，一個是是活性中心心，另一個個是調(diào)節(jié)中中心?；钚晕稽c:與底物結(jié)合合變構(gòu)位點:與抑制劑結(jié)結(jié)合,構(gòu)象象變化,不不能與底物物結(jié)合與激活劑結(jié)結(jié)合,構(gòu)構(gòu)象變化,促進與底底物結(jié)合變構(gòu)酶上有有兩個位點點：協(xié)同效應(yīng)中中，酶有多多個調(diào)節(jié)位位點，只有每一位位點與終產(chǎn)產(chǎn)物結(jié)合才才產(chǎn)生反饋饋。同功酶（isoenzyme)理論：：某一產(chǎn)物過過量僅抑制制相應(yīng)酶活活，對其他他產(chǎn)物沒影影響。酶的活性可可以調(diào)控在代謝途徑徑中調(diào)節(jié)酶酶活性幾個酶或十十幾個酶前前后配合，，完成一系系列代謝反反應(yīng)，形成成一條代謝途徑。在一條代代謝途徑中中，常常是是前一個酶酶促反應(yīng)的的產(chǎn)物，便便是下一個個酶促反應(yīng)應(yīng)的底物。。共價調(diào)節(jié)有時候，酶酶蛋白分子子可以和一一個基團形形成共價結(jié)結(jié)合，結(jié)合合的結(jié)果，，使酶蛋白白分子結(jié)構(gòu)構(gòu)發(fā)生改變變，使酶活活性發(fā)生改改變。例如如，與磷酸根的結(jié)合。這種調(diào)節(jié)酶酶活性的情情況稱為酶的共價調(diào)調(diào)節(jié)。競爭性抑制制有的酶在遇遇到一些化化學(xué)結(jié)構(gòu)與與底物相似似的分子時時，這些分分子與底物物競爭結(jié)合合酶的活性性中心，亦亦會表現(xiàn)出出酶活性的的降低（抑抑制）。這這種情況稱稱為酶的競爭性抑制制。競爭性抑制制劑在結(jié)構(gòu)上與與底物相似二、酶合成成的調(diào)節(jié)酶合成的調(diào)調(diào)節(jié)是一種種通過調(diào)節(jié)節(jié)酶的合成成量進而調(diào)調(diào)節(jié)代謝速速率的調(diào)節(jié)節(jié)機制，這這是一種在在基因水平平上（在原原核生物中中主要在轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄水平上上）的代謝謝調(diào)節(jié)。凡能促進酶酶生物合成成的現(xiàn)象，，稱為誘導(dǎo)。能阻礙酶生生物合成的的現(xiàn)象，則則稱為阻遏。與上述調(diào)節(jié)節(jié)酶活性的的反饋抑制制等相比，，調(diào)節(jié)酶的的合成（即即產(chǎn)酶量））而實現(xiàn)代代謝調(diào)節(jié)的的方式是一一類較間接而緩緩慢的調(diào)節(jié)節(jié)方式。其優(yōu)點則是通過阻阻止酶的過過量合成，，有利于節(jié)節(jié)約生物合合成的原料料和能量。。在正常代謝謝途徑中，，酶活性調(diào)調(diào)節(jié)和酶合合成調(diào)節(jié)兩兩者是同時時存在且密密切配合、、協(xié)調(diào)進行行的。（一）酶合合成調(diào)節(jié)的的類型1．誘導(dǎo)根據(jù)酶的生生成是否與與環(huán)境中所所存在的該該酶底物或或其有關(guān)物物的關(guān)系，，可把酶劃劃分成組成酶和誘誘導(dǎo)酶兩類。誘導(dǎo)酶是細胞為適適應(yīng)外來底底物或其結(jié)結(jié)構(gòu)類似物物而臨時合合成的一類類酶。能促進誘導(dǎo)導(dǎo)酶產(chǎn)生的的物質(zhì)稱為為誘導(dǎo)物，，它可以是是該酶的底底物，也可可以是難以以代謝的底底物類似物物或是底物物的前體物物質(zhì)。酶的誘導(dǎo)合合成類型同時誘導(dǎo)：即當(dāng)誘導(dǎo)導(dǎo)物加入后后，微生物物能同時或或幾乎同時時誘導(dǎo)幾種種酶的合成成，它主要要存在于短短的代謝途途徑中。例例如，將乳乳糖加入到到E．coli培養(yǎng)養(yǎng)基中后，，即可同時時誘導(dǎo)出ββ-半乳糖糖苷透性酶酶、β-半半乳糖苷酶酶和半乳糖糖苷轉(zhuǎn)乙酰酰酶的合成成；順序誘導(dǎo)：即先合成成能分解底底物的酶，，再依次合合成分解各各中間代謝謝物的酶，，以達到對對較復(fù)雜代代謝途徑的的分段調(diào)節(jié)節(jié)。2．阻遏在微生物的的代謝過程程中，當(dāng)代代謝途徑中中某末端產(chǎn)產(chǎn)物過量時時，除可用用前述的反反饋抑制的的方式來抑抑制該途徑徑中關(guān)鍵酶酶的活性以以減少末端端產(chǎn)物的生生成外，還還可通過阻阻遏作用來來阻礙代謝謝途徑中包包括關(guān)鍵酶在內(nèi)的的一系列酶酶的生物合合成，從而更徹底底地控制代代謝和減少少末端產(chǎn)物物的合成。。阻遏作用有有利于生物物體節(jié)省有有限的養(yǎng)料料和能量。。阻遏的類型型主要有末端代謝產(chǎn)產(chǎn)物阻遏和分解代謝產(chǎn)產(chǎn)物阻遏兩種。（1）末端端產(chǎn)物阻遏遏指由某代謝謝途徑末端端產(chǎn)物的過過量累積而而引起的阻阻遏。對直直線式反應(yīng)應(yīng)途徑來說說，末端產(chǎn)產(chǎn)物阻遏的的情況較為為簡單，即即產(chǎn)物作用用于代謝途途徑中的各各種酶，使使之合成受受阻遏。對分支代謝謝途徑來說說，情況就就較復(fù)雜。。每種末端端產(chǎn)物僅專專一地阻遏遏合成它的的那條分支支途徑的酶酶。代謝途徑分分支點以前前的“公共共酶”僅受受所有分支支途徑末端端產(chǎn)物的阻阻遏，此即即稱多價阻遏作作用。末端產(chǎn)物阻阻遏在代謝謝調(diào)節(jié)中有有著重要的的作用，它它可保證細細胞內(nèi)各種種物質(zhì)維持持適當(dāng)?shù)臐鉂舛取＃?）分解代謝謝物阻遏現(xiàn)象：當(dāng)細胞內(nèi)同同時存在兩兩種可利用用底物（碳碳源或氮源源）時，利利用快的底底物會阻遏遏與利用慢慢的底物有有關(guān)的酶合合成。原因：阻遏并不是是由于快速速利用底物物直接作用用的結(jié)果，，而是由這種底物物分解過程程中產(chǎn)生的的中間代謝謝物引起的的，所以稱為分分解代謝物物阻遏分解代謝產(chǎn)產(chǎn)物阻遏葡萄糖效應(yīng)應(yīng)二次生長現(xiàn)現(xiàn)象大腸桿菌利利用混合碳碳源生長時時時，發(fā)現(xiàn)現(xiàn)葡萄糖會會抑制其它它糖的利用用大腸桿菌在在含乳糖和和葡萄糖的的培養(yǎng)基中中，優(yōu)先利利用葡萄糖糖，并只有有當(dāng)葡萄糖糖耗盡后才才開始利用用乳糖，這這就形成了了在兩個對對數(shù)生長期期中間的第第二個生長長停滯期1.單獨加加入葡萄糖糖時，菌體體生長幾乎乎沒有延遲遲期；單獨加入乳乳糖時，菌菌體生長有有明顯的延延遲期；2.同時時加入葡萄萄糖和乳糖糖時，菌體體呈二次生生長（二）酶合合成調(diào)節(jié)的的機制酶合成的誘誘導(dǎo)操縱子子學(xué)說：操縱子（operon）：是是基因表達達和控制的的一個完整整單元，其其中包括啟動基因(promoter)、操縱基因(operator)和結(jié)構(gòu)基因(Structuralgene)3部分分。啟動基因是一種能被被依賴于DNA的RNA多聚聚酶所識別別的堿基順順序，它既既是RNA多聚酶的的結(jié)合部位位，也是轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄的起始始點；操縱基因是位于啟動動基因和結(jié)結(jié)構(gòu)基因之之間的一段段堿基順序序，能與阻阻遏物（一一種調(diào)節(jié)蛋蛋白）相結(jié)結(jié)合，以此此來決定結(jié)結(jié)構(gòu)基因的的轉(zhuǎn)錄是否否能進行；；結(jié)構(gòu)基因則是決定某某一多肽的的DNA模模板，可根根據(jù)其上的的堿基順序序轉(zhuǎn)錄出對對應(yīng)的mRNA，然然后再可通通過核糖體體而轉(zhuǎn)譯出出相應(yīng)的酶酶。一個操操縱子的轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄，就合合成了一個個mRNA分子。調(diào)節(jié)基因用于編碼組組成型調(diào)節(jié)節(jié)蛋白的基基因。調(diào)節(jié)節(jié)基因一般般位于相應(yīng)應(yīng)操縱子的的附近。效應(yīng)物是一類低分分子量的信信號物質(zhì)（（如糖類及及其衍生物物、氨基酸酸和核苷酸酸等），包括誘導(dǎo)物物和輔阻遏遏物兩種，它們們可與調(diào)節(jié)節(jié)蛋白相結(jié)結(jié)合以使后后者發(fā)生變變構(gòu)作用，，并進一步步提高或降降低與操縱縱基因的結(jié)結(jié)合能力。。色氨酸操縱縱子模型操縱子分兩兩類:一類是誘導(dǎo)型操縱縱子，只有當(dāng)存存在誘導(dǎo)物物（一種效效應(yīng)物）時時，其轉(zhuǎn)錄錄頻率才最最高，并隨隨之轉(zhuǎn)譯出出大量誘導(dǎo)導(dǎo)酶，出現(xiàn)現(xiàn)誘導(dǎo)現(xiàn)象象。另一類是阻遏型操縱縱子，只有當(dāng)缺缺乏輔阻遏遏物（一種種效應(yīng)物））時，其轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄頻率才才最高。由由阻遏型操操縱子所編編碼的酶的的合成，只只有通過去去阻遏作用用才能起動動。腺苷酸環(huán)化化酶乳糖操縱子子模型解釋釋分解代謝謝物的阻遏遏機制乳糖操縱子子的啟動基基因內(nèi)，除除RNA聚聚合酶結(jié)合合位點外，，還有一個個稱為CAP-cAMP復(fù)合合物的結(jié)合合位點cAMP是是環(huán)腺苷苷酸，CAP是降解解物基因活活化蛋白（（又稱為cAMP受受體蛋白，，CRP）），當(dāng)CAP與cAMP結(jié)合合后，就會會被活化。。CAP-cAMP復(fù)復(fù)合物又會會激活啟動動基因，并并使RNA聚合酶酶與啟動基基因結(jié)合。。乳糖與葡萄萄糖同時存存在時，因因為分解葡葡萄糖的酶酶類屬于組組成酶，能能迅速地將將葡萄糖降降解成某種種中間產(chǎn)物物（X），，X既會阻阻止ATP環(huán)化形成成cAMP，同時又又會促進cAMP分分解成AMP，從而而降低了cAMP的的濃度，繼繼而阻遏了了與乳糖降降解有關(guān)的的誘導(dǎo)酶合合成。只有當(dāng)葡萄萄糖耗盡后后，cAMP才能回回升到正常常濃度，操操縱子重新新開啟，并并開始利用用乳糖作為為碳源，形形成菌體的的二次生長長。當(dāng)代謝產(chǎn)生生末端代謝謝產(chǎn)物色氨氨酸后，色色氨酸作為為效應(yīng)物與與原阻遏物物結(jié)合，使使后者發(fā)生生變構(gòu)效應(yīng)應(yīng)，并能與與操縱基因因結(jié)合，從從而阻止了了結(jié)構(gòu)基因因的表達酶阻遏的色色氨酸操縱縱子模型三、調(diào)控理論的的應(yīng)用食品發(fā)酵的的目的：大量積累人人們所需要要的微生物物代謝產(chǎn)物物。代謝的人工工控制：人為地打破破微生物的的代謝控制制體系，使使代謝朝著著人們希望望的方向進進行。人工控制代代謝的手段段：改變微生物物遺傳特性性(遺傳學(xué)學(xué)方法）；；控制發(fā)酵條條件（生物物化學(xué)方法法）；改變細胞膜膜透性。(一)遺傳學(xué)方法法1、篩選抗抗反饋突變變株如:對誘變變后的菌種種用終產(chǎn)物物結(jié)構(gòu)類似似物，篩選選對終產(chǎn)物物積累不敏敏感的細胞胞株。產(chǎn)生原因：：1）酶結(jié)構(gòu)構(gòu)發(fā)生改變變；2）酶系統(tǒng)統(tǒng)發(fā)生改變變。因此細胞不不受終產(chǎn)物物反饋抑制制，產(chǎn)生過過量的產(chǎn)物物。(一)遺傳傳學(xué)方法2、營養(yǎng)缺缺陷型菌株株的應(yīng)用（1）對于于直線式代代謝途徑：：選育營養(yǎng)養(yǎng)缺陷性突突變株只只能積累中中間代謝產(chǎn)產(chǎn)物ABCDEabcd==末端產(chǎn)物物E對生生長乃是是必需的的，所以以，應(yīng)在在培養(yǎng)基基中限量量供給給E，使之足以以維持菌菌株生長長，但又又不至于于造成反反饋調(diào)節(jié)節(jié)（阻遏或或抑制）），這樣樣才能有有利于菌菌株積累累中間產(chǎn)產(chǎn)物C。。分支代謝謝途徑：：情況較復(fù)復(fù)雜，可可利用營營養(yǎng)缺陷陷性克服服協(xié)同或或累加反反饋抑制制積累末末端產(chǎn)物物，亦可可利用用雙重缺缺陷發(fā)酵酵生產(chǎn)中中間產(chǎn)物物。分支途徑徑——賴賴氨酸生生產(chǎn)(2)應(yīng)應(yīng)用抗反反饋調(diào)節(jié)節(jié)的突變變株解除除反饋調(diào)調(diào)節(jié)抗反饋調(diào)調(diào)節(jié)突變變菌株，，就是指指一種對對反饋抑抑制不敏敏感或?qū)ψ瓒粲杏锌剐缘牡慕M成型型菌株，，或兼而而有之的的菌株。。在這類菌菌株中，，因其反反饋抑制制或阻遏遏已解除除，或是是反饋抑抑制和阻阻遏已同同時解除除，所以以能分泌泌大量的的末端代代謝產(chǎn)物物。（二）生生物化學(xué)學(xué)方法1、添加加前體繞繞過反饋饋控制點點：亦能能使某種種代謝產(chǎn)產(chǎn)物大量量產(chǎn)生。。2、添加加誘導(dǎo)劑劑：從提提高誘導(dǎo)導(dǎo)酶合成成量來說說,最好好的誘導(dǎo)導(dǎo)劑往往往不是該該酶的底底物，而而是底物物的衍生生物，3、發(fā)酵酵與分離離過程耦耦合：4、控制制發(fā)酵的的培養(yǎng)基基成分：：（三）控控制細胞胞膜滲透透性使胞內(nèi)的的代謝產(chǎn)產(chǎn)物迅速速滲漏出出去,解解除末端端產(chǎn)物的的反饋抑抑制。1、用生生理學(xué)手手段———直接接抑制膜膜的合成成或使膜膜受缺損損。如:在在Glu發(fā)酵中中，生物物素引起起膜透性性下降。。把生物物素濃度度控制制在亞適適量可大大量分泌泌Glu。2、利用用膜缺損損突變株株———油酸缺缺陷型、、甘油缺缺陷型。。如:用谷谷氨酸生生產(chǎn)菌的的油酸缺缺陷型，，培養(yǎng)過過程中，，有限制制地添加加油酸，，合成有有缺損的的膜，使使細胞膜膜發(fā)生滲滲漏而提提高谷氨氨酸產(chǎn)量量。9、靜夜四無鄰鄰，荒居舊業(yè)業(yè)貧。。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、雨中中黃葉葉樹，，燈下下白頭頭人。。。21:10:0621:10:0621:1012/28/20229:10:06PM11、以我獨沈沈久，愧君君相見頻。。。12月-2221:10:0621:10Dec-2228-Dec-2212、故故人人江江海海別別，，幾幾度度隔隔山山川川。。。。21:10:0621:10:0621:10Wednesday,December28,202213、乍見翻疑夢夢，相悲各問問年。。12月-2212月-2221:10:0621:10:06December28,202214、他鄉(xiāng)生生白發(fā)，，舊國見見青山。。。28十十二月20229:10:06下午午21:10:0612月-2215、比不了得得就不比，，得不到的的就不要。。。。十二月229:10下下午12月-2221:10December28,202216、行動出成成果，工作作出財富。。。2022/12/2821:10:0721:10:0728December202217、做前，，能夠環(huán)環(huán)視四周周；做時時，你只只能或者者最好沿沿著以腳腳為起點點的射線線向前。。。9:10:07下午午9:10下午午21:10:0712月-229、沒有失敗敗，只有暫暫時停止成成功！。12月-2212月-22Wednesday,December28,202210、很多事情情努力了未未必有結(jié)果果，但是不不努力卻什什么改變也也沒有。。。21:10:0721:10:0721:1012/28/20229:10:07PM11、成功就是日日復(fù)一日那一一點點小小努努力的積累。。。12月-2221:10:0721:10Dec-2228-Dec-2212、世間成事，，不求其絕對對圓滿，留一一份不足，可可得無限完美美。。21:10:0721:10:0721:10Wednesday,December28,202213、不不知知香香積積寺寺，，數(shù)數(shù)里里入入云云峰峰。。。。12月月-2212月月-2221:10:0721:10:07December28,202214、意意志志堅堅強強的的人人