實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備器皿及用具

第二章實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、器皿及用具白鳳麟2013.9.12一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)置二、實(shí)驗(yàn)室儀器三、實(shí)驗(yàn)室器皿及用具四、洗滌技術(shù)五、滅菌技術(shù)六、無(wú)菌操作技術(shù)

組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室布局的總體要求

便于隔離便于操作便于滅菌便于觀察一、實(shí)驗(yàn)室設(shè)置基本布局規(guī)律根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作程序排列實(shí)驗(yàn)室；接種室和培養(yǎng)室設(shè)在與外界環(huán)境隔離性好的區(qū)域；滅菌室與接種室相鄰；其他實(shí)驗(yàn)室的布局可根據(jù)條件，以方便使用為宜?；緦?shí)驗(yàn)室輔助實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室組成準(zhǔn)備室緩沖室無(wú)菌操作室培養(yǎng)室細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室溫室生化分析實(shí)驗(yàn)室基本實(shí)驗(yàn)室布局平面圖實(shí)驗(yàn)臺(tái)擱架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架培養(yǎng)架藥品及儀器柜無(wú)菌臺(tái)無(wú)菌臺(tái)擱架拉窗冰箱擱架水槽電爐門4.5m3.0m3.5m4.0m準(zhǔn)備室緩沖室無(wú)菌室培養(yǎng)室植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室布局示意圖培養(yǎng)室準(zhǔn)備室滅菌室儲(chǔ)藏室接種室緩沖室組織培養(yǎng)準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)室1.準(zhǔn)備室1.1洗滌間根據(jù)工作量的大小決定其大小，一般面積控制在30-50m2。在實(shí)驗(yàn)室的一側(cè)設(shè)置專用的洗滌水槽，用來(lái)清洗玻璃器皿。中央實(shí)驗(yàn)臺(tái)還應(yīng)配置2個(gè)水槽，用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大，可以購(gòu)置一臺(tái)洗瓶機(jī)。準(zhǔn)備1-2個(gè)洗液缸，專門用于洗滌對(duì)潔凈度要求很高的玻璃器皿。此外還應(yīng)配置落水架、干燥箱、柜子、超聲波清洗器等。地面應(yīng)耐濕并排水良好。超聲波清洗器面積60平方米左左右，配配備的主主要儀器器設(shè)備有有：冰冰箱、天天平、微微波爐、、pH計(jì)、培養(yǎng)養(yǎng)基分裝裝器、藥藥品柜、、器械柜柜、抽氣氣泵、電電爐、各各種規(guī)格格的培養(yǎng)養(yǎng)瓶、培培養(yǎng)皿、、移液管管、燒杯杯、量筒筒、容量量瓶、儲(chǔ)儲(chǔ)藏瓶等等。冰箱箱以體積積180-200L為宜，用用于儲(chǔ)存存培養(yǎng)基基母液、、激素維維生素等等貴重藥藥品、彩彩色膠卷卷、及保保存植物物材料。。天平應(yīng)應(yīng)有不同同感量。。1.2培養(yǎng)基配配制間1.準(zhǔn)備室配備實(shí)驗(yàn)驗(yàn)臺(tái)、高高壓滅菌菌鍋、排排風(fēng)滅火火設(shè)備、、細(xì)菌過(guò)過(guò)濾設(shè)備備、干熱熱消毒柜柜、電爐爐等。滅滅菌鍋的的選擇應(yīng)應(yīng)根據(jù)不不同的要要求選擇擇不同型型號(hào)的滅滅菌鍋。。一般實(shí)實(shí)驗(yàn)室可可選用小小型的醫(yī)醫(yī)用手提提式高壓壓滅菌鍋鍋，較大大的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室可選選用立式式自動(dòng)控控制壓力力和溫度度的滅菌菌鍋。生生產(chǎn)產(chǎn)性的實(shí)實(shí)驗(yàn)室可可選用大大型的臥臥式滅菌菌鍋。如如果沒(méi)有有條件的的話，可可以將上上述工作作間合并并成一個(gè)個(gè)準(zhǔn)備間間，要求求是設(shè)備備的安裝裝和排列列要合理理、房間間要寬敞敞、明亮亮、透風(fēng)風(fēng)，地面面要便于于清潔、、防滑。。1.3消毒間1.準(zhǔn)備室2.緩沖室無(wú)菌操作室主主要用于實(shí)驗(yàn)驗(yàn)材料的接種種操作，所以以又叫接種室。通常由里外外兩間組成，，外間是緩沖沖間，用于準(zhǔn)準(zhǔn)備工作，還還有防止污染染的作用。緩緩沖間的門應(yīng)應(yīng)該與接種室室的門錯(cuò)開(kāi)，，兩個(gè)門也不不要同時(shí)開(kāi)啟啟，以保證無(wú)無(wú)菌室不因開(kāi)開(kāi)門和人的進(jìn)進(jìn)出帶進(jìn)雜菌菌。緩沖間內(nèi)內(nèi)應(yīng)該設(shè)有水水槽、實(shí)驗(yàn)臺(tái)臺(tái)、鞋帽架、、和柜子、紫紫外燈。無(wú)菌菌操作室的內(nèi)內(nèi)壁應(yīng)當(dāng)用塑塑鋼板或瓷磚磚裝修，工作作人員進(jìn)入操操作間前要穿穿上消過(guò)毒的的工作服和拖拖鞋。室室內(nèi)應(yīng)應(yīng)配有超凈工工作臺(tái)，紫外外燈、解剖鏡鏡、各種接種種器械等。3.無(wú)菌操作室無(wú)菌室無(wú)菌室為了控制培養(yǎng)養(yǎng)室的溫度和和光照時(shí)間及及其強(qiáng)度，培培養(yǎng)室的房間間不要窗戶，，但應(yīng)當(dāng)留一一個(gè)通氣窗，，并安上排氣氣扇。室內(nèi)溫溫度由空調(diào)控控制，光照由由日光燈控制制。天花板和和內(nèi)墻最好用用塑料鋼板裝裝修，地面用用水磨石或瓷瓷磚鋪設(shè)，一一般要分兩間間，一為光照照培養(yǎng)室，一一為暗培養(yǎng)。。

培養(yǎng)室外外應(yīng)有一預(yù)備備間或走廊。。培培養(yǎng)室應(yīng)配有有培養(yǎng)架、轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)床、搖床、、光照培養(yǎng)箱箱、生化培養(yǎng)養(yǎng)箱、自動(dòng)控控時(shí)器等。日日光燈一般用用40W，固定在培養(yǎng)養(yǎng)架的側(cè)面或或擱板的下面面，每層有兩兩支日光燈，，距離在20cm，光照強(qiáng)度為為2000-3000lx。4.培養(yǎng)室設(shè)計(jì)組培實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室時(shí)的注意意事項(xiàng)為了減少污染染，實(shí)驗(yàn)室最最好設(shè)一走廊廊且走廊上方方最好安裝紫紫外燈；培養(yǎng)室最好設(shè)設(shè)在南面，設(shè)設(shè)大玻璃窗，，以雙層玻璃璃窗為最好。。如果培養(yǎng)室室是設(shè)在房屋屋的邊側(cè)，其其東邊或西邊邊的墻上也可可設(shè)置大玻璃璃窗；培養(yǎng)室房間及及門要小，而而且密閉性要要好，最好裝裝移門；無(wú)菌操作室要要小，要設(shè)緩緩沖間，也最最好裝移門，，且門要稍大大一些。二、儀器與設(shè)設(shè)備1、基本設(shè)備冰箱、電爐、、酸度計(jì)、純純水器、天平平、培養(yǎng)基分分裝器、攪拌拌器等。酸度計(jì)電熱套天平培養(yǎng)基分裝器器攪拌器2、滅菌設(shè)備蒸汽壓力滅菌菌鍋、干熱消消毒柜、過(guò)濾濾滅菌裝置、、噴霧消毒器器、紫外燈。。蒸汽壓力滅菌菌鍋干熱消毒柜利用高溫干熱熱對(duì)微生物有有氧化、蛋白白質(zhì)變性、電電介質(zhì)濃縮引引起中毒等作作用。其中主主要是通過(guò)氧氧化作用破壞壞細(xì)胞原生質(zhì)質(zhì)，使微生物物死亡，所以以在一定的加加熱時(shí)間內(nèi)可可殺死一切微微生物。無(wú)菌瓶頂過(guò)濾濾裝置噴霧消毒器（參考圖）（參考圖）接種器具消毒毒器3、無(wú)菌操作設(shè)設(shè)備超凈工作臺(tái)無(wú)菌接種箱4、細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)設(shè)備搖床培養(yǎng)架恒溫振蕩培養(yǎng)養(yǎng)箱光照培養(yǎng)箱5、細(xì)胞學(xué)鑒定定設(shè)備光學(xué)研究顯微微鏡、實(shí)體顯顯微鏡、倒置置顯微鏡倒置顯微鏡光學(xué)顯微鏡1、玻璃器皿三、培養(yǎng)器皿皿及實(shí)驗(yàn)用具具培養(yǎng)皿三角瓶培養(yǎng)瓶2、金屬材質(zhì)用用具鑷子解剖刀接種針1、玻璃器皿洗洗滌新購(gòu)置玻璃器皿1%稀HCl浸漬12h洗衣粉洗滌清水沖洗晾干備用已用過(guò)的玻璃器皿四、洗滌技術(shù)術(shù)清洗后器皿內(nèi)內(nèi)外不可掛有有水珠，否則則重洗，若重重洗后仍掛有有水珠，則需需用洗液浸泡泡數(shù)小時(shí)后（（或用去污粉粉擦洗），重重新清洗。2、塑料用品洗洗滌新的塑料器皿皿打開(kāi)即用已用過(guò)的塑料器皿2%NaOH浸泡12h清水沖洗2%—5%鹽酸浸泡30min清水沖洗蒸餾水沖洗晾干備用金屬用品一般般不宜用各種種洗滌液洗滌滌（新的可以以用熱洗衣粉粉水洗凈），，需要清洗時(shí)時(shí)，一般用酒酒精擦洗，然然后火焰干燥燥。3、金屬用品洗洗滌（一）、滅菌菌工作是極其其重要的。首先應(yīng)建立有有菌和無(wú)菌的的概念有菌的的范疇：有有菌：凡是暴露在空空氣中的物體體，至少其表表面都是有菌菌的。如植物物的表面、超超凈工作臺(tái)的的臺(tái)面，未處處理的工具和和手等。無(wú)菌：高壓高溫處處理（工具、、器皿、培養(yǎng)養(yǎng)基等）物理或化學(xué)處處理；火烤后的物體體；健康的動(dòng)植物物不與內(nèi)外部部表面接觸的的組織內(nèi)部可能是無(wú)無(wú)菌的（有時(shí)時(shí)也有內(nèi)生菌菌，但不會(huì)影響培養(yǎng)養(yǎng)，也不會(huì)污污染）五.滅菌技術(shù)1、物理方法：干熱、濕熱熱、過(guò)濾（0.25微米）紫外外燈、超聲聲波等。2、化學(xué)方法：使用滅菌菌劑或抗菌菌素，如酒酒精、次氯氯酸鈉、升升汞、漂白白粉、高錳錳酸鉀、雙雙氧水、福福爾馬林等等。五.滅菌技術(shù)干熱滅菌玻璃器皿、、器械濕熱滅菌培養(yǎng)基、蒸蒸餾水、器器械、棉塞塞等熏蒸滅菌接種室、培培養(yǎng)室過(guò)濾滅菌液體培養(yǎng)基基、蒸餾水水藥劑滅菌培養(yǎng)材料燒灼滅菌器械、瓶口口、棉塞、、包頭紙輻射滅菌接種室、培培養(yǎng)間（一）各種種滅菌方法法及其使用用范圍適用于玻璃璃器皿和金金屬器械的的滅菌。操操作方法：：150℃、40min或120℃、120min，如果發(fā)現(xiàn)現(xiàn)芽孢桿菌菌，160℃、90～120min（1）干熱滅菌菌適用于各種種器皿、培培養(yǎng)基、器器皿、蒸餾餾水、棉塞塞、紙等。。121℃維持20～30min注意點(diǎn)：加加足水、排排盡氣、氣氣壓降到0時(shí)，才能開(kāi)開(kāi)蓋。（2）濕熱滅菌菌培養(yǎng)基的滅滅菌一般用用高壓高溫溫處理，但但如果培養(yǎng)養(yǎng)基中某些些成分遇到到高溫分解解（如某些些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)節(jié)劑GA3、玉米素等等），就需需要過(guò)濾滅滅菌。另外外酶、血清清等也需要要過(guò)濾滅菌菌。滅滅菌菌方法：將將生長(zhǎng)調(diào)節(jié)節(jié)劑或酶配配成一定濃濃度，用注注射器注入入微孔濾膜膜慮，濾膜膜孔徑0.22～0.45微米。制培培養(yǎng)基時(shí)，，現(xiàn)將培養(yǎng)養(yǎng)基高壓滅滅菌，待降降至50℃左右時(shí)，加加入適量的的激素，然然后分裝。。（3）過(guò)濾滅菌菌主要是利用用紫外燈進(jìn)進(jìn)行照射，，適合實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室空氣、、操作臺(tái)等等，滅菌時(shí)時(shí)間20～30min。

注意：：關(guān)燈后5min后再進(jìn)入。。超凈工作作臺(tái)關(guān)燈后后要打開(kāi)風(fēng)風(fēng)機(jī)。（4）射線滅菌菌用火焰灼燒燒達(dá)到滅菌菌目的，適適用于接種種器皿的滅滅菌。（5）火焰灼燒燒滅菌適用外植體體、實(shí)驗(yàn)器器皿、操作作表面、皮皮膚等。幾種常用消消毒劑的效效果比較消毒劑使用濃度(%)消毒時(shí)間(min.)效果殘液去除難易乙醇70-750.1-3好易新潔爾滅10～205～30好易氯化汞0.1～12～15最好最難過(guò)氧化氫10～125～15較好最易抗菌素4～50mgl-130～60較好較難次氯酸鈣/納9～105～30好易（6）消毒劑長(zhǎng)期不用的的培養(yǎng)室或或接種室要要進(jìn)行熏蒸蒸。方法：：甲醛、高錳錳酸鉀熏蒸蒸。甲甲醛的的用量通常常按每立方方米空間2-6毫升計(jì)算，，高錳酸鉀鉀的用量是是甲醛的一一半。室內(nèi)內(nèi)準(zhǔn)備妥當(dāng)當(dāng)后，把稱稱好的高錳錳酸鉀放在在瓷碗或燒燒杯內(nèi)(最好在碗或或杯下面鋪鋪一張報(bào)紙紙，以利清清洗)，然后將甲甲醛也倒入入碗或杯內(nèi)內(nèi)，立即出出屋關(guān)門。。幾秒鐘后后，甲醛溶溶液即沸騰騰揮發(fā)。高高錳酸鉀是是一種氧化化劑，當(dāng)它它與一部分分甲醛作用用時(shí)，由氧氧化反應(yīng)產(chǎn)產(chǎn)生的熱可可使其余的的甲醛揮發(fā)發(fā)為氣體。。（7）熏蒸滅菌菌甲醛熏蒸接接種室應(yīng)至至少在使用用前24小時(shí)進(jìn)行，，熏蒸后密密閉保持4小時(shí)以上再再進(jìn)入室內(nèi)內(nèi)工作。甲甲醛對(duì)人的的眼、鼻有有強(qiáng)烈刺激激作用。因因此，可在在使用前用用氨進(jìn)行中中和。取與與甲醛等量量的氨水，，倒在另一一個(gè)燒杯里里，迅速放放入熏蒸室室內(nèi)，使甲甲醛和氨水水發(fā)生中和和反應(yīng)，以以消除甲醛醛味，減少少對(duì)人體的的刺激作用用。使用氨氨水應(yīng)在工工作前2小時(shí)進(jìn)行。。對(duì)對(duì)有材料料的培養(yǎng)室室，也可以以采用乙二二醇加熱熏熏蒸。（二）接種種室滅菌空氣消毒滅菌接種室超凈工作臺(tái)紫外燈照射70%—75%的酒精擦洗培養(yǎng)材料的接種紫外燈照射（三）外植植體滅菌流水沖洗10—20min或更長(zhǎng)時(shí)間70%—75%酒精中浸泡30s0.1%—0.2%氯化汞液中浸泡10min左右蒸餾水沖洗4—5次在10%的次氯酸鈉、飽和漂白粉浸泡30min左右備用常用消毒劑劑消毒滅菌菌比較表消毒劑使用濃度（%）去除難易消毒時(shí)間（min）效果次氯酸鈣次氯酸鈉漂白粉溴水過(guò)氧化氫升汞酒精抗生素硝酸銀9~102飽和溶液1~210~120.1~170~754~5（mg/L1易易易易最易較難易中較難5~305~305~302~105~152~100.2~230~605~30很好很好很好很好好最好好較好好污染來(lái)源人為因素（工作人員本身）：工作服、帽、口罩、酒精擦手。物品因素器皿和用具培養(yǎng)皿：洗→熱壓玻璃器皿：洗→干熱（干熱箱）或晾干接種用具：用CCL4布擦→濕布擦→泡75%~95%酒精→燒培養(yǎng)基：濕熱培養(yǎng)材料外部細(xì)菌：用水沖洗→化學(xué)藥劑處理內(nèi)部細(xì)菌莖尖培養(yǎng)加抗生素：青霉素、利福平操作的空氣：洗刷地板95%酒精擦超凈工作臺(tái)用化學(xué)試劑薰蒸六、無(wú)菌操操作技術(shù)1、實(shí)驗(yàn)器具具和材料的的準(zhǔn)備2、用75%的酒精擦拭拭超凈工作作臺(tái)，然后后室內(nèi)及超超凈工作臺(tái)臺(tái)用紫外燈燈殺菌20min-30min。注意：臺(tái)臺(tái)面上的用用品不要放放置太多或或重疊放置置，以免降降低滅菌效效果。3、關(guān)紫外燈燈、打開(kāi)風(fēng)風(fēng)機(jī)，過(guò)5-10min進(jìn)入緩沖間間，以75%洗手和手臂臂，更換無(wú)無(wú)菌服、帽帽子和口罩罩。進(jìn)入接接種室。（（注：沒(méi)有有特別情況況，盡量不不要下工作作臺(tái)）六、無(wú)菌操操作技術(shù)4、用70－75％的酒精拭拭擦臺(tái)面并并消毒雙手手。試驗(yàn)用用具也應(yīng)該該用酒精消消毒。點(diǎn)燃燃酒精燈，，將金屬器器械在其火火焰上灼燒燒，冷卻待待用。注意：所有有操作應(yīng)在在火焰近處處并經(jīng)過(guò)灼灼燒進(jìn)行。。金屬器械械不能過(guò)度度灼燒，以以防退火。。移液管不不能灼燒，，培養(yǎng)瓶口口、塑料材材料、橡膠膠材料過(guò)火火焰不能時(shí)時(shí)間太長(zhǎng)。。5、取流水沖沖洗（至少少30min）過(guò)的外植植體，用一一定的消毒毒劑浸泡消消毒，用無(wú)無(wú)菌水沖洗洗3~4次，放入無(wú)無(wú)菌培養(yǎng)皿皿中，置于于酒精燈火火焰下方，，用無(wú)菌的的接種器械械進(jìn)行分離離、切割或或其他處理理。6、打開(kāi)培養(yǎng)養(yǎng)瓶，瓶口口在燈焰處處旋轉(zhuǎn)灼燒燒，用鑷子子將培養(yǎng)材材料置于培培養(yǎng)基上，，灼燒鑷子子放回，灼灼燒瓶口，，蓋上瓶塞塞。7、用酒精擦擦洗工作臺(tái)臺(tái)和手。進(jìn)進(jìn)行下一輪輪操作。注意（1）進(jìn)行培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)，動(dòng)作作要準(zhǔn)確敏敏捷，但又又不必太快快，以防空空氣流動(dòng)，，增加污染染機(jī)會(huì)。（（2）不能用手手觸及已消消毒器皿，，如已接觸觸，要用火火焰燒灼消消毒或取備備品更換。。（3）為拿取方方便，工作作臺(tái)面上的的用品要有有合理的布布局，原則則上應(yīng)是右右手使用的的東西放置置在右側(cè)，，左手用品品在左側(cè)，，酒精燈置置于中央。。（4）工作由始始至終要保保持一定順順序性，組組織或細(xì)胞胞在未做處處理之前，，勿過(guò)早暴暴露在空氣氣中。同樣樣，培養(yǎng)液液在未用前前，不要過(guò)過(guò)早開(kāi)瓶；；用過(guò)之后后如不再重重復(fù)使用，，應(yīng)立即封封閉瓶口直直立可增加加落菌機(jī)會(huì)會(huì)。（5）吸取營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)液、細(xì)胞胞懸液及其其它各種用用液時(shí)，均均應(yīng)分別使使用吸管，，不能混用用，以防擴(kuò)擴(kuò)大污染或或?qū)е录?xì)胞胞交叉污染染。

（6）工作中不不能面向操操作區(qū)講話話或咳嗽，，以免唾沫沫把細(xì)菌或或支原體帶帶入工作臺(tái)臺(tái)面發(fā)生污污染。（（7）手或相對(duì)對(duì)較臟的物物品不能經(jīng)經(jīng)過(guò)開(kāi)放的的瓶口上方方，瓶口最最易污染，，加液時(shí)如如吸管尖碰碰到瓶口，，則應(yīng)將吸吸管丟掉。。接種時(shí)在近近火焰處打打開(kāi)瓶口，，使瓶?jī)A斜斜，以免空空氣中微生生物落入瓶瓶中。正

確錯(cuò)誤整個(gè)接種操操作應(yīng)在近近火焰處進(jìn)進(jìn)行，且動(dòng)動(dòng)作要迅速速。正確錯(cuò)誤接種過(guò)程中中盡可能達(dá)達(dá)到懸空要要求防止操作帶帶來(lái)的污染染正確錯(cuò)誤接種種時(shí)時(shí)不不得得用用手手接接觸觸瓶瓶蓋蓋內(nèi)內(nèi)壁壁或或瓶瓶口口正確錯(cuò)誤瓶蓋蓋朝朝上上放放，，接接種種完完畢畢后后立立即即蓋蓋好好瓶瓶口口正確錯(cuò)誤接種種完完一一瓶瓶用用火火燒燒用用具具以以防防止止交交叉叉污污染染產(chǎn)產(chǎn)生生配方成分弱液次強(qiáng)液強(qiáng)液常用配方重鉻酸鉀（g）濃硫酸（ml）蒸餾水（ml）501001000100200100060800200100200800清潔潔液液配配方方實(shí)驗(yàn)員消毒實(shí)驗(yàn)室、無(wú)菌臺(tái)滅菌實(shí)驗(yàn)器材的滅菌無(wú)菌接種消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)衛(wèi)生培養(yǎng)室培養(yǎng)9、靜夜四四無(wú)鄰，，荒居舊舊業(yè)貧。。。12月-2212月-22Thursday,December29,202210、雨中黃葉葉樹(shù)，燈下下白頭人。。。12:50:2612:50:2612:5012/29/202212:50:26PM11、以我獨(dú)沈久久，愧君相見(jiàn)見(jiàn)頻。。12月-2212:50:2612:50Dec-2229-Dec-2212、故人人江海海別，，幾度度隔山山川。。。12:50:2612:50:2612:50Thursday,December29,202213、乍見(jiàn)翻疑疑夢(mèng)，相悲悲各問(wèn)年。。。12月-2212月-2212:50:2612:50:26December29,202214、他鄉(xiāng)鄉(xiāng)生白白發(fā)，，舊國(guó)國(guó)見(jiàn)青青山。。。29十十二二月202212:50:26下下午午12:50:2612月月-2215、比不了得就就不比，得不不到的就不要要。。。十二月2212:50下下午12月-2212:50December29,202216、行動(dòng)動(dòng)出成成果，，工作作出財(cái)財(cái)富。。。2022/12/2912:50:2612:50:2629December202217、做前前，能能夠環(huán)環(huán)視四四周；；做時(shí)時(shí)，你你只能能或者者最好好沿著著以腳腳為起起點(diǎn)的的射線線向前前。。。12:50:26下下午午12:50下下午12:50:2612月月-229、沒(méi)有失敗，，只有暫時(shí)停停止成功！。。12月-2212月-22Thursday,December29,202210、很多事情情努力了未未必有結(jié)果果，但是不不努力卻什什么改變也也沒(méi)有。。。12:50:2612:50:2612:5012/29/202212:50:26PM11、成功功就是是日復(fù)復(fù)一日日那一一點(diǎn)點(diǎn)點(diǎn)小小小努力力的積積累。。。12月月-2212:50:2612:50Dec-2229-Dec-2212、世間成成事，不不求其絕絕對(duì)圓滿滿，留一一份不足足，可得得無(wú)限完完美。。。12:50:2612:50:2612:50Thursday,December29,202213、不知香香積寺，，數(shù)里入入云峰。。。12月-2212月-2212:50:2612:50:26December29,202214、意志堅(jiān)強(qiáng)的的人能把世界界放在手中像像泥塊一樣任任意揉捏。29十二月月202212:50:26下午午12:50:2612月-2215、楚塞塞三湘湘接，，荊門門九派派通。。。。十二月月2212:50下下午12月月-2212:50December29,202216、少少年年十十五五二二十十時(shí)時(shí)，，步步行行奪奪得得胡胡馬馬騎騎。。。。2022/12/2912:50:26