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班級組另0小組成實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)書1、研究題目:茶多酚對氯化鋇誘發(fā)的大鼠心律失常的作用2、理論依據(jù)及研究現(xiàn)狀:[1]心律失常就是由于竇房結(jié)激動(dòng)異?;蚣?dòng)產(chǎn)生于竇房結(jié)以外激動(dòng)的傳導(dǎo)緩慢、阻滯或經(jīng)異常通道傳導(dǎo),即心臟活動(dòng)的起源與(或)傳導(dǎo)障礙導(dǎo)致心臟搏動(dòng)的頻率與(或)節(jié)律異常。心律失常就是心血管疾病中重要的一組疾病。它可單獨(dú)發(fā)病亦可與心血管病伴發(fā)??赏蝗话l(fā)作而致猝死,亦可持續(xù)累及心臟而衰竭。導(dǎo)致心律失常的原因主要有各種器質(zhì)性心臟病(冠心病、心肌病、風(fēng)心病等、植物神經(jīng)系統(tǒng)興奮性改變、電解質(zhì)紊亂、麻醉、胸腔或心臟手術(shù)、某些藥物副作用及中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病等。[2]氯化鋇能促進(jìn)浦肯野纖維Na+內(nèi)流,就是動(dòng)作電位4相自發(fā)除極速率加快,心肌自律性增高,異位節(jié)律產(chǎn)生,導(dǎo)致心律失常的發(fā)生,故靜脈注射氯化鋇可制作心律失常病理模型。[3]茶葉系山茶科植物茶樹的干燥嫩葉或葉芽,就是一種傳統(tǒng)的藥食同源的天然保健飲品、茶葉中含有咖啡堿、茶多酚、維生素類、礦物質(zhì)、氨基酸與脂多糖等物質(zhì),其中茶多酚(teapolyphenols,、TP)就是茶葉的主要生理活性成分、近年來,大量的研究發(fā)現(xiàn),茶多酚具有抗腫瘤、降血脂、抗動(dòng)脈粥樣硬化、強(qiáng)心、抗心律失常、抗衰老與抗菌等多種生物活性并且揭示這些生物活性均與其抗氧化作用有關(guān)、主要概述近年來有關(guān)茶多酚的藥理、毒理與藥動(dòng)學(xué)方面的研究、[4]茶多酚10mg/kgiv可顯著降低CaCI2所致小鼠死亡率.15mg/kg茶多酚iv能提高哇巴因致膛鼠心律失常的用量.對氯仿誘發(fā)的小鼠心律失常有明顯預(yù)防作用,并能對抗大鼠心肌缺血一再灌注所致的心律失常,但對鳥頭堿誘發(fā)大鼠心律失常無作用。[5]可通過抑制Ca離子內(nèi)流從而降低竇房結(jié)自律性,降低缺血時(shí)心房、心室,浦肯野纖維的異常自律性,減少或消除后除極所致觸發(fā)活動(dòng);減慢房室結(jié)傳導(dǎo),可終止房室結(jié)折返,減慢心房撲動(dòng)、心房顫動(dòng)時(shí)加快的心室率;延長竇房結(jié)、房室結(jié)的有效不應(yīng)期。[5]利多卡因阻滯鈉通道的激活與失活狀態(tài),通道恢復(fù)至靜息狀態(tài)時(shí)阻滯作用迅速解除,因此利多卡因?qū)Τ龢O化組織作用強(qiáng),對缺血或強(qiáng)心苷中毒所致的除極化型心律失常有較強(qiáng)抑制作用。并且抑制參與動(dòng)作電位復(fù)極2期的少量Na內(nèi)流,縮短或不影響浦肯野纖維與心室肌的動(dòng)作電位時(shí)程。減小動(dòng)作電位4期去極斜率,提高興奮閾值,降低自律性。3、研究內(nèi)容:建立急性心律失常模型,分別用茶多酚與利多卡因治療,并比較實(shí)驗(yàn)結(jié)果,從而比較茶多酚與利多卡因治療急性心律失常的療效4、研究方法:(一)實(shí)驗(yàn)對象:健康大鼠性別:雌雄兼有規(guī)格:體重(200±50)g數(shù)量:9只(二)實(shí)驗(yàn)組與對照組的處理:1、將大鼠隨機(jī)分為3組,注射適量生理鹽水治療心律失常的大鼠(A組),注射等量利多卡因治療心律失常的大鼠(B組),注射等量茶多酚治療心律失常的大鼠(C組)2、A組大鼠注射氯化鋇溶液0、05ml/100g后再注射生理鹽水0、1ml/100gB組大鼠注射氯化鋇溶液0、05ml/100g后再注射利多卡因0、1ml/100gC組大鼠注射氯化鋇溶液0、05ml/100g后再注射茶多酚0、1ml/100g(三)觀察指標(biāo):心電圖5、儀器與藥品:生物信號(hào)采集與處理系統(tǒng),心電電極及輸入線,大鼠手術(shù)臺(tái),大鼠手術(shù)器械1套,注射器(1ml,2ml,10ml),注射針頭10%水合氯醛,0、8%氯化鋇溶液,0、5%鹽酸利多卡因,0、5%茶多酚溶液,生理鹽水,苦味酸實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將9只體重(200±50)g大鼠隨機(jī)分為3組并編號(hào)麻醉固定:將9只大鼠分別稱重,腹腔注射10%水合氯醛0、3ml/100g麻醉,麻醉后背位固定于大鼠手術(shù)臺(tái)上。插入心電電極:將白、紅、黑色心電電極分別插入大鼠的右前肢、左前肢、右后肢皮下,描記一段正常II導(dǎo)聯(lián)心電圖。復(fù)制心律失常模型:A、B、C組大鼠全部舌下靜脈注射0、8%氯化鋇0、05ml/100g,用適量生理鹽水推入,連續(xù)描記10min,觀察氯化鋇引起的心電圖變化。當(dāng)心律失常出現(xiàn)后,A組大鼠立即舌下靜脈注射生理鹽水0、1ml/100g,連續(xù)描記10min內(nèi)的心電圖;B組大鼠立即舌下靜脈注射0、5%鹽酸利多卡因0、1ml/100g,連續(xù)描記10min內(nèi)的心電圖;C組大鼠立即舌下靜脈注射0、5%茶多酚溶液0、1ml/100g,連續(xù)描記10min內(nèi)的心電圖利多卡因與茶多酚對心律失常的治療作用組別實(shí)驗(yàn)鼠數(shù)氯化鋇生理鹽水利多卡因茶多酚心率(次/(只)(ml/100g)(ml/100g)(ml/100g)(ml/100g)分)A組30、050、1B組30、050、1C組30、050、1預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果:A組大鼠經(jīng)生理鹽水治療后心律失常情況未改善B組大鼠經(jīng)利多卡因治療后心律失常情況改善,心率恢復(fù)正常C組大鼠經(jīng)茶多酚治療后心律失常情況有改善但心率仍有部分未恢復(fù)(附上心電圖)注意事項(xiàng):捉拿大鼠要注意安全,一旦被大鼠咬了要及時(shí)打疫苗心電圖針形電極應(yīng)插入皮下,不能插入肌肉舌下靜脈注射時(shí)要找準(zhǔn)位置,避免將舌頭打腫,若已經(jīng)打腫舌頭,改用股靜脈注射參考文獻(xiàn):全國高等醫(yī)藥教材《病理生理學(xué)》?第八版?人民衛(wèi)生出版社《醫(yī)學(xué)機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)》、龔永生,陳醒言主編---北京:高等教育出版社《中草藥》2004年第10期|陳繼英
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