胚胎細(xì)胞凋亡課件

早期胚胎細(xì)胞的凋亡

Apoptosisintheearlyphaseembryocells主要內(nèi)容概述細(xì)胞凋亡的分子機(jī)制細(xì)胞凋亡的檢測(cè)研究進(jìn)展展望概述細(xì)胞凋亡(Apoptosis)是指細(xì)胞接受某信號(hào)或受到某些因素刺激后為了維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而發(fā)生的一種主動(dòng)性消亡過(guò)程，是一種由基因調(diào)控的，細(xì)胞的自殺性死亡胚胎發(fā)育既存在著細(xì)胞的不斷增殖，又存在著細(xì)胞的不斷凋亡。一方面通過(guò)凋亡除掉異常的、有害的和有錯(cuò)誤發(fā)育潛能的卵裂球細(xì)胞另一方面，如果凋亡的細(xì)胞比例增大，存在的大量死亡細(xì)胞會(huì)破壞胚胎的動(dòng)態(tài)平衡，受損的胚胎會(huì)停止發(fā)育或死亡。細(xì)胞凋亡的生化特征DNA的片段化染色體DNA降解，產(chǎn)生180～200bp整數(shù)倍的DNA片段在瓊脂糖凝膠電泳中就是呈現(xiàn)特異的“梯狀(Ladder)圖譜研究胚胎細(xì)胞凋亡的意義形態(tài)良好的囊胚也許在亞細(xì)胞水平有缺陷,對(duì)哺乳動(dòng)物胚胎卵裂球細(xì)胞進(jìn)行凋亡分析,評(píng)估胚胎活性提供了一種新的方法凋亡指數(shù)成為反映胚胎質(zhì)量和健康的重要參數(shù)。凋亡指數(shù)(theapoptoticcellratio,ACR)：凋亡的細(xì)胞數(shù)占細(xì)胞數(shù)的百分率.(Thepercentageofapoptoticcellsperembryo)胚胎細(xì)胞凋亡的主要原因染色體和核的異常（如多倍體和嵌合體;不合適的發(fā)育潛能）如存在能夠形成滋養(yǎng)層的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)生長(zhǎng)或“存活”因子的不平衡(如IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、TGF-a、PAF及激素)在不合適的培養(yǎng)條件下(如不適的培養(yǎng)液組成成分和不合適的胚胎培養(yǎng)密度）暴露于有害因素(如活性氧、紫外線或熱激活)凋亡發(fā)生的分子機(jī)制兩個(gè)基因家族：BCl-2家族：促凋亡成員（Bax,Bcl-Xs,Bak,Bad)抗凋亡成員（Bcl－XL，Bcl-W，Bcl-2)Caspase家族：?jiǎn)?dòng)Caspase（Caspase-8，9，12）執(zhí)行Caspase（Caspase-3，6，7）P53(腫瘤抑制因子）調(diào)節(jié)Bax基因的表達(dá)細(xì)胞凋亡的途徑

（一）線粒體途徑細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法顯微鏡形態(tài)學(xué)觀察（光學(xué)、熒光、電子顯微鏡）DNA瓊脂糖凝膠電泳流式細(xì)胞儀（flowcytometry,FCM）檢測(cè)技術(shù)Caspase-3活性的檢測(cè)原位末端標(biāo)記（TUNEL）法用熒光顯微鏡觀察，選用藍(lán)色激發(fā)光（波長(zhǎng)488n