VITEK2Compact全自動細(xì)菌鑒定儀的操作規(guī)程

VITEK2Compact全自動細(xì)菌鑒定儀的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程目的規(guī)范VITEK2Compact全自動細(xì)菌鑒定儀的操作規(guī)程 ,保證檢驗質(zhì)量 .授權(quán)操作人經(jīng)培訓(xùn)并通過考核合格的微生物實驗室工作人員。原理為光電技術(shù) ,電腦技術(shù)和細(xì)菌八進(jìn)位制數(shù)碼鑒定技術(shù)相結(jié)合的鑒定方法。每個鑒定卡內(nèi)含有 64項生化反應(yīng) ,每三項為一組 ,組內(nèi)各項反應(yīng)陽性時分別賦值為 1,2,4,然后計算每組數(shù)值。根據(jù) 64項生化反應(yīng)結(jié)果即可獲得生物數(shù)碼。在電腦控制下 ,讀數(shù)器每隔 15分鐘對每一試卡讀數(shù)一次 ,對各反應(yīng)孔底物進(jìn)行光掃描 ,動態(tài)觀察反應(yīng)變化 ,一旦試卡內(nèi)終點指示孔達(dá)到臨界值 ,表示此卡檢測完成 ,系統(tǒng)將最后一次判讀結(jié)果所得的生物數(shù)碼與菌種資料庫標(biāo)準(zhǔn)菌生物模型相比較 ,經(jīng)矩陣分析得到鑒定值和鑒定結(jié)果。工作環(huán)境相對濕度： 20%～80%；溫度 15～30℃；電源電壓： 200～240V，50/60Hz。操作程序開機(jī)依次打開 UPS,交流電源 ,儀器將自動進(jìn)行初始化。 儀器孵育轉(zhuǎn)盤溫度上升至測試卡所需的溫度。 （5～15分鐘）啟動完成之后 ,屏幕下方的狀態(tài)區(qū)顯示 OK,代表儀器可以處理測試卡了。依次打開顯示器 ,打印機(jī),電腦電源 ,進(jìn)入VITEK2Compact軟件應(yīng)用界面。卡片的選擇鑒定卡GN：革蘭陰性菌鑒定卡； GP：革蘭陽性菌鑒定卡； YST：酵母菌鑒定卡； NH:苛養(yǎng)菌鑒定卡；ANC：厭氧菌及棒狀桿菌鑒定卡藥敏卡AST-GNxx:革蘭陰性菌藥敏卡； AST-GPxx:革蘭陽性菌藥敏卡。菌懸液配置及藥敏卡稀釋懸浮液0.45%NaCl溶液,PH4.5～7.2。菌懸液濃度：見表 1表1VITEK2Compact全自動細(xì)菌鑒定儀各種鑒定卡所需細(xì)菌懸液濃度GNGP YSTAST-GNxxAST-GPxxNH0.5～0.63McF0.5～0.63McF1.8～2.2McF3.0ml鹽水+145l3.0ml鹽水+280l2.8 ～3.2McF0.5～0.63McF菌懸液 0.5 ～0.63McF菌懸液操作流程根據(jù)細(xì)菌種類選卡。將卡片和鹽水從冰箱取出 ,室溫放置 15～20分鐘。在載卡架上放置試管 ,每管中加入 0.45%NaCl溶液 3ml。校正比濁儀。標(biāo)準(zhǔn)比濁管校正可接受濁度范圍，見下表：挑取培養(yǎng) 18～24小時純菌落 ,配置菌懸液，濃度要求參照表 1。用比濁儀測定菌懸液濃度，如同時作藥敏,應(yīng)稀釋并混勻。物品準(zhǔn)備： 0.45%NaCl溶液；載卡架上放置無菌試管；一次性無菌拭子；配套標(biāo)準(zhǔn)定量移液槍。比濁，標(biāo)準(zhǔn)見表 1比濁，標(biāo)準(zhǔn)見表 1取145ul菌液稀釋，將 AST-GN卡插入稀釋菌液 取280ul菌液稀釋，將 AST-GN卡插入稀釋菌液按順序?qū)⒖ㄆ胖糜谳d卡架上 ,輸樣管插入菌液中。藥敏卡放置在配對鑒定卡后面。將載卡架放入填充倉 ,按〖填充〗即 StartFill。藍(lán)色指示燈閃亮提示填充完畢。將載卡架取出并放入裝載倉。儀器自動掃描 ,審核卡片信息 ,確認(rèn)無誤后自動封口和上卡。儀器口的藍(lán)色箭頭閃亮提示操作完成。進(jìn)入軟件主界面 ,輸入標(biāo)本信息，對標(biāo)本進(jìn)行編號，保存。儀器每隔 15分鐘自動閱讀所有測試卡 ,最終將確認(rèn)無誤的結(jié)果傳至中文電腦。儀器已完成的卡片自動卸載入廢卡槽。結(jié)果處理鑒定結(jié)果 為1種細(xì)菌時 ,可信度高的結(jié)果儀器將自動傳輸至病人資料數(shù)據(jù)庫 ,并長期儲存?！?2種細(xì)菌時,應(yīng)按儀器注釋做補(bǔ)充實驗 ,確定正確鑒定結(jié)果 ,并將結(jié)果傳輸?shù)綌?shù)據(jù)庫中。不能鑒定的細(xì)菌 ,應(yīng)查找分離平板 ,確認(rèn)細(xì)菌純度 ,必要時重新分純 ,重新鑒定。藥敏結(jié)果 同時進(jìn)行鑒定和藥敏結(jié)果時 ,鑒定結(jié)果會自動加到藥敏卡上 ,否則需手工添加。如出現(xiàn)專家評語,應(yīng)對藥敏結(jié)果作適當(dāng)修改并確認(rèn)最終結(jié)果。如出現(xiàn)瀏覽信息 ,應(yīng)按程序處理并確認(rèn)最終結(jié)果。上述處理完畢 ,結(jié)果會自動傳輸?shù)?LIS數(shù)據(jù)庫中。關(guān)機(jī)一般狀態(tài)下不關(guān)機(jī)，機(jī)器 24小時工作。遇到下列情況需關(guān)閉或者重啟開關(guān)：電源斷開、移位等特殊情況。先關(guān)閉VITEK2Compact儀器：在儀器用戶界面按回車鍵 ,屏幕出現(xiàn)主菜單 ,進(jìn)入關(guān)機(jī)功能指令 :MainMenu>Maintenance>Shutdown>Yes關(guān)機(jī)。依次關(guān)閉交流電源 ,英文工作電腦及其他附屬設(shè)備并拔掉電源插座。質(zhì)量控制質(zhì)控頻率及方法鑒定卡的質(zhì)控 每月和更新批號時用相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)菌株做一次質(zhì)控。每一新生產(chǎn)批號鑒定卡需用相應(yīng)質(zhì)控菌株做質(zhì)控以檢測生化反應(yīng)的可靠性 ,材料和試驗批號必須記錄并保存。藥敏卡的質(zhì)控每周和更新批號時用相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)菌株做一次質(zhì)控。質(zhì)控菌株 見表2表2VITEK2Compact各種鑒定卡質(zhì)量控制使用的質(zhì)控菌株反應(yīng)卡種類質(zhì)控菌 株GN霍氏腸桿菌 ATCC700323GP腐生葡萄球菌 ATCC-BAA750YST白色念珠菌 ATCC14053NH齒蝕艾肯 ATCC1152AST-GN13 大腸埃希菌 ATCC25922AST-GP67 金黃色葡萄球菌 ATCC29213AST-GP68 肺炎鏈球菌 ATCC49619AST-GN09 銅綠假單胞菌 ATCC27853質(zhì)控操作步驟按5.4.6程序上卡 ,掃描試卡后 ,在對試卡維護(hù)時選擇質(zhì)控卡。根據(jù)卡的種類，按儀器提示選擇所對應(yīng)的質(zhì)控菌株，再保存。質(zhì)控結(jié)束后查看結(jié)果是否在控。如失控,應(yīng)立即按照 6.4步驟進(jìn)行查誤。如誤差無法解決 ,應(yīng)聯(lián)系梅里埃公司或代理商的技術(shù)代表。失控結(jié)果分析和處理 如失控,應(yīng)按照以下步驟進(jìn)行查誤校正。明顯錯誤可能為 :①錯誤使用質(zhì)控菌株。②懸浮液 （0.45%鹽水）污染。③懸浮液 PH及濃度未在要求的范圍內(nèi)。④沒有按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序操作。如無明顯錯誤 ,應(yīng)按以下步驟進(jìn)行誤校正。重新實驗以確認(rèn)誤差結(jié)果；確認(rèn)比濁儀校正在有效期內(nèi) ,并妥善保存；確認(rèn)所有試劑均在有效期內(nèi) ,并妥善保存；孵育/判讀箱溫度正常；標(biāo)準(zhǔn)菌株未受污染 ,生物特性沒有改變；菌懸液濃度符合要求；標(biāo)準(zhǔn)菌株接種平板正確 ,孵育時間正確。校正例行校正 至少每年一次。故障校正 質(zhì)控失控 ,監(jiān)測指標(biāo)失控 ,儀器移位 ,維修后需校正。校正后驗收 校正后,微生物實驗室負(fù)責(zé)人對各項指標(biāo)核實 ,達(dá)標(biāo)后方可。維護(hù)和保養(yǎng)程序日常維護(hù)應(yīng)清潔廢卡槽、清潔儀器內(nèi)試卡架、清潔光學(xué)讀數(shù)頭、清潔充填倉、清潔載卡架。清潔廢卡槽打開廢卡收集器艙口 ,取出廢卡收集器將所有卡片倒入醫(yī)療廢物桶 ,用洗必泰消毒廢卡槽，再放回艙內(nèi)。清潔儀器內(nèi)試卡架 Carousel試卡架分為四個部分 ,清洗前,應(yīng)確認(rèn)卡架內(nèi)已沒有待處理的試卡。進(jìn)入卡架卸載程序 :MainMenu-Maintence-CarouselRemoval,點擊 OK。儀器顯示 PreparingforsectionRemoval,按儀器提示 ,依次卸載 4個試卡架 ,消毒清潔并干燥試卡架 （每月用棉簽蘸取 75%酒精 ,擦拭儀器內(nèi)的傳感器 ）。進(jìn)入卡架裝載程序 MainMenu--Maintence—ReplaceCarousel,按照儀器提示裝載 4個試卡架 ,蓋好試卡架進(jìn)入蓋。清潔光學(xué)讀數(shù)頭進(jìn)入讀數(shù)頭清潔程序 :MainMenu-Maintence—OpticsCleaning打開孵育器蓋子 ,拔出讀數(shù)頭 ,用擦鏡紙清潔。 用棉簽蘸取 75%酒精擦拭傳送皮帶 ,將讀數(shù)頭裝好 ,關(guān)上孵育器的門 ,儀器自動檢測讀數(shù)頭的吸光度值 ,自檢通過后 ,儀器進(jìn)入準(zhǔn)備狀態(tài)。清潔充填倉打開艙門，用棉簽蘸取蒸餾水清潔艙門。清潔載卡架用75%酒精洗擦試架表面。再用干凈軟棉布擦拭，待其干燥再使用。影響儀器檢測準(zhǔn)確性的因素菌懸液濁度配制不當(dāng)。配制菌懸液的生理鹽水污染。未挑取純菌落作鑒定和藥敏。儀器工作不正常。應(yīng)急處理出現(xiàn)不能自行解決故障 ,應(yīng)及時聯(lián)系經(jīng)銷商或工程師維修處理 ,并