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釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用
答辯人:趙昕昕專業(yè):食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師:孫春燕釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用答辯人:趙昕昕1主要內(nèi)容緒論實(shí)驗(yàn)部分
釔離子對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)
釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝主要內(nèi)容緒論2FluoroquinolonesFQs氟喹諾酮類藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥,種類繁多,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星(OFL)培氟沙星(PEF)氟甲喹(FLU)蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX)格帕沙星(GPFX)帕珠沙星(PZFX)沙拉沙星(SAR)緒論獸藥殘留問題Fluoroquinolones氟喹諾酮類藥物緒論獸藥殘留3檢驗(yàn)方法微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法檢驗(yàn)方法微生物法4熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物(Eu3+,Tb3+等)——稀土離子特征熒光稀土離子+氟喹諾酮類藥物(La3+,Y3+等)——增強(qiáng)氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏稀土離子與氟喹諾酮類藥物配合物的熒光性質(zhì)熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物稀土離子與氟喹諾酮類5立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類藥物以下分別為環(huán)丙沙星,培氟沙星,依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類藥6
儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)(上海三科儀器有限公司970CRT型)Cary100紫外-可見分光光度計(jì)(美國(guó)瓦里安公司)920穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計(jì)(英國(guó)Edinburgh公司)pH計(jì)(PHS-3C,上海康儀有限責(zé)任公司)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)丙沙星培氟沙星依諾沙星實(shí)驗(yàn)部分釔離子對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)材料與試劑
儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)部分釔離7熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔離子溶液1ml1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液++加二次蒸餾水定容至10ml,放置15分鐘,用熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光強(qiáng)度
實(shí)驗(yàn)方法熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔8
結(jié)果與討論
———紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L培氟沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L依諾沙星的紫外可見吸收光譜270nm319nm274nm313nm266nm338nm結(jié)果與討論
———紫外可見吸收光譜1.09熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖
培氟沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖
依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖
實(shí)驗(yàn)條件:5.0×10-5mol/L釔離子溶液,1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物,2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖培氟沙星加入釔離10緩沖溶液對(duì)體系的影響
不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件:5.0×10-5mol/L釔離子溶液,1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥,2ml緩沖溶液NH4Ac-HAcTris-HCLHAc-NaAcNH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCL緩沖溶液對(duì)體系的影響
不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒11pH值對(duì)體系的影響
pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強(qiáng)度的影響
pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響
pH值對(duì)Y3+-依諾沙星體系熒光強(qiáng)度的影響
實(shí)驗(yàn)條件:5.0×10-5mol/L釔離子溶液,1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物,2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液pH值對(duì)體系的影響
pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星pH=5.0pH12
Y3+濃度對(duì)體系的影響(以培氟沙星為例)
釔離子對(duì)培氟沙星熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件:1ml1.0×10-6mol/L培氟沙星溶液,2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液Y3+濃度對(duì)體系的影響(以培氟沙星為例)13干擾離子的影響
與體系穩(wěn)定性試驗(yàn)以釔-培氟沙星為例,加入的干擾物質(zhì)的相對(duì)熒光強(qiáng)度在±5%范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對(duì)體系均無(wú)干擾。體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光,隨著時(shí)間的增加熒光強(qiáng)度有微弱的增強(qiáng),在15分鐘后熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值,之后保持穩(wěn)定,同時(shí)可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。干擾離子的影響
與體系穩(wěn)定14
分析應(yīng)用
培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/L-20.0×10-6mol/L時(shí),呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8mol/L
樣品測(cè)定
線性方程為y=20.285x-23.152,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。
工作曲線及檢出限
分析應(yīng)用
培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/15機(jī)理的初步探討
La3+,Lu3+,Y3+,Sc3+等離子在與氟喹諾酮類藥物藥物結(jié)合后,由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強(qiáng)稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級(jí)在配合物的S1能級(jí)之上時(shí),這些稀土離子相當(dāng)于一個(gè)惰性原子,與氟喹諾酮類藥物形成一個(gè)螯合物,并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強(qiáng)了其剛性,使原來(lái)不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強(qiáng)熒光的物質(zhì)。機(jī)理的初步探討La3+,Lu3+,Y3+,Sc3+等離子16討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行了研究,對(duì)各種影響因素進(jìn)行了條件優(yōu)化,并對(duì)機(jī)理進(jìn)行了初步探討,建立了利用釔增強(qiáng)氟喹諾酮藥物熒光檢測(cè)該類藥物的新方法。該方法具有操作簡(jiǎn)單,檢測(cè)快速且靈敏度高的特點(diǎn),干擾少,穩(wěn)定性好,若與分離技術(shù)相結(jié)合,在食品中氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景。討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行17釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物
熒光性初探
實(shí)驗(yàn)材料,儀器及溶液:實(shí)驗(yàn)方法:優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件:pH值及緩沖溶液的影響釔離子的影響表面活性劑的影響釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物
熒光性初探
實(shí)驗(yàn)材料,儀器及溶18實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論依諾沙星,銪-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖
依諾沙星,銪-依諾沙星,銪-釔-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)銪離子與依諾沙星形成配合物時(shí)發(fā)生能量轉(zhuǎn)移,依諾沙星的熒光強(qiáng)度減弱,同時(shí)銪的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。但加入釔之后,銪的特征峰沒有熒光增強(qiáng)效應(yīng),只是增強(qiáng)了依諾沙星的熒光強(qiáng)度綠線:依諾沙星黃線:銪-依諾沙星紅線:依諾沙星黃線:銪-依諾沙星綠線:銪-釔-依諾沙星實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論依諾沙星,銪-依諾沙星依諾沙星,銪-依諾沙星,19實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論在表面活性劑的影響試驗(yàn)中,TritonX-100對(duì)體系無(wú)增敏作用,CTMA,SDBS和SDS則有不同程度的增敏作用,其中以SDS效果最好。說明在實(shí)驗(yàn)條件下,釔離子只能微弱的增強(qiáng)銪-依諾沙星的敏化熒光特性,對(duì)銪-依諾沙星體系的能量轉(zhuǎn)移并無(wú)太大影響。銪-釔-依諾沙星,銪-釔-依諾沙星-SDS的熒光發(fā)射光譜圖
黃線:銪-釔-依諾沙星綠線:銪-釔-依諾沙星-SDS實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論在表面活性劑的影響試驗(yàn)中,TritonX-20討論本文在文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上對(duì)釔-銪-氟喹諾酮類藥物的熒光增敏作用進(jìn)行了初步探索,但結(jié)果并不理想,分析可能是由于產(chǎn)生共發(fā)光效應(yīng)的稀土離子的選擇及實(shí)驗(yàn)條件有所誤差,反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)條件有待進(jìn)一步優(yōu)化。討論本文在文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上對(duì)釔-銪-氟喹諾酮類藥物的熒光增敏21在此對(duì)孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時(shí),在論文實(shí)驗(yàn)過程給予支持和建議的盧靜老師,王海波老師,卜秀娟老師以及食品質(zhì)量與安全的全體指導(dǎo)老師表示誠(chéng)摯的謝意。感謝在論文工作中給予我?guī)椭椭С值暮|(zhì)云同學(xué),趙磊同學(xué),劉立國(guó)同學(xué),周立灶同學(xué),我的室友以及05級(jí)食品質(zhì)量與安全的所有同學(xué)。在此表示由衷的感謝。致謝在此對(duì)孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時(shí),在論文22謝謝大家!請(qǐng)領(lǐng)導(dǎo)老師批評(píng)指正!謝謝大家!請(qǐng)領(lǐng)導(dǎo)老師批評(píng)指正!23釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用
答辯人:趙昕昕專業(yè):食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師:孫春燕釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用答辯人:趙昕昕24主要內(nèi)容緒論實(shí)驗(yàn)部分
釔離子對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)
釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝主要內(nèi)容緒論25FluoroquinolonesFQs氟喹諾酮類藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥,種類繁多,廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星(OFL)培氟沙星(PEF)氟甲喹(FLU)蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX)格帕沙星(GPFX)帕珠沙星(PZFX)沙拉沙星(SAR)緒論獸藥殘留問題Fluoroquinolones氟喹諾酮類藥物緒論獸藥殘留26檢驗(yàn)方法微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法檢驗(yàn)方法微生物法27熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物(Eu3+,Tb3+等)——稀土離子特征熒光稀土離子+氟喹諾酮類藥物(La3+,Y3+等)——增強(qiáng)氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏稀土離子與氟喹諾酮類藥物配合物的熒光性質(zhì)熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物稀土離子與氟喹諾酮類28立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類藥物以下分別為環(huán)丙沙星,培氟沙星,依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類藥29
儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)(上海三科儀器有限公司970CRT型)Cary100紫外-可見分光光度計(jì)(美國(guó)瓦里安公司)920穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計(jì)(英國(guó)Edinburgh公司)pH計(jì)(PHS-3C,上??祪x有限責(zé)任公司)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)丙沙星培氟沙星依諾沙星實(shí)驗(yàn)部分釔離子對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)材料與試劑
儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)部分釔離30熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔離子溶液1ml1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液++加二次蒸餾水定容至10ml,放置15分鐘,用熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光強(qiáng)度
實(shí)驗(yàn)方法熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔31
結(jié)果與討論
———紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L培氟沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L依諾沙星的紫外可見吸收光譜270nm319nm274nm313nm266nm338nm結(jié)果與討論
———紫外可見吸收光譜1.032熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖
培氟沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖
依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖
實(shí)驗(yàn)條件:5.0×10-5mol/L釔離子溶液,1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物,2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖培氟沙星加入釔離33緩沖溶液對(duì)體系的影響
不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件:5.0×10-5mol/L釔離子溶液,1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥,2ml緩沖溶液NH4Ac-HAcTris-HCLHAc-NaAcNH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCL緩沖溶液對(duì)體系的影響
不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒34pH值對(duì)體系的影響
pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強(qiáng)度的影響
pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響
pH值對(duì)Y3+-依諾沙星體系熒光強(qiáng)度的影響
實(shí)驗(yàn)條件:5.0×10-5mol/L釔離子溶液,1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物,2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液pH值對(duì)體系的影響
pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星pH=5.0pH35
Y3+濃度對(duì)體系的影響(以培氟沙星為例)
釔離子對(duì)培氟沙星熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件:1ml1.0×10-6mol/L培氟沙星溶液,2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液Y3+濃度對(duì)體系的影響(以培氟沙星為例)36干擾離子的影響
與體系穩(wěn)定性試驗(yàn)以釔-培氟沙星為例,加入的干擾物質(zhì)的相對(duì)熒光強(qiáng)度在±5%范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對(duì)體系均無(wú)干擾。體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光,隨著時(shí)間的增加熒光強(qiáng)度有微弱的增強(qiáng),在15分鐘后熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值,之后保持穩(wěn)定,同時(shí)可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。干擾離子的影響
與體系穩(wěn)定37
分析應(yīng)用
培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/L-20.0×10-6mol/L時(shí),呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8mol/L
樣品測(cè)定
線性方程為y=20.285x-23.152,測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。
工作曲線及檢出限
分析應(yīng)用
培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/38機(jī)理的初步探討
La3+,Lu3+,Y3+,Sc3+等離子在與氟喹諾酮類藥物藥物結(jié)合后,由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定,不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強(qiáng)稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級(jí)在配合物的S1能級(jí)之上時(shí),這些稀土離子相當(dāng)于一個(gè)惰性原子,與氟喹諾酮類藥物形成一個(gè)螯合物,并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強(qiáng)了其剛性,使原來(lái)不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強(qiáng)熒光的物質(zhì)。機(jī)理的初步探討La3+,Lu3+,Y3+,Sc3+等離子39討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行了研究,對(duì)各種影響因素進(jìn)行了條件優(yōu)化,并對(duì)機(jī)理進(jìn)行了初步探討,建立了利用釔增強(qiáng)氟喹諾酮藥物熒光檢測(cè)該類藥物的新方法。該方法具有操作簡(jiǎn)單,檢測(cè)快速且靈敏度高的特點(diǎn),干擾少,穩(wěn)定性好,若與分離技術(shù)相結(jié)合,在食品中氟喹諾酮類藥物殘留的檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景。討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行40釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物
熒光性初探
實(shí)驗(yàn)材料,儀器及溶液:實(shí)驗(yàn)方法:優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件:pH值及緩沖溶液的影響釔離子的影響表面活性劑的影響釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物
熒光性初探
實(shí)驗(yàn)材料,儀器及溶41實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論依諾沙星,銪-依諾沙星的熒光發(fā)
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