釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用課件

釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用

答辯人：趙昕昕專(zhuān)業(yè)：食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師：孫春燕釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用答辯人：趙昕昕1主要內(nèi)容緒論實(shí)驗(yàn)部分

釔離子對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)

釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝主要內(nèi)容緒論2FluoroquinolonesFQs氟喹諾酮類(lèi)藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥，種類(lèi)繁多，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星（OFL）培氟沙星（PEF）氟甲喹（FLU）蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX)格帕沙星（GPFX）帕珠沙星（PZFX）沙拉沙星（SAR）緒論獸藥殘留問(wèn)題Fluoroquinolones氟喹諾酮類(lèi)藥物緒論獸藥殘留3檢驗(yàn)方法微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法檢驗(yàn)方法微生物法4熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類(lèi)藥物（Eu3+,Tb3+等）——稀土離子特征熒光稀土離子+氟喹諾酮類(lèi)藥物（La3+，Y3+等）——增強(qiáng)氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏稀土離子與氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物的熒光性質(zhì)熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類(lèi)藥物稀土離子與氟喹諾酮類(lèi)5立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類(lèi)藥物以下分別為環(huán)丙沙星，培氟沙星，依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類(lèi)藥6

儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)（上海三科儀器有限公司970CRT型）Cary100紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)瓦里安公司）920穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計(jì)（英國(guó)Edinburgh公司）pH計(jì)(PHS-3C,上?？祪x有限責(zé)任公司)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)丙沙星培氟沙星依諾沙星實(shí)驗(yàn)部分釔離子對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)材料與試劑

儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)部分釔離7熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔離子溶液1ml1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液++加二次蒸餾水定容至10ml，放置15分鐘，用熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光強(qiáng)度

實(shí)驗(yàn)方法熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔8

結(jié)果與討論

———紫外可見(jiàn)吸收光譜1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜1.0×10-5mol/L培氟沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜1.0×10-5mol/L依諾沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜270nm319nm274nm313nm266nm338nm結(jié)果與討論

———紫外可見(jiàn)吸收光譜1.09熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

培氟沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類(lèi)藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖培氟沙星加入釔離10緩沖溶液對(duì)體系的影響

不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類(lèi)藥，2ml緩沖溶液NH4Ac-HAcTris-HCLHAc-NaAcNH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCL緩沖溶液對(duì)體系的影響

不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒11pH值對(duì)體系的影響

pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強(qiáng)度的影響

pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響

pH值對(duì)Y3+-依諾沙星體系熒光強(qiáng)度的影響

實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類(lèi)藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液pH值對(duì)體系的影響

pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星pH=5.0pH12

Y3+濃度對(duì)體系的影響（以培氟沙星為例）

釔離子對(duì)培氟沙星熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件：1ml1.0×10-6mol/L培氟沙星溶液，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液Y3+濃度對(duì)體系的影響（以培氟沙星為例）13干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定性試驗(yàn)以釔-培氟沙星為例，加入的干擾物質(zhì)的相對(duì)熒光強(qiáng)度在±5%范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對(duì)體系均無(wú)干擾。體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光，隨著時(shí)間的增加熒光強(qiáng)度有微弱的增強(qiáng)，在15分鐘后熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值，之后保持穩(wěn)定，同時(shí)可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定14

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/L-20.0×10-6mol/L時(shí)，呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8mol/L

樣品測(cè)定

線性方程為y=20.285x-23.152，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。

工作曲線及檢出限

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/15機(jī)理的初步探討

La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子在與氟喹諾酮類(lèi)藥物藥物結(jié)合后，由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強(qiáng)稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級(jí)在配合物的S1能級(jí)之上時(shí)，這些稀土離子相當(dāng)于一個(gè)惰性原子，與氟喹諾酮類(lèi)藥物形成一個(gè)螯合物，并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強(qiáng)了其剛性，使原來(lái)不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強(qiáng)熒光的物質(zhì)。機(jī)理的初步探討La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子16討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行了研究，對(duì)各種影響因素進(jìn)行了條件優(yōu)化，并對(duì)機(jī)理進(jìn)行了初步探討，建立了利用釔增強(qiáng)氟喹諾酮藥物熒光檢測(cè)該類(lèi)藥物的新方法。該方法具有操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)快速且靈敏度高的特點(diǎn)，干擾少，穩(wěn)定性好，若與分離技術(shù)相結(jié)合，在食品中氟喹諾酮類(lèi)藥物殘留的檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景。討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行17釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物

熒光性初探

實(shí)驗(yàn)材料，儀器及溶液：實(shí)驗(yàn)方法：優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件：pH值及緩沖溶液的影響釔離子的影響表面活性劑的影響釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物

熒光性初探

實(shí)驗(yàn)材料，儀器及溶18實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論依諾沙星，銪-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖

依諾沙星，銪-依諾沙星，銪-釔-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明當(dāng)銪離子與依諾沙星形成配合物時(shí)發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，依諾沙星的熒光強(qiáng)度減弱，同時(shí)銪的熒光強(qiáng)度增強(qiáng)。但加入釔之后，銪的特征峰沒(méi)有熒光增強(qiáng)效應(yīng)，只是增強(qiáng)了依諾沙星的熒光強(qiáng)度綠線：依諾沙星黃線：銪-依諾沙星紅線：依諾沙星黃線：銪-依諾沙星綠線：銪-釔-依諾沙星實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論依諾沙星，銪-依諾沙星依諾沙星，銪-依諾沙星，19實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論在表面活性劑的影響試驗(yàn)中，TritonX-100對(duì)體系無(wú)增敏作用，CTMA，SDBS和SDS則有不同程度的增敏作用，其中以SDS效果最好。說(shuō)明在實(shí)驗(yàn)條件下，釔離子只能微弱的增強(qiáng)銪-依諾沙星的敏化熒光特性，對(duì)銪-依諾沙星體系的能量轉(zhuǎn)移并無(wú)太大影響。銪-釔-依諾沙星，銪-釔-依諾沙星-SDS的熒光發(fā)射光譜圖

黃線：銪-釔-依諾沙星綠線：銪-釔-依諾沙星-SDS實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論在表面活性劑的影響試驗(yàn)中，TritonX-20討論本文在文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上對(duì)釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增敏作用進(jìn)行了初步探索，但結(jié)果并不理想，分析可能是由于產(chǎn)生共發(fā)光效應(yīng)的稀土離子的選擇及實(shí)驗(yàn)條件有所誤差，反應(yīng)的實(shí)驗(yàn)條件有待進(jìn)一步優(yōu)化。討論本文在文獻(xiàn)報(bào)道的基礎(chǔ)上對(duì)釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增敏21在此對(duì)孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時(shí)，在論文實(shí)驗(yàn)過(guò)程給予支持和建議的盧靜老師，王海波老師，卜秀娟老師以及食品質(zhì)量與安全的全體指導(dǎo)老師表示誠(chéng)摯的謝意。感謝在論文工作中給予我?guī)椭椭С值暮|(zhì)云同學(xué)，趙磊同學(xué)，劉立國(guó)同學(xué)，周立灶同學(xué)，我的室友以及05級(jí)食品質(zhì)量與安全的所有同學(xué)。在此表示由衷的感謝。致謝在此對(duì)孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時(shí)，在論文22謝謝大家！請(qǐng)領(lǐng)導(dǎo)老師批評(píng)指正！謝謝大家！請(qǐng)領(lǐng)導(dǎo)老師批評(píng)指正！23釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用

答辯人：趙昕昕專(zhuān)業(yè)：食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師：孫春燕釔離子對(duì)氟喹諾酮藥物熒光增強(qiáng)效應(yīng)的研究及應(yīng)用答辯人：趙昕昕24主要內(nèi)容緒論實(shí)驗(yàn)部分

釔離子對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)

釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝主要內(nèi)容緒論25FluoroquinolonesFQs氟喹諾酮類(lèi)藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥，種類(lèi)繁多，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星（OFL）培氟沙星（PEF）氟甲喹（FLU）蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX)格帕沙星（GPFX）帕珠沙星（PZFX）沙拉沙星（SAR）緒論獸藥殘留問(wèn)題Fluoroquinolones氟喹諾酮類(lèi)藥物緒論獸藥殘留26檢驗(yàn)方法微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法檢驗(yàn)方法微生物法27熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類(lèi)藥物（Eu3+,Tb3+等）——稀土離子特征熒光稀土離子+氟喹諾酮類(lèi)藥物（La3+，Y3+等）——增強(qiáng)氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏稀土離子與氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物的熒光性質(zhì)熒光增強(qiáng)機(jī)理不同稀土離子+氟喹諾酮類(lèi)藥物稀土離子與氟喹諾酮類(lèi)28立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類(lèi)藥物以下分別為環(huán)丙沙星，培氟沙星，依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖立題思想稀土離子Y增強(qiáng)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光性檢測(cè)氟喹諾酮類(lèi)藥29

儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)（上海三科儀器有限公司970CRT型）Cary100紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)（美國(guó)瓦里安公司）920穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計(jì)（英國(guó)Edinburgh公司）pH計(jì)(PHS-3C,上?？祪x有限責(zé)任公司)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)丙沙星培氟沙星依諾沙星實(shí)驗(yàn)部分釔離子對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)材料與試劑

儀器與設(shè)備熒光分光光度計(jì)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品實(shí)驗(yàn)部分釔離30熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔離子溶液1ml1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液++加二次蒸餾水定容至10ml，放置15分鐘，用熒光分光光度計(jì)測(cè)定熒光強(qiáng)度

實(shí)驗(yàn)方法熒光光譜檢測(cè)5ml1.0×10-4mol/L釔31

結(jié)果與討論

———紫外可見(jiàn)吸收光譜1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜1.0×10-5mol/L培氟沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜1.0×10-5mol/L依諾沙星的紫外可見(jiàn)吸收光譜270nm319nm274nm313nm266nm338nm結(jié)果與討論

———紫外可見(jiàn)吸收光譜1.032熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

培氟沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類(lèi)藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖培氟沙星加入釔離33緩沖溶液對(duì)體系的影響

不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類(lèi)藥，2ml緩沖溶液NH4Ac-HAcTris-HCLHAc-NaAcNH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCL緩沖溶液對(duì)體系的影響

不同緩沖溶液對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒34pH值對(duì)體系的影響

pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強(qiáng)度的影響

pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值對(duì)Y3+-培氟沙星體系熒光強(qiáng)度的影響

pH值對(duì)Y3+-依諾沙星體系熒光強(qiáng)度的影響

實(shí)驗(yàn)條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類(lèi)藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液pH值對(duì)體系的影響

pH值對(duì)Y3+-環(huán)丙沙星pH=5.0pH35

Y3+濃度對(duì)體系的影響（以培氟沙星為例）

釔離子對(duì)培氟沙星熒光強(qiáng)度的影響實(shí)驗(yàn)條件：1ml1.0×10-6mol/L培氟沙星溶液，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液Y3+濃度對(duì)體系的影響（以培氟沙星為例）36干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定性試驗(yàn)以釔-培氟沙星為例，加入的干擾物質(zhì)的相對(duì)熒光強(qiáng)度在±5%范圍內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對(duì)體系均無(wú)干擾。體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光，隨著時(shí)間的增加熒光強(qiáng)度有微弱的增強(qiáng)，在15分鐘后熒光強(qiáng)度達(dá)到最大值，之后保持穩(wěn)定，同時(shí)可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定37

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/L-20.0×10-6mol/L時(shí)，呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8mol/L

樣品測(cè)定

線性方程為y=20.285x-23.152，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。

工作曲線及檢出限

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/38機(jī)理的初步探討

La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子在與氟喹諾酮類(lèi)藥物藥物結(jié)合后，由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強(qiáng)稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級(jí)在配合物的S1能級(jí)之上時(shí)，這些稀土離子相當(dāng)于一個(gè)惰性原子，與氟喹諾酮類(lèi)藥物形成一個(gè)螯合物，并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強(qiáng)了其剛性，使原來(lái)不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強(qiáng)熒光的物質(zhì)。機(jī)理的初步探討La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子39討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行了研究，對(duì)各種影響因素進(jìn)行了條件優(yōu)化，并對(duì)機(jī)理進(jìn)行了初步探討，建立了利用釔增強(qiáng)氟喹諾酮藥物熒光檢測(cè)該類(lèi)藥物的新方法。該方法具有操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)快速且靈敏度高的特點(diǎn)，干擾少，穩(wěn)定性好，若與分離技術(shù)相結(jié)合，在食品中氟喹諾酮類(lèi)藥物殘留的檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景。討論本文對(duì)稀土離子釔對(duì)氟喹諾酮類(lèi)藥物的熒光增強(qiáng)效應(yīng)進(jìn)行40釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物

熒光性初探

實(shí)驗(yàn)材料，儀器及溶液：實(shí)驗(yàn)方法：優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件：pH值及緩沖溶液的影響釔離子的影響表面活性劑的影響釔-銪-氟喹諾酮類(lèi)藥物配合物

熒光性初探

實(shí)驗(yàn)材料，儀器及溶41實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論依諾沙星，銪-依諾沙星的熒光發(fā)