糖化血紅蛋白檢測(cè)與臨床應(yīng)用課件

概述糖尿病與糖化血紅蛋白（Glycatedhemoglobin，GHB）糖尿病糖尿病診斷與監(jiān)測(cè)

概述1主要內(nèi)容重點(diǎn)：糖化血紅蛋白定義了解：糖化血紅蛋白類(lèi)型了解：糖化血紅蛋白檢測(cè)方法重點(diǎn)：糖化血紅蛋白臨床應(yīng)用主要內(nèi)容重點(diǎn)：糖化血紅蛋白定義2糖化蛋白己糖（葡萄糖）糖基+蛋白質(zhì)氨基酸基團(tuán)糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白相關(guān)概念糖化蛋白糖化血紅蛋白相關(guān)概念3重點(diǎn)：概念：是血紅蛋白與糖類(lèi)經(jīng)非酶促結(jié)合而成的，它的合成過(guò)程是緩慢的而且相對(duì)不可逆的，積累并持續(xù)于紅細(xì)胞中，合成速率與糖的濃度成正比。重點(diǎn)：概念：是血紅蛋白與糖類(lèi)經(jīng)非酶促結(jié)合而成的，它的合成過(guò)程4GHB在糖尿病監(jiān)測(cè)中的特點(diǎn)：（1）與血糖值相平行。（2）生成緩慢。（3）一旦生成就不易分解。（4）反應(yīng)場(chǎng)所。

GHB在糖尿病監(jiān)測(cè)中的特點(diǎn)：5糖化血紅蛋白類(lèi)型HbA95-97%以上，HbA2（占2.5％），HbF（占0.2％）

HbA0（未糖化部分）HbAHbA1（糖基化部分）：

HbA1a（a1-a2）

HbA1b（b1-b3）

HbA1c（葡萄糖結(jié)合）

糖化血紅蛋白類(lèi)型HbA95-97%以上，HbA2（占2.6糖化血紅蛋白檢測(cè)方法基于糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白所帶電荷不同：

離子層析法、電泳等基于糖化血紅蛋白上糖化基團(tuán)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：親和層析、免疫法、離子捕獲法等糖化血紅蛋白檢測(cè)方法基于糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白所帶電荷7一、免疫凝集法原理：利用血紅蛋白β-鏈上糖基化的N末端的4-8個(gè)氨基酸糖化位點(diǎn)制備的單克隆或多克隆抗體直接測(cè)定。許多同源的糖化血紅蛋白變體也有相同的N末端結(jié)構(gòu)，從而會(huì)對(duì)結(jié)果造成干擾。一、免疫凝集法原理：8二、離子交換HLPC法原理：根據(jù)血紅蛋白β鏈N末端纈氨酸糖化后所帶電荷不同。在中性pH條件下，HbA1c攜帶電荷較少，可以與其它組分（HbA1a、HbA1b、HbF、HbA0

等）分開(kāi)達(dá)到分離的目的。二、離子交換HLPC法原理：9三、親和層析法原理：采用間氨基苯硼酸的瓊脂糖珠。硼酸具有與血紅蛋白分子上葡萄糖可逆結(jié)合反應(yīng)的性質(zhì)，致使GHb選擇性地結(jié)合于柱上，而非糖化血紅蛋白及不穩(wěn)定GHb、HbF被洗脫而分離。除葡萄糖外，血液中所有的糖類(lèi)都可與Hb相結(jié)合，因此該方法的檢測(cè)結(jié)果為糖化血紅蛋白總量，而不是HbA1c的含量。三、親和層析法原理：10臨床應(yīng)用標(biāo)本采集參考值范圍平均血糖4.HbA1c研究及其標(biāo)準(zhǔn)化5.臨床意義臨床應(yīng)用11標(biāo)本采集與保存：靜脈血：EDTA、草酸鹽、肝素放置：4℃可放置1周。采集時(shí)間：不限美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)(ADA)建議血糖控制滿(mǎn)意且穩(wěn)定的糖尿病患者至少1年測(cè)2次糖化血紅蛋白；若血糖控制不滿(mǎn)意且需調(diào)整方案者，應(yīng)一年測(cè)4次。糖化血紅蛋白檢測(cè)與臨床應(yīng)用課件12正常參考值：4~6%

診斷界值：≥

6.5%糖尿病高危人群：5.7%～6.4%一般認(rèn)為，糖尿病患HbA1c≤6.5％時(shí)，說(shuō)明血糖水平控制較好。參考值范圍參考值范圍13

平均血糖與HbA1c的關(guān)系根據(jù)DCCT的數(shù)據(jù)，美國(guó)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目（NGSP）以及大型的臨床試驗(yàn)研究ADAG，得出的直線(xiàn)回歸方程式可以將糖化血紅蛋白值用來(lái)估計(jì)平均血糖值：

MBG估計(jì)值＝24.89×（HbA1c）－45.36

平均血糖與HbA1c的關(guān)系根據(jù)DCCT的數(shù)據(jù)，美國(guó)糖化血紅14

GHb(%)平均血糖（MGB）43.3355.0066.6778.3389.99911.71013.31114.91216.7平均血糖取代HbA1c？GHb(%)平均血糖（MGB）43.3355.15HbA1c研究穩(wěn)定發(fā)展，是評(píng)價(jià)血糖控制的重要指標(biāo)幾個(gè)大型的國(guó)際糖尿病研究都表明HbA1c與糖尿病并發(fā)癥存在著線(xiàn)性相關(guān)。HbA1c研究及其標(biāo)準(zhǔn)化HbA1c研究穩(wěn)定發(fā)展，是評(píng)價(jià)血糖控制的重要指標(biāo)HbA1c研16UKPDS流行病學(xué)分析：HbA1c降低1%的獲益

–21%全部并發(fā)癥

–14%

–14%

–12%

–37%糖尿病相關(guān)死亡總死亡率心肌梗死卒中微血管病變

–21%課件UKPDS流行病學(xué)分析：HbA1c降低1%的獲益–21%全17RelativeRisk視網(wǎng)膜病變腎臟病變神經(jīng)病變微量白蛋白尿HbA1c(%)151311975316789101112DCCT：糖化血紅蛋白與并發(fā)癥線(xiàn)性相關(guān)課件RelativeRisk視網(wǎng)膜病變腎臟病變神經(jīng)病變微量白蛋18

在糖尿病的篩查中有提示價(jià)值，可作為輕癥、2型、隱性糖尿病早期診斷指標(biāo)。發(fā)現(xiàn)治療中存在的問(wèn)題以及指導(dǎo)治療方案的調(diào)整。在糖尿病的治療中可作為參考、治療指標(biāo)。預(yù)示微、小血管并發(fā)癥（糖基化終產(chǎn)物產(chǎn)生、刺激產(chǎn)生ROS，損傷血管細(xì)胞）臨床意義在糖尿病的篩查中有提示價(jià)值，可作為輕癥、2型、隱性糖尿病早19測(cè)定糖化血紅蛋白的注意事項(xiàng)（一）

血糖波動(dòng)較大，不能反映真正的血糖變化HbA1cHbA1c6.0%時(shí)間6.0%HbA1c能代表血糖控制水平，能代表血糖控制質(zhì)量嗎？生理性HbA1c6.0%是否等于病理性6.0％？測(cè)定糖化血紅蛋白的注意事項(xiàng)（一）HbA1cHbA1c6.020糖化血紅蛋白還受紅細(xì)胞的影響，在合并影響紅細(xì)胞質(zhì)和量的疾病（如腎臟疾病、溶血性貧血等）時(shí)，所測(cè)得的糖化血紅蛋白也不能反映真正的血糖水平。測(cè)定糖化血紅蛋白的注意事項(xiàng)（二）

糖化血紅蛋白還受紅細(xì)胞的影響，在合并影響紅細(xì)胞質(zhì)和量的疾病（21小結(jié)糖化血紅蛋白是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物。糖化血紅蛋白越高表示血糖與血紅蛋白結(jié)合越多，糖尿病病情也越重。糖化血紅蛋白能夠反映過(guò)去2～3個(gè)月血糖控制的平均水平。

小結(jié)糖化血紅蛋白是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合222.糖化血紅蛋白與血糖的控制情況

4%～6%：血糖控制正常

6%～7%：血糖控制比較理想

7%～8%：血糖控制一般

8%～9%：控制不理想＞9%：血糖控制很差，慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險(xiǎn)高2.糖化血紅蛋白與血糖的控制情況233.測(cè)定GHb主要是利用GHb和GHb的物理化學(xué)性質(zhì)的不同而進(jìn)行的，目前主要的檢測(cè)方法有5種：離子交換高效液相色譜法-HbA1c的金標(biāo)準(zhǔn)、微柱法、電泳法、親和層析法、免疫法

方法與原理3.測(cè)定GHb主要是利用GHb和GHb的物理化學(xué)性質(zhì)的不同244.臨床意義在糖尿病的篩查中有早期提示的價(jià)值。在糖尿病的治療中，HbA1C是評(píng)價(jià)血糖控制好壞的重要標(biāo)準(zhǔn)。預(yù)示微、小血管并發(fā)癥，估計(jì)糖尿病慢性并發(fā)癥的發(fā)生與發(fā)展情況。4.臨床意義25

謝謝！謝謝！謝謝！供婁浪頹藍(lán)辣襖駒靴鋸瀾互慌仲寫(xiě)繹衰斡染圾明將呆則孰盆瘸砒腥悉漠塹脊髓灰質(zhì)炎(講課2019)脊髓灰質(zhì)炎(講課2019)謝謝！供婁浪頹藍(lán)辣襖駒靴鋸瀾互慌仲寫(xiě)繹衰斡染圾明將呆則孰盆瘸27供婁浪頹藍(lán)辣襖駒靴鋸瀾互慌仲寫(xiě)繹衰斡染圾明將呆則孰盆瘸砒腥悉漠塹脊髓灰質(zhì)炎(講課2019)脊髓灰質(zhì)炎(講課2019)供婁浪頹藍(lán)辣襖駒靴鋸瀾互慌仲寫(xiě)繹衰斡染圾明將呆則孰盆瘸砒腥悉28概述糖尿病與糖化血紅蛋白（Glycatedhemoglobin，GHB）糖尿病糖尿病診斷與監(jiān)測(cè)

概述29主要內(nèi)容重點(diǎn)：糖化血紅蛋白定義了解：糖化血紅蛋白類(lèi)型了解：糖化血紅蛋白檢測(cè)方法重點(diǎn)：糖化血紅蛋白臨床應(yīng)用主要內(nèi)容重點(diǎn)：糖化血紅蛋白定義30糖化蛋白己糖（葡萄糖）糖基+蛋白質(zhì)氨基酸基團(tuán)糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白相關(guān)概念糖化蛋白糖化血紅蛋白相關(guān)概念31重點(diǎn)：概念：是血紅蛋白與糖類(lèi)經(jīng)非酶促結(jié)合而成的，它的合成過(guò)程是緩慢的而且相對(duì)不可逆的，積累并持續(xù)于紅細(xì)胞中，合成速率與糖的濃度成正比。重點(diǎn)：概念：是血紅蛋白與糖類(lèi)經(jīng)非酶促結(jié)合而成的，它的合成過(guò)程32GHB在糖尿病監(jiān)測(cè)中的特點(diǎn)：（1）與血糖值相平行。（2）生成緩慢。（3）一旦生成就不易分解。（4）反應(yīng)場(chǎng)所。

GHB在糖尿病監(jiān)測(cè)中的特點(diǎn)：33糖化血紅蛋白類(lèi)型HbA95-97%以上，HbA2（占2.5％），HbF（占0.2％）

HbA0（未糖化部分）HbAHbA1（糖基化部分）：

HbA1a（a1-a2）

HbA1b（b1-b3）

HbA1c（葡萄糖結(jié)合）

糖化血紅蛋白類(lèi)型HbA95-97%以上，HbA2（占2.34糖化血紅蛋白檢測(cè)方法基于糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白所帶電荷不同：

離子層析法、電泳等基于糖化血紅蛋白上糖化基團(tuán)的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：親和層析、免疫法、離子捕獲法等糖化血紅蛋白檢測(cè)方法基于糖化血紅蛋白與非糖化血紅蛋白所帶電荷35一、免疫凝集法原理：利用血紅蛋白β-鏈上糖基化的N末端的4-8個(gè)氨基酸糖化位點(diǎn)制備的單克隆或多克隆抗體直接測(cè)定。許多同源的糖化血紅蛋白變體也有相同的N末端結(jié)構(gòu)，從而會(huì)對(duì)結(jié)果造成干擾。一、免疫凝集法原理：36二、離子交換HLPC法原理：根據(jù)血紅蛋白β鏈N末端纈氨酸糖化后所帶電荷不同。在中性pH條件下，HbA1c攜帶電荷較少，可以與其它組分（HbA1a、HbA1b、HbF、HbA0

等）分開(kāi)達(dá)到分離的目的。二、離子交換HLPC法原理：37三、親和層析法原理：采用間氨基苯硼酸的瓊脂糖珠。硼酸具有與血紅蛋白分子上葡萄糖可逆結(jié)合反應(yīng)的性質(zhì)，致使GHb選擇性地結(jié)合于柱上，而非糖化血紅蛋白及不穩(wěn)定GHb、HbF被洗脫而分離。除葡萄糖外，血液中所有的糖類(lèi)都可與Hb相結(jié)合，因此該方法的檢測(cè)結(jié)果為糖化血紅蛋白總量，而不是HbA1c的含量。三、親和層析法原理：38臨床應(yīng)用標(biāo)本采集參考值范圍平均血糖4.HbA1c研究及其標(biāo)準(zhǔn)化5.臨床意義臨床應(yīng)用39標(biāo)本采集與保存：靜脈血：EDTA、草酸鹽、肝素放置：4℃可放置1周。采集時(shí)間：不限美國(guó)糖尿病協(xié)會(huì)(ADA)建議血糖控制滿(mǎn)意且穩(wěn)定的糖尿病患者至少1年測(cè)2次糖化血紅蛋白；若血糖控制不滿(mǎn)意且需調(diào)整方案者，應(yīng)一年測(cè)4次。糖化血紅蛋白檢測(cè)與臨床應(yīng)用課件40正常參考值：4~6%

診斷界值：≥

6.5%糖尿病高危人群：5.7%～6.4%一般認(rèn)為，糖尿病患HbA1c≤6.5％時(shí)，說(shuō)明血糖水平控制較好。參考值范圍參考值范圍41

平均血糖與HbA1c的關(guān)系根據(jù)DCCT的數(shù)據(jù)，美國(guó)糖化血紅蛋白標(biāo)準(zhǔn)化項(xiàng)目（NGSP）以及大型的臨床試驗(yàn)研究ADAG，得出的直線(xiàn)回歸方程式可以將糖化血紅蛋白值用來(lái)估計(jì)平均血糖值：

MBG估計(jì)值＝24.89×（HbA1c）－45.36

平均血糖與HbA1c的關(guān)系根據(jù)DCCT的數(shù)據(jù)，美國(guó)糖化血紅42

GHb(%)平均血糖（MGB）43.3355.0066.6778.3389.99911.71013.31114.91216.7平均血糖取代HbA1c？GHb(%)平均血糖（MGB）43.3355.43HbA1c研究穩(wěn)定發(fā)展，是評(píng)價(jià)血糖控制的重要指標(biāo)幾個(gè)大型的國(guó)際糖尿病研究都表明HbA1c與糖尿病并發(fā)癥存在著線(xiàn)性相關(guān)。HbA1c研究及其標(biāo)準(zhǔn)化HbA1c研究穩(wěn)定發(fā)展，是評(píng)價(jià)血糖控制的重要指標(biāo)HbA1c研44UKPDS流行病學(xué)分析：HbA1c降低1%的獲益

–21%全部并發(fā)癥

–14%

–14%

–12%

–37%糖尿病相關(guān)死亡總死亡率心肌梗死卒中微血管病變

–21%課件UKPDS流行病學(xué)分析：HbA1c降低1%的獲益–21%全45RelativeRisk視網(wǎng)膜病變腎臟病變神經(jīng)病變微量白蛋白尿HbA1c(%)151311975316789101112DCCT：糖化血紅蛋白與并發(fā)癥線(xiàn)性相關(guān)課件RelativeRisk視網(wǎng)膜病變腎臟病變神經(jīng)病變微量白蛋46

在糖尿病的篩查中有提示價(jià)值，可作為輕癥、2型、隱性糖尿病早期診斷指標(biāo)。發(fā)現(xiàn)治療中存在的問(wèn)題以及指導(dǎo)治療方案的調(diào)整。在糖尿病的治療中可作為參考、治療指標(biāo)。預(yù)示微、小血管并發(fā)癥（糖基化終產(chǎn)物產(chǎn)生、刺激產(chǎn)生ROS，損傷血管細(xì)胞）臨床意義在糖尿病的篩查中有提示價(jià)值，可作為輕癥、2型、隱性糖尿病早47測(cè)定糖化血紅蛋白的注意事項(xiàng)（一）

血糖波動(dòng)較大，不能反映真正的血糖變化HbA1cHbA1c6.0%時(shí)間6.0%HbA1c能代表血糖控制水平，能代表血糖控制質(zhì)量嗎？生理性HbA1c6.0%是否等于病理性6.0％？測(cè)定糖化血紅蛋白的注意事項(xiàng)（一）HbA1cHbA1c6.048糖化血紅蛋白還受紅細(xì)胞的影響，在合并影響紅細(xì)胞質(zhì)和量的疾?。ㄈ缒I臟疾病、溶血性貧血等）時(shí)，所測(cè)得的糖化血紅蛋白也不能反映真正的血糖水平。測(cè)定糖化血紅蛋白的注意事項(xiàng)（二）

糖化血紅蛋白還受紅細(xì)胞的影響，在合并影響紅細(xì)胞質(zhì)和量的疾?。?9小結(jié)糖化血紅蛋白是人體血液中紅細(xì)胞內(nèi)的血紅蛋白與血糖結(jié)合的產(chǎn)物。糖化血紅蛋白越高表示血糖與血紅蛋白結(jié)合越多，糖尿病病情也越重。糖