目的基因的獲取(實用)課件

基因工程的基本操作程序?qū)ｎ}１基因工程DNA重組技術(shù)的基本工具“分子手術(shù)刀”“分子縫合針”“分子運輸車”復(fù)習(xí)——限制酶——DNA連接酶——基因進入受體細(xì)胞的載體運載體基因工程培育抗蟲棉的簡要過程：普通棉花(無抗蟲特性)蘇云金芽孢桿菌提取抗蟲基因與運載體DNA拼接導(dǎo)入棉花細(xì)胞棉花植株(有抗蟲特性)(含抗蟲基因)------結(jié)構(gòu)基因或調(diào)控因子2.獲取目的基因的常用方法（1）從基因文庫中獲?。?）利用PCR技術(shù)擴增（3）人工合成一、獲取目的基因

1.目的基因是指或從細(xì)胞中分離與人工合成編碼蛋白質(zhì)，連續(xù)不間斷原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)：非編碼區(qū)①不編碼蛋白質(zhì)。②調(diào)控遺傳信息表達。原核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)非編碼區(qū)非編碼區(qū)編碼區(qū)編碼區(qū)上游

編碼區(qū)下游

與RNA聚合酶結(jié)合位點啟動子終止子轉(zhuǎn)錄部位為基因編碼區(qū)真核細(xì)胞的基因結(jié)構(gòu)編碼區(qū)非編碼區(qū)：外顯子：能編碼蛋白質(zhì)的

序列內(nèi)含子：不能編碼蛋白質(zhì)

的序列有調(diào)控作用，上游有RNA聚合酶結(jié)合位點(啟動子)。非編碼序列：包括非編碼區(qū)和內(nèi)含子結(jié)構(gòu)基因外顯子內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄、加工修飾mRNA種類部分基因文庫

（如:cDNA文庫）①.基因文庫的概念和種類(1)從基因文庫中獲取目的基因概念：基因組文庫基因文庫B反轉(zhuǎn)錄法：②.構(gòu)建基因文庫DNA聚合酶反轉(zhuǎn)錄酶cDNAmRNA雙鏈DNA基因重組重組質(zhì)粒部分基因文庫基因文庫中不是直接保管相應(yīng)基因，而是保存受體菌，菌中含基因依據(jù)目的基因的有關(guān)信息如：根據(jù)基因的核苷酸序列基因在染色體上的位置基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA基因表達產(chǎn)物蛋白質(zhì)等特性。③如何從基因文庫中得到所需要的基因？(2)利用PCR技術(shù)擴增目的基因①概念②原理③前提條件基本條件④方式⑤結(jié)果⑥過程模板、原料、酶、能量引物變性、退火、延伸三步曲延伸：加熱至70～75℃以目的基因為模板，合成互補的新DNA鏈變性：加熱至90～95℃雙鏈DNA解鏈成為單鏈DNA退火：冷卻至55~60℃部分引物與模板的單鏈DNA的特定互補部位相配對和結(jié)合變性延伸退火PCR的基本原理PCR反應(yīng)條件PCR過程PCR的特點50℃引物1引物2DNA引物PCR的基本原理PCR反應(yīng)條件PCR過程PCR的特點引物1引物2DNA引物72℃Taq酶Taq酶蛋白質(zhì)的氨基酸序列mRNA的核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因的核苷酸序列推測推測目的基因化學(xué)合成⑶人工合成目的基因——根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA目的基因可從基因文庫中獲得，下列有關(guān)基因文庫的描述正確的是A.某生物的全套基因就是一個基因文庫B.將含有某種生物不同的許多DNA片段導(dǎo)入某個生物體內(nèi)，則這個生物就是一個基因文庫

C.含有一種生物所有基因的基因文庫叫做基因組文庫D.含有一種生物的一部分基因的基因文庫叫cDNA文庫練習(xí)

3.下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是①從基因文庫中獲取目的基因②利用PCR技術(shù)擴增目的基因③反轉(zhuǎn)錄法④通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成

A.①②③④B.①②③C.②③④ D.②③

4.在基因工程中，把選出的目的基因（共1000個脫氧核苷酸對，其中腺嘌嶺脫氧核苷酸是460個）放入DNA擴增儀中擴增4代，那么，在擴增儀中應(yīng)放入胞嘧啶