生物2013年高考復(fù)習(xí)課件：選修1專(zhuān)題1、2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

選修1專(zhuān)題1、2

生物技術(shù)實(shí)踐傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 選修1 生物技術(shù)實(shí)踐微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1考綱內(nèi)容2013年高考風(fēng)向標(biāo)實(shí)驗(yàn)：(1)微生物的分離和培養(yǎng)(2)某種微生物數(shù)量的測(cè)定(3)培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用(4)利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用以生活實(shí)踐為背景，考查本專(zhuān)題的相關(guān)知識(shí)，多以選擇題的形式出現(xiàn)考綱內(nèi)容2013年高考風(fēng)向標(biāo)實(shí)驗(yàn)：(1)微生物的分離和培養(yǎng)2一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.制作果酒無(wú)氧20℃酸性榨汁

(1)原理：酵母菌在①______的條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵。 (2)發(fā)酵條件：溫度控制在18℃～25℃，最適為②_____左右；pH呈③______。 (3)制作流程：挑選水果→沖洗→④______→酒精發(fā)酵→果酒。一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.制作果酒無(wú)氧20℃酸性榨汁 (132.制作果醋有氧30℃～35℃糖源(1)原理：醋酸菌在⑤_____的條件下進(jìn)行醋酸發(fā)酵。(2)發(fā)酵條件：最適溫度為⑥_____________；適時(shí)通氣；控制⑦_(dá)_____供應(yīng)。酒精發(fā)酵肽和氨基酸

(3)制作流程：挑選水果→沖洗→榨汁→⑧__________→醋酸發(fā)酵→果醋。3.制作腐乳甘油和脂肪酸

(1)原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶、肽酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的⑨_____________；脂肪酶可將脂肪水解為⑩_____________。2.制作果醋有氧30℃～35℃糖源(1)原理：醋酸菌在⑤4(2)制作流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加?______裝瓶→密封。鹵湯

(3)影響腐乳品質(zhì)的因素：豆腐含水量、鹽的用量、鹵湯中酒的含量等。4.制作泡菜乳酸菌(1)原理：利用?________在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解成?

______。乳酸(2)制作流程圖(2)制作流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加?______5(3)影響泡菜品質(zhì)的因素：泡菜壇的選擇，腌制的條件(如腌制時(shí)間、?_______、食鹽用量等)。 (4)測(cè)定亞硝酸鹽含量的操作流程比色配制溶液→制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備樣品處理液→?_____。 1.果醋制作時(shí)如果糖源缺少，空氣(氧氣)充足時(shí)，醋酸菌可將酒精轉(zhuǎn)化為乙醇，進(jìn)而轉(zhuǎn)化為乙酸，而產(chǎn)生果醋。()2．果酒的制作中要通氣一段時(shí)間后再密封或預(yù)留發(fā)酵容器的1/3空間。()√溫度√(3)影響泡菜品質(zhì)的因素：泡菜壇的選擇，腌制的條件(如腌制時(shí)6二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1.微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)(1)配制培養(yǎng)基稱(chēng)量→混合→溶化→調(diào)pH→分裝→包扎。(2)滅菌高壓滅菌鍋加水→將培養(yǎng)基放入鍋內(nèi)→密封→排冷氣→維持壓力→取出倒平板(或擱置斜面)。(3)接種1)接種過(guò)程：洗凈雙手→點(diǎn)燃酒精燈→接種→貼標(biāo)簽。二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用稱(chēng)量→混合→溶化→調(diào)pH→分裝→包扎72)接種工具：包括?_______________。3)接種方法：?_________法、?______________法。(4)培養(yǎng)：接種后的培養(yǎng)皿放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。平板劃線(xiàn)1.接種要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。()√2．接種后要進(jìn)行滅菌處理。()×2.土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)菌種篩選選擇培養(yǎng)基尿素1)培養(yǎng)基：?___________。2)特點(diǎn)：?______是唯一氮源。接種環(huán)、涂布器稀釋涂布平板2)接種工具：包括?_______________。(4)培8(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 __________________；(3)設(shè)置對(duì)照的主要目的

____________________。 排除實(shí)驗(yàn)組中____________對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則包括重復(fù)原則和對(duì)照原則。()非測(cè)試因素√稀釋涂布平板法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法排除實(shí)驗(yàn)組中____________93.分解纖維素的微生物的分離——纖維素分解菌的篩選(1)實(shí)驗(yàn)原理1)纖維素酶的催化原理2)篩選纖維素分解菌的原理透明圈即：可根據(jù)是否產(chǎn)生_______來(lái)篩選纖維素分解菌。3.分解纖維素的微生物的分離——纖維素分解菌的篩選2)篩選纖10(2)過(guò)程纖維素土壤取樣：選擇富含_______的環(huán)境中的土壤。

↓選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量。

↓梯度稀釋微生物倒平板挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(2)過(guò)程纖維素土壤取樣：選擇富含_______的環(huán)境中的土11

纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用剛果紅染色法所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。()發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶葡萄糖√ 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用剛果紅發(fā)酵產(chǎn)生纖12微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類(lèi)真核生物原核生物真核生物原核生物生活方式異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧適宜溫度 (℃)20左右30～3515～18室溫發(fā)酵條件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧無(wú)氧主要繁殖方式適宜條件下 出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖主要用途釀酒、發(fā)面釀醋制作腐乳制作酸奶、 泡菜考點(diǎn)與傳統(tǒng)發(fā)酵有關(guān)的幾種微生物的比較微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類(lèi)真核生物原核生物真核生13【典例1】下列關(guān)于幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖的描述，正確的是()

A.根瘤菌通過(guò)生物固氮，制造了含氮養(yǎng)料和含碳有機(jī)物 B.接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進(jìn)入對(duì)數(shù)期能大量積累有毒素

C.培養(yǎng)液中溶氧量的變化，會(huì)影響酵母菌的生長(zhǎng)繁殖和代謝途徑 D.用32P標(biāo)記的噬菌體感染細(xì)菌，在新形成的噬菌體中都能檢測(cè)到32P【典例1】下列關(guān)于幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖的描述，正確14

[解題思路]本題考察了幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖的問(wèn)題。A中根瘤菌通過(guò)生物固氮不能制造含碳有機(jī)物；B中接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進(jìn)入穩(wěn)定期能大量積累毒素；C中酵母菌是兼性厭氧型生物，故溶氧量的變化，會(huì)影響酵母菌的生長(zhǎng)繁殖和代謝途徑，C正確；D中用32P標(biāo)記的噬菌體感染細(xì)菌，在新形成的噬菌體中只有部分噬菌體能檢測(cè)到32P。[答案]C [解題思路]本題考察了幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖[答案15?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練

1．(2011年江蘇)下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述，正確的是()D

A.腐乳制作所需要的適宜溫度最高 B.果醋發(fā)酵包括無(wú)氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵 C.使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D.使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA

解析：無(wú)論是真菌還是細(xì)菌，都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA。?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練正確的是()D A.腐乳制作所需要的適宜溫度最高16營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來(lái)源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無(wú)機(jī)化合物(CO2、NaHCO3)，有機(jī)化合物(糖類(lèi)、脂肪酸、花生粉餅、石油等)氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無(wú)機(jī)化合物(N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽)，有機(jī)化合物(尿素、牛肉膏、蛋白胨等)生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)必不可少的微量有機(jī)物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等考點(diǎn)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1．微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及功能

微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水這五大類(lèi)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來(lái)源碳源凡能提供所需構(gòu)成生物體的細(xì)胞無(wú)機(jī)17①微生物最常利用的碳源是糖類(lèi)，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。②對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。③微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，往往是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。①微生物最常利用的碳源是糖類(lèi)，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是18劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀(guān)察微生物的運(yùn)動(dòng)、 分類(lèi)、鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明 確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基

培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分己知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類(lèi)、鑒定2．培養(yǎng)基的種類(lèi)劃分培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途物理液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體19劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基上加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽)鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)續(xù)表劃分培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某培養(yǎng)、分離20①加入培養(yǎng)基中的凝固劑(如瓊脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。

②選擇培養(yǎng)基一般只生長(zhǎng)具有特定目的的微生物，鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。①加入培養(yǎng)基中的凝固劑(如瓊脂)，一般不能被微生物利用，只起21項(xiàng)目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子適用范圍實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等常用方法煮沸消毒法(如100℃，5～6min)，巴氏消毒法(80℃，15min)，酒精、氯氣、石炭酸等化學(xué)藥劑消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌3．消毒與滅菌(1)消毒與滅菌的比較項(xiàng)目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果22(2)高溫加熱滅菌原理：使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，從而達(dá)到殺滅細(xì)菌的目的。

(3)化學(xué)藥劑消毒原理：使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，但是化學(xué)物質(zhì)很難透過(guò)孢子或芽孢的堅(jiān)硬外層進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，因此化學(xué)方法難以消滅孢子和芽孢。

(4)體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇?xì)⒕Ч畹脑颍簼舛冗^(guò)低，殺菌力弱；濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其內(nèi)，影響殺菌效果。對(duì)剛洗刷后未干的器皿，可選擇75%的酒精進(jìn)行消毒。(2)高溫加熱滅菌原理：使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，從而達(dá)到殺滅細(xì)234.微生物培養(yǎng)中的注意事項(xiàng)(1)倒平板①培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右才能倒平板。②整個(gè)操作過(guò)程需在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。③平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。(2)平板劃線(xiàn)操作

①第一次劃線(xiàn)及每次劃線(xiàn)之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線(xiàn)操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的見(jiàn)下表：4.微生物培養(yǎng)中的注意事項(xiàng)①培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃24第一次灼燒每次劃線(xiàn)之前灼燒劃線(xiàn)結(jié)束目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種，使每次劃線(xiàn)的菌種均來(lái)自上次劃線(xiàn)末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者②灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。③劃線(xiàn)時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。第一次灼燒每次劃線(xiàn)之前灼燒劃線(xiàn)結(jié)束目的避免接種環(huán)上殺死上次劃25(3)稀釋涂布平板①稀釋操作：每支試管及其中9mL水、移液管均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處。②涂布平板

a.涂布器用70%酒精消毒，取出時(shí)多余酒精在燒杯中滴盡，沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃后冷卻。 b.不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。(3)稀釋涂布平板①稀釋操作：每支試管及其中9mL水、26【典例2】稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

A.操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋 B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面 C.不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 D.操作過(guò)程中對(duì)培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理

[解題思路]只有適宜濃度的菌液才可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，如果濃度太高，則出現(xiàn)菌落重疊的現(xiàn)象。

[答案]C【典例2】稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。27?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練2．分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是()A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上

B.富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)的纖維素分解菌少C.經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色A

D.對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上

解析：經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)拍軐悠吠坎嫉借b別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練2．分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是()28分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離原理提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(如營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制其他微生物的生長(zhǎng)，常用選擇培養(yǎng)基篩選過(guò)程土壤取樣→樣品稀釋→培養(yǎng)與觀(guān)察土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布于含剛果紅(CR)的鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落→發(fā)酵培養(yǎng)考點(diǎn)微生物的分離與計(jì)數(shù)

1．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與分解纖維素的微生物的分離的比較分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離原理提供有利于目29分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離鑒定酚紅指示劑(變紅)剛果紅(產(chǎn)生透明圈)培養(yǎng) 基固體、尿素為唯一氮源選擇培養(yǎng)基：液體、纖維素為唯一碳源鑒別培養(yǎng)基：固體2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)稀釋涂布平板法

①原理：當(dāng)樣品的稀釋濃度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。續(xù)表分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離鑒定酚紅指示劑(30②操作a．設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b．為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C/V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。(2)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。②操作a．設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b．為了保證31試劑用量試劑用量牛肉膏5g瓊脂20g蛋白胨10g水1000mLNaCl5g————【典例3】(2011

年長(zhǎng)沙模擬)下表是用于從土壤中分離純化土壤細(xì)菌的培養(yǎng)基的配方。下列分析不正確的是()

A.上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是牛肉膏和蛋白胨 B．分離純化微生物最常使用的接種方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法試劑用量試劑用量牛肉膏5g瓊脂20g蛋白胨10g水100032C．加CR的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，只以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基D．使用纖維素酶處理比化學(xué)方法更高效率、反應(yīng)條件溫和、不污染環(huán)境

[解題思路]牛肉膏和蛋白胨能提供碳源和氮源；加CR的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，只以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。[答案]CC．加CR的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，只以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)33?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練3．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是()CA.分解尿素的細(xì)菌C.分解纖維素的細(xì)菌B．硝化細(xì)菌D．乳酸菌

解析：分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練3．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是()341．(2012年汕頭統(tǒng)考)下列關(guān)于果醋制作的敘述中，錯(cuò)誤的是()BA．制作過(guò)程中需要通入氧氣B．溫度一般要控制在50℃左右C．醋酸菌能將果酒變成果醋D．當(dāng)氧氣、糖充足時(shí)，醋酸菌可將果汁中的糖分解成醋酸解析：醋酸菌的最適溫度在30℃～50℃。1．(2012年汕頭統(tǒng)考)下列關(guān)于果醋制作的敘述中，錯(cuò)誤的35

2．(2011年揭陽(yáng)會(huì)考·雙選)下圖是實(shí)驗(yàn)室使用某種接種方法在各種營(yíng)養(yǎng)條件適宜的培養(yǎng)基上培養(yǎng)某種微生物的結(jié)果，相關(guān)敘述不正確的是()BD

A．該圖最可能是用平板劃線(xiàn)法進(jìn)行接種 B．該種微生物有可能是H5N1病毒 C．操作者的衣著和手，需進(jìn)行消毒 D．該接種方法常用來(lái)準(zhǔn)確統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目

解析：病毒營(yíng)寄生生活，只能用活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)；該方法是一種常見(jiàn)的分離方法。 2．(2011年揭陽(yáng)會(huì)考·雙選)下圖是實(shí)驗(yàn)室使用某種接種36培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)Ⅰ瓊脂、葡萄糖35Ⅱ瓊脂、葡萄糖、生長(zhǎng)因子250Ⅲ瓊脂、生長(zhǎng)因子0

3．(2011年佛山二?！るp選)三個(gè)培養(yǎng)皿中分別加入10mL不同的培養(yǎng)基，然后接種相同的大腸桿菌樣液。培養(yǎng)36小時(shí)后，計(jì)算菌落數(shù)，結(jié)果如下表。下列選項(xiàng)正確的是()BD

A.該實(shí)驗(yàn)采用的是液體培養(yǎng)基 B．該實(shí)驗(yàn)采用稀釋涂布平板法接種 C．Ⅰ和Ⅲ對(duì)照，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)不需要生長(zhǎng)因子 D．Ⅱ和Ⅲ對(duì)照，說(shuō)明大腸桿菌的生長(zhǎng)需要糖類(lèi)

解析：有瓊脂一定不是液體培養(yǎng)基；Ⅰ和Ⅲ有兩個(gè)自變量，不能說(shuō)明問(wèn)題。培養(yǎng)皿培養(yǎng)基成分菌落數(shù)Ⅰ瓊脂、葡萄糖35Ⅱ瓊脂、葡萄糖、生長(zhǎng)374．(2010年廣東·雙選)小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放入已滅菌的發(fā)酵裝置中進(jìn)行試驗(yàn)(見(jiàn)下圖)，恰當(dāng)?shù)淖龇ㄊ?)A.加入適量的酵母菌AC

B.一直打開(kāi)閥b通氣 C.一直關(guān)緊閥a，偶爾打開(kāi)閥b幾秒鐘 D.把發(fā)酵裝置放到4℃冰箱中進(jìn)行試驗(yàn)

解析：果酒的制備過(guò)程中先讓酵母菌在有氧條件下迅速擴(kuò)增，再讓酵母菌在無(wú)氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生酒精。4．(2010年廣東·雙選)小李嘗試制作果酒，他將葡萄汁放38組別對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組處理情況不做處理的帶落葉的土壤處理過(guò)的帶落葉的土壤將等量的帶落葉的土壤，用帶有編號(hào)的相同的塑料袋分別包扎好，并埋在5cm深的土壤中5．(2011年深圳二模)下列是對(duì)土壤微生物開(kāi)展探究活動(dòng)的三個(gè)案例，請(qǐng)?jiān)谙鄳?yīng)的空白處作答。(1)案例Ⅰ：探究落葉在土壤微生物的作用下是否發(fā)生腐爛(分解)。設(shè)計(jì)思路：組別對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組處理不做處理的帶落葉的土壤處理過(guò)的帶落葉的土39對(duì)實(shí)驗(yàn)組土壤應(yīng)該進(jìn)行_____處理，盡可能排除__________的作用。滅菌土壤微生物(2)案例Ⅱ：探究土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用。實(shí)驗(yàn)步驟：①將取自農(nóng)田的土壤制成土壤浸出液，放在燒杯中靜置一段時(shí)間。30mL(等量)

②另取兩只燒杯，編號(hào)為A、B，放入等量的淀粉糊。在A(yíng)燒杯中加入30mL土壤浸出液，B燒杯中加入_________________________________。蒸餾水(無(wú)菌水)對(duì)實(shí)驗(yàn)組土壤應(yīng)該進(jìn)行_____處理，盡可能排除_______40

③在室溫條件下放置7天后，從A燒杯中取20mL溶液，分別加入A1和A2兩支試管各10mL；從B燒杯中取20mL溶液，分別加入B1和B2兩支試管各10mL。 ④在A(yíng)1和B1中加入碘液；在A(yíng)2和B2中加入_________________，并進(jìn)行________處理。(等量的)斐林水浴加熱⑤觀(guān)察各試管的________，記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。顏色變化

(3)案例Ⅲ：探究土壤微生物中是否含有分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)將土壤浸出液接種在以_______為唯一碳源的培養(yǎng)基上，并用_______(試劑)加以鑒別。纖維素剛果紅試劑 ③在室溫條件下放置7天后，從A燒杯中取20mL41

選修1專(zhuān)題1、2

生物技術(shù)實(shí)踐傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 選修1 生物技術(shù)實(shí)踐微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用42考綱內(nèi)容2013年高考風(fēng)向標(biāo)實(shí)驗(yàn)：(1)微生物的分離和培養(yǎng)(2)某種微生物數(shù)量的測(cè)定(3)培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用(4)利用微生物發(fā)酵來(lái)生產(chǎn)特定的產(chǎn)物以及微生物在其他方面的應(yīng)用以生活實(shí)踐為背景，考查本專(zhuān)題的相關(guān)知識(shí)，多以選擇題的形式出現(xiàn)考綱內(nèi)容2013年高考風(fēng)向標(biāo)實(shí)驗(yàn)：(1)微生物的分離和培養(yǎng)43一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.制作果酒無(wú)氧20℃酸性榨汁

(1)原理：酵母菌在①______的條件下進(jìn)行酒精發(fā)酵。 (2)發(fā)酵條件：溫度控制在18℃～25℃，最適為②_____左右；pH呈③______。 (3)制作流程：挑選水果→沖洗→④______→酒精發(fā)酵→果酒。一、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用1.制作果酒無(wú)氧20℃酸性榨汁 (1442.制作果醋有氧30℃～35℃糖源(1)原理：醋酸菌在⑤_____的條件下進(jìn)行醋酸發(fā)酵。(2)發(fā)酵條件：最適溫度為⑥_____________；適時(shí)通氣；控制⑦_(dá)_____供應(yīng)。酒精發(fā)酵肽和氨基酸

(3)制作流程：挑選水果→沖洗→榨汁→⑧__________→醋酸發(fā)酵→果醋。3.制作腐乳甘油和脂肪酸

(1)原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶、肽酶將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的⑨_____________；脂肪酶可將脂肪水解為⑩_____________。2.制作果醋有氧30℃～35℃糖源(1)原理：醋酸菌在⑤45(2)制作流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加?______裝瓶→密封。鹵湯

(3)影響腐乳品質(zhì)的因素：豆腐含水量、鹽的用量、鹵湯中酒的含量等。4.制作泡菜乳酸菌(1)原理：利用?________在無(wú)氧條件下將葡萄糖分解成?

______。乳酸(2)制作流程圖(2)制作流程：讓豆腐上長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→加?______46(3)影響泡菜品質(zhì)的因素：泡菜壇的選擇，腌制的條件(如腌制時(shí)間、?_______、食鹽用量等)。 (4)測(cè)定亞硝酸鹽含量的操作流程比色配制溶液→制備標(biāo)準(zhǔn)顯色液→制備樣品處理液→?_____。 1.果醋制作時(shí)如果糖源缺少，空氣(氧氣)充足時(shí)，醋酸菌可將酒精轉(zhuǎn)化為乙醇，進(jìn)而轉(zhuǎn)化為乙酸，而產(chǎn)生果醋。()2．果酒的制作中要通氣一段時(shí)間后再密封或預(yù)留發(fā)酵容器的1/3空間。()√溫度√(3)影響泡菜品質(zhì)的因素：泡菜壇的選擇，腌制的條件(如腌制時(shí)47二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用1.微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)(1)配制培養(yǎng)基稱(chēng)量→混合→溶化→調(diào)pH→分裝→包扎。(2)滅菌高壓滅菌鍋加水→將培養(yǎng)基放入鍋內(nèi)→密封→排冷氣→維持壓力→取出倒平板(或擱置斜面)。(3)接種1)接種過(guò)程：洗凈雙手→點(diǎn)燃酒精燈→接種→貼標(biāo)簽。二、微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用稱(chēng)量→混合→溶化→調(diào)pH→分裝→包扎482)接種工具：包括?_______________。3)接種方法：?_________法、?______________法。(4)培養(yǎng)：接種后的培養(yǎng)皿放入恒溫箱內(nèi)培養(yǎng)。平板劃線(xiàn)1.接種要在無(wú)菌環(huán)境中進(jìn)行。()√2．接種后要進(jìn)行滅菌處理。()×2.土壤中分解尿素細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(1)菌種篩選選擇培養(yǎng)基尿素1)培養(yǎng)基：?___________。2)特點(diǎn)：?______是唯一氮源。接種環(huán)、涂布器稀釋涂布平板2)接種工具：包括?_______________。(4)培49(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法 __________________；(3)設(shè)置對(duì)照的主要目的

____________________。 排除實(shí)驗(yàn)組中____________對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原則包括重復(fù)原則和對(duì)照原則。()非測(cè)試因素√稀釋涂布平板法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法(2)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法排除實(shí)驗(yàn)組中____________503.分解纖維素的微生物的分離——纖維素分解菌的篩選(1)實(shí)驗(yàn)原理1)纖維素酶的催化原理2)篩選纖維素分解菌的原理透明圈即：可根據(jù)是否產(chǎn)生_______來(lái)篩選纖維素分解菌。3.分解纖維素的微生物的分離——纖維素分解菌的篩選2)篩選纖51(2)過(guò)程纖維素土壤取樣：選擇富含_______的環(huán)境中的土壤。

↓選擇培養(yǎng)：用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，以增加纖維素分解菌的數(shù)量。

↓梯度稀釋微生物倒平板挑選產(chǎn)生透明圈的菌落(2)過(guò)程纖維素土壤取樣：選擇富含_______的環(huán)境中的土52

纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用剛果紅染色法所用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。()發(fā)酵產(chǎn)生纖維素酶葡萄糖√ 纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，而用剛果紅發(fā)酵產(chǎn)生纖53微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類(lèi)真核生物原核生物真核生物原核生物生活方式異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧適宜溫度 (℃)20左右30～3515～18室溫發(fā)酵條件前期需氧，后期不需氧一直需氧一直需氧無(wú)氧主要繁殖方式適宜條件下 出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖主要用途釀酒、發(fā)面釀醋制作腐乳制作酸奶、 泡菜考點(diǎn)與傳統(tǒng)發(fā)酵有關(guān)的幾種微生物的比較微生物酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)分類(lèi)真核生物原核生物真核生54【典例1】下列關(guān)于幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖的描述，正確的是()

A.根瘤菌通過(guò)生物固氮，制造了含氮養(yǎng)料和含碳有機(jī)物 B.接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進(jìn)入對(duì)數(shù)期能大量積累有毒素

C.培養(yǎng)液中溶氧量的變化，會(huì)影響酵母菌的生長(zhǎng)繁殖和代謝途徑 D.用32P標(biāo)記的噬菌體感染細(xì)菌，在新形成的噬菌體中都能檢測(cè)到32P【典例1】下列關(guān)于幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖的描述，正確55

[解題思路]本題考察了幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖的問(wèn)題。A中根瘤菌通過(guò)生物固氮不能制造含碳有機(jī)物；B中接種到培養(yǎng)基上的青霉菌，進(jìn)入穩(wěn)定期能大量積累毒素；C中酵母菌是兼性厭氧型生物，故溶氧量的變化，會(huì)影響酵母菌的生長(zhǎng)繁殖和代謝途徑，C正確；D中用32P標(biāo)記的噬菌體感染細(xì)菌，在新形成的噬菌體中只有部分噬菌體能檢測(cè)到32P。[答案]C [解題思路]本題考察了幾種微生物的營(yíng)養(yǎng)代謝和生長(zhǎng)繁殖[答案56?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練

1．(2011年江蘇)下列與果酒、果醋和腐乳制作相關(guān)的敘述，正確的是()D

A.腐乳制作所需要的適宜溫度最高 B.果醋發(fā)酵包括無(wú)氧發(fā)酵和有氧發(fā)酵 C.使用的菌種分別是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌 D.使用的菌種都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA

解析：無(wú)論是真菌還是細(xì)菌，都具有細(xì)胞壁、核糖體、DNA和RNA。?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練正確的是()D A.腐乳制作所需要的適宜溫度最高57營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來(lái)源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體的細(xì)胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)無(wú)機(jī)化合物(CO2、NaHCO3)，有機(jī)化合物(糖類(lèi)、脂肪酸、花生粉餅、石油等)氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物無(wú)機(jī)化合物(N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽)，有機(jī)化合物(尿素、牛肉膏、蛋白胨等)生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)必不可少的微量有機(jī)物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等考點(diǎn)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

1．微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及功能

微生物的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽和水這五大類(lèi)。營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來(lái)源碳源凡能提供所需構(gòu)成生物體的細(xì)胞無(wú)機(jī)58①微生物最常利用的碳源是糖類(lèi)，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是銨鹽、硝酸鹽。②對(duì)異養(yǎng)微生物來(lái)說(shuō)，含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。③微生物之所以需要補(bǔ)充生長(zhǎng)因子，往往是由于缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。①微生物最常利用的碳源是糖類(lèi)，尤其是葡萄糖；最常利用的氮源是59劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途物理性質(zhì)液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)基加凝固劑，如瓊脂觀(guān)察微生物的運(yùn)動(dòng)、 分類(lèi)、鑒定固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒定、活菌計(jì)數(shù)、保藏菌種化學(xué)成分天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分不明 確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基

培養(yǎng)基成分明確(用化學(xué)成分己知的化學(xué)物質(zhì)配成)分類(lèi)、鑒定2．培養(yǎng)基的種類(lèi)劃分培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途物理液體培養(yǎng)基不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)半固體60劃分標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)、分離出特定微生物(如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基上加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度食鹽)鑒別培養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類(lèi)的微生物，如可用伊紅—美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸桿菌(若有，菌落呈深紫色，并帶有金屬光澤)續(xù)表劃分培養(yǎng)基種類(lèi)特點(diǎn)用途用途選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某培養(yǎng)、分離61①加入培養(yǎng)基中的凝固劑(如瓊脂)，一般不能被微生物利用，只起到凝固作用。

②選擇培養(yǎng)基一般只生長(zhǎng)具有特定目的的微生物，鑒別培養(yǎng)基可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。①加入培養(yǎng)基中的凝固劑(如瓊脂)，一般不能被微生物利用，只起62項(xiàng)目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽孢和孢子)殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子適用范圍實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等常用方法煮沸消毒法(如100℃，5～6min)，巴氏消毒法(80℃，15min)，酒精、氯氣、石炭酸等化學(xué)藥劑消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌3．消毒與滅菌(1)消毒與滅菌的比較項(xiàng)目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果63(2)高溫加熱滅菌原理：使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，從而達(dá)到殺滅細(xì)菌的目的。

(3)化學(xué)藥劑消毒原理：使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，但是化學(xué)物質(zhì)很難透過(guò)孢子或芽孢的堅(jiān)硬外層進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，因此化學(xué)方法難以消滅孢子和芽孢。

(4)體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇?xì)⒕Ч畹脑颍簼舛冗^(guò)低，殺菌力弱；濃度過(guò)高，使菌體表面蛋白質(zhì)凝固形成一層保護(hù)膜，乙醇分子不能滲入其內(nèi)，影響殺菌效果。對(duì)剛洗刷后未干的器皿，可選擇75%的酒精進(jìn)行消毒。(2)高溫加熱滅菌原理：使細(xì)菌體內(nèi)蛋白質(zhì)變性，從而達(dá)到殺滅細(xì)644.微生物培養(yǎng)中的注意事項(xiàng)(1)倒平板①培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃左右才能倒平板。②整個(gè)操作過(guò)程需在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。③平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，造成污染。(2)平板劃線(xiàn)操作

①第一次劃線(xiàn)及每次劃線(xiàn)之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線(xiàn)操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的見(jiàn)下表：4.微生物培養(yǎng)中的注意事項(xiàng)①培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50℃65第一次灼燒每次劃線(xiàn)之前灼燒劃線(xiàn)結(jié)束目的避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后殘留在接種環(huán)上的菌種，使每次劃線(xiàn)的菌種均來(lái)自上次劃線(xiàn)末端殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者②灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。③劃線(xiàn)時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。第一次灼燒每次劃線(xiàn)之前灼燒劃線(xiàn)結(jié)束目的避免接種環(huán)上殺死上次劃66(3)稀釋涂布平板①稀釋操作：每支試管及其中9mL水、移液管均需滅菌；操作時(shí)，試管口和移液管應(yīng)在離火焰1～2cm處。②涂布平板

a.涂布器用70%酒精消毒，取出時(shí)多余酒精在燒杯中滴盡，沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃后冷卻。 b.不要將過(guò)熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。(3)稀釋涂布平板①稀釋操作：每支試管及其中9mL水、67【典例2】稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()

A.操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋 B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面 C.不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 D.操作過(guò)程中對(duì)培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理

[解題思路]只有適宜濃度的菌液才可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落，如果濃度太高，則出現(xiàn)菌落重疊的現(xiàn)象。

[答案]C【典例2】稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。68?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練2．分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是()A.經(jīng)選擇培養(yǎng)后將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上

B.富集培養(yǎng)這一步可省略，但培養(yǎng)的纖維素分解菌少C.經(jīng)稀釋培養(yǎng)后，用剛果紅染色A

D.對(duì)照組可用同樣量的培養(yǎng)液涂布到不含纖維素的培養(yǎng)基上

解析：經(jīng)選擇培養(yǎng)后，再經(jīng)稀釋?zhuān)拍軐悠吠坎嫉借b別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上；設(shè)置對(duì)照能證明經(jīng)富集培養(yǎng)的確得到了欲分離的微生物。?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練2．分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)過(guò)程中操作有誤的是()69分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離原理提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(如營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制其他微生物的生長(zhǎng)，常用選擇培養(yǎng)基篩選過(guò)程土壤取樣→樣品稀釋→培養(yǎng)與觀(guān)察土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布于含剛果紅(CR)的鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落→發(fā)酵培養(yǎng)考點(diǎn)微生物的分離與計(jì)數(shù)

1．土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與分解纖維素的微生物的分離的比較分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離原理提供有利于目70分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離鑒定酚紅指示劑(變紅)剛果紅(產(chǎn)生透明圈)培養(yǎng) 基固體、尿素為唯一氮源選擇培養(yǎng)基：液體、纖維素為唯一碳源鑒別培養(yǎng)基：固體2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法(1)稀釋涂布平板法

①原理：當(dāng)樣品的稀釋濃度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌。通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。續(xù)表分解尿素的細(xì)菌的分離分解纖維素的微生物的分離鑒定酚紅指示劑(71②操作a．設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b．為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

③計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)＝(C/V)×M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。(2)顯微鏡直接計(jì)數(shù)法①原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。②方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。③缺點(diǎn)：不能區(qū)分死菌與活菌。②操作a．設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說(shuō)服力與準(zhǔn)確性。b．為了保證72試劑用量試劑用量牛肉膏5g瓊脂20g蛋白胨10g水1000mLNaCl5g————【典例3】(2011

年長(zhǎng)沙模擬)下表是用于從土壤中分離純化土壤細(xì)菌的培養(yǎng)基的配方。下列分析不正確的是()

A.上述培養(yǎng)基配方中能充當(dāng)碳源的成分是牛肉膏和蛋白胨 B．分離純化微生物最常使用的接種方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法試劑用量試劑用量牛肉膏5g瓊脂20g蛋白胨10g水100073C．加CR的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，只以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基D．使用纖維素酶處理比化學(xué)方法更高效率、反應(yīng)條件溫和、不污染環(huán)境

[解題思路]牛肉膏和蛋白胨能提供碳源和氮源；加CR的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，只以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。[答案]CC．加CR的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，只以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)74?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練3．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落是()CA.分解尿素的細(xì)菌C.分解纖維素的細(xì)菌B．硝化細(xì)菌D．乳酸菌

解析：分解纖維素的細(xì)菌能將纖維素分解，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。?考點(diǎn)對(duì)應(yīng)練3．在加入剛果紅的培養(yǎng)基中出現(xiàn)透明圈的菌落