高中生物2020屆高考生物一輪復(fù)習(xí)專題24生物技術(shù)實踐課件201908151385

第十單元生物技術(shù)實踐專題24生物技術(shù)實踐生物

(天津市選考專用)A組自主命題·天津卷題組(2016天津理綜,10,12分)天津獨流老醋歷史悠久、獨具風(fēng)味,其生產(chǎn)工藝流程如下圖。淀粉類原料

成熟酒醅

成熟醋醅

(1)在糖化階段添加酶制劑需要控制反應(yīng)溫度,這是因為酶

。(2)在酒精發(fā)酵階段,需添加酵母菌。在操作過程中,發(fā)酵罐先通氣,后密閉。通氣能提高

的數(shù)量,有利于密閉時獲得更多的酒精產(chǎn)物。五年高考(3)在醋酸發(fā)酵階段,獨流老醋采用獨特的分層固體發(fā)酵法,發(fā)酵30天。工藝如下。

①發(fā)酵過程中,定期取樣測定醋酸桿菌密度變化,趨勢如圖。據(jù)圖分析,與顛倒前相比,B層醋酸

桿菌在顛倒后密度變化的特點是

,由此推測,影響醋酸桿菌密度

變化的主要環(huán)境因素是

。

②乳酸含量高是獨流老醋風(fēng)味獨特的重要成因。發(fā)酵過程中,發(fā)酵缸中

層的醋醅有利于乳酸菌繁殖,積累乳酸。③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯減少,主要原因是發(fā)酵后期營養(yǎng)物質(zhì)消耗等環(huán)境因素的改變,

加劇了不同種類乳酸菌的

,淘汰了部分乳酸菌種類。答案(1)在最適溫度條件下催化能力最強(2)酵母菌(3)①先快速增長后趨于穩(wěn)定氧氣、營養(yǎng)物質(zhì)、pH②顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻

動,或下)③競爭解析(1)因酶在最適溫度下的催化能力最強,故發(fā)酵過程中需控制好反應(yīng)溫度。(2)酵母菌是

兼性厭氧型微生物,在有氧條件下分解有機物釋放能量多,繁殖快。(3)曲線圖顯示,與翻動前

相比,B層在翻動后醋酸桿菌密度先快速增加而后趨于穩(wěn)定,對比翻動前后B層醋酸桿菌所處

環(huán)境條件知,影響醋酸桿菌密度變化的主要環(huán)境因素有氧氣濃度、pH及營養(yǎng)物質(zhì)含量等。乳

酸菌是厭氧型微生物,處于發(fā)酵缸下層的醋醅有利于乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸。隨著發(fā)酵時間的

推移,環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)減少,代謝廢物增多,微生物生存條件惡劣,不同種乳酸菌間的競爭加劇,

部分菌種因不適應(yīng)環(huán)境而被淘汰。審題方法

解答本題的關(guān)鍵是理解獨流老醋的分層固體發(fā)酵的原理為有氧與無氧環(huán)境的

更替。B組統(tǒng)一命題、省(區(qū)、市)卷題組考點1微生物的培養(yǎng)、分離與數(shù)量測定1.(2019江蘇單科,12,2分)下列關(guān)于微生物實驗操作的敘述,錯誤的是

()A.培養(yǎng)微生物的試劑和器具都要進行高壓蒸汽滅菌B.接種前后,接種環(huán)都要在酒精燈火焰上進行灼燒C.接種后的培養(yǎng)皿要倒置,以防培養(yǎng)污染D.菌種分離和菌落計數(shù)都可以使用固體培養(yǎng)基答案

A本題借助微生物培養(yǎng)實驗,考查考生對微生物培養(yǎng)與分離過程中的基礎(chǔ)知識及相

關(guān)操作技術(shù)的分析處理能力,體現(xiàn)了對科學(xué)思維素養(yǎng)中的分析與判斷要素的考查。接種環(huán)、涂布器需進行灼燒滅菌,A錯誤;接種操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上

可能存在的微生物污染培養(yǎng)物,每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上

殘留的菌種,使下一次劃線時,接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)

的增加,使每次劃線時的菌種數(shù)目逐漸減少,以便得到單菌落,劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),避免細

菌污染環(huán)境和感染操作者,B正確;接種后將培養(yǎng)皿倒置,可防止冷凝水污染培養(yǎng)基,C正確;固體

培養(yǎng)基既可用于分離菌種,也可用于菌落計數(shù),D正確。2.(2016江蘇單科,25,3分)漆酶屬于木質(zhì)素降解酶類,在環(huán)境修復(fù)、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)等領(lǐng)域有著廣泛用

途。如圖是分離、純化和保存漆酶菌株的過程,相關(guān)敘述正確的是(多選)

()

A.生活污水中含有大量微生物,是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品B.篩選培養(yǎng)基中需要加入漆酶的底物,通過菌落特征挑出產(chǎn)漆酶的菌落C.在涂布平板上長出的菌落,再通過劃線進一步純化D.斜面培養(yǎng)基中含有大量營養(yǎng)物,可在常溫下長期保存菌株答案

BC產(chǎn)漆酶的微生物主要生活在木質(zhì)素含量較高的環(huán)境中,生活污水中含有大量的微

生物,不是分離產(chǎn)漆酶菌株的首選樣品;篩選產(chǎn)漆酶微生物的培養(yǎng)基中應(yīng)加入木質(zhì)素等漆酶降

解的底物,因不同菌種的菌落特征不同,故可通過菌落特征挑選產(chǎn)漆酶的菌落;圖中顯示,通過

涂布平板法進行初步篩選,再通過平板劃線法進一步純化;微生物長期保存應(yīng)用甘油管藏法,保

存溫度為-20℃。知識歸納微生物的純化方法常采用選擇培養(yǎng)基,用稀釋涂布平板法或平板劃線法純化微生物。用稀釋涂布平板法接種的

微生物經(jīng)培養(yǎng)后,其菌落在培養(yǎng)基上接近均勻分布,且該接種法可以對微生物活菌計數(shù)。3.(2015江蘇單科,19,2分)做“微生物的分離與培養(yǎng)”實驗時,下列敘述正確的是

()A.高壓滅菌加熱結(jié)束時,打開放氣閥使壓力表指針回到零后,開啟鍋蓋B.倒平板時,應(yīng)將打開的皿蓋放到一邊,以免培養(yǎng)基濺到皿蓋上C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)火焰滅菌后應(yīng)趁熱快速挑取菌落D.用記號筆標(biāo)記培養(yǎng)皿中菌落時,應(yīng)標(biāo)記在皿底上答案

D本題考查微生物的分離與培養(yǎng)的相關(guān)知識。高壓滅菌加熱結(jié)束時,需先切斷電源,

讓滅菌鍋內(nèi)溫度降至100℃以下,壓力表的指針回到零時,再打開鍋蓋,A錯誤;倒平板時,應(yīng)將培

養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,而不能將培養(yǎng)皿蓋完全打開,以防污染,B錯誤;接種環(huán)經(jīng)火焰

滅菌后需待冷卻后挑取菌落,C錯誤。易錯分析錯選的學(xué)生對高壓滅菌鍋使用方法不太了解。高壓滅菌通常采用的溫度為121℃,滅菌剛結(jié)束時滅菌鍋中的液體溫度都超過100℃,必須緩慢降溫、降壓。如未能充分冷卻,鍋內(nèi)尚有剩余壓力,打開放氣閥會使鍋內(nèi)壓力驟減,液體就會發(fā)生爆沸,沖出容器。4.(2019課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)已知一種有機物X(僅含有C、H兩種元素)不易降解,會造成環(huán)境

污染。某小組用三種培養(yǎng)基篩選土壤中能高效降解X的細菌(目標(biāo)菌)。Ⅰ號培養(yǎng)基:在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中加入X(5g/L)。Ⅱ號培養(yǎng)基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機鹽(適量),X(15g/L)。Ⅲ號培養(yǎng)基:氯化鈉(5g/L),硝酸銨(3g/L),其他無機鹽(適量),X(45g/L)。回答下列問題。(1)在Ⅰ號培養(yǎng)基中,為微生物提供氮源的是

。Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中為微生

物提供碳源的有機物是

。(2)若將土壤懸浮液接種在Ⅱ號液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)一段時間后,不能降解X的細菌比例會

,其原因是

。(3)Ⅱ號培養(yǎng)基加入瓊脂后可以制成固體培養(yǎng)基,若要以該固體培養(yǎng)基培養(yǎng)目標(biāo)菌并對菌落進

行計數(shù),接種時,應(yīng)采用的方法是

。(4)假設(shè)從Ⅲ號培養(yǎng)基中得到了能高效降解X的細菌,且該菌能將X代謝為丙酮酸,則在有氧條件下,丙酮酸可為該菌的生長提供

和

。答案(1)牛肉膏、蛋白胨X(2)下降不能降解X的細菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的細菌能夠增殖(3)稀釋涂布平板法(4)能量合成其他物質(zhì)的原料解析本題借助微生物培養(yǎng)與篩選的相關(guān)知識,考查對相關(guān)操作技能的掌握以及將實驗方法

和技能進行靈活運用的能力;試題通過對高效降解X細菌的篩選,體現(xiàn)了科學(xué)探究中的結(jié)果分

析要素。(1)在Ⅰ號培養(yǎng)基中,牛肉膏、蛋白胨可以為微生物提供氮源,Ⅱ、Ⅲ號培養(yǎng)基中為微生物提供

碳源的是有機物X。(2)Ⅱ號培養(yǎng)基中,碳源只有X,不能降解X的細菌會因缺乏碳源而不能增

殖,使該類細菌比例降低。(3)利用固體培養(yǎng)基對菌落進行計數(shù)時,需采用稀釋涂布平板法進行

接種。(4)在有氧條件下,丙酮酸可被分解為CO2和H2O且釋放能量,為該菌的生長提供能量和

合成其他物質(zhì)的原料。知識歸納總結(jié)微生物培養(yǎng)的?？贾R(1)培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成:各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽,按照物理性質(zhì)可分為

液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。(2)常用滅菌方法:灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。(3)培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶常采用的滅菌和消毒方法依

次是高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌、灼燒滅菌、化學(xué)消毒、紫外線滅菌、巴氏消毒法。(4)選擇培養(yǎng)基的原理:不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同。有的適于酸

性環(huán)境,有的適于堿性環(huán)境。例如從土壤中分離放線菌時,可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴,抑

制細菌和真菌的生長;如培養(yǎng)酵母菌和霉菌,可在培養(yǎng)基中加入青霉素;培養(yǎng)金黃色葡萄球菌,

可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽。5.(2019課標(biāo)全國Ⅱ,37,15分)物質(zhì)W是一種含氮有機物,會污染土壤。W在培養(yǎng)基中達到一定

量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組欲從土壤中篩選出能降解W的細菌(目標(biāo)菌)?；卮鹣?/p>

列問題。(1)要從土壤中分離目標(biāo)菌,所用選擇培養(yǎng)基中的氮源應(yīng)該是

。(2)在從土壤中分離目標(biāo)菌的過程中,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上甲、乙兩種細菌都能生長并形成菌落(如圖

所示)。如果要得到目標(biāo)菌,應(yīng)該選擇

菌落進一步純化,選擇的依據(jù)是

。

(3)土壤中的某些微生物可以利用空氣中的氮氣作為氮源。若要設(shè)計實驗進一步確定甲、乙

菌能否利用空氣中的氮氣作為氮源,請簡要寫出實驗思路、預(yù)期結(jié)果和結(jié)論,即

。(4)該小組將人工合成的一段DNA轉(zhuǎn)入大腸桿菌,使大腸桿菌產(chǎn)生能降解W的酶(酶E)。為了比

較酶E與天然酶降解W能力的差異,該小組擬進行如下實驗,請完善相關(guān)內(nèi)容。①在含有一定濃度W的固體培養(yǎng)基上,A處滴加含有酶E的緩沖液,B處滴加含有相同濃度天然

酶的緩沖液,C處滴加

,三處滴加量相同。②一段時間后,測量透明圈的直徑。若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明

;若

A、B處形成的透明圈直徑大小相近,說明

。答案(1)W(2)乙乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,說明乙菌能降解W(3)將甲、乙菌分別接種在

無氮源培養(yǎng)基上,若細菌能生長,則說明該細菌能利用空氣中的氮氣作為氮源(4)①緩沖液

②緩沖液不能降解W酶E與天然酶降解W的能力相近解析本題借助微生物的篩選及酶活力對比實驗的相關(guān)知識,考查考生對實驗?zāi)康摹⒃淼?/p>

理解和對實驗現(xiàn)象、結(jié)果的分析、解釋能力。通過對不同種類微生物的篩選、純化及酶活

力實驗分析,體現(xiàn)了對科學(xué)探究素養(yǎng)中方案探討、結(jié)果分析要素的考查。(1)要從土壤中分離能降解W的細菌,培養(yǎng)基中應(yīng)以W為唯一氮源。(2)乙菌落周圍出現(xiàn)透明圈,

說明乙菌能降解W。(3)要判斷甲、乙能否利用空氣中的氮氣作為氮源,應(yīng)將甲、乙菌分別接

種在無氮源的培養(yǎng)基上,觀察細菌能否生長,若細菌能生長,則說明該細菌能利用空氣中的氮氣

作為氮源,否則不能。(4)①實驗設(shè)計應(yīng)遵循單一變量原則,C處應(yīng)滴加等量不含酶的緩沖液。

②C處只滴加等量緩沖液,若C處沒有出現(xiàn)透明圈,說明緩沖液不能降解W,若A、B處形成的透

明圈直徑大小相近,說明酶E與天然酶降解W的能力相近。6.(2019課標(biāo)全國Ⅲ,37,15分)回答下列與細菌培養(yǎng)相關(guān)的問題。(1)在細菌培養(yǎng)時,培養(yǎng)基中能同時提供碳源、氮源的成分是

(填“蛋白胨”“葡萄

糖”或“NaNO3”)。通常,制備培養(yǎng)基時要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH,其原

因是

。硝化細菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上

(填“能夠”或“不能”)生長,原因是

。(2)用平板培養(yǎng)細菌時一般需要將平板

(填“倒置”或“正置”)。(3)單個細菌在平板上會形成菌落,研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來初

步區(qū)分不同種的微生物,原因是

。(4)有些使用后的培養(yǎng)基在丟棄前需要經(jīng)過

處理,這種處理可以殺死丟棄物中所有的

微生物。答案(1)蛋白胨不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同能夠硝化細菌可以利用空氣中

的CO2作為碳源(2)倒置(3)在一定的培養(yǎng)條件下,不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征(4)滅菌解析本題借助細菌的培養(yǎng)方法與操作的相關(guān)知識,考查考生理解實驗原理、方法與操作步

驟,并對一些生物學(xué)問題進行初步探究的能力;試題通過實驗分析和方案探究的形式體現(xiàn)了對

科學(xué)探究素養(yǎng)的考查。(1)細菌培養(yǎng)時需要碳源、氮源、水和無機鹽等,蛋白胨能同時提供碳源、氮源,葡萄糖提供碳

源,NaNO3不能提供碳源,可提供無機氮源。不同細菌生長繁殖所需的最適pH不同,故制備培

養(yǎng)基時需要根據(jù)所培養(yǎng)細菌的不同來調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH。硝化細菌是自養(yǎng)型細菌,可以利用空

氣中的CO2作為碳源,故硝化細菌可在沒有碳源的培養(yǎng)基上生長。(2)為防止培養(yǎng)皿蓋的冷凝

水落入培養(yǎng)基造成污染,用平板培養(yǎng)細菌時一般需將平板倒置。(3)在一定培養(yǎng)條件下,不同種

微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征,如特定的形狀、大小、顏色、隆起程度等,所以依據(jù)菌落

的特征,可以初步區(qū)分不同種的微生物。(4)為防止污染環(huán)境,使用后的培養(yǎng)基丟棄前要經(jīng)過滅

菌處理,以便殺死丟棄物中所有的微生物。7.(2018課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。

在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}:(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制

的生長,加入了鏈霉素

的培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基。(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還

有

(答出兩點即可)。氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有

(答出兩點即可)。(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色

劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是

,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的

原理是

。(4)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下

得到以下結(jié)果:甲同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133;乙同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是

。答案(1)細菌選擇(2)碳源、無機鹽蛋白質(zhì)、核酸(3)碘液淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈(4)乙同學(xué)的結(jié)

果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差解析本題主要考查微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用。(1)鏈霉素可抑制細菌生長,從功能上看,添加鏈霉

素的培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)微生物正常生長需要的營養(yǎng)物質(zhì)有無機鹽、氮源、碳源

等。氮源進入細胞后,可以用于合成含氮大分子物質(zhì),如核酸、蛋白質(zhì)等。(3)淀粉遇碘液顯藍

色,若淀粉被水解,則產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解,形成以菌落為中心的透明圈。(4)用

稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)目時,為保證統(tǒng)計結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板

進行計數(shù),取結(jié)果差別不大組別的平均值,進而得出計數(shù)結(jié)果。而乙同學(xué)的結(jié)果中,1個平板的

計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,即乙同學(xué)的結(jié)果可信度低。知識歸納微生物的計數(shù)方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法:利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板,在顯微鏡下計數(shù)一定容積的樣品

中微生物的數(shù)量。缺點:因不能區(qū)分死菌與活菌而使計數(shù)結(jié)果偏大。(2)活菌計數(shù)法:利用稀釋涂布平板法接種,通過統(tǒng)計菌落數(shù)目計算樣品中的活菌數(shù)。缺點:當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,因此統(tǒng)計結(jié)果偏小。8.(2018課標(biāo)全國Ⅲ,37,15分)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用

(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊

脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應(yīng)采用

滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培

養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是

。(2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進

(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)

生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進

(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)

生”或“乳酸產(chǎn)生”)。(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原

因是

。答案(1)麥芽汁瓊脂高壓蒸汽由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體(2)菌體

快速增殖乙醇產(chǎn)生(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟解析(1)常用含葡萄糖較多的麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基分離培養(yǎng)酵母菌。培養(yǎng)基常采用高壓蒸汽

滅菌法滅菌。菌落是由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體。(2)有氧氣存在時,酵母

菌有氧呼吸產(chǎn)生的大量能量可用于快速增殖;無氧氣存在時,酵母菌進行無氧呼吸產(chǎn)生乙醇和

CO2。(3)酵母菌進行細胞呼吸可產(chǎn)生CO2,故用酵母菌制作的面包會變得松軟。易錯警示

不同培養(yǎng)基的用途牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)細菌,MS培養(yǎng)基常用于植物組織培養(yǎng),麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基常

用于培養(yǎng)酵母菌。9.(2017課標(biāo)全國Ⅰ,37,15分)某些土壤細菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用?；?/p>

答下列問題:(1)有些細菌能分解尿素,有些細菌則不能,原因是前者能產(chǎn)生

。能分解尿素的細菌不能

以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是

。但可用葡萄糖作為碳源,進入細菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是

(答出兩點即可)。(2)為了篩選可分解尿素的細菌,在配制培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇

(填“尿素”“NH4NO3”或

“尿素+NH4NO3”)作為氮源,不選擇其他兩組的原因是

。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有

(答出兩點即可)。答案(1)脲酶分解尿素的細菌是異養(yǎng)生物,不能利用CO2來合成有機物為細胞生命活動

提供能量,為其他有機物的合成提供原料(2)尿素其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4

NO3,不能起到篩選作用(3)為細菌生長提供無機營養(yǎng),作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH穩(wěn)定解析(1)能分解尿素的細菌體內(nèi)應(yīng)含有脲酶;能分解尿素的細菌是異養(yǎng)型生物,不能利用CO2

來合成有機物,可用葡萄糖等有機物作為碳源。進入細菌體內(nèi)的葡萄糖既能為細胞生命活動

提供能量,又可為其他有機物的合成提供原料。(2)篩選可分解尿素的細菌,應(yīng)選擇以尿素為唯

一氮源的培養(yǎng)基,而能分解尿素的細菌和不能分解尿素的細菌都能利用NH4NO3,其他兩組不

能起到篩選作用。(3)用來篩選分解尿素細菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,這兩種物質(zhì)既

可為細菌生長提供無機營養(yǎng),又可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH相對穩(wěn)定。10.(2017江蘇單科,31,7分)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明

同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)如圖所示操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回

答下列問題:

(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有

。(2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增加而逐漸

,以達到富集酚降解

菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應(yīng)進一步

,以便于菌落計數(shù)與分離。制

備平板培養(yǎng)基時除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加

。(3)如圖為連續(xù)劃線法示意圖,在圖中

(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。

(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯

度并進行顯色反應(yīng),下表中1~5號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為

。管號123456苯酚濃度(mg/L)

1如果廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋

(填序

號:①5②10③20)倍后,再進行比色。答案(1)蛋白胨、苯酚(2)增加稀釋涂布凝固劑(3)③(4)0、0.2、0.4、0.6、0.8

③解析本題考查微生物分離的相關(guān)知識。(1)酚降解菌培養(yǎng)基中的蛋白胨和苯酚為酚降解菌

生長提供碳源。(2)轉(zhuǎn)接的目的之一是富集降解苯酚能力強的酚降解菌,故隨轉(zhuǎn)接次數(shù)增多,培

養(yǎng)基中的苯酚含量應(yīng)逐漸增加。若平板中菌落過于密集,則需進一步稀釋,降低菌體密度后再

涂布培養(yǎng),以便于菌落分離與計數(shù)。制備平板培養(yǎng)基時,需添加瓊脂等凝固劑。(3)連續(xù)劃線

時,在劃線的末端菌體密度最低,即在劃線的末端最易獲得單菌落。(4)1號比色管應(yīng)為空白對

照組,由6號比色管中苯酚濃度知,1~5號比色管苯酚濃度應(yīng)為0、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L。廢水為50mg/L苯酚溶液,降解后殘留的苯酚濃度約為50×21%=10.5(mg/L),則需

對殘留液進行20倍稀釋后[10.5÷20=0.525(mg/L)],才可以進行比色。11.(2016四川理綜,10,12分)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程,圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的

mRNA部分序列。

圖甲

圖乙(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以

為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加

作指示劑,產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后,其菌落周圍的指示劑將變成

色。(2)在5個細菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1mL,培養(yǎng)一段時間后,平

板上長出的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程采取的接種方法是

,每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為

×108個;與

血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比,此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)較

。(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活,突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增

加了70個核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)

錄的mRNA中,終止密碼為

,突變基因表達的蛋白含

個氨基酸。答案(1)尿素酚紅紅(2)稀釋涂布平板法1.75少(3)UGA115解析(1)脲酶由分解尿素的細菌產(chǎn)生,故需用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選該類微生物。

分解尿素的細菌合成的脲酶可以將尿素分解成氨,故培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑后,菌落周圍將

出現(xiàn)紅色。(2)稀釋涂布平板法常用來統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù),在計數(shù)時一般選擇菌落數(shù)在30~300的平板進行計數(shù),并取平均值。每克樣品中的菌株數(shù)=(C/V)×M。因培養(yǎng)基上兩個或多個細

胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,故統(tǒng)計結(jié)果往往較實際數(shù)目少;而用血細胞計數(shù)

板計數(shù)時,死亡的、活的菌體都計數(shù)在內(nèi)。(3)乙圖顯示,mRNA在箭頭以前有273個核苷酸(為

91個密碼子),箭頭處增加的70個核苷酸與后續(xù)的AG剛好組成24個密碼子,后面的UGA為終止

密碼。突變基因表達的蛋白質(zhì)含91+24=115個氨基酸。知識歸納微生物菌體計數(shù)方法通常有稀釋涂布平板法、顯微鏡直接計數(shù)法、濾膜法等。

稀釋涂布平板法為活菌計數(shù)法,顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計的是死菌、活菌的總數(shù)。12.(2016課標(biāo)全國Ⅰ,39,15分)空氣中的微生物在重力等作用下,可以一定程度地沉降。某研究

小組欲用平板收集教室空氣中的微生物,以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。

實驗步驟如下:①配制培養(yǎng)基(成分:牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O);②制作無菌平板;③設(shè)置空白對照組和若干實驗組,進行相關(guān)操作;④將各組平板置于37℃恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}:(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于

。若要完成步驟②,該培養(yǎng)基中的成分

X通常是

。(2)步驟③中,實驗組的操作是

。(3)若在某次調(diào)查中,某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為36個/平板,而空白對照組的一個平板上

出現(xiàn)了6個菌落,這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了

現(xiàn)象。若將30(即36-6)個/平板作

為本組菌落數(shù)的平均值,該做法

(填“正確”或“不正確”)。答案(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上,開蓋暴露一段時間(3)污染不正確解析(1)培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨可為培養(yǎng)基中的微生物提供氮源;制備固體培養(yǎng)基需加

入瓊脂。(2)該實驗的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況,所以需在教室不

同高度的位置分別用平板收集微生物即開蓋暴露一段時間。(3)該實驗中空白對照組不應(yīng)出

現(xiàn)菌落,若空白對照組出現(xiàn)了菌落,則說明此次調(diào)查中出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,實驗組的污染情況不能

確定,故不能用實驗組與空白對照組菌落數(shù)的差值作為實驗結(jié)果,而應(yīng)重新進行實驗。13.(2015課標(biāo)全國Ⅰ,39,15分)已知微生物A可以產(chǎn)生油脂,微生物B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶

和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題:(1)顯微觀察時,微生物A菌體中的油脂通常可用

染色。微生物A產(chǎn)生的油脂不易揮

發(fā),可選用

(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B的單菌落,可從含有油料作物種子腐爛物的

土壤中取樣,并應(yīng)選用以

為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物B的菌體數(shù),可在顯微鏡下用

直接計數(shù);若要測定

其活菌數(shù)量,可選用

法進行計數(shù)。(4)為了確定微生物B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度,某同學(xué)測得相同時間內(nèi),在35℃、40℃、45℃溫度下降解10g油脂所需酶量依次為4mg、1mg、6mg,則上述三個溫度中,

℃條

件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度,應(yīng)圍繞

℃設(shè)計后續(xù)實驗。答案

(1)蘇丹Ⅲ(或蘇丹Ⅳ)萃取法(每空2分,共4分)(2)油脂(3分)(3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板(每空2分,共4分)(4)4540(每空2分,共4分)解析

本題主要考查了植物油脂的染色和提取方法、選擇培養(yǎng)基的配制、微生物的計數(shù)以

及確定酶的最適溫度的實驗設(shè)計等。(1)脂肪可用蘇丹Ⅲ染液(或蘇丹Ⅳ染液)進行染色。微

生物A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā),不能用水蒸氣蒸餾法提取,應(yīng)用萃取法加以提取。(2)能產(chǎn)生脂肪

酶的微生物B可存在于含有油料作物種子的腐爛物的土壤中,為了選擇培養(yǎng),固體培養(yǎng)基上應(yīng)

以油脂作為唯一碳源。(3)測定培養(yǎng)液中的微生物的菌體數(shù),可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直

接計數(shù);而要測定活菌數(shù),則可利用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。(4)酶量需要最多的溫度下,其

酶活力最小,即酶活力最小的溫度應(yīng)為45℃。三個溫度下酶活力最大的溫度是40℃,但40℃

不一定是該酶的最適溫度,故應(yīng)圍繞40℃設(shè)計后續(xù)實驗。14.(2015江蘇單科,31,8分)人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃,可用來發(fā)酵處理秸稈,提高秸

稈的營養(yǎng)價值。為了增強發(fā)酵效果,研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株,并對其降解纖

維素能力進行了研究。請回答下列問題:(1)在樣品稀釋和涂布平板步驟中,下列選項不需要的是

(填序號)。①酒精燈②培養(yǎng)皿③顯微鏡④無菌水(2)在涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是

。(3)向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,若試管口粘附有培養(yǎng)基,需要用酒精棉球擦凈的原因是

。(4)剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物,但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這

種反應(yīng)。研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上,篩到了幾株有透明降解圈的菌落(見圖)。圖中降

解圈大小與纖維素酶的

有關(guān)。圖中降解纖維素能力最強的菌株是

(填

圖中序號)。

(5)研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4,在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵,測得發(fā)酵

液中酶活性的結(jié)果見下圖,推測菌株

更適合用于人工瘤胃發(fā)酵,理由是

。答案(1)③(2)培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液,導(dǎo)致菌體堆積,影響分離效果(3)避免培

養(yǎng)基污染棉塞(4)量與活性①(5)J4發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸,J4菌株在較高溫度和酸性

環(huán)境下酶的活性更高解析本題考查微生物培養(yǎng)與分離的相關(guān)知識。(1)樣品稀釋需用無菌水,在培養(yǎng)基中涂布接

種時需在酒精燈的火焰旁進行。(2)涂布平板時,滴加到培養(yǎng)基表面的菌液一般為0.1mL,量過

大將導(dǎo)致菌體密度過大而影響分離效果。(3)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時,試管口粘有培養(yǎng)基易造

成雜菌滋生,故應(yīng)用酒精棉球擦凈。(4)纖維素酶活性越大,菌落周圍被分解的纖維素量也越

大,菌落周圍的透明圈也就越大。故圖中降解纖維素能力最強的菌株為①。(5)發(fā)酵過程中由

于呼吸作用產(chǎn)生較多的熱量和有機酸,故應(yīng)選擇較高溫度和酸性環(huán)境中活性較高J4酶。15.(2015山東理綜,35,12分)乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,具有重要應(yīng)用價值。

乳糖酶的制備及固定化步驟如下:產(chǎn)乳糖酶產(chǎn)乳糖酶乳糖酶的乳糖酶的微生物L(fēng)的篩選?微生物L(fēng)的培養(yǎng)?提取純化?固定化(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時,宜用

作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作

用是

。從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于

。(2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前,宜采用

方法對接種環(huán)進行滅菌。(3)純化后的乳糖酶可用電泳法檢測其分子量大小。在相同條件下,帶電荷相同的蛋白質(zhì)電泳

速度越快,說明其分子量越

。(4)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(共價鍵結(jié)合法)進行固定化,可通過檢測固定化乳糖酶的

確定其應(yīng)用價值。除化學(xué)結(jié)合法外,酶的固定化方法還包括

、

、離子吸附法及交聯(lián)法等。答案(1)乳糖凝固劑選擇培養(yǎng)基(2)灼燒(3)小(4)(酶)活性[或:(酶)活力]包埋法物理吸附法(注:兩空可顛倒)解析(1)產(chǎn)乳糖酶的微生物可以利用乳糖,故宜選用以乳糖作為唯一碳源的培養(yǎng)基篩選獲得

產(chǎn)乳糖酶的微生物,這類培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中常用瓊脂作為凝固劑。(2)接種環(huán)常

用灼燒滅菌法進行滅菌。(3)電泳法檢測蛋白質(zhì)分子量大小的原理是電荷相同的蛋白質(zhì),分子

量越小,其電泳速度越快。(4)酶的固定化方法有化學(xué)結(jié)合法、包埋法和物理吸附法等。固定

化酶的活性越高,其應(yīng)用價值越大,故可通過檢測固定化酶的活性確定其應(yīng)用價值。16.(2015浙江自選,17節(jié)選)某工廠為了生產(chǎn)耐高溫植酸酶飼料添加劑,開展了產(chǎn)該酶菌株的篩

選、酶的固定化及其特性分析研究,其流程如下圖所示:土樣中的菌種篩選

菌株鑒定

優(yōu)良菌株擴大培養(yǎng)

植酸酶提純

植酸酶固定化

植酸酶特性分析請回答:(1)土壤懸液首先經(jīng)80℃處理15分鐘,共目的是篩選出①

。(2)在無菌條件下,將經(jīng)過處理的土壤懸液進行②

,然后涂布于含有植酸鈉的固體培養(yǎng)

基上。培養(yǎng)后觀察到③

,其周圍出現(xiàn)透明水解圈,圈的直徑大小與④

強弱有關(guān)。(3)篩選獲得的菌株經(jīng)鑒定后,將優(yōu)良菌株進行液體擴大培養(yǎng)。培養(yǎng)時需要振蕩,其主要目的是

⑤

。液體培養(yǎng)基與固體培養(yǎng)基相比,不含有的成分是⑥

。答案(1)①耐高溫菌株(2)②稀釋③單菌落④植酸酶的活性(3)⑤供氧⑥瓊脂解析(1)用80℃高溫處理土壤懸液可以篩選出耐高溫菌株。(2)經(jīng)處理的土壤懸液利用稀釋

涂布平板法進行接種;培養(yǎng)后可觀察到有的單菌落周圍出現(xiàn)透明圈,這是耐高溫菌株產(chǎn)生的植

酸酶水解形成的,透明圈越大,說明植酸酶的活性越高。(3)將液體培養(yǎng)基振蕩可提高培養(yǎng)液中

氧的含量,固體培養(yǎng)基具有固體狀態(tài)是因為制備培養(yǎng)基時加入了瓊脂。考點2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)1.(2019江蘇單科,9,2分)下列關(guān)于傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)應(yīng)用的敘述,正確的是

()A.利用乳酸菌制作酸奶過程中,先通氣培養(yǎng),后密封發(fā)酵B.家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是純種發(fā)酵C.果醋制作過程中發(fā)酵液pH逐漸降低,果酒制作過程中情況相反D.毛霉主要通過產(chǎn)生脂肪酶、蛋白酶和纖維素酶參與腐乳發(fā)酵答案

B本題借助對傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用,考查對發(fā)酵技術(shù)的綜合應(yīng)用能力;通過對發(fā)酵技

術(shù)的應(yīng)用分析,體現(xiàn)了科學(xué)探究素養(yǎng)中的技術(shù)評價與結(jié)果分析要素。乳酸菌為嚴(yán)格厭氧型細菌,通氣會造成乳酸菌死亡,A錯誤;家庭釀制葡萄酒利用的主要是附著

在葡萄果皮上的野生酵母菌,果醋發(fā)酵需要的醋酸桿菌常從變酸酒的表面菌膜中獲取,腐乳的

制作主要利用空氣中的毛霉孢子,三者都不是純種發(fā)酵,B正確;果醋發(fā)酵中隨著醋酸的產(chǎn)生,

pH逐漸降低,果酒發(fā)酵中會產(chǎn)生較多的CO2,使發(fā)酵液pH降低,C錯誤;毛霉產(chǎn)生的酶有蛋白酶和

脂肪酶等,但毛霉不產(chǎn)生纖維素酶,D錯誤。易錯警示在傳統(tǒng)的葡萄酒制作中起主要作用的是附著在葡萄果皮上的野生型酵母菌。2.(2017江蘇單科,10,2分)下列關(guān)于“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是

()A.控制發(fā)酵溫度的主要目的是腐乳調(diào)味B.腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用C.毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉D.成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由細菌產(chǎn)生答案

B本題考查腐乳制作的相關(guān)知識?？刂瓢l(fā)酵溫度的主要目的是使毛霉等微生物正常

生長增殖,A錯誤;腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐和調(diào)味作用,B正確;毛霉等微生物可

分泌蛋白酶和脂肪酶,催化豆腐中的蛋白質(zhì)水解為小分子肽和氨基酸,催化脂肪水解為脂肪酸

和甘油,C錯誤;成品腐乳表面的粘性物質(zhì)主要由毛霉產(chǎn)生,D錯誤。3.(2017江蘇單科,25,3分)如圖是探究果酒與果醋發(fā)酵的裝置示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是

(多選)

()

A.改變通入氣體種類,可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響B(tài).果酒發(fā)酵中期通入氮氣,酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸C.果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密切相關(guān)D.氣體入口與氣體出口可以交換使用易錯提醒①果酒與果醋的制作利用的是微生物發(fā)酵,微生物需要一定的溫度才能正常生

長。②氣體入口可為培養(yǎng)液中微生物提供氣體環(huán)境,故應(yīng)將與氣體入口相連的導(dǎo)管插入發(fā)酵

瓶底部。答案

ABC本題主要考查果酒和果醋制作的相關(guān)知識。果酒和果醋發(fā)酵所利用的菌種分

別是酵母菌、醋酸菌,其中酵母菌屬于兼性厭氧菌,而醋酸菌為需氧菌,因此改變通入氣體種

類,可研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響,A正確;果酒發(fā)酵中期通入氮氣后,酵母菌可從有氧呼吸

轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸,B正確;醋酸菌的最適生長溫度為30~35℃,溫度過低會抑制酶活性,從而抑制

果醋的發(fā)酵周期,C正確;圖中的氣體入口與氣體出口不可以交換使用,因為與氣體入口相連的

導(dǎo)管需要插入發(fā)酵瓶的底部,D錯誤。4.(2016江蘇單科,7,2分)下列關(guān)于中學(xué)“腐乳的制作”實驗,敘述正確的是

()A.加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,利于毛霉生長B.加料酒主要是為了滅菌,避免腐敗變質(zhì)C.發(fā)酵過程中起主要作用的是乳酸桿菌D.實驗室制作的腐乳不宜直接食用答案

D加鹽主要是為了調(diào)節(jié)水分,同時也能抑制微生物的生長,A錯誤;加料酒可以抑制微

生物的生長,同時能使腐乳具有獨特的香味,并非滅菌,B錯誤;發(fā)酵過程中起主要作用的是毛

霉,C錯誤;實驗室制作的腐乳,未經(jīng)嚴(yán)格檢測,不宜直接食用,D正確。知識拓展毛霉、酵母菌、蘑菇等屬于真菌。5.(2015江蘇單科,17,2分)關(guān)于“腐乳的制作”實驗,下列敘述錯誤的是

()A.將腐乳坯堆積起來會導(dǎo)致堆內(nèi)溫度升高,影響毛霉生長B.腐乳坯若被細菌污染,則腐乳坯表面會出現(xiàn)黏性物C.勤向腐乳坯表面噴水,有利于毛霉菌絲的生長D.裝壇階段加入料酒,可有效防止雜菌污染答案

C本題考查腐乳制作的相關(guān)知識。毛霉生長需要適宜的溫度(范圍是15~18℃)和濕

度,將腐乳坯堆積起來時會因毛霉等的呼吸作用釋放能量而使堆內(nèi)溫度升高,影響了毛霉生長,

勤向腐乳坯表面噴水,會改變腐乳坯的濕度,又會導(dǎo)致雜菌污染,不利于毛霉菌絲的生長,故A正

確、C錯誤;腐乳坯若被細菌污染,細菌會在腐乳坯上進行代謝,產(chǎn)生黏性物,B正確;裝壇階段加

入料酒,不僅可以調(diào)味,還能有效防止雜菌污染,D正確。名師點睛解答本題的關(guān)鍵在于理解腐乳制作的過程:前期發(fā)酵和后期發(fā)酵,前期發(fā)酵是讓豆

腐長出毛霉,后期發(fā)酵包括加鹽腌制、加香辛料、密封、理解加鹽、加料酒、加香辛料的作

用。6.(2017課標(biāo)全國Ⅱ,37,15分)豆豉是大豆經(jīng)過發(fā)酵制成的一種食品。為了研究影響豆豉發(fā)酵

效果的因素,某小組將等量的甲、乙兩菌種分別接入等量的A、B兩桶煮熟大豆中并混勻,再

將兩者置于適宜條件下進行發(fā)酵,并在32h內(nèi)定期取樣觀測發(fā)酵效果。回答下列問題:(1)該實驗的自變量是

、

。(2)如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵容器內(nèi)上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌是

。(3)如果在實驗后,發(fā)現(xiàn)32h內(nèi)的發(fā)酵效果越來越好,且隨發(fā)酵時間呈直線上升關(guān)系,則無法確定

發(fā)酵的最佳時間;若要確定最佳發(fā)酵時間,還需要做的事情是

。(4)從大豆到豆豉,大豆中的成分會發(fā)生一定的變化,其中,蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

,脂肪

轉(zhuǎn)變?yōu)?/p>

。答案(1)菌種發(fā)酵時間(2)好氧菌(3)延長發(fā)酵時間,觀測發(fā)酵效果,最好的發(fā)酵效果所

對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間(4)氨基酸和肽脂肪酸和甘油解析本題考查傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識。(1)根據(jù)題中“甲、乙兩菌種”和“32h內(nèi)定期

取樣觀測發(fā)酵效果”可確定該實驗的自變量是菌種類型和發(fā)酵時間。(2)發(fā)酵容器底層缺氧,

上層氧氣相對充足,上層大豆的發(fā)酵效果比底層的好,說明該發(fā)酵菌屬于好氧菌。(3)由于32h

內(nèi)發(fā)酵效果隨發(fā)酵時間呈直線上升,所以若要確定最佳發(fā)酵時間,應(yīng)該繼續(xù)延長發(fā)酵時間,觀測

發(fā)酵效果,最好發(fā)酵效果所對應(yīng)的時間即為最佳發(fā)酵時間。(4)發(fā)酵過程中微生物會產(chǎn)生多種

蛋白酶和脂肪酶,蛋白酶可使蛋白質(zhì)分解為小分子的肽和氨基酸,脂肪酶可使脂肪分解為甘油

和脂肪酸。7.(2016課標(biāo)全國Ⅲ,39,15分)某同學(xué)用新鮮的泡菜濾液為實驗材料分離純化乳酸菌。分離純

化所用固體培養(yǎng)基中因含有碳酸鈣而不透明,乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣。

回答下列問題:(1)分離純化乳酸菌時,首先需要用

對泡菜濾液進行梯度稀釋,進行梯度稀釋的理由是

。(2)推測在分離純化所用的培養(yǎng)基中加入碳酸鈣的作用有

和

。分離純化時應(yīng)挑選出

的菌落作為候選菌。(3)乳酸菌在-20℃長期保存時,菌液中常需要加入一定量的

(填“蒸餾水”“甘油”

或“碳酸鈣”)。答案(1)無菌水(2分)泡菜濾液中菌的濃度高,直接培養(yǎng)很難分離得到單菌落(3分)(2)鑒別乳酸菌中和產(chǎn)生的乳酸(或酸)(每空3分,共6分)具有透明圈(2分)(3)甘油(2分)解析(1)分離純化乳酸菌時,由于泡菜濾液中菌的濃度高,因此需要用無菌水對泡菜濾液進行

梯度稀釋,其目的是將聚集在一起的乳酸菌分散成單個細胞,以便在培養(yǎng)基表面形成單菌落。

(2)乳酸菌代謝過程中可產(chǎn)生乳酸,若在培養(yǎng)基中加入碳酸鈣,則碳酸鈣既可以中和乳酸,又可

以在乳酸菌菌落的周圍出現(xiàn)明顯透明圈,據(jù)此可以用于乳酸菌的鑒別。(3)乳酸菌在-20℃長

期保存時,為了避免水結(jié)冰產(chǎn)生冰晶損傷細胞,在菌液中常需要加入一定量的甘油。8.(2016浙江自選,17,10分)某研究小組以紫葡萄為原料制作葡萄酒的基本流程和裝置示意圖

如下。

請回答:(1)制作葡萄漿前,對葡萄進行清洗和用

色的高錳酸鉀溶液浸泡。制作酵母懸液時,在

干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖,待酵母懸液中出現(xiàn)

即可。(2)裝瓶后開始的一段時間,發(fā)酵瓶中溶解氧的含量變化是

。發(fā)酵過程中,發(fā)酵瓶中酒

精的含量變化是

。(3)下列關(guān)于裝置中有水彎管作用的敘述,錯誤的是

。A.隔絕氣體出入B.使發(fā)酵瓶內(nèi)外的壓強基本平衡C.減少雜菌污染D.有利于發(fā)酵瓶內(nèi)形成缺氧環(huán)境(4)實驗中,判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是

。A.發(fā)酵瓶中pH開始下降B.發(fā)酵瓶中停止出現(xiàn)氣泡C.發(fā)酵瓶中酒精濃度達到30%D.發(fā)酵瓶中酵母菌數(shù)量急劇減少(5)欲利用葡萄酒制作果醋,發(fā)酵瓶中應(yīng)加入的菌種是

,該菌種在

條件下能

將乙醇氧化為醋酸。答案(1)紅(紫)氣泡(2)減少增加(3)A(4)B(5)醋化醋桿菌有氧解析(1)制作酵母菌懸液時,在干酵母中加入少量溫水和極少量蔗糖,若懸浮液中出現(xiàn)氣泡,

說明酵母菌已經(jīng)活化。(2)裝瓶后開始的一段時間,酵母菌進行需(有)氧呼吸,瓶內(nèi)的溶氧量減

少。隨酵母菌無氧發(fā)酵時間的延長,發(fā)酵瓶中酒精含量增加。(3)裝置中有水彎管可維持發(fā)酵

瓶內(nèi)的無氧環(huán)境,防止空氣中的雜菌污染發(fā)酵液,同時也可將發(fā)酵產(chǎn)生的氣體排到瓶外,維持瓶

內(nèi)外壓強基本平衡,故A錯誤。(4)酵母菌進行無氧發(fā)酵有CO2產(chǎn)生,故判斷發(fā)酵完畢的依據(jù)是

發(fā)酵瓶中不再有氣泡產(chǎn)生。(5)醋化醋桿菌(醋酸菌)在有氧條件下可以將乙醇轉(zhuǎn)化為乙醛,再

將乙醛轉(zhuǎn)化為醋酸。9.(2016課標(biāo)全國Ⅱ,39,15分)蘋果醋是以蘋果汁為原料經(jīng)發(fā)酵而成的?；卮鹣铝袉栴}:(1)酵母菌的呼吸代謝途徑如圖所示。圖中過程①和②是蘋果醋生產(chǎn)的第一階段,在酵母菌細

胞的

中進行,其產(chǎn)物乙醇與

試劑反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色,這一反應(yīng)可用于乙

醇的檢驗;過程③在酵母菌細胞的

中進行。與無氧條件相比,在有氧條件下,酵母菌的

增殖速度

。

(2)第二階段是在醋酸桿菌的作用下將第一階段產(chǎn)生的乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程,根據(jù)醋酸桿菌

的呼吸作用類型,該過程需要在

條件下才能完成。(3)在生產(chǎn)過程中,第一階段和第二階段的發(fā)酵溫度不同,第一階段的溫度

(填“低

于”或“高于”)第二階段的。(4)醋酸桿菌屬于

核生物,其細胞結(jié)構(gòu)中

(填“含有”或“不含有”)線粒

體。答案(1)細胞質(zhì)基質(zhì)重鉻酸鉀線粒體快(2)有氧(3)低于(4)原不含有解析(1)圖中過程①和②表示酵母菌無氧呼吸的第一、二階段,發(fā)生場所是細胞質(zhì)基質(zhì);乙醇

可在酸性條件下與重鉻酸鉀試劑發(fā)生顏色反應(yīng);過程③表示有氧呼吸的第二、三階段,發(fā)生在

線粒體中;與無氧呼吸相比,有氧呼吸過程釋放的能量多,所以在有氧條件下酵母菌的繁殖速度

較快。(2)醋酸桿菌是好氧菌,所以乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程需要在有氧條件下才能完成。(3)酵

母菌和醋酸桿菌的最適生長溫度分別是20℃和30~35℃。(4)醋酸桿菌屬于細菌,是原核生物,

原核細胞中不含有線粒體。10.(2015廣東理綜,29,16分)泡菜是我國的傳統(tǒng)食品之一,但制作過程中產(chǎn)生的亞硝酸鹽對人體

健康有潛在危害。某興趣小組準(zhǔn)備參加“科技創(chuàng)新大賽”,查閱資料得到圖。

(1)制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是

。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物有

。(2)據(jù)圖,與第3天相比,第8天后的泡菜更適于食用,因為后者

;

pH呈下降趨勢,原因是

。(3)該小組得到一株“優(yōu)選”乳酸菌(亞硝酸鹽還原酶活力比普通乳酸菌高5倍),擬參照資料的

實驗方案和食鹽濃度(4%~10%),探究與普通乳酸菌相比用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜過程中亞

硝酸鹽含量的高低,并確定其最適條件。請你設(shè)計一個實驗結(jié)果記錄表,并推測實驗結(jié)論。答案(16分)(1)創(chuàng)造無氧環(huán)境(1分)丙酮酸、[H]、ATP(3分)(2)亞硝酸鹽含量已接近最低水平(1分)乳酸積累(2分)(3)結(jié)果記錄表(6分)亞硝酸鹽含量(單位:mg/kg)食鹽濃度(%)乳酸菌發(fā)酵時間(d)

123456789104普通

優(yōu)選

7普通

優(yōu)選

10普通

優(yōu)選

注:其他合理答案酌情給分。推測實驗結(jié)論:①用“優(yōu)選”乳酸菌制作泡菜,亞硝酸鹽含量更低(1分)②最適條件是亞硝酸鹽含量最低時的食鹽濃度和發(fā)酵時間(2分)解析(1)由于乳酸菌是厭氧細菌,制作泡菜時,泡菜壇一般用水密封,目的是隔絕空氣,創(chuàng)造無

氧環(huán)境。乳酸菌發(fā)酵第一階段的產(chǎn)物是丙酮酸、[H]和ATP。(2)析圖可知,8天后的泡菜中亞

硝酸鹽含量低,更適于食用。制作泡菜過程中,由于乳酸的積累,pH呈下降趨勢。(3)該實驗的

目的是比較“優(yōu)選”乳酸菌和普通乳酸菌在制作泡菜過程中亞硝酸鹽含量的高低,并確定最

適條件,故表格的設(shè)計要體現(xiàn)不同時間不同食鹽濃度下兩種乳酸菌的亞硝酸鹽含量的差異。

實驗結(jié)論應(yīng)是優(yōu)選乳酸菌制作的泡菜中亞硝酸鹽含量更低,并確定亞硝酸鹽含量最低時的食

鹽濃度和發(fā)酵時間。C組教師專用題組1.(2014課標(biāo)全國Ⅱ,39,15分)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況,某研究小組測定了該河流水樣中的

細菌含量,并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}:(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中的細菌含量。在涂布接種前,隨機取若干滅菌后的

空白平板先行培養(yǎng)了一段時間,這樣做的目的是

;然后,將1mL水樣稀

釋100倍,在3個平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液;經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后,3個平板上的菌落數(shù)分

別為39、38和37。據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為

。(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時,接種環(huán)通過

滅菌,在第二次及

以后的劃線時,總是從上一次劃線的末端開始劃線。這樣做的目的是

。(3)示意圖A和B中,

表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。

(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻,一部分進行靜置培養(yǎng),另一部分進行振蕩

培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn):振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是:振蕩培養(yǎng)能

提高培養(yǎng)液中

的含量,同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸,提高

的利用率。答案(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.8×107(每空2分,共4分)(2)灼燒(2分)將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3分)(3)B(2分)(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)(每空2分,共4分)解析(1)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間,可依據(jù)是否產(chǎn)生菌落確定培養(yǎng)基的滅

菌效果是否理想。由樣品中菌株數(shù)計算公式:(C÷V)×M知:1mL水樣中菌株數(shù)為(38÷0.1)×100=

3.8×104,故每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×107。(2)利用接種環(huán)接種時,接種環(huán)需灼燒滅菌。利用

平板劃線法分離細菌時,在第二次及以后劃線時,總是從上一次劃線的末端開始,可以將聚集的

菌體逐步稀釋以便得到單個菌落。(3)稀釋涂布平板法是用涂布器將菌液均勻涂布在培養(yǎng)基

表面,故培養(yǎng)后產(chǎn)生的菌落應(yīng)隨機分布在培養(yǎng)基表面,即B表示的是用稀釋涂布平板法接種培

養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)液體培養(yǎng)基通過振蕩可提高溶氧量,同時使菌體與營養(yǎng)物質(zhì)充分接觸,提

高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率,從而提高細菌的生長速度。2.(2014江蘇單科,30,8分)為了獲得β-胡蘿卜素產(chǎn)品,某小組開展了產(chǎn)β-胡蘿卜素酵母的篩選與

色素提取實驗。請回答下列問題:(1)實驗用的培養(yǎng)皿常用的兩種滅菌方法是

;為了減少滅菌后器皿被污染,滅菌前應(yīng)該

。(2)為了篩選出酵母菌,培養(yǎng)基中添加了青霉素,其目的是

。(3)如圖是滅菌鍋及其局部剖面示意圖,圖中甲、乙、丙指示的依次是

。(填序

號)

①安全閥、放氣閥、壓力表②放氣閥、安全閥、壓力表③安全閥、放氣閥、溫度表④放氣閥、安全閥、溫度表(4)為了將分離到的菌株純化,挑取了菌落在3塊相同平板上劃線,結(jié)果其中一塊平板的各劃線

區(qū)均未見菌生長,最可能的原因是

。(5)為增加β-胡蘿卜素提取量,在研磨酵母細胞時,添加石英砂的目的是

;

研磨時

(填“需要”或“不需要”)添加CaCO3,理由是

。答案(1)干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)用牛皮紙(報紙)包扎器皿(2)抑制細菌(放線菌)生長(3)①(4)接種環(huán)溫度過高,菌被殺死(5)有助于研磨充分不需要

β-胡蘿卜素較耐酸解析(1)培養(yǎng)皿滅菌方法通常有干熱滅菌和濕熱滅菌(高壓蒸汽滅菌)兩種。用牛皮紙(或報

紙)包扎器皿后再滅菌,可防止滅菌后的器皿被再次污染。(2)青霉素可抑制細菌、放線菌的生

長,但對酵母菌生長無影響,故培養(yǎng)基中添加青霉素可以篩選出酵母菌。(3)滅菌鍋中的甲、

乙、丙分別表示安全閥、放氣閥和壓力表。(4)該接種過程中的3塊平板相同,菌種來源相同,

只有一塊平板接種培養(yǎng)后無菌落,對比知,問題出現(xiàn)在接種過程中,最可能的原因是接種環(huán)灼燒

后未充分冷卻,菌種被殺死。(5)對酵母菌的研磨過程中加入石英砂有助于充分研磨,因β-胡蘿

卜素較耐酸,故該過程不需要加入CaCO3。3.(2014四川理綜,10,11分)有機農(nóng)藥苯磺隆是一種除草劑,長期使用會污染環(huán)境。研究發(fā)現(xiàn),苯

磺隆能被土壤中某些微生物降解。分離降解苯磺隆的菌株和探索其降解機制的實驗過程如

圖甲、乙所示。

(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、水、

四類,該實驗所用的選

擇培養(yǎng)基只能以苯磺隆作為唯一碳源,其原因是

。(2)與微生物培養(yǎng)基相比,植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基常需添加生長素和

,這些植物激

素一般需要事先單獨配制成

保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時,通常使用的劃線工具是

。劃線的某個平板培養(yǎng)后,第一劃線區(qū)域的劃

線上都不間斷地長滿了菌,第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落,其他劃線上有菌落。造成劃線無菌落可能的操作失誤有

。(4)為探究苯磺隆的降解機制,將該菌種的培養(yǎng)液過濾離心,取上清液做圖乙所示實驗。該實驗

的假設(shè)是

,該實驗設(shè)計是否合理?為什么?

。答案(1)氮源和無機鹽只有能利用苯磺隆的微生物能正常生長繁殖(2)細胞分裂素母液(3)接種環(huán)①接種環(huán)灼燒后未冷卻;②劃線未從第一區(qū)域末端開始(4)目的菌株能分泌降解苯磺隆的蛋白質(zhì)不合理,缺少空白對照解析(1)微生物生長繁殖所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水、碳源、氮源和無機鹽;在培養(yǎng)基中加

入苯磺隆作為唯一碳源,可將只能利用此碳源的菌種篩選出來。(2)植物組織培養(yǎng)基與微生物

培養(yǎng)基相比,常常需要添加植物激素,包括生長素和細胞分裂素;這些植物激素事先按一定的質(zhì)

量濃度單獨配成母液保存?zhèn)溆谩?3)純化菌株時,通常用接種環(huán)進行劃線操作;第二區(qū)域劃第一

條線時,接種環(huán)灼燒后未冷卻,致使所劃第一條線上無菌落。若第二次劃線未從第一區(qū)域末端

開始,則也會導(dǎo)致第二劃線區(qū)域第一條線上無菌落。(4)由圖乙可知本實驗的目的是探究能降

解苯磺隆的物質(zhì)是否是該菌種所產(chǎn)生的蛋白質(zhì)。為使實驗設(shè)計更合理還需再設(shè)置一個對照

組,將蛋白酶溶液改為等量的蒸餾水,其余設(shè)置不變。4.(2014課標(biāo)全國Ⅰ,39,15分)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}:(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶,該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶,其中的葡萄

糖苷酶可將

分解成

。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時,CR可與纖維素形成

色復(fù)合物。用含有

CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的

。(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落,某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)

基(成分見下表):

酵母膏無機鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-+++注:“+”表示有,“-”表示無。據(jù)表判斷,培養(yǎng)基甲

(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌,原因是

;培養(yǎng)基乙

(填“能”或“不能”)用于分

離和鑒別纖維素分解菌,原因是

。答案(1)纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素,不會形成CR—纖維

素紅色復(fù)合物,即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌解析(1)纖維素酶是一種復(fù)合酶,一般認為它至少包括三種組分:C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶,前

兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,葡萄糖苷酶將纖維二糖分解成葡萄糖。(2)剛果紅可與纖維

素形成紅色復(fù)合物,但并不與水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。用含有剛果紅的纖

維素培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時,由于纖維素被分解,紅色復(fù)合物無法形成,培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以

纖維素分解菌為中心的透明圈。(3)培養(yǎng)基甲未使用瓊脂,為液體培養(yǎng)基,不能用于分離單菌

落。含有纖維素和剛果紅(CR)的培養(yǎng)基可分離和鑒別纖維素分解菌。A組2017—2019年高考模擬·考點基礎(chǔ)題組三年模擬考點1微生物的培養(yǎng)、分離與數(shù)量測定1.(2019福建寧德一模,37)乳酸菌是對人體有益的微生物之一,常用于生產(chǎn)酸奶,其發(fā)酵產(chǎn)物為

乳酸,能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣?；卮鹣铝袉栴}:(1)為檢測某品牌酸奶中的乳酸菌含量是否達標(biāo),檢驗人員進行了相關(guān)實驗。①配制培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中除含水、無機鹽、碳源、氮源和瓊脂外,還需添加維生素和

。②稀釋樣品:取1mL待測酸奶,用

進行梯度稀釋。③接種培養(yǎng):用

法接種,培養(yǎng)時控制的氣體條件是

。④觀察計數(shù):菌落周圍出現(xiàn)的

就是乳酸菌的菌落,選擇菌落數(shù)在

的平板計

數(shù)。每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,目的是

。(2)生產(chǎn)上不能用含有抗生素的牛奶發(fā)酵成酸奶,原因是

。答案(1)CaCO3無菌水稀釋涂布平板無氧透明圈(或溶鈣圈)30~300可以防止因

培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目(2)抗生素會抑制乳酸菌(或細菌)的繁殖解析(1)①乳酸菌的發(fā)酵產(chǎn)物乳酸,能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣,因此配制培養(yǎng)乳酸菌

的培養(yǎng)基除加入水、無機鹽、碳源、氮源和瓊脂外,還需添加維生素和CaCO3。②計數(shù)乳酸

菌前,需用無菌水將待測酸奶稀釋至合適濃度。③計數(shù)乳酸菌需用稀釋涂布平板法接種,乳酸

菌是厭氧菌,培養(yǎng)時控制的氣體條件是無氧。④乳酸能溶解周圍環(huán)境中的難溶性碳酸鈣,不透

明的培養(yǎng)基上出現(xiàn)的透明(溶鈣)圈就是乳酸菌的菌落。細菌計數(shù)時,常選擇菌落數(shù)在30~300

的平板計數(shù)。每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果,目的是可

以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。(2)生產(chǎn)上不能用含有抗生素的牛奶發(fā)酵成

酸奶,因為抗生素會抑制乳酸菌的繁殖。2.(2019廣東肇慶二模,37)自養(yǎng)需氧型的硝化細菌能夠降低水體中的銨鹽,對水體有一定的凈

化作用。請回答:(1)培養(yǎng)硝化細菌時,將含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是

。培養(yǎng)基中加入銨鹽為硝化細菌的生長提供

,培養(yǎng)基中沒有加入有機碳,

從功能上看這種培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基。(2)硝化細菌純化并計數(shù)時,對照組應(yīng)該涂布等量的

。若實驗組每個平板中

的菌落數(shù)都超過了300,應(yīng)對樣本菌液進行

處理。(3)甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下

得到以下結(jié)果:甲同學(xué)在該濃度下涂布了1個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)為49;乙同學(xué)在該濃度下涂布

了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為43、54、287,然后取其平均值128作為統(tǒng)計結(jié)果。請評價這

兩位同學(xué)的實驗結(jié)果是否有效,并說明理由。①甲同學(xué)的結(jié)果

。②乙同學(xué)的結(jié)果

。答案(1)防止冷凝形成水滴污染培養(yǎng)基(沖散菌落)氮源選擇(2)無菌水適當(dāng)?shù)南♂?3)無效,沒有設(shè)置重復(fù)實驗,結(jié)果不具有說服力無效,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,

結(jié)果的重復(fù)性差解析(1)微生物培養(yǎng)中將含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培

養(yǎng)基(沖散菌落)。硝化細菌屬于化能自養(yǎng)型細菌,能夠利用銨鹽氧化時釋放的能量,將CO2和H2O合成有機物,因此該培養(yǎng)基中不需要加入碳源,從功能上看這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。同

時銨鹽還可以為硝化細菌提供氮源。(2)硝化細菌純化并計數(shù)時,未檢驗滅菌是否合格,可設(shè)對

照組,對照組應(yīng)該涂布等量的無菌水,培養(yǎng)一段時間,觀察其是否有菌落產(chǎn)生。若實驗組每個平

板中的菌落數(shù)都超過了300,說明菌液濃度過大,需要進行適當(dāng)?shù)南♂屘幚怼?3)甲同學(xué)只涂布

了1個平板,平板數(shù)量太少,由于沒有設(shè)置重復(fù)實驗,結(jié)果不具有說服力,所以實驗結(jié)果無效。乙

同學(xué)在該濃度下涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為43、54、287,然后取其平均值128作為

統(tǒng)計結(jié)果,由于1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差,所以實驗結(jié)果無效。考點2傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)1.(2019廣東汕頭二模,37)中國杏樹的栽培已有兩千年以上的歷史,但對杏果的利用一直停留

在鮮食果肉或杏仁上。研究人員不斷創(chuàng)新開發(fā),成功釀制出杏果酒,其色澤淡黃、果香濃郁、

營養(yǎng)豐富;檢測發(fā)現(xiàn)果酒中總黃酮達20%,是目前天然可食植物制品黃酮含量最高的飲品,具有

抗癌防衰老的作用。請回答下列問題:(1)在釀制出杏果酒的開始時一般要先通氣,其目的是

。在酸性條件下,可

用

檢測酒精的存在。若要進一步檢測所得杏果酒中活體酵母菌

的密度,一般采用

法,但此種方法最終計算得出的菌體數(shù)往往比實際數(shù)目低。(2)釀制杏果酒時,不需要對杏果進行嚴(yán)格的消毒處理,這是因為

。(3)制作成功的杏果酒若暴露在空氣中酒味