功能基因組學(xué)及其研究方法課件

功能基因組學(xué)及其研究方法功能基因組學(xué)及其研究方法1基因組(genome)是德國(guó)遺傳學(xué)家H.Winkler在1920年將gene（基因）和chromosome(染色體)兩個(gè)詞縮合而創(chuàng)造的一個(gè)新詞，意思是指染色體上的全部基因。幾十年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，其含義擴(kuò)展為在個(gè)體水平代表一個(gè)個(gè)體所有遺傳性狀的總和，在細(xì)胞水平代表一個(gè)細(xì)胞所有不同染色體（單倍體）的總和，在分子水平代表一個(gè)物種所有DNA分子的總和。

一、基因組學(xué)概念基因組(genome)是德國(guó)遺傳學(xué)家H.Win2基因組學(xué)（genomics）研究生物基因組的結(jié)構(gòu)和功能的科學(xué)，即從整體水平上來(lái)研究一個(gè)物種的基因組的結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控的一門(mén)科學(xué)。1986年提出，至今20年，已經(jīng)發(fā)展成為遺傳學(xué)中最重要的分支學(xué)科?；蚪M學(xué)（genomics）研究生物基因組的結(jié)構(gòu)3基因組學(xué)研究的最終目標(biāo)獲得生物體全部基因組序列;鑒定所有基因的功能;明確基因之間的相互作用關(guān)系;闡明基因組的進(jìn)化規(guī)律.

基因組學(xué)研究的最終目標(biāo)獲得生物體全部基因組序列;4功能基因組學(xué)及其研究方法課件5基因組學(xué)包括2-3個(gè)亞領(lǐng)域亞領(lǐng)域內(nèi)容結(jié)構(gòu)基因組學(xué)整個(gè)基因組的遺傳制圖、物理制圖、DNA測(cè)序；

功能基因組學(xué)認(rèn)識(shí)、分析整個(gè)基因組所包含的基因、非基因序列及其功能；蛋白質(zhì)組學(xué)

研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成及其活動(dòng)規(guī)律?；蚪M學(xué)包括2-3個(gè)亞領(lǐng)域亞領(lǐng)域6結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)，顧名思義，就是研究生物基因組結(jié)構(gòu)的科學(xué)。它是基因組研究的第一階段的工作，建立功能基因組學(xué)的基礎(chǔ)。其主要目標(biāo)是繪制生物的遺傳圖（geneticmap）、物理圖（physicalmap）、轉(zhuǎn)錄圖（transcriptmap）和序列圖（sequencemap）?；蚪M測(cè)序是結(jié)構(gòu)基因組學(xué)最基本的研究工作。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)(structuralgenomics)是通過(guò)人類(lèi)基因組計(jì)劃(HumanGenomeProject,HGP)的實(shí)施來(lái)完成的。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)，顧名思義，就是研究生物基因組結(jié)構(gòu)的7HGP的內(nèi)容就是制作高分辨率的人類(lèi)遺傳圖和物理圖，最終完成人類(lèi)和其它重要模式生物全部基因組DNA序列測(cè)定。自1990年開(kāi)始實(shí)施人類(lèi)基因組計(jì)劃以來(lái)，在它的影響下，迄今已完成了400多個(gè)物種的基因組DNA序列的測(cè)定，其中包括流感嗜血桿菌、大腸桿菌、酵母、秀麗線蟲(chóng)等多個(gè)病原微生物和模式生物以及人類(lèi)基因組的測(cè)序。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)8模式生物是指一類(lèi)被深入研究旨在揭示特定生命現(xiàn)象普遍規(guī)律的生物物種。大多數(shù)生物學(xué)過(guò)程在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中是高度保守的，因此，許多生物學(xué)過(guò)程在大多數(shù)或所有的模式生物中都是類(lèi)似的，模式生物也因此在生物學(xué)研究中具有不可替代的重要作用。模式生物是指一類(lèi)被深入研究旨在揭示特定生命現(xiàn)象普遍規(guī)律的生物9

人類(lèi)基因

組計(jì)劃人類(lèi)基因

組計(jì)劃10基因定位基因組作圖測(cè)定核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因組學(xué)基因定位結(jié)構(gòu)基因組學(xué)11TheE.coligenomeTheE.coligenome12AportionoftheE.colichromosomeshowinggenesandoperons.

Adotindicatesthepromoterforeachgeneoroperon.Arrowsandcolorindicatethedirectionoftranscribtion:darkbluegenesaretranscribedlefttoright,lightbluearetranscribedrighttoleft.Overlappinggeneareshowningreen.AportionoftheE.colichromo13功能基因組學(xué)

概念：利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息，以高通量，大規(guī)模實(shí)驗(yàn)方法及統(tǒng)計(jì)與計(jì)算機(jī)分析為特征，全面系統(tǒng)地分析全部基因的功能的學(xué)科。近年來(lái)應(yīng)用計(jì)算機(jī)生物信息技術(shù)，分析研究已測(cè)序完DNA序列的生物基因組后，發(fā)現(xiàn)了未知功能的許多基因，這促進(jìn)了基因定位和基因表達(dá)調(diào)控的研究。但目前功能基因組學(xué)的研究，還只局限于RNA水平。今后隨著蛋白質(zhì)分析技術(shù)的發(fā)展，例如，高效和超高靈敏度的雙向凝膠電泳、色譜儀的出現(xiàn)，人們有可能在蛋白質(zhì)水平上，分析基因組中基因間的相互作用，進(jìn)而進(jìn)一步地豐富和發(fā)展功能基因組學(xué)。功能基因組學(xué)概念：利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息，以高通量，大14主要具體內(nèi)容包括以下方面（一）鑒定DNA序列中的基因（二）同源搜索預(yù)測(cè)基因功能（三）實(shí)驗(yàn)性研究基因功能（四）描述基因表達(dá)模式（五）蛋白質(zhì)相互作用的模式主要具體內(nèi)容包括以下方面15（一）鑒定DNA序列中的基因計(jì)算機(jī)對(duì)基因組序列(DNA序列)進(jìn)行分析，包括鑒定和描述推測(cè)的基因、非基因序列及其功能。

（一）鑒定DNA序列中的基因16根據(jù)序列分析搜尋基因

查找開(kāi)放閱讀框（openreadingframe,ORF）開(kāi)放閱讀框都有一個(gè)起始密碼子，ATG，還要有終止密碼子。從ATG開(kāi)始，然后向下游尋找終止密碼子。起始密碼子和終止密碼子之間的堿基數(shù)目要能夠被3整除每一條鏈都有3種可能的閱讀框，2條連共計(jì)有6種可能的閱讀框.根據(jù)序列分析搜尋基因查找開(kāi)放閱讀框（openreadi17（二）同源搜索設(shè)計(jì)基因功能同源基因在進(jìn)化中來(lái)自共同的祖先，通過(guò)核苷酸序列或氨基酸序列的同源性比較推測(cè)基因組內(nèi)相似功能的基因。同源基因起源于同一個(gè)祖先，在不同的物種中結(jié)構(gòu)和功能相同或相似的基因。（二）同源搜索設(shè)計(jì)基因功能同源基因18同源查詢(xún)的依據(jù)有親緣關(guān)系的物種，基因組可能存在某種程度的相似性：存在某些完全相同的序列；ORF演繹的氨基酸序列相似；ORF的排列相似，如等長(zhǎng)的外顯子；模擬的多肽鏈的高級(jí)結(jié)構(gòu)相似，等。同源查詢(xún)的依據(jù)有親緣關(guān)系的物種，基因組可能存在某種程度19生物信息學(xué)(bioinformatics)是運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)和信息技術(shù)開(kāi)發(fā)新的算法和統(tǒng)計(jì)方法，對(duì)生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，確定數(shù)據(jù)所含有的生物學(xué)意義，并開(kāi)發(fā)新的數(shù)據(jù)分析工具以實(shí)現(xiàn)對(duì)各種信息的獲取和管理的學(xué)科。利用生物信息學(xué)能夠分析從微生物、動(dòng)物、植物以及人類(lèi)基因組序列測(cè)定產(chǎn)生的大量資料，闡明遺傳信息。

研究?jī)?nèi)容兩大類(lèi)：DNA數(shù)據(jù)分析；蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)分析。生物信息學(xué)(bioinformatics)是運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)和20DNA序列分析基因結(jié)構(gòu)域分析，包括啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合序列、內(nèi)含子、外顯子、重復(fù)序列、開(kāi)放讀碼框架等。同源分析和檢索，包括DNA數(shù)據(jù)庫(kù)、EST數(shù)據(jù)庫(kù)、STS數(shù)據(jù)庫(kù)、Unigene數(shù)據(jù)庫(kù)、Swissprot數(shù)據(jù)庫(kù)等。DNA序列分析21蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)分析蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)分析：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分析，包括等電點(diǎn)、信號(hào)肽、穿膜區(qū)、DNA結(jié)合序列等同源分析和檢索，包括Nr數(shù)據(jù)庫(kù)、Swissprot數(shù)據(jù)庫(kù)等功能區(qū)分析，包括Prosite、Emotif、Identify分析等。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)分析：蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，如PDB數(shù)據(jù)庫(kù)。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)，如Homology等軟件分析。蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)分析22（三）實(shí)驗(yàn)性研究基因功能基因克隆基因敲除（knock-out）

轉(zhuǎn)座子插入突變

基因的超表達(dá)反義RNA技術(shù)RNAi

（三）實(shí)驗(yàn)性研究基因功能23基因克隆的策略基因文庫(kù)—傳統(tǒng)方法PCR擴(kuò)增–后基因組時(shí)代基因克隆的策略基因文庫(kù)—傳統(tǒng)方法24基因敲除技術(shù)（geneknockout)通過(guò)基因工程的方法將一個(gè)結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因去除，或用其他序列相近的基因取代（又稱(chēng)基因敲入,基因替換），然后從整體觀察生物體，從而推測(cè)相應(yīng)基因的功能。這種人為地把生物體某一種有功能的基因完全缺失的技術(shù)稱(chēng)為基因敲除技術(shù)。基因敲除技術(shù)（geneknockout)25基因替換轉(zhuǎn)座子誘變整合突變自殺質(zhì)粒介導(dǎo)的缺失突變基因替換26（四）描述基因表達(dá)模式采用DNA微點(diǎn)陣進(jìn)行整體基因表達(dá)譜--轉(zhuǎn)錄組分析；采用蛋白質(zhì)或多肽微點(diǎn)陣、改進(jìn)的雙向電泳結(jié)合飛行質(zhì)譜技術(shù)分析蛋白質(zhì)表達(dá)譜--蛋白質(zhì)組分析。（四）描述基因表達(dá)模式27轉(zhuǎn)錄組(transcriptome):一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的一套mRNA轉(zhuǎn)錄物，包含了某一環(huán)境條件、某一生命階段、某一生理或病理(功能)狀態(tài)下，生命體的細(xì)胞或組織所表達(dá)的基因種類(lèi)和水平。轉(zhuǎn)錄組(transcriptome):28轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究方法－DNA芯片技術(shù)轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究方法－DNA芯片技術(shù)29基因表達(dá)譜類(lèi)型:1，組織、細(xì)胞表達(dá)譜2，差異的組織、細(xì)胞表達(dá)譜3，誘導(dǎo)的細(xì)胞表達(dá)譜表達(dá)譜專(zhuān)用技術(shù):1，SAGE分析2，生物芯片技術(shù)(基因芯片，細(xì)胞芯片，組織芯片)3，其它基因表達(dá)譜類(lèi)型:30SerialAnalysisofGeneExpression(SAGE)用于定量地、平行地分析大量的轉(zhuǎn)錄本。若要知道一種組織，器官或細(xì)胞的基因表達(dá)譜，首先從組織細(xì)胞里分離出短的診斷性Tags，歸類(lèi)并克隆。測(cè)定數(shù)千個(gè)克隆的DNA序列就可以了解代表這種組織、器官或細(xì)胞的功能的基因表達(dá)譜。所以SAGE提供了一種廣泛應(yīng)用的工具，定量地分析比較各種正常組織細(xì)胞，各種發(fā)育狀態(tài)和各種病理狀態(tài)下的基因表達(dá)譜。/網(wǎng)站搜集了大量的SAGE供研究者檢索。SerialAnalysisofGeneExpression(SAGE)SerialAnalysisofGen31SequencingthausandstagsLivercDNAExpresssequencetagcloningDeterminingageneexpressionpatterncharacteristicofliver’sfunctionmRNASequencingLivercDNAExpressclo32基因芯片技術(shù)信息時(shí)代的產(chǎn)物90年代興起的一項(xiàng)前沿生物技術(shù)橫跨：生命科學(xué)、物理學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、微電子技術(shù)光電技術(shù)、材料科學(xué)等現(xiàn)代高科技高度集約化高靈敏度大通量平行分析基因芯片技術(shù)信息時(shí)代的產(chǎn)物90年代興起的一項(xiàng)前沿高度集約化33DNA微列陣(DNAmicroarrays)是利用DNA芯片技術(shù)，同時(shí)進(jìn)行大量分子雜交，以分析比較不同組織或器官的基因表達(dá)水平，篩選突變基因，從核酸水平分析基因表達(dá)模式。是后基因組學(xué)研究中的重要方法之一。DNA微列陣(DNAmicroarrays)是利用DNA芯34基因芯片發(fā)展歷史Southern&NorthernBlotDotBlotMacroarrayMicroarray基因芯片發(fā)展歷史Southern&NorthernDo35功能基因組學(xué)及其研究方法課件36其基本原理是將一系列的核酸片段固定在芯片載體上作為固相靶片段（target），待測(cè)的核酸片段人工標(biāo)記上不同的熒光、或同位素等作為探針（probe），一定條件下兩者雜交，根據(jù)雜交后不同的信號(hào)即可獲得靶片段的信息，進(jìn)行計(jì)算機(jī)分析。其基本原理是將一系列的核酸片段固定在芯片載體上作為固相靶片37制備靶片段結(jié)果觀察，信息分析制備固相探針對(duì)照組（組織，細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)組（組織，細(xì)胞）提取mRNA提取mRNACy5標(biāo)記Cy3標(biāo)記雜交制備靶片段結(jié)果觀察，信息分析制備固相探針對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組提取mR38掃描圖掃描圖39蛋白質(zhì)組(proteom)：一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的全套蛋白質(zhì)，反映了特殊階段、環(huán)境、狀態(tài)下細(xì)胞或組織在翻譯水平的蛋白質(zhì)的表達(dá)譜?；蚴沁z傳信息的攜帶者,而全部生物功能的執(zhí)行者卻是蛋白質(zhì),僅僅從基因的角度來(lái)研究是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的。蛋白質(zhì)組(proteom)：40蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)組成及其活動(dòng)規(guī)律。旨在闡明生物體全部蛋白質(zhì)的表達(dá)模式及功能模式,內(nèi)容包括鑒定蛋白質(zhì)表達(dá)、存在方式、結(jié)構(gòu)、功能和相互作用方式等。蛋白質(zhì)組學(xué)(proteomics)41蛋白質(zhì)組學(xué)比基因組學(xué)更為復(fù)雜：DNA線狀結(jié)構(gòu)與二級(jí)結(jié)構(gòu)的功能差異不大，但多肽鏈需折疊成一定的三維空間結(jié)構(gòu)才形成有功能的蛋白質(zhì)；同一種蛋白質(zhì)經(jīng)不同的加工修飾可形成不同的功能，因此蛋白質(zhì)的多樣性遠(yuǎn)復(fù)雜于基因本身。蛋白質(zhì)組學(xué)比基因組學(xué)更為復(fù)雜：DNA線狀結(jié)構(gòu)與二級(jí)結(jié)構(gòu)的功能42蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法雙向電泳（twodimensionelectrophoresis,2-DE）：蛋白質(zhì)具有等電點(diǎn)和分子量的特異性，將蛋白質(zhì)混合物在電荷（等電聚焦，IEF）和分子量（變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，SDS）兩個(gè)水平上進(jìn)行分離。蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法43功能基因組學(xué)及其研究方法課件44MolecularsIons

生物質(zhì)譜技術(shù)MassSpectrometry：通過(guò)測(cè)定樣品離子的質(zhì)荷比（m/z）來(lái)進(jìn)行成分和結(jié)構(gòu)分析。MolecularsIons生物質(zhì)譜技術(shù)MassSpe45蛋白質(zhì)2D電泳分析A對(duì)照；B為人的垂體瘤蛋白質(zhì)2D電泳箭頭示有明顯差異的蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)2D電泳分析46∵真核生物的基因表達(dá)受轉(zhuǎn)錄因子控制，轉(zhuǎn)錄因子需與啟動(dòng)子區(qū)域的DNA結(jié)合并激活RNA聚合酶轉(zhuǎn)錄。轉(zhuǎn)錄因子具有DNA結(jié)合及激活轉(zhuǎn)錄兩功能，分別由不同區(qū)域完成，而且將這兩部分分割成兩個(gè)片段后仍由互作能裝配成一個(gè)完全有功能的轉(zhuǎn)錄因子?；谶@一特點(diǎn)，設(shè)計(jì)出酵母雙雜交系統(tǒng)。是利用酵母菌同一個(gè)細(xì)胞中共同表達(dá)不同蛋白質(zhì)，以鑒定蛋白質(zhì)之間互作的一種分析方法。酵母菌雙雜交系統(tǒng)(twohybrid-systems)：∵真核生物的基因表達(dá)受轉(zhuǎn)錄因子控制，轉(zhuǎn)錄因子需與啟動(dòng)子區(qū)域的47蛋白質(zhì)之間相互作用以及通過(guò)相互作用而形成的蛋白復(fù)合物是細(xì)胞各種基本功能的主要完成者。幾乎所有的重要生命活動(dòng)，包括DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的合成與分泌、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝等等，都離不開(kāi)蛋白質(zhì)之間的相互作用。蛋白質(zhì)之間相互作用研究的重要性蛋白質(zhì)之間相互作用以及通過(guò)相互作用而形成的蛋白復(fù)合物是細(xì)胞各48酵母雙雜交各種親和分析（親和色譜、免疫共沉淀等）熒光共振能量轉(zhuǎn)換效應(yīng)分析噬菌體顯示系統(tǒng)篩選等等常用蛋白質(zhì)相互作用的研究技術(shù)酵母雙雜交常用蛋白質(zhì)相互作用的研究技術(shù)49一、酵母雙雜交技術(shù)的基本原理一、酵母雙雜交技術(shù)的基本原理50

二、酵母雙雜交系統(tǒng)的應(yīng)用（一）分析已知蛋白之間的相互作用（二）對(duì)蛋白質(zhì)功能域的分析（三）分析未知蛋白相互作用（四）繪制蛋白質(zhì)相互作用系統(tǒng)圖譜（五）在藥物設(shè)計(jì)中的應(yīng)用

二、酵母雙雜交系統(tǒng)的應(yīng)用（一）分析已知蛋白之間的相互作用51功能基因組學(xué)及其研究方法功能基因組學(xué)及其研究方法52基因組(genome)是德國(guó)遺傳學(xué)家H.Winkler在1920年將gene（基因）和chromosome(染色體)兩個(gè)詞縮合而創(chuàng)造的一個(gè)新詞，意思是指染色體上的全部基因。幾十年來(lái)，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，其含義擴(kuò)展為在個(gè)體水平代表一個(gè)個(gè)體所有遺傳性狀的總和，在細(xì)胞水平代表一個(gè)細(xì)胞所有不同染色體（單倍體）的總和，在分子水平代表一個(gè)物種所有DNA分子的總和。

一、基因組學(xué)概念基因組(genome)是德國(guó)遺傳學(xué)家H.Win53基因組學(xué)（genomics）研究生物基因組的結(jié)構(gòu)和功能的科學(xué)，即從整體水平上來(lái)研究一個(gè)物種的基因組的結(jié)構(gòu)、功能及調(diào)控的一門(mén)科學(xué)。1986年提出，至今20年，已經(jīng)發(fā)展成為遺傳學(xué)中最重要的分支學(xué)科?；蚪M學(xué)（genomics）研究生物基因組的結(jié)構(gòu)54基因組學(xué)研究的最終目標(biāo)獲得生物體全部基因組序列;鑒定所有基因的功能;明確基因之間的相互作用關(guān)系;闡明基因組的進(jìn)化規(guī)律.

基因組學(xué)研究的最終目標(biāo)獲得生物體全部基因組序列;55功能基因組學(xué)及其研究方法課件56基因組學(xué)包括2-3個(gè)亞領(lǐng)域亞領(lǐng)域內(nèi)容結(jié)構(gòu)基因組學(xué)整個(gè)基因組的遺傳制圖、物理制圖、DNA測(cè)序；

功能基因組學(xué)認(rèn)識(shí)、分析整個(gè)基因組所包含的基因、非基因序列及其功能；蛋白質(zhì)組學(xué)

研究細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的組成及其活動(dòng)規(guī)律。基因組學(xué)包括2-3個(gè)亞領(lǐng)域亞領(lǐng)域57結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)，顧名思義，就是研究生物基因組結(jié)構(gòu)的科學(xué)。它是基因組研究的第一階段的工作，建立功能基因組學(xué)的基礎(chǔ)。其主要目標(biāo)是繪制生物的遺傳圖（geneticmap）、物理圖（physicalmap）、轉(zhuǎn)錄圖（transcriptmap）和序列圖（sequencemap）?；蚪M測(cè)序是結(jié)構(gòu)基因組學(xué)最基本的研究工作。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)(structuralgenomics)是通過(guò)人類(lèi)基因組計(jì)劃(HumanGenomeProject,HGP)的實(shí)施來(lái)完成的。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)，顧名思義，就是研究生物基因組結(jié)構(gòu)的58HGP的內(nèi)容就是制作高分辨率的人類(lèi)遺傳圖和物理圖，最終完成人類(lèi)和其它重要模式生物全部基因組DNA序列測(cè)定。自1990年開(kāi)始實(shí)施人類(lèi)基因組計(jì)劃以來(lái)，在它的影響下，迄今已完成了400多個(gè)物種的基因組DNA序列的測(cè)定，其中包括流感嗜血桿菌、大腸桿菌、酵母、秀麗線蟲(chóng)等多個(gè)病原微生物和模式生物以及人類(lèi)基因組的測(cè)序。結(jié)構(gòu)基因組學(xué)結(jié)構(gòu)基因組學(xué)59模式生物是指一類(lèi)被深入研究旨在揭示特定生命現(xiàn)象普遍規(guī)律的生物物種。大多數(shù)生物學(xué)過(guò)程在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中是高度保守的，因此，許多生物學(xué)過(guò)程在大多數(shù)或所有的模式生物中都是類(lèi)似的，模式生物也因此在生物學(xué)研究中具有不可替代的重要作用。模式生物是指一類(lèi)被深入研究旨在揭示特定生命現(xiàn)象普遍規(guī)律的生物60

人類(lèi)基因

組計(jì)劃人類(lèi)基因

組計(jì)劃61基因定位基因組作圖測(cè)定核苷酸序列結(jié)構(gòu)基因組學(xué)基因定位結(jié)構(gòu)基因組學(xué)62TheE.coligenomeTheE.coligenome63AportionoftheE.colichromosomeshowinggenesandoperons.

Adotindicatesthepromoterforeachgeneoroperon.Arrowsandcolorindicatethedirectionoftranscribtion:darkbluegenesaretranscribedlefttoright,lightbluearetranscribedrighttoleft.Overlappinggeneareshowningreen.AportionoftheE.colichromo64功能基因組學(xué)

概念：利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息，以高通量，大規(guī)模實(shí)驗(yàn)方法及統(tǒng)計(jì)與計(jì)算機(jī)分析為特征，全面系統(tǒng)地分析全部基因的功能的學(xué)科。近年來(lái)應(yīng)用計(jì)算機(jī)生物信息技術(shù)，分析研究已測(cè)序完DNA序列的生物基因組后，發(fā)現(xiàn)了未知功能的許多基因，這促進(jìn)了基因定位和基因表達(dá)調(diào)控的研究。但目前功能基因組學(xué)的研究，還只局限于RNA水平。今后隨著蛋白質(zhì)分析技術(shù)的發(fā)展，例如，高效和超高靈敏度的雙向凝膠電泳、色譜儀的出現(xiàn)，人們有可能在蛋白質(zhì)水平上，分析基因組中基因間的相互作用，進(jìn)而進(jìn)一步地豐富和發(fā)展功能基因組學(xué)。功能基因組學(xué)概念：利用結(jié)構(gòu)基因組學(xué)提供的信息，以高通量，大65主要具體內(nèi)容包括以下方面（一）鑒定DNA序列中的基因（二）同源搜索預(yù)測(cè)基因功能（三）實(shí)驗(yàn)性研究基因功能（四）描述基因表達(dá)模式（五）蛋白質(zhì)相互作用的模式主要具體內(nèi)容包括以下方面66（一）鑒定DNA序列中的基因計(jì)算機(jī)對(duì)基因組序列(DNA序列)進(jìn)行分析，包括鑒定和描述推測(cè)的基因、非基因序列及其功能。

（一）鑒定DNA序列中的基因67根據(jù)序列分析搜尋基因

查找開(kāi)放閱讀框（openreadingframe,ORF）開(kāi)放閱讀框都有一個(gè)起始密碼子，ATG，還要有終止密碼子。從ATG開(kāi)始，然后向下游尋找終止密碼子。起始密碼子和終止密碼子之間的堿基數(shù)目要能夠被3整除每一條鏈都有3種可能的閱讀框，2條連共計(jì)有6種可能的閱讀框.根據(jù)序列分析搜尋基因查找開(kāi)放閱讀框（openreadi68（二）同源搜索設(shè)計(jì)基因功能同源基因在進(jìn)化中來(lái)自共同的祖先，通過(guò)核苷酸序列或氨基酸序列的同源性比較推測(cè)基因組內(nèi)相似功能的基因。同源基因起源于同一個(gè)祖先，在不同的物種中結(jié)構(gòu)和功能相同或相似的基因。（二）同源搜索設(shè)計(jì)基因功能同源基因69同源查詢(xún)的依據(jù)有親緣關(guān)系的物種，基因組可能存在某種程度的相似性：存在某些完全相同的序列；ORF演繹的氨基酸序列相似；ORF的排列相似，如等長(zhǎng)的外顯子；模擬的多肽鏈的高級(jí)結(jié)構(gòu)相似，等。同源查詢(xún)的依據(jù)有親緣關(guān)系的物種，基因組可能存在某種程度70生物信息學(xué)(bioinformatics)是運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)和信息技術(shù)開(kāi)發(fā)新的算法和統(tǒng)計(jì)方法，對(duì)生物實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，確定數(shù)據(jù)所含有的生物學(xué)意義，并開(kāi)發(fā)新的數(shù)據(jù)分析工具以實(shí)現(xiàn)對(duì)各種信息的獲取和管理的學(xué)科。利用生物信息學(xué)能夠分析從微生物、動(dòng)物、植物以及人類(lèi)基因組序列測(cè)定產(chǎn)生的大量資料，闡明遺傳信息。

研究?jī)?nèi)容兩大類(lèi)：DNA數(shù)據(jù)分析；蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)分析。生物信息學(xué)(bioinformatics)是運(yùn)用計(jì)算機(jī)技術(shù)和71DNA序列分析基因結(jié)構(gòu)域分析，包括啟動(dòng)子、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合序列、內(nèi)含子、外顯子、重復(fù)序列、開(kāi)放讀碼框架等。同源分析和檢索，包括DNA數(shù)據(jù)庫(kù)、EST數(shù)據(jù)庫(kù)、STS數(shù)據(jù)庫(kù)、Unigene數(shù)據(jù)庫(kù)、Swissprot數(shù)據(jù)庫(kù)等。DNA序列分析72蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)分析蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)分析：結(jié)構(gòu)特點(diǎn)分析，包括等電點(diǎn)、信號(hào)肽、穿膜區(qū)、DNA結(jié)合序列等同源分析和檢索，包括Nr數(shù)據(jù)庫(kù)、Swissprot數(shù)據(jù)庫(kù)等功能區(qū)分析，包括Prosite、Emotif、Identify分析等。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)分析：蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，如PDB數(shù)據(jù)庫(kù)。蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)，如Homology等軟件分析。蛋白質(zhì)的數(shù)據(jù)分析73（三）實(shí)驗(yàn)性研究基因功能基因克隆基因敲除（knock-out）

轉(zhuǎn)座子插入突變

基因的超表達(dá)反義RNA技術(shù)RNAi

（三）實(shí)驗(yàn)性研究基因功能74基因克隆的策略基因文庫(kù)—傳統(tǒng)方法PCR擴(kuò)增–后基因組時(shí)代基因克隆的策略基因文庫(kù)—傳統(tǒng)方法75基因敲除技術(shù)（geneknockout)通過(guò)基因工程的方法將一個(gè)結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因去除，或用其他序列相近的基因取代（又稱(chēng)基因敲入,基因替換），然后從整體觀察生物體，從而推測(cè)相應(yīng)基因的功能。這種人為地把生物體某一種有功能的基因完全缺失的技術(shù)稱(chēng)為基因敲除技術(shù)?；蚯贸夹g(shù)（geneknockout)76基因替換轉(zhuǎn)座子誘變整合突變自殺質(zhì)粒介導(dǎo)的缺失突變基因替換77（四）描述基因表達(dá)模式采用DNA微點(diǎn)陣進(jìn)行整體基因表達(dá)譜--轉(zhuǎn)錄組分析；采用蛋白質(zhì)或多肽微點(diǎn)陣、改進(jìn)的雙向電泳結(jié)合飛行質(zhì)譜技術(shù)分析蛋白質(zhì)表達(dá)譜--蛋白質(zhì)組分析。（四）描述基因表達(dá)模式78轉(zhuǎn)錄組(transcriptome):一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的一套mRNA轉(zhuǎn)錄物，包含了某一環(huán)境條件、某一生命階段、某一生理或病理(功能)狀態(tài)下，生命體的細(xì)胞或組織所表達(dá)的基因種類(lèi)和水平。轉(zhuǎn)錄組(transcriptome):79轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究方法－DNA芯片技術(shù)轉(zhuǎn)錄組學(xué)的研究方法－DNA芯片技術(shù)80基因表達(dá)譜類(lèi)型:1，組織、細(xì)胞表達(dá)譜2，差異的組織、細(xì)胞表達(dá)譜3，誘導(dǎo)的細(xì)胞表達(dá)譜表達(dá)譜專(zhuān)用技術(shù):1，SAGE分析2，生物芯片技術(shù)(基因芯片，細(xì)胞芯片，組織芯片)3，其它基因表達(dá)譜類(lèi)型:81SerialAnalysisofGeneExpression(SAGE)用于定量地、平行地分析大量的轉(zhuǎn)錄本。若要知道一種組織，器官或細(xì)胞的基因表達(dá)譜，首先從組織細(xì)胞里分離出短的診斷性Tags，歸類(lèi)并克隆。測(cè)定數(shù)千個(gè)克隆的DNA序列就可以了解代表這種組織、器官或細(xì)胞的功能的基因表達(dá)譜。所以SAGE提供了一種廣泛應(yīng)用的工具，定量地分析比較各種正常組織細(xì)胞，各種發(fā)育狀態(tài)和各種病理狀態(tài)下的基因表達(dá)譜。/網(wǎng)站搜集了大量的SAGE供研究者檢索。SerialAnalysisofGeneExpression(SAGE)SerialAnalysisofGen82SequencingthausandstagsLivercDNAExpresssequencetagcloningDeterminingageneexpressionpatterncharacteristicofliver’sfunctionmRNASequencingLivercDNAExpressclo83基因芯片技術(shù)信息時(shí)代的產(chǎn)物90年代興起的一項(xiàng)前沿生物技術(shù)橫跨：生命科學(xué)、物理學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)、微電子技術(shù)光電技術(shù)、材料科學(xué)等現(xiàn)代高科技高度集約化高靈敏度大通量平行分析基因芯片技術(shù)信息時(shí)代的產(chǎn)物90年代興起的一項(xiàng)前沿高度集約化84DNA微列陣(DNAmicroarrays)是利用DNA芯片技術(shù)，同時(shí)進(jìn)行大量分子雜交，以分析比較不同組織或器官的基因表達(dá)水平，篩選突變基因，從核酸水平分析基因表達(dá)模式。是后基因組學(xué)研究中的重要方法之一。DNA微列陣(DNAmicroarrays)是利用DNA芯85基因芯片發(fā)展歷史Southern&NorthernBlotDotBlotMacroarrayMicroarray基因芯片發(fā)展歷史Southern&NorthernDo86功能基因組學(xué)及其研究方法課件87其基本原理是將一系列的核酸片段固定在芯片載體上作為固相靶片段（target），待測(cè)的核酸片段人工標(biāo)記上不同的熒光、或同位素等作為探針（probe），一定條件下兩者雜交，根據(jù)雜交后不同的信號(hào)即可獲得靶片段的信息，進(jìn)行計(jì)算機(jī)分析。其基本原理是將一系列的核酸片段固定在芯片載體上作為固相靶片88制備靶片段結(jié)果觀察，信息分析制備固相探針對(duì)照組（組織，細(xì)胞）實(shí)驗(yàn)組（組織，細(xì)胞）提取mRNA提取mRNACy5標(biāo)記Cy3標(biāo)記雜交制備靶片段結(jié)果觀察，信息分析制備固相探針對(duì)照組實(shí)驗(yàn)組提取mR89掃描圖掃描圖90蛋白質(zhì)組(proteom)：一個(gè)細(xì)胞內(nèi)的全套蛋白質(zhì)，反映了特殊階段、環(huán)境、狀態(tài)下細(xì)胞或組織在翻譯水平的蛋白質(zhì)的