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放線菌形態(tài)的觀察
放線菌形態(tài)的觀察目的要求實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)程序思考題目的要求學(xué)習(xí)觀察放線菌的基本方法加深理解放線菌的形態(tài)特征G+GC含量高(和另一類(lèi)陽(yáng)性菌——厚壁菌門(mén)相比)好氧、少部分寄生兼性厭氧放線菌重要的屬有:放線菌屬(Actinomyces)節(jié)桿菌屬(Arthrobacter)棒桿菌屬(Corynebacterium)弗蘭克氏菌屬(Frankia)微球菌屬(Micrococcus)微單孢菌屬(Micromonospora)分枝桿菌屬(Mycobacterium)諾卡氏菌屬(Nocardia)丙酸桿菌屬(Propionibacterium)鏈霉菌屬(Streptomyces)(1)鏈霉菌屬(Streptomyces)分枝菌絲孢子體或氣生菌絲菌絲無(wú)橫隔好氧原核生物降解高分子底物生長(zhǎng)條件簡(jiǎn)單抗生素(2)棒狀桿菌屬(Corynrbacterium)谷氨酸棒桿菌(C.glutamicum)味精生產(chǎn)菌氨基酸生物合成調(diào)節(jié)機(jī)制白喉棒狀桿菌(C.diphtheriae)(3)分枝桿菌屬(Mycobacterium)不規(guī)則桿狀菌抗酸性染色細(xì)胞壁含有大量的脂類(lèi)和分枝菌酸結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌FilamentousActinomycetesTypicalappearanceofastreptomycetegrowingonagarslantsThecolorsareduetotheproductionofpigments插片法1.倒平板2.接種:劃線培養(yǎng)3.插片:無(wú)菌操作將蓋玻片以大約45度角插入培養(yǎng)基4.培養(yǎng)倒置培養(yǎng)28℃,通常4-6天5.鏡檢FilamentousActinomycetesStagesintheconversionofastreptomycete’s(鏈霉菌)aerialhyphaintospores(conidia)Varioustypesofspore-bearingstructuresinthestreptomycetesFilamentousActinomycetesSeveralspore-bearingstructuresofactinomycetes:Streptomyces浸染法放線菌形態(tài)觀察插片培養(yǎng)(高氏1號(hào)培養(yǎng)基),取片浸染:把蓋玻片上長(zhǎng)有放線菌的部分,放入石碳酸復(fù)紅染液池中浸染0.5-1min染色液:A液:堿性復(fù)紅0.3g,95%乙醇10ml;B液:石碳酸5.0g,蒸餾水95ml。染色時(shí),混合A液及B液,再將混合液稀釋5倍即成。干燥:染色完畢,用吸水紙吸掉蓋玻片上多余的染液,將蓋玻片放于酒精燈火焰上部烘干,注意溫度不宜高,以免蓋玻片碎裂。鏡檢:取一潔凈載玻片,滴入適量蒸餾水,用鑷子將干燥好的蓋玻片放在滴有蒸餾水的地方,有菌的一面朝上,操作中盡量避免氣泡的產(chǎn)生。蓋玻片緊緊地貼附在載玻片上后,切勿隨意移動(dòng),隨即進(jìn)行顯微觀察。印片染色法1.接種培養(yǎng)28℃培養(yǎng)4-7d2.印片:用鑷子取一小塊菌苔,置于載玻片上,取另外一潔凈玻片蓋在菌苔上,輕輕粘一下菌苔表面,使培養(yǎng)物(氣絲、孢子絲、孢子)粘附載玻片中央,過(guò)火焰2-3次固定3.染色:石炭酸復(fù)紅染色1min,水洗4.鏡檢(油鏡).印片法放線菌孢子(100×)印片法放線菌菌絲(100×)印片法放線菌孢子(100×)思考題在用插
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