生物21微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)新選修1的課件

微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)第二課時(shí)——純化大腸桿菌1溫故而知新一、培養(yǎng)基定義成分種類二、無菌技術(shù)方法內(nèi)容消毒滅菌操作空間、操作者的手培養(yǎng)器皿、接種用具、培養(yǎng)基在酒精燈火焰附近操作避免已滅菌的材料用具與周圍物品接觸溫故而知新溫故而知新溫故而知新2粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH）2SO40.4gH2O100mLMgSO49.25gCaCI20.5g①++++-+++②+++-++++③++++++++鞏固檢測鞏固檢測鞏固檢測1、甲、乙、丙是三種微生物，下表①、②、③是用來培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在③中正常生長繁殖；甲能在①中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在②中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是：A、甲乙丙都是異養(yǎng)微生物B、甲乙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物3鞏固檢測鞏固檢測鞏固檢測2、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌、消毒方法依次是：①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線滅菌⑤高壓蒸汽滅菌⑥巴氏消毒法

A、⑤③②①④⑥B、①②③④⑤⑥

C、⑥②③④①⑤D、③④②①⑥⑤4新課：新課：三、純化大腸桿菌實(shí)驗(yàn)?zāi)康模航臃N大腸桿菌于培養(yǎng)基上，經(jīng)過培養(yǎng)使其形成由單個(gè)細(xì)胞繁殖形成的子細(xì)胞群體，即菌落。實(shí)驗(yàn)過程：(知識網(wǎng)絡(luò)）配制培養(yǎng)基接種大腸桿菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（12—24h）結(jié)果分析與評價(jià)計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板調(diào)PH→分裝→包扎菌種保藏平板劃線稀釋涂布平板未接種的培養(yǎng)（對照組）接種的培養(yǎng)（實(shí)驗(yàn)組）培養(yǎng)基配制成功與否？接種操作成功與否？5配制培養(yǎng)基①在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；②右手拿錐形瓶，使錐形瓶的瓶口迅速通過火焰；③左手將培養(yǎng)皿打開一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。④待平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置。倒平板過程總結(jié)：6配制培養(yǎng)基分析：1、培養(yǎng)基高壓蒸汽滅菌后，需冷卻到____℃左右時(shí)，才能倒平板。用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度？_____________________________________________________________2、操作時(shí)錐形瓶口通過酒精燈火焰的目的是：_____________________________________________________________3、將平板倒置的目的是：_________________________________________________________________________________________________________________________4、在倒平板過程中，將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？_____________________________________________________________50感覺錐形瓶的溫度剛剛不燙手，就可以倒平板了防止瓶口微生物污染培養(yǎng)基既可以使培養(yǎng)基表面冷凝的水分更好的揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染不能，因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。7平板劃線接種原理通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。8平板劃線接種灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第一區(qū)域）蘸取菌液灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第二區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第三區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第四區(qū)域）灼燒接種環(huán)冷卻

劃線（第五區(qū)域）灼燒接種環(huán)平板倒置放置培養(yǎng)9平板劃線接種第一區(qū)域第二區(qū)域第三區(qū)域第四區(qū)域第五區(qū)域10平板劃線接種問題2：每次劃線前灼燒接種環(huán)的目的：問題3：劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)的目的：答案：避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)基答案：殺死上次劃線結(jié)束后殘留的菌種答案：及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免污染環(huán)境和操作者。問題1：第一步灼燒接種環(huán)的目的：11稀釋涂布平板接種原理：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋，并將不同稀釋度菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。12稀釋涂布平板接種1、梯度稀釋2、涂布平板13結(jié)果分析與評價(jià)1、培養(yǎng)基制備成功的標(biāo)準(zhǔn)2、接種操作成功的標(biāo)準(zhǔn)如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2天后無菌落生長，說明培養(yǎng)基配制是成功的，否則實(shí)驗(yàn)失敗，需重新配制。如果培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、性狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn)，則說明操作是否和要求的。如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達(dá)到要求，實(shí)驗(yàn)失敗，需分析原因，再次實(shí)驗(yàn)。14菌種的保藏（了解）1、臨時(shí)保藏：適用于頻繁使用的菌種。將菌種接種到固體斜面培養(yǎng)基，在適宜的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管置于4℃的冰箱中保藏2、甘油冷凍管保藏：適用于需長期保存的菌種。在3mL甘油瓶中，裝入1mL甘油滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻，放-20℃的冷凍箱中保藏15本節(jié)內(nèi)容結(jié)束下節(jié)再見！16純化大腸桿菌（重點(diǎn)內(nèi)容）17微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)（知識點(diǎn)總結(jié)）18

；5日均線jch36kcf是知道，不知道就是不知道?！鄙倌陚兒芨吲d把學(xué)堂上夫子的教訓(xùn)搬到這里來用，“有什么不是很知道的！你肚子里有鬼！”“有個(gè)屁鬼！”明蕙二舅舅炸了，“你們這幫小子找死是吧？”“哈呀呀！”少年們大樂，“找的就是你們的鬼！”特高興有個(gè)拔劍決斗的機(jī)會。值班的衙役們望過來了，瞧見兵刃的話，掄鏈子，鎖人，兩邊都鎖上，關(guān)回去，叫他們家里拿錢來贖人，節(jié)下，贖金翻倍，還要備酒菜……“誤會啊誤會??！”明蕙大舅舅冷汗涔涔，“我們，完全不知道五少爺怎么回事兒。我們，就是因?yàn)闆]了家里姑娘，穿個(gè)孝。”“又不是沒了你媽，”少年里還有人嘴巴忒毒，“你穿的哪門子孝！”“你！”明蕙二舅舅要炸了。明蕙大舅舅硬把他壓下去，對著蓄勢待發(fā)的衙役陪笑：“誤會，誤會！”衙役看他這兒沒火苗，就轉(zhuǎn)而盯著少年們。只有一方滋事的話，逮捕單方也不是不可以，這些少年家里，有的還是湊得出幾個(gè)錢的……“誤會?！鄙倌陚兒吆撸⑶液芸焐⑷チ?。衙役們也無趣的回到各自崗位上。這一番折騰，蘇家人已經(jīng)爬到山階的一半了，劉家人看著明蕙大舅舅：這會兒咋辦？來都來了，又不能退回去。她大舅舅道：“再跟?！庇谑怯指先?。兩個(gè)出嫁沒多久的小媳婦，剛從廟里上完香，下階來，經(jīng)過劉家人身邊，看他們一看，笑著咭咭咕咕，儼然也夾著些：“不要臉……逼死了自家姑娘，來訛錢”之類的話。明蕙大舅舅盯著她們，她們像受驚的小母雞似的搖搖擺擺下去了，先前那些潑皮少年們沒走遠(yuǎn)，被她們小母雞一樣又圓又撅的屁股吸引住了，追著她們后頭撩撥幾句風(fēng)話，激起她們咯咯的蠢笑。有個(gè)少年斜起一邊嘴角，向劉家人瞄過來一眼，明蕙大舅舅趕緊低下頭，心里透涼透涼的，像攤得太薄、凝都凝不起來的粥，怎么這么不得勁兒。問蘇家要這點(diǎn)子錢，怎么就這么難呢……山階仄仄向上，一步一聲佛唱，劉家人越走越?jīng)]意思，有的大局觀和團(tuán)結(jié)精神不強(qiáng)的，就悄悄把乞丐似的舊麻衣扯了下來、破白布喪帶子也解下來。再走幾步，就悄悄溜了，過他們的年去。大雄寶殿在望，兩個(gè)大香爐噴著馥郁的香煙，兜售香燭的叫賣聲一發(fā)嘹亮，明蕙大舅舅回頭，看身后稀稀拉拉跟的已經(jīng)不剩幾個(gè)人，嘆了口氣，望望寺內(nèi)。蘇家人早被尼姑殷勤備至的接了進(jìn)去，白胡子