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實(shí)驗(yàn)七平板菌落計(jì)數(shù)法與氧對(duì)微生物的影響(一)、平板菌落計(jì)數(shù)法目的要求學(xué)習(xí)平板菌落計(jì)數(shù)的基本原理和方法?;驹硗ㄟ^(guò)將樣品制成均勻的一系列不同稀釋度的稀釋液(使樣品中的微生物細(xì)胞充分分散,成單個(gè)細(xì)胞存在),再取一定量的稀釋液接種,使其均勻分布于培養(yǎng)皿中特定的選擇性培養(yǎng)基內(nèi),最后根據(jù)在平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)計(jì)算出每克或每毫升樣品中的微生物數(shù)量。實(shí)驗(yàn)器材菌種:大腸桿菌菌懸液培養(yǎng)基:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基儀器或其他用具:1mL無(wú)菌吸管,無(wú)菌平皿,盛有4.5mL無(wú)菌水的試管等。兩種計(jì)數(shù)方法傾注法(本次實(shí)驗(yàn))涂布法10-410-510-6原樣10-110-210-310-410-510-60.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml0.2ml0.2ml0.2ml2.稀釋:放菌液時(shí)吸管尖不要碰到液面,即每一支吸管只接觸一個(gè)稀釋度。3.取樣0.5ml4.倒平板:倒入融化后冷卻至45℃的培養(yǎng)基15ml,置水平位置迅速旋動(dòng)平皿,使培養(yǎng)基與菌液混合均勻。5.培養(yǎng):37℃倒置培養(yǎng)18~24h實(shí)驗(yàn)結(jié)果P95表格計(jì)算每毫升大腸桿菌菌懸液的含菌量。思考題(P95(1)(2)(4))為什么融化后的培養(yǎng)基要冷卻至45℃左右才能倒平板?要使平板菌落計(jì)數(shù)準(zhǔn)確,需要掌握哪幾個(gè)關(guān)鍵?為什么?當(dāng)你的平板上長(zhǎng)出的菌落不是均勻分散的而是集中在一起時(shí),你認(rèn)為問(wèn)題出在哪里??jī)A注法涂布法實(shí)驗(yàn)步驟制備4種菌懸液溶化培養(yǎng)基:100℃水浴中溶化并保溫5~10min。接種:培養(yǎng)基冷卻至45~50℃,以無(wú)菌操作各接入0.1ml的菌懸液,雙手快速搓動(dòng)試管,避免振蕩混入過(guò)多空氣。培養(yǎng):將上述試管置于28℃靜置培養(yǎng)48h后觀察結(jié)果。思考題(P1042.(1)(2))(1)在溶化的培養(yǎng)基中接入菌種后,為何搓動(dòng)試管而不振蕩試管來(lái)使軍中均勻分布于培養(yǎng)基中?(2)解釋不同類
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