神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件

神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病

與

免疫學(xué)檢驗(yàn)神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病

與

免疫學(xué)檢驗(yàn)1神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)肽類激素肽類神經(jīng)遞質(zhì)細(xì)胞因子受體內(nèi)分泌系統(tǒng)免疫系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)肽類激素受體內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)神2一、重癥肌無力

myastheniagravis,MG一、重癥肌無力

myastheniagravis,MG3SynapticcleftAchreceptorsSynapticvesicleCa2+channelCa2+ACh神經(jīng)-肌接頭SynapticcleftAchreceptorsSyn4MG概念胸腺發(fā)育異?；蛭粗颍划a(chǎn)生乙酰膽堿受體抗體，突觸后膜終板膽堿受體遭到破壞，數(shù)量減少；導(dǎo)致肌細(xì)胞動作電位產(chǎn)生障礙。主要臨床表現(xiàn)晨輕幕重的眼瞼下垂、疲勞、虛弱、四肢無力呼吸困難MG概念5SynapticcleftAchreceptorsAChCa2+channelSynapticvesicleCa2+MG(antibody)Lambert-Eatonsyndrome(antibody)AminoglycosideantibioticsBotulinumtoxinMGAchR抗體阻斷神經(jīng)-肌接頭信號的機(jī)制SynapticcleftAchreceptorsACh6MG病因

胸腺異常增生萎縮腫瘤遺傳因素4%家族史單卵雙生36%一致性藥物青霉胺MG環(huán)境因素病毒感染分子模擬AchR結(jié)合新抗原MG病因胸腺異常遺傳因素藥物MG環(huán)境因素7發(fā)病機(jī)制之一——體液免疫應(yīng)答神經(jīng)-肌接頭信號傳導(dǎo)障礙直接阻斷離子通道補(bǔ)體Textinhere加速受體內(nèi)吞和降解Ab-Ag發(fā)病機(jī)制之一——體液免疫應(yīng)答神經(jīng)-肌接頭信號傳導(dǎo)障礙直接8注意：

AchRAb的陽性率與肌無力嚴(yán)重程度無明顯關(guān)系；抗AchR抗體的量在MG患者中變化很大，與疾病的嚴(yán)重程度無明確相關(guān)性；同一患者血清中抗體與疾病的臨床表現(xiàn)相關(guān)，Ab水平降低50%時，臨床表現(xiàn)有顯著改善。注意：9

部分MG患者無AchRAb，提示AchR特異性的CTL介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答的存在；AchRAb的產(chǎn)生必須有AchR特異性CD4+T細(xì)胞參與;T細(xì)胞受體-AchR-MHC-II類分子構(gòu)成了免疫應(yīng)答的基礎(chǔ)。123發(fā)病機(jī)制之二——細(xì)胞免疫應(yīng)答部分MG患者無AchRAb，AchRAb的產(chǎn)生必須有10免疫學(xué)檢查AchR抗體--臨床診斷MG的重要證據(jù)之一。1、免疫沉淀法125I-α–BuTx標(biāo)記AchRγ計數(shù)儀讀數(shù)標(biāo)記肌細(xì)胞抽提物nmol為單位，減去cut-off值后，大于0.5nmol/L，即被認(rèn)為陽性，洗滌捕獲并沉淀AchRAb加入至待檢血清室溫下溫育2h或4℃下過夜免疫學(xué)檢查AchR抗體--臨床診斷MG的重要證據(jù)之一。125112、ELISA法

α-BuTx捕獲AchR，然后檢測待測血清中的AchR抗體。

2、ELISA法12AchR抗體弱陽性BECDA多發(fā)性肌炎遲發(fā)型運(yùn)動障礙原發(fā)性膽汁性肝硬化無MG表現(xiàn)的胸腺瘤患者青霉胺治療RA通常與最終發(fā)展成MG有關(guān)AchR抗體弱陽性BECDA多發(fā)性肌炎遲發(fā)型運(yùn)動障礙原發(fā)13MultipleSclerosis（MS）

多發(fā)性硬化癥MultipleSclerosis（MS）

多發(fā)性硬化癥14二、多發(fā)性硬化

MultipleSclerosis（MS）

定義：是一種病因未明的，以中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性、多灶性、脫髓鞘性病變?yōu)樘卣鞯募膊?。病變部位：脊髓的白質(zhì)傳導(dǎo)束、視神經(jīng)、腦室周圍白質(zhì)、腦干和小腦的病變。發(fā)病情況：15~50歲，女性易患，多數(shù)呈慢性進(jìn)行性加重的趨勢。二、多發(fā)性硬化

MultipleSclerosis（MS15神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件16一、髓鞘的結(jié)構(gòu)組成：由少突膠質(zhì)細(xì)胞形成，主要蛋白質(zhì)為髓鞘堿性蛋白(myelinbasicprotein，MBP)和髓鞘蛋白脂蛋白。功能：輔助神經(jīng)沖動傳導(dǎo)；絕緣、保護(hù)作用。一、髓鞘的結(jié)構(gòu)組成：由少突膠質(zhì)細(xì)胞形成，主要蛋白質(zhì)為髓鞘堿性17神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件18神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件19神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件20神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件21神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件22MS的病因病毒感染遺傳因素環(huán)境因素一種在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，外因作用的結(jié)果MSMS的病因病毒感染遺傳因素環(huán)境因素一種在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，23MS為自身免疫疾病的依據(jù)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤病灶區(qū)細(xì)胞表達(dá)MHC-II類抗原病灶區(qū)免疫活性細(xì)胞分泌CK免疫調(diào)節(jié)藥物可改變疾病活動度MS動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭С肿陨砻庖邔W(xué)說自身免疫疾病CSF中IgG含量增加，呈寡克隆帶MS為自身免疫疾病的依據(jù)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤病灶區(qū)細(xì)胞表達(dá)24實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimentallergicencephalo．myelitis，EAE)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimentallerg25三、發(fā)病機(jī)制MS的確切抗原及免疫活化機(jī)制仍不清楚

(一)

感染因素導(dǎo)致MS的機(jī)制

1、分子模擬 病毒與髓鞘抗原存在共同的抗原表位；被穿過血腦屏障CTL誤攻擊*人類皰疹病毒-6和EB病毒

2、旁路激活 一種是通過炎癥細(xì)胞因子、超抗原和分子識別模式等非TCR依賴旁路激活自身反應(yīng)性T細(xì)胞；另一種是在病毒感染后，導(dǎo)致宿主細(xì)胞被破壞，使自身抗原被釋放出來，被特異性T細(xì)胞識別，導(dǎo)致反應(yīng)性T細(xì)胞被活化。三、發(fā)病機(jī)制MS的確切抗原及免疫活化機(jī)制仍不清楚26（二）MS免疫應(yīng)答反應(yīng)1、CD4+T細(xì)胞急性期CD4+T細(xì)胞增多→IFN-Y分泌增加→病情加重。表達(dá)HLA-DR或DQ分子的人源化小鼠易被誘導(dǎo)成EAE;

修飾的MBL肽類配基誘導(dǎo)交叉反應(yīng)性CD4+Th1細(xì)胞活化，可致MS病情加重。2、CD8+細(xì)胞 少突膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元不能表達(dá)MHC-II類分子，因此只能被CD8+T細(xì)胞識別。在MS患者腦組織中，CD8+記憶性T細(xì)胞寡克隆帶顯著擴(kuò)增，并在CSF和血液中持續(xù)存在相同的CD8+細(xì)胞克隆。在MS患者腦組織中CD8+細(xì)胞比CD4+細(xì)胞更普遍存在。MHC-I類分子能誘導(dǎo)表達(dá)在神經(jīng)元上，病毒特異性CD8+T細(xì)胞可以通過Fas/FasL相互作用直接裂解神經(jīng)元。已經(jīng)確定多個針對MBP、蛋白脂蛋白和髓磷脂相關(guān)糖蛋白的MHC-I類分子限制性髓磷脂表位，并且在MS患者體內(nèi)的CTL對MBP應(yīng)答是增強(qiáng)的。髓磷脂特異性CD8+T細(xì)胞分泌趨化因子（IL-6、IP10）吸引髓磷脂特異性CD4+T細(xì)胞到達(dá)病變部位。（二）MS免疫應(yīng)答反應(yīng)27神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件28神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件29神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件303、B細(xì)胞和抗體1）CSF中Ig增高是MS的最重要和最早期的證據(jù)。

CSF中Ig增高，存在IgG寡克隆帶；血清中不高。與MS病情惡化程度相關(guān)。2）B細(xì)胞的作用：

自身反應(yīng)性T細(xì)胞的APC細(xì)胞并提供協(xié)同刺激分子；募集自身反應(yīng)性T細(xì)胞到達(dá)CNS;MBP抗體的產(chǎn)生和硬化斑塊內(nèi)髓磷脂被破壞是B細(xì)胞參與MS病理過程的最重要體現(xiàn)。3、B細(xì)胞和抗體31二、免疫學(xué)檢查

321腦脊液細(xì)胞數(shù)腦脊液蛋白腦脊液髓磷脂堿性蛋白二、免疫學(xué)檢查

321腦脊液細(xì)胞數(shù)腦脊液蛋白腦脊液髓磷脂堿性32（一）腦脊液細(xì)胞數(shù)

CSF壓力一般正常； 細(xì)胞數(shù)變化不明顯，急性期可見細(xì)胞數(shù)增高，主要表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞的增多，以淋巴細(xì)胞為主。（二）腦脊液蛋白的檢測

1、40%蛋白輕度增高，少有>100mg/dl。70~80%IgG增高，80~90%可見IgG寡克隆帶；

2、二者不具有特異性 神經(jīng)梅毒、腦炎、RA和急性硬化性全腦炎及寄生蟲?。ㄒ唬┠X脊液細(xì)胞數(shù)33（三）腦脊液髓磷脂堿性蛋白的檢測

1、脫髓鞘的程度與MBP的濃度相關(guān)；

2、急性發(fā)作期內(nèi)MBP可一過性增高，2W后可恢復(fù)正常。

3、并非特異性指標(biāo)，腦白質(zhì)營養(yǎng)不良、腦梗死、腦炎和代謝性腦病均可見升高。（三）腦脊液髓磷脂堿性蛋白的檢測34神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件35MRIMRIismoresensitiveshowingwhitematterdisease.OnT-2weightedimages,patchyareaofabnormalwhitematterarefoundmostcommonlyincerebralhemisphereinparaventicularareas;oftenlesionscanbepresentinthecerebellum,brainstem,cervicalandorthoracicspinalcordAreaofdemyelinationincerebralhemisphereMRIMRIismoresensitiveshow36DemyelinationintheCervicalSpinalCordMRIfindingarenotnecessarilydiagnosticDemyelinationintheCervical37重癥肌無力病例 洪某某，女，23歲，大學(xué)生，進(jìn)來感覺全身泛力和易疲勞，甚至梳頭也感覺吃力，不時右眼瞼下垂，上樓梯時幾次跌倒。休息后上述癥狀可緩解。實(shí)驗(yàn)室檢查發(fā)現(xiàn)，血中抗AchR抗體含量明顯增高。重復(fù)刺激運(yùn)動神經(jīng)元時，骨骼肌反映下降。使用新斯的明治療后，肌力恢復(fù)。診斷：重癥肌無力。重癥肌無力病例38神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件39神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病

與

免疫學(xué)檢驗(yàn)神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病

與

免疫學(xué)檢驗(yàn)40神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)肽類激素肽類神經(jīng)遞質(zhì)細(xì)胞因子受體內(nèi)分泌系統(tǒng)免疫系統(tǒng)神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)-內(nèi)分泌-免疫系統(tǒng)網(wǎng)絡(luò)肽類激素受體內(nèi)分泌免疫系統(tǒng)神41一、重癥肌無力

myastheniagravis,MG一、重癥肌無力

myastheniagravis,MG42SynapticcleftAchreceptorsSynapticvesicleCa2+channelCa2+ACh神經(jīng)-肌接頭SynapticcleftAchreceptorsSyn43MG概念胸腺發(fā)育異?；蛭粗?；產(chǎn)生乙酰膽堿受體抗體，突觸后膜終板膽堿受體遭到破壞，數(shù)量減少；導(dǎo)致肌細(xì)胞動作電位產(chǎn)生障礙。主要臨床表現(xiàn)晨輕幕重的眼瞼下垂、疲勞、虛弱、四肢無力呼吸困難MG概念44SynapticcleftAchreceptorsAChCa2+channelSynapticvesicleCa2+MG(antibody)Lambert-Eatonsyndrome(antibody)AminoglycosideantibioticsBotulinumtoxinMGAchR抗體阻斷神經(jīng)-肌接頭信號的機(jī)制SynapticcleftAchreceptorsACh45MG病因

胸腺異常增生萎縮腫瘤遺傳因素4%家族史單卵雙生36%一致性藥物青霉胺MG環(huán)境因素病毒感染分子模擬AchR結(jié)合新抗原MG病因胸腺異常遺傳因素藥物MG環(huán)境因素46發(fā)病機(jī)制之一——體液免疫應(yīng)答神經(jīng)-肌接頭信號傳導(dǎo)障礙直接阻斷離子通道補(bǔ)體Textinhere加速受體內(nèi)吞和降解Ab-Ag發(fā)病機(jī)制之一——體液免疫應(yīng)答神經(jīng)-肌接頭信號傳導(dǎo)障礙直接47注意：

AchRAb的陽性率與肌無力嚴(yán)重程度無明顯關(guān)系；抗AchR抗體的量在MG患者中變化很大，與疾病的嚴(yán)重程度無明確相關(guān)性；同一患者血清中抗體與疾病的臨床表現(xiàn)相關(guān)，Ab水平降低50%時，臨床表現(xiàn)有顯著改善。注意：48

部分MG患者無AchRAb，提示AchR特異性的CTL介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答的存在；AchRAb的產(chǎn)生必須有AchR特異性CD4+T細(xì)胞參與;T細(xì)胞受體-AchR-MHC-II類分子構(gòu)成了免疫應(yīng)答的基礎(chǔ)。123發(fā)病機(jī)制之二——細(xì)胞免疫應(yīng)答部分MG患者無AchRAb，AchRAb的產(chǎn)生必須有49免疫學(xué)檢查AchR抗體--臨床診斷MG的重要證據(jù)之一。1、免疫沉淀法125I-α–BuTx標(biāo)記AchRγ計數(shù)儀讀數(shù)標(biāo)記肌細(xì)胞抽提物nmol為單位，減去cut-off值后，大于0.5nmol/L，即被認(rèn)為陽性，洗滌捕獲并沉淀AchRAb加入至待檢血清室溫下溫育2h或4℃下過夜免疫學(xué)檢查AchR抗體--臨床診斷MG的重要證據(jù)之一。125502、ELISA法

α-BuTx捕獲AchR，然后檢測待測血清中的AchR抗體。

2、ELISA法51AchR抗體弱陽性BECDA多發(fā)性肌炎遲發(fā)型運(yùn)動障礙原發(fā)性膽汁性肝硬化無MG表現(xiàn)的胸腺瘤患者青霉胺治療RA通常與最終發(fā)展成MG有關(guān)AchR抗體弱陽性BECDA多發(fā)性肌炎遲發(fā)型運(yùn)動障礙原發(fā)52MultipleSclerosis（MS）

多發(fā)性硬化癥MultipleSclerosis（MS）

多發(fā)性硬化癥53二、多發(fā)性硬化

MultipleSclerosis（MS）

定義：是一種病因未明的，以中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎性、多灶性、脫髓鞘性病變?yōu)樘卣鞯募膊?。病變部位：脊髓的白質(zhì)傳導(dǎo)束、視神經(jīng)、腦室周圍白質(zhì)、腦干和小腦的病變。發(fā)病情況：15~50歲，女性易患，多數(shù)呈慢性進(jìn)行性加重的趨勢。二、多發(fā)性硬化

MultipleSclerosis（MS54神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件55一、髓鞘的結(jié)構(gòu)組成：由少突膠質(zhì)細(xì)胞形成，主要蛋白質(zhì)為髓鞘堿性蛋白(myelinbasicprotein，MBP)和髓鞘蛋白脂蛋白。功能：輔助神經(jīng)沖動傳導(dǎo)；絕緣、保護(hù)作用。一、髓鞘的結(jié)構(gòu)組成：由少突膠質(zhì)細(xì)胞形成，主要蛋白質(zhì)為髓鞘堿性56神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件57神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件58神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件59神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件60神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件61MS的病因病毒感染遺傳因素環(huán)境因素一種在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，外因作用的結(jié)果MSMS的病因病毒感染遺傳因素環(huán)境因素一種在遺傳易感性的基礎(chǔ)上，62MS為自身免疫疾病的依據(jù)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤病灶區(qū)細(xì)胞表達(dá)MHC-II類抗原病灶區(qū)免疫活性細(xì)胞分泌CK免疫調(diào)節(jié)藥物可改變疾病活動度MS動物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭С肿陨砻庖邔W(xué)說自身免疫疾病CSF中IgG含量增加，呈寡克隆帶MS為自身免疫疾病的依據(jù)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤病灶區(qū)細(xì)胞表達(dá)63實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimentallergicencephalo．myelitis，EAE)實(shí)驗(yàn)性變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎(experimentallerg64三、發(fā)病機(jī)制MS的確切抗原及免疫活化機(jī)制仍不清楚

(一)

感染因素導(dǎo)致MS的機(jī)制

1、分子模擬 病毒與髓鞘抗原存在共同的抗原表位；被穿過血腦屏障CTL誤攻擊*人類皰疹病毒-6和EB病毒

2、旁路激活 一種是通過炎癥細(xì)胞因子、超抗原和分子識別模式等非TCR依賴旁路激活自身反應(yīng)性T細(xì)胞；另一種是在病毒感染后，導(dǎo)致宿主細(xì)胞被破壞，使自身抗原被釋放出來，被特異性T細(xì)胞識別，導(dǎo)致反應(yīng)性T細(xì)胞被活化。三、發(fā)病機(jī)制MS的確切抗原及免疫活化機(jī)制仍不清楚65（二）MS免疫應(yīng)答反應(yīng)1、CD4+T細(xì)胞急性期CD4+T細(xì)胞增多→IFN-Y分泌增加→病情加重。表達(dá)HLA-DR或DQ分子的人源化小鼠易被誘導(dǎo)成EAE;

修飾的MBL肽類配基誘導(dǎo)交叉反應(yīng)性CD4+Th1細(xì)胞活化，可致MS病情加重。2、CD8+細(xì)胞 少突膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元不能表達(dá)MHC-II類分子，因此只能被CD8+T細(xì)胞識別。在MS患者腦組織中，CD8+記憶性T細(xì)胞寡克隆帶顯著擴(kuò)增，并在CSF和血液中持續(xù)存在相同的CD8+細(xì)胞克隆。在MS患者腦組織中CD8+細(xì)胞比CD4+細(xì)胞更普遍存在。MHC-I類分子能誘導(dǎo)表達(dá)在神經(jīng)元上，病毒特異性CD8+T細(xì)胞可以通過Fas/FasL相互作用直接裂解神經(jīng)元。已經(jīng)確定多個針對MBP、蛋白脂蛋白和髓磷脂相關(guān)糖蛋白的MHC-I類分子限制性髓磷脂表位，并且在MS患者體內(nèi)的CTL對MBP應(yīng)答是增強(qiáng)的。髓磷脂特異性CD8+T細(xì)胞分泌趨化因子（IL-6、IP10）吸引髓磷脂特異性CD4+T細(xì)胞到達(dá)病變部位。（二）MS免疫應(yīng)答反應(yīng)66神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件67神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件68神經(jīng)系統(tǒng)免疫性疾病及檢驗(yàn)免疫學(xué)課件693、B細(xì)胞和抗體1）CSF中Ig增高是MS的最重要和最早期的證據(jù)。

CSF中Ig增高，存在IgG寡克隆帶；血清中不高。與MS病情惡化程度相關(guān)。2）B細(xì)胞的作用：

自身反應(yīng)性T細(xì)胞的APC細(xì)胞并提供協(xié)同刺激分子；募集自身反應(yīng)性T細(xì)胞到達(dá)CNS;MBP抗體的產(chǎn)生和硬化斑塊內(nèi)髓磷脂被破壞是B細(xì)胞參與MS病理過程的最重要體現(xiàn)。3、B細(xì)胞和抗體70二、免疫學(xué)檢查

321腦脊液細(xì)胞數(shù)腦脊液蛋白腦脊液髓磷脂堿性蛋白二、免疫學(xué)檢查

321腦脊液細(xì)胞數(shù)腦脊液蛋白腦脊液髓磷脂堿性71（一）腦脊液細(xì)胞數(shù)

CSF壓力一般正常； 細(xì)胞數(shù)變化不明顯，急性期可見細(xì)胞數(shù)增高，主要表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞的增多，以淋巴細(xì)胞為主。（二）腦脊液蛋白的檢測

1、40%蛋白輕度增高，少有>100mg/dl。70~