血細(xì)胞分析儀與臨床應(yīng)用課件

血細(xì)胞自動(dòng)分析與臨床Automatedanalysisofbloodcellsandclinic王佳血細(xì)胞自動(dòng)分析與臨床Automatedanalysiso1傳統(tǒng)的血細(xì)胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費(fèi)時(shí),而且由于多種原因,計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度難以保證.20世紀(jì)50年代末,庫(kù)爾特采用電阻率變化與電子技術(shù)相結(jié)合的方法,發(fā)明了性能比較穩(wěn)定的電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,開(kāi)創(chuàng)了血細(xì)胞分析的新紀(jì)元.傳統(tǒng)的血細(xì)胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費(fèi)時(shí),而且由于2公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司

始創(chuàng)于1935年

Dr.ArnoldO.Beckman庫(kù)爾特電子公司始創(chuàng)于1958年WallaceH.&JosephR.Coulter公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司

始創(chuàng)于1935年

Dr.3庫(kù)爾特先生(1913-1998)“ScienceServingHumanity”(科學(xué)服務(wù)人類(lèi))庫(kù)爾特原理發(fā)明者，早期單克隆抗體研究者直至1998年，曾獲6項(xiàng)美國(guó)科學(xué)榮譽(yù)，及多項(xiàng)發(fā)明專利庫(kù)爾特先生(1913-1998)“ScienceSe4主要服務(wù)對(duì)象

生物研究診斷醫(yī)療大學(xué)研究所生物技術(shù)生化制藥醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室私人實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療所主要服務(wù)對(duì)象生物研究診斷醫(yī)療大學(xué)生物5血細(xì)胞分析儀的發(fā)展史

從庫(kù)爾特公司的發(fā)展史開(kāi)始…1947年，華萊士.庫(kù)爾特先生發(fā)明庫(kù)爾特原理；

“當(dāng)一個(gè)不良導(dǎo)體顆粒，例如血細(xì)胞，通過(guò)兩個(gè)電極之間時(shí)，導(dǎo)致電路的電阻抗發(fā)生變化。”-華萊士.庫(kù)爾特，

1947血細(xì)胞分析儀的發(fā)展史

從庫(kù)爾特公司的發(fā)展史開(kāi)始…1947年，61953年庫(kù)爾特家族研制出全世界第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：ModelA;現(xiàn)在，95%的血細(xì)胞分析儀采用庫(kù)爾特原理；1953年庫(kù)爾特家族研制出全世界第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：Mode7

庫(kù)爾特原理三要素：小孔、負(fù)壓、電極

檢測(cè)：細(xì)胞大小和數(shù)量

負(fù)壓血細(xì)胞懸液外電極內(nèi)電極小孔小孔管小孔電流樣品杯小孔近觀在等滲電解質(zhì)溶液（稀釋液）中，有一個(gè)用于細(xì)胞計(jì)數(shù)的小孔管，其內(nèi)側(cè)充滿了稀釋液，并有一個(gè)內(nèi)電極，其外側(cè)細(xì)胞懸液中有個(gè)外電極，小孔兩側(cè)的電極之間有穩(wěn)定的電流。細(xì)胞為相對(duì)不良導(dǎo)體，其導(dǎo)電性質(zhì)比稀釋液低，當(dāng)有個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔，于瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)脈沖信號(hào)，脈沖的數(shù)量與細(xì)胞的數(shù)量成正比，高度與細(xì)胞體積成正比。脈沖信號(hào)經(jīng)放大，閾值調(diào)節(jié)，甄別，整形后，送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)進(jìn)行處理，得出被測(cè)細(xì)胞的數(shù)量和體積分布直方圖。

庫(kù)爾特原理三要素：小孔、負(fù)壓、電極

檢測(cè)：細(xì)胞大小和8檢測(cè)區(qū)域紅細(xì)胞紅細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理Oscilloscope示波鏡檢測(cè)區(qū)域紅細(xì)胞紅細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理Oscilloscop9檢測(cè)區(qū)域白細(xì)胞白細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理示波鏡檢測(cè)區(qū)域白細(xì)胞白細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理示波鏡10庫(kù)爾特技術(shù)庫(kù)爾特技術(shù)11高頻度分析-直方圖直方圖-X軸：體積（fL）-Y軸：相對(duì)數(shù)量通道劃分RBC直方圖：36-360fLPLT直方圖：2-20fLWBC直方圖：35-450fL高頻度分析-直方圖直方圖通道劃分12脈沖編輯（專利技術(shù)）作用：刪除不規(guī)則脈沖對(duì)體積測(cè)量的影響。脈沖編輯（專利技術(shù)）作用：刪除不規(guī)則脈沖對(duì)體積測(cè)量的影響。13重疊校正（專利技術(shù)）

小孔近觀

作用：糾正因重疊而導(dǎo)致的對(duì)顆粒計(jì)數(shù)和體積測(cè)量的影響。重疊校正（專利技術(shù)）小孔近觀作用14三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)血小板計(jì)數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù)；對(duì)血小板濃度小于67X109/L的標(biāo)本，儀器自動(dòng)延長(zhǎng)1-2個(gè)三次計(jì)數(shù)。三次計(jì)數(shù)：統(tǒng)計(jì)補(bǔ)償；監(jiān)控計(jì)數(shù)過(guò)程的穩(wěn)定性。延長(zhǎng)計(jì)數(shù)：針對(duì)低濃度的標(biāo)本。三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)血小板計(jì)數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù)；15掃流技術(shù)(專利技術(shù))測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞回流示波鏡紅細(xì)胞血小板+-掃流技術(shù)(專利技術(shù))測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞回流示波鏡紅細(xì)胞血小板+-16測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技術(shù)(專利技術(shù))測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技17掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用：防止紅細(xì)胞回流對(duì)血小板計(jì)數(shù)的干擾；防止細(xì)胞再度進(jìn)入感應(yīng)區(qū)被兩次計(jì)數(shù)。掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用：防止紅細(xì)胞回流對(duì)血小板計(jì)數(shù)的干擾；18擬合曲線（專利技術(shù)）在血小板的直方圖上可見(jiàn)兩條曲線：一條是2fl-20fl的原始數(shù)據(jù)曲線;另一條是0fl-70fl的擬合曲線.由最小平方回歸法定義出一條對(duì)數(shù)正態(tài)曲線，即擬合曲線；擬合曲線（專利技術(shù)）在血小板的直方圖上可見(jiàn)兩條曲線：19擬合曲線血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來(lái)自:2fl以下：噪音;細(xì)菌的干擾20fl以上：裂紅細(xì)胞;小紅細(xì)胞;白細(xì)胞的干擾擬合曲線血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來(lái)自:20擬合曲線的作用對(duì)曲線下的面積進(jìn)行積分計(jì)算；將該面積值校準(zhǔn)到參考的PLT計(jì)數(shù)；獲得與參考方法最具相關(guān)性的血小板數(shù)值.在0-70fL范圍的非血小板脈沖被擬合曲線排除于血小板計(jì)數(shù)之外；大大增加了血小板的線性范圍(0-1,500,000)擬合曲線的作用對(duì)曲線下的面積進(jìn)行積分計(jì)算；21燃燒電路（專利技術(shù)）作用：預(yù)防蛋白堆積于計(jì)數(shù)孔；取消小孔的日常保養(yǎng)程序。

燃燒電路（專利技術(shù)）作用：預(yù)防蛋白堆積于計(jì)數(shù)孔；22酶清潔劑（專利配方）操作：每24小時(shí)浸泡0.5小時(shí)。作用：令儀器的流式通道、計(jì)數(shù)池、分血片、和血紅蛋白檢測(cè)室保持潔凈性。圖示：計(jì)數(shù)孔在用CLENZ清潔劑浸泡前后的潔凈度比較。

酶清潔劑（專利配方）操作：每24小時(shí)浸泡0.5小時(shí)。圖示：計(jì)23自我清潔的分血片庫(kù)爾特另一個(gè)免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是具自我清潔功能的分血片。自我清潔的分血片庫(kù)爾特另一個(gè)免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是24庫(kù)爾特CBC分析技術(shù)計(jì)數(shù)和體積分析的技術(shù)脈沖編輯重疊校正三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)高頻度分析血小板分析的技術(shù)掃流技術(shù)擬合曲線三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)燃燒電路酶清潔劑自我清潔的分血片其他技術(shù)庫(kù)爾特CBC分析技術(shù)計(jì)數(shù)和體積分析的技術(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)25白細(xì)胞分類(lèi)原理三分類(lèi)原理：庫(kù)爾特直方圖分類(lèi)五分類(lèi)原理：VCS三維分析原理白細(xì)胞分類(lèi)原理三分類(lèi)原理：庫(kù)爾特直方圖分類(lèi)26從三分類(lèi)到五分類(lèi)三分類(lèi)：淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞五分類(lèi)：淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞從三分類(lèi)到五分類(lèi)三分類(lèi)：五分類(lèi)：27在進(jìn)行白細(xì)胞分析時(shí),,由于白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中除加入一定量的稀釋液外還加入了溶血?jiǎng)?此溶血?jiǎng)┮环矫媸辜t細(xì)胞溶解,另一方面使白細(xì)胞質(zhì)經(jīng)胞膜滲出,胞膜緊裹在細(xì)胞核或存在的顆粒周?chē)?使白細(xì)胞成為”膜包核”.儀器將體積在35-450fl的這種顆粒認(rèn)定為白細(xì)胞,并根據(jù)其體積大小在直方圖上從左至右初步確認(rèn)其相應(yīng)的三個(gè)細(xì)胞群.在進(jìn)行白細(xì)胞分析時(shí),,由于白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中除加入一定量的稀釋液28在正常白細(xì)胞直方圖上,小細(xì)胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在35-90fl,以成熟淋巴細(xì)胞為主要特征細(xì)胞,大細(xì)胞群是位于右側(cè)較低且分布寬的峰,跨越160-450fl,以中性粒細(xì)胞為主要特征細(xì)胞,位于大、小細(xì)胞群之間的較平坦的區(qū)域，分布在90-160fl，是單個(gè)核細(xì)胞，也稱為中間細(xì)胞，以單核細(xì)胞為主要特征細(xì)胞。淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞在正常白細(xì)胞直方圖上,小細(xì)胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在29儀器根據(jù)各細(xì)胞群占總體的比例計(jì)算出相應(yīng)的百分比，從而得到白細(xì)胞三分類(lèi)結(jié)果，如果再與該標(biāo)本的白細(xì)胞總數(shù)相乘，即得到各類(lèi)細(xì)胞的絕對(duì)值。電阻抗法的白細(xì)胞分類(lèi)只是根據(jù)加溶血?jiǎng)┖蟀准?xì)胞體積的大小獲得，由于多種因素可影響白細(xì)胞分類(lèi)的真實(shí)性，因此，準(zhǔn)確的白細(xì)胞分類(lèi)還不能完全脫離手工顯微鏡檢查。儀器根據(jù)各細(xì)胞群占總體的比例計(jì)算出相應(yīng)的百分比，從而得到白細(xì)30白細(xì)胞五項(xiàng)分類(lèi)：VCS技術(shù)分析外周血液中的淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞運(yùn)用VCS技術(shù),對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行多參量分析大小、核形、顆粒特性白細(xì)胞五項(xiàng)分類(lèi)：VCS技術(shù)分析外周血液中的31嗜酸細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板

嗜堿細(xì)胞紅細(xì)胞嗜酸細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板嗜堿細(xì)胞紅細(xì)胞32淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細(xì)胞淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細(xì)胞33V.C.S.三維分析原理運(yùn)用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點(diǎn),對(duì)通過(guò)的單列白細(xì)胞，進(jìn)行逐個(gè)的、同時(shí)的、三重的檢測(cè)，以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。V-低頻波，分析細(xì)胞體積；C-高頻波，分析細(xì)胞核型；S-激光，分析細(xì)胞的顆粒特性。V.C.S.三維分析原理運(yùn)用V、C、S三種探針,在流式通道的34VCS檢測(cè)八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地接受VCS三重檢測(cè)，得到各自的三維座標(biāo)值VCSVCS檢測(cè)八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地接受VCS三重檢測(cè)35增強(qiáng)型流式通道VCS增強(qiáng)型流式通道運(yùn)用三種獨(dú)立的能量探針來(lái)分析細(xì)胞增強(qiáng)型流式通道VCS增強(qiáng)型流式通道運(yùn)用三種獨(dú)立的能量探針來(lái)分36更好的大小測(cè)量方法

0-3

(相對(duì)大小)V是以參考的直流電阻方法檢測(cè)整個(gè)細(xì)胞的體積普通流式方法根據(jù)激光的前向散射估計(jì)細(xì)胞的相對(duì)大小激光VCS

-DC更好的大小測(cè)量方法0-3V是以參考的直流電阻方37更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測(cè)量方法

7-10(復(fù)雜性)RF運(yùn)用類(lèi)似于超聲波的高頻波測(cè)量細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)普通流式方法根據(jù)激光的低角度散射估計(jì)細(xì)胞的復(fù)雜性激光VCS-RF更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測(cè)量方法7-10RF運(yùn)用類(lèi)似于超聲波的38射頻(RF)信號(hào)的問(wèn)題細(xì)胞越大，它發(fā)出射頻信號(hào)所需要的時(shí)間就越長(zhǎng)；因此，細(xì)胞大小對(duì)射頻信號(hào)具有影響；這種影響可以減弱對(duì)LY、MO、和GR的分辨效果。VolumeRF射頻(RF)信號(hào)的問(wèn)題細(xì)胞越大，它發(fā)出射頻信號(hào)所需要的時(shí)間就39將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細(xì)胞體積，可對(duì)射頻信號(hào)作體積補(bǔ)償；使信號(hào)的變化只受細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響；阻光性測(cè)量核的密度和分葉性，使更好地區(qū)分細(xì)胞。VolumeOpacity將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細(xì)胞體積，可對(duì)射頻信號(hào)作體積補(bǔ)償；Vo40高頻傳導(dǎo)信號(hào)大的細(xì)胞嗜中性、嗜酸性、嗜堿性粒細(xì)胞高頻傳導(dǎo)信號(hào)小的細(xì)胞淋巴、單核細(xì)胞高頻傳導(dǎo)（阻光性）高頻傳導(dǎo)信號(hào)大的細(xì)胞高頻傳導(dǎo)信號(hào)小的細(xì)胞高頻傳導(dǎo)（阻光性）419Odeg.激光VCS-LaserS是運(yùn)用一個(gè)寬角度的散射范圍（10-70）來(lái)測(cè)量細(xì)胞的顆粒特性普通流式方法運(yùn)用單角度/側(cè)向激光散射測(cè)量細(xì)胞的顆粒特性更好的顆粒特性測(cè)量方法9Odeg.激光VCS-LaserS是運(yùn)用一個(gè)寬角度的42激光散射信號(hào)大的細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞激光散射信號(hào)小的細(xì)胞淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞激光散射激光散射信號(hào)大的細(xì)胞激光散射信號(hào)小的細(xì)胞激光散射43三維分析技術(shù)將檢測(cè)過(guò)的8,192個(gè)細(xì)胞分布到一個(gè)以V、C、S為三維坐標(biāo)的空間內(nèi)，顯示出細(xì)胞群特征。高智能的計(jì)算機(jī)軟件分析分析細(xì)胞群的位置、相對(duì)密度、輪廓、和大小。三維坐標(biāo)的數(shù)據(jù)分析位點(diǎn)多過(guò)16×106個(gè)。三維分析技術(shù)將檢測(cè)過(guò)的8,192個(gè)細(xì)胞分布到一個(gè)以V、C、S44三維空間的立體表示三維空間的立體表示45VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)接近原態(tài)的白細(xì)胞分析一個(gè)分類(lèi)試劑包ScatterPak雙試劑系統(tǒng)的作用去紅細(xì)胞:紅細(xì)胞溶解劑通過(guò)滲透壓差溶解紅細(xì)胞；保持白細(xì)胞原態(tài):溶解終止液令白細(xì)胞恢復(fù)到“接近原態(tài)”大小。VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)接近原態(tài)的白細(xì)胞分析46接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細(xì)胞進(jìn)入流式通道接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細(xì)胞進(jìn)入流式通道47VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)1流體動(dòng)力聚焦的流式通道單細(xì)胞流在鞘液的包裹下呈最適排列通過(guò)流式通道；將重疊限制到最低限度。VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)1流體動(dòng)力聚焦的流式通道48正常壓力差：標(biāo)本壓力小于鞘流壓力正常壓力差：標(biāo)本壓力小于鞘流壓力49異常壓力差：標(biāo)本與鞘流壓力差過(guò)小異常壓力差：標(biāo)本與鞘流壓力差過(guò)小50異常壓力差：標(biāo)本壓力與鞘流壓力相等異常壓力差：標(biāo)本壓力與鞘流壓力相等512增強(qiáng)型流式通道，VCS直接、同時(shí)、三重檢測(cè)分析細(xì)胞的視角與手工相似VCS，匯集最全面的物理檢測(cè)工具3三維分析的高分辨率(256256256)五分類(lèi)10種異常細(xì)胞2增強(qiáng)型流式通道，VCS直接、同時(shí)、三重檢測(cè)52十種異常細(xì)胞的報(bào)警提示十種異常細(xì)胞的報(bào)警提示53紅細(xì)胞檢測(cè)原理根據(jù)各參數(shù)的檢測(cè)原理不同，大致分為三個(gè)部分1紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血細(xì)胞比容測(cè)定原理與白細(xì)胞檢測(cè)相同，當(dāng)紅細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，形成相應(yīng)大小的脈沖，脈沖的多少代表RBC的數(shù)量，脈沖的高度代表單個(gè)細(xì)胞的體積。脈沖高度疊加，經(jīng)換算即可得血細(xì)胞比積（HCT）。紅細(xì)胞檢測(cè)原理根據(jù)各參數(shù)的檢測(cè)原理不同，大致分為三個(gè)部分542血紅蛋白檢測(cè)原理在稀釋的血液中加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞被溶解，釋放出血紅蛋白(Hb)，后者與溶血濟(jì)中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物，進(jìn)入Hb測(cè)試系統(tǒng)，在特定波長(zhǎng)（一般在530-550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成正比，儀器便可顯示其濃度。2血紅蛋白檢測(cè)原理在稀釋的血液中加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞被溶解，55HGB測(cè)量庫(kù)爾特的HGB測(cè)量方法：改良的氰化高鐵血紅蛋白試劑；溶血?jiǎng)┝罴t細(xì)胞破碎溶解，并將血紅蛋白轉(zhuǎn)換為氰化血紅蛋白一個(gè)具寬光譜的鎢燈光源；一個(gè)紅外濾光器過(guò)濾熱吸收；一個(gè)以525nm為中心的寬幅通帶濾光器；沒(méi)有來(lái)自磺基血紅蛋白的干擾；多重試劑空白。HGB測(cè)量庫(kù)爾特的HGB測(cè)量方法：56窄幅通帶濾光器光吸收波長(zhǎng)窄幅通帶濾光器光波長(zhǎng)57寬幅通帶濾光器波長(zhǎng)光吸收寬幅通帶濾光器波長(zhǎng)光58吸收峰偏移如果吸收峰頻率發(fā)生偏移，窄幅通帶濾光器可能會(huì)漏掉曲線的大部分；寬幅通帶濾光器對(duì)吸收峰偏移現(xiàn)象會(huì)有所補(bǔ)償。光吸收光吸收波長(zhǎng)吸收峰偏移如果吸收峰頻率發(fā)生偏移，窄幅通帶濾光器可能會(huì)漏掉曲593血小板檢測(cè)原理隨紅細(xì)胞一起在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)不同的域值，計(jì)算機(jī)分別給出血小板與紅細(xì)胞的數(shù)目。3血小板檢測(cè)原理隨紅細(xì)胞一起在一個(gè)系統(tǒng)中進(jìn)行檢測(cè)，根據(jù)不同60血細(xì)胞分析儀

檢測(cè)參數(shù)的臨床意義白細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義

1生理性增多主要見(jiàn)于初生兒，妊娠期與分娩時(shí)，運(yùn)動(dòng)，疼痛和情緒變化，體力勞動(dòng)，冷熱水浴，日光或紫外線照射等以及日間變化。血細(xì)胞分析儀

檢測(cè)參數(shù)的臨床意義白細(xì)胞計(jì)數(shù)的臨床意義61病理性增多

急性感染（化膿性感染）嚴(yán)重組織損傷或大量血細(xì)胞破壞（大手術(shù)）急性大出血（脾破裂，宮外孕輸卵管破裂）急性中毒（安眠藥，敵敵畏）腫瘤性增多（白血?。?/p>

病理性增多62數(shù)量減少革蘭陰性桿菌或病毒感染某些血液?。ㄔ僬希┞岳怼⒒瘬p傷（電離輻射，長(zhǎng)期服用氯霉素）自身免疫性疾病（SLE）因各種原因所致的脾功能亢進(jìn)（肝硬化門(mén)脈高壓癥）數(shù)量減少63紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與Hb測(cè)定的臨床意義1增多（1）相對(duì)性增多劇烈嘔吐，嚴(yán)重腹瀉，大面積燒傷，大量出汗，多尿和水的攝入量顯著不足的患者。（2）絕對(duì)性增多常見(jiàn)于繼發(fā)性增多：慢性肺源性心臟病，發(fā)紺性先天性心臟病，慢性一氧化碳中毒，登山病等。（3）真性紅細(xì)胞增多癥面色磚紅，肝脾腫大為特征，紅細(xì)胞可達(dá)（7-10）×1012/L紅細(xì)胞計(jì)數(shù)與Hb測(cè)定的臨床意義1增多642紅細(xì)胞減少（1）生理性貧血妊娠期婦女，3個(gè)月嬰兒至15歲的兒童，老年人。（2）病理性減少再障，MDS，缺鐵貧等

2紅細(xì)胞減少65血小板計(jì)數(shù)的臨床意義1血小板的減少（1）生成減少造血功能受到損害如再障、急性白血病。（2）破壞亢進(jìn)原發(fā)性血小板減少性紫癜、脾功能亢進(jìn)癥。（3）消耗過(guò)多彌散性血管內(nèi)凝血，血栓性血小板減少性紫癜等。血小板計(jì)數(shù)的臨床意義1血小板的減少662血小板增多（1）一過(guò)性增多常見(jiàn)于急性大出血及溶血之后。（2）持續(xù)性增多見(jiàn)于真紅，出血性血小板增多癥。（3）慢粒，多發(fā)性骨髓瘤及許多惡性腫瘤的早期?？梢?jiàn)于血小板增多。2血小板增多67檢驗(yàn)報(bào)告中報(bào)警提示一覽表檢驗(yàn)報(bào)告中報(bào)警提示一覽表68ＴＨＡＮＫＹＯＵ?。裕龋粒危耍伲希?！69血細(xì)胞自動(dòng)分析與臨床Automatedanalysisofbloodcellsandclinic王佳血細(xì)胞自動(dòng)分析與臨床Automatedanalysiso70傳統(tǒng)的血細(xì)胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費(fèi)時(shí),而且由于多種原因,計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性和精密度難以保證.20世紀(jì)50年代末,庫(kù)爾特采用電阻率變化與電子技術(shù)相結(jié)合的方法,發(fā)明了性能比較穩(wěn)定的電阻抗法血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,開(kāi)創(chuàng)了血細(xì)胞分析的新紀(jì)元.傳統(tǒng)的血細(xì)胞檢查完全采用手工方法,不僅操作繁瑣費(fèi)時(shí),而且由于71公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司

始創(chuàng)于1935年

Dr.ArnoldO.Beckman庫(kù)爾特電子公司始創(chuàng)于1958年WallaceH.&JosephR.Coulter公司創(chuàng)辦人貝克曼儀器公司

始創(chuàng)于1935年

Dr.72庫(kù)爾特先生(1913-1998)“ScienceServingHumanity”(科學(xué)服務(wù)人類(lèi))庫(kù)爾特原理發(fā)明者，早期單克隆抗體研究者直至1998年，曾獲6項(xiàng)美國(guó)科學(xué)榮譽(yù)，及多項(xiàng)發(fā)明專利庫(kù)爾特先生(1913-1998)“ScienceSe73主要服務(wù)對(duì)象

生物研究診斷醫(yī)療大學(xué)研究所生物技術(shù)生化制藥醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室私人實(shí)驗(yàn)室醫(yī)療所主要服務(wù)對(duì)象生物研究診斷醫(yī)療大學(xué)生物74血細(xì)胞分析儀的發(fā)展史

從庫(kù)爾特公司的發(fā)展史開(kāi)始…1947年，華萊士.庫(kù)爾特先生發(fā)明庫(kù)爾特原理；

“當(dāng)一個(gè)不良導(dǎo)體顆粒，例如血細(xì)胞，通過(guò)兩個(gè)電極之間時(shí)，導(dǎo)致電路的電阻抗發(fā)生變化?！?華萊士.庫(kù)爾特，

1947血細(xì)胞分析儀的發(fā)展史

從庫(kù)爾特公司的發(fā)展史開(kāi)始…1947年，751953年庫(kù)爾特家族研制出全世界第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：ModelA;現(xiàn)在，95%的血細(xì)胞分析儀采用庫(kù)爾特原理；1953年庫(kù)爾特家族研制出全世界第一臺(tái)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀：Mode76

庫(kù)爾特原理三要素：小孔、負(fù)壓、電極

檢測(cè)：細(xì)胞大小和數(shù)量

負(fù)壓血細(xì)胞懸液外電極內(nèi)電極小孔小孔管小孔電流樣品杯小孔近觀在等滲電解質(zhì)溶液（稀釋液）中，有一個(gè)用于細(xì)胞計(jì)數(shù)的小孔管，其內(nèi)側(cè)充滿了稀釋液，并有一個(gè)內(nèi)電極，其外側(cè)細(xì)胞懸液中有個(gè)外電極，小孔兩側(cè)的電極之間有穩(wěn)定的電流。細(xì)胞為相對(duì)不良導(dǎo)體，其導(dǎo)電性質(zhì)比稀釋液低，當(dāng)有個(gè)細(xì)胞通過(guò)小孔，于瞬間引起了電壓變化而出現(xiàn)脈沖信號(hào)，脈沖的數(shù)量與細(xì)胞的數(shù)量成正比，高度與細(xì)胞體積成正比。脈沖信號(hào)經(jīng)放大，閾值調(diào)節(jié)，甄別，整形后，送入計(jì)數(shù)系統(tǒng)進(jìn)行處理，得出被測(cè)細(xì)胞的數(shù)量和體積分布直方圖。

庫(kù)爾特原理三要素：小孔、負(fù)壓、電極

檢測(cè)：細(xì)胞大小和77檢測(cè)區(qū)域紅細(xì)胞紅細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理Oscilloscope示波鏡檢測(cè)區(qū)域紅細(xì)胞紅細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理Oscilloscop78檢測(cè)區(qū)域白細(xì)胞白細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理示波鏡檢測(cè)區(qū)域白細(xì)胞白細(xì)胞通過(guò)小孔庫(kù)爾特原理示波鏡79庫(kù)爾特技術(shù)庫(kù)爾特技術(shù)80高頻度分析-直方圖直方圖-X軸：體積（fL）-Y軸：相對(duì)數(shù)量通道劃分RBC直方圖：36-360fLPLT直方圖：2-20fLWBC直方圖：35-450fL高頻度分析-直方圖直方圖通道劃分81脈沖編輯（專利技術(shù)）作用：刪除不規(guī)則脈沖對(duì)體積測(cè)量的影響。脈沖編輯（專利技術(shù)）作用：刪除不規(guī)則脈沖對(duì)體積測(cè)量的影響。82重疊校正（專利技術(shù)）

小孔近觀

作用：糾正因重疊而導(dǎo)致的對(duì)顆粒計(jì)數(shù)和體積測(cè)量的影響。重疊校正（專利技術(shù)）小孔近觀作用83三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)血小板計(jì)數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù)；對(duì)血小板濃度小于67X109/L的標(biāo)本，儀器自動(dòng)延長(zhǎng)1-2個(gè)三次計(jì)數(shù)。三次計(jì)數(shù)：統(tǒng)計(jì)補(bǔ)償；監(jiān)控計(jì)數(shù)過(guò)程的穩(wěn)定性。延長(zhǎng)計(jì)數(shù)：針對(duì)低濃度的標(biāo)本。三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)血小板計(jì)數(shù)以三次擬合的均值為依據(jù)；84掃流技術(shù)(專利技術(shù))測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞回流示波鏡紅細(xì)胞血小板+-掃流技術(shù)(專利技術(shù))測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞回流示波鏡紅細(xì)胞血小板+-85測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技術(shù)(專利技術(shù))測(cè)試區(qū)域紅細(xì)胞被掃流液沖走示波鏡RBCPLT+-掃流液掃流技86掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用：防止紅細(xì)胞回流對(duì)血小板計(jì)數(shù)的干擾；防止細(xì)胞再度進(jìn)入感應(yīng)區(qū)被兩次計(jì)數(shù)。掃流技術(shù)(專利技術(shù))作用：防止紅細(xì)胞回流對(duì)血小板計(jì)數(shù)的干擾；87擬合曲線（專利技術(shù)）在血小板的直方圖上可見(jiàn)兩條曲線：一條是2fl-20fl的原始數(shù)據(jù)曲線;另一條是0fl-70fl的擬合曲線.由最小平方回歸法定義出一條對(duì)數(shù)正態(tài)曲線，即擬合曲線；擬合曲線（專利技術(shù)）在血小板的直方圖上可見(jiàn)兩條曲線：88擬合曲線血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來(lái)自:2fl以下：噪音;細(xì)菌的干擾20fl以上：裂紅細(xì)胞;小紅細(xì)胞;白細(xì)胞的干擾擬合曲線血小板計(jì)數(shù)的干擾主要來(lái)自:89擬合曲線的作用對(duì)曲線下的面積進(jìn)行積分計(jì)算；將該面積值校準(zhǔn)到參考的PLT計(jì)數(shù)；獲得與參考方法最具相關(guān)性的血小板數(shù)值.在0-70fL范圍的非血小板脈沖被擬合曲線排除于血小板計(jì)數(shù)之外；大大增加了血小板的線性范圍(0-1,500,000)擬合曲線的作用對(duì)曲線下的面積進(jìn)行積分計(jì)算；90燃燒電路（專利技術(shù)）作用：預(yù)防蛋白堆積于計(jì)數(shù)孔；取消小孔的日常保養(yǎng)程序。

燃燒電路（專利技術(shù)）作用：預(yù)防蛋白堆積于計(jì)數(shù)孔；91酶清潔劑（專利配方）操作：每24小時(shí)浸泡0.5小時(shí)。作用：令儀器的流式通道、計(jì)數(shù)池、分血片、和血紅蛋白檢測(cè)室保持潔凈性。圖示：計(jì)數(shù)孔在用CLENZ清潔劑浸泡前后的潔凈度比較。

酶清潔劑（專利配方）操作：每24小時(shí)浸泡0.5小時(shí)。圖示：計(jì)92自我清潔的分血片庫(kù)爾特另一個(gè)免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是具自我清潔功能的分血片。自我清潔的分血片庫(kù)爾特另一個(gè)免日常保養(yǎng)的關(guān)鍵部件是專利的、是93庫(kù)爾特CBC分析技術(shù)計(jì)數(shù)和體積分析的技術(shù)脈沖編輯重疊校正三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)高頻度分析血小板分析的技術(shù)掃流技術(shù)擬合曲線三次計(jì)數(shù)/延長(zhǎng)計(jì)數(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)燃燒電路酶清潔劑自我清潔的分血片其他技術(shù)庫(kù)爾特CBC分析技術(shù)計(jì)數(shù)和體積分析的技術(shù)免日常保養(yǎng)的技術(shù)94白細(xì)胞分類(lèi)原理三分類(lèi)原理：庫(kù)爾特直方圖分類(lèi)五分類(lèi)原理：VCS三維分析原理白細(xì)胞分類(lèi)原理三分類(lèi)原理：庫(kù)爾特直方圖分類(lèi)95從三分類(lèi)到五分類(lèi)三分類(lèi)：淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞五分類(lèi)：淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸細(xì)胞嗜堿細(xì)胞從三分類(lèi)到五分類(lèi)三分類(lèi)：五分類(lèi)：96在進(jìn)行白細(xì)胞分析時(shí),,由于白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中除加入一定量的稀釋液外還加入了溶血?jiǎng)?此溶血?jiǎng)┮环矫媸辜t細(xì)胞溶解,另一方面使白細(xì)胞質(zhì)經(jīng)胞膜滲出,胞膜緊裹在細(xì)胞核或存在的顆粒周?chē)?使白細(xì)胞成為”膜包核”.儀器將體積在35-450fl的這種顆粒認(rèn)定為白細(xì)胞,并根據(jù)其體積大小在直方圖上從左至右初步確認(rèn)其相應(yīng)的三個(gè)細(xì)胞群.在進(jìn)行白細(xì)胞分析時(shí),,由于白細(xì)胞計(jì)數(shù)池中除加入一定量的稀釋液97在正常白細(xì)胞直方圖上,小細(xì)胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在35-90fl,以成熟淋巴細(xì)胞為主要特征細(xì)胞,大細(xì)胞群是位于右側(cè)較低且分布寬的峰,跨越160-450fl,以中性粒細(xì)胞為主要特征細(xì)胞,位于大、小細(xì)胞群之間的較平坦的區(qū)域，分布在90-160fl，是單個(gè)核細(xì)胞，也稱為中間細(xì)胞，以單核細(xì)胞為主要特征細(xì)胞。淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞粒細(xì)胞在正常白細(xì)胞直方圖上,小細(xì)胞群是位于左側(cè)又高又陡的峰,分布在98儀器根據(jù)各細(xì)胞群占總體的比例計(jì)算出相應(yīng)的百分比，從而得到白細(xì)胞三分類(lèi)結(jié)果，如果再與該標(biāo)本的白細(xì)胞總數(shù)相乘，即得到各類(lèi)細(xì)胞的絕對(duì)值。電阻抗法的白細(xì)胞分類(lèi)只是根據(jù)加溶血?jiǎng)┖蟀准?xì)胞體積的大小獲得，由于多種因素可影響白細(xì)胞分類(lèi)的真實(shí)性，因此，準(zhǔn)確的白細(xì)胞分類(lèi)還不能完全脫離手工顯微鏡檢查。儀器根據(jù)各細(xì)胞群占總體的比例計(jì)算出相應(yīng)的百分比，從而得到白細(xì)99白細(xì)胞五項(xiàng)分類(lèi)：VCS技術(shù)分析外周血液中的淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞嗜堿性粒細(xì)胞運(yùn)用VCS技術(shù),對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行多參量分析大小、核形、顆粒特性白細(xì)胞五項(xiàng)分類(lèi)：VCS技術(shù)分析外周血液中的100嗜酸細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板

嗜堿細(xì)胞紅細(xì)胞嗜酸細(xì)胞淋巴細(xì)胞單核細(xì)胞中性粒細(xì)胞血小板嗜堿細(xì)胞紅細(xì)胞101淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細(xì)胞淋巴嗜堿單核嗜酸中性粒細(xì)胞102V.C.S.三維分析原理運(yùn)用V、C、S三種探針,在流式通道的某一位點(diǎn),對(duì)通過(guò)的單列白細(xì)胞，進(jìn)行逐個(gè)的、同時(shí)的、三重的檢測(cè)，以及三維分析,以確定其亞群性質(zhì)。V-低頻波，分析細(xì)胞體積；C-高頻波，分析細(xì)胞核型；S-激光，分析細(xì)胞的顆粒特性。V.C.S.三維分析原理運(yùn)用V、C、S三種探針,在流式通道的103VCS檢測(cè)八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地接受VCS三重檢測(cè)，得到各自的三維座標(biāo)值VCSVCS檢測(cè)八千多個(gè)白細(xì)胞逐個(gè)、直接、同時(shí)地接受VCS三重檢測(cè)104增強(qiáng)型流式通道VCS增強(qiáng)型流式通道運(yùn)用三種獨(dú)立的能量探針來(lái)分析細(xì)胞增強(qiáng)型流式通道VCS增強(qiáng)型流式通道運(yùn)用三種獨(dú)立的能量探針來(lái)分105更好的大小測(cè)量方法

0-3

(相對(duì)大小)V是以參考的直流電阻方法檢測(cè)整個(gè)細(xì)胞的體積普通流式方法根據(jù)激光的前向散射估計(jì)細(xì)胞的相對(duì)大小激光VCS

-DC更好的大小測(cè)量方法0-3V是以參考的直流電阻方106更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測(cè)量方法

7-10(復(fù)雜性)RF運(yùn)用類(lèi)似于超聲波的高頻波測(cè)量細(xì)胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)普通流式方法根據(jù)激光的低角度散射估計(jì)細(xì)胞的復(fù)雜性激光VCS-RF更好的內(nèi)部結(jié)構(gòu)測(cè)量方法7-10RF運(yùn)用類(lèi)似于超聲波的107射頻(RF)信號(hào)的問(wèn)題細(xì)胞越大，它發(fā)出射頻信號(hào)所需要的時(shí)間就越長(zhǎng)；因此，細(xì)胞大小對(duì)射頻信號(hào)具有影響；這種影響可以減弱對(duì)LY、MO、和GR的分辨效果。VolumeRF射頻(RF)信號(hào)的問(wèn)題細(xì)胞越大，它發(fā)出射頻信號(hào)所需要的時(shí)間就108將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細(xì)胞體積，可對(duì)射頻信號(hào)作體積補(bǔ)償；使信號(hào)的變化只受細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的影響；阻光性測(cè)量核的密度和分葉性，使更好地區(qū)分細(xì)胞。VolumeOpacity將射頻轉(zhuǎn)換為阻光性已知細(xì)胞體積，可對(duì)射頻信號(hào)作體積補(bǔ)償；Vo109高頻傳導(dǎo)信號(hào)大的細(xì)胞嗜中性、嗜酸性、嗜堿性粒細(xì)胞高頻傳導(dǎo)信號(hào)小的細(xì)胞淋巴、單核細(xì)胞高頻傳導(dǎo)（阻光性）高頻傳導(dǎo)信號(hào)大的細(xì)胞高頻傳導(dǎo)信號(hào)小的細(xì)胞高頻傳導(dǎo)（阻光性）1109Odeg.激光VCS-LaserS是運(yùn)用一個(gè)寬角度的散射范圍（10-70）來(lái)測(cè)量細(xì)胞的顆粒特性普通流式方法運(yùn)用單角度/側(cè)向激光散射測(cè)量細(xì)胞的顆粒特性更好的顆粒特性測(cè)量方法9Odeg.激光VCS-LaserS是運(yùn)用一個(gè)寬角度的111激光散射信號(hào)大的細(xì)胞嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞激光散射信號(hào)小的細(xì)胞淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞激光散射激光散射信號(hào)大的細(xì)胞激光散射信號(hào)小的細(xì)胞激光散射112三維分析技術(shù)將檢測(cè)過(guò)的8,192個(gè)細(xì)胞分布到一個(gè)以V、C、S為三維坐標(biāo)的空間內(nèi)，顯示出細(xì)胞群特征。高智能的計(jì)算機(jī)軟件分析分析細(xì)胞群的位置、相對(duì)密度、輪廓、和大小。三維坐標(biāo)的數(shù)據(jù)分析位點(diǎn)多過(guò)16×106個(gè)。三維分析技術(shù)將檢測(cè)過(guò)的8,192個(gè)細(xì)胞分布到一個(gè)以V、C、S113三維空間的立體表示三維空間的立體表示114VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)接近原態(tài)的白細(xì)胞分析一個(gè)分類(lèi)試劑包ScatterPak雙試劑系統(tǒng)的作用去紅細(xì)胞:紅細(xì)胞溶解劑通過(guò)滲透壓差溶解紅細(xì)胞；保持白細(xì)胞原態(tài):溶解終止液令白細(xì)胞恢復(fù)到“接近原態(tài)”大小。VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)接近原態(tài)的白細(xì)胞分析115接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細(xì)胞進(jìn)入流式通道接近原態(tài)的WBC分析接近原態(tài)的白細(xì)胞進(jìn)入流式通道116VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)1流體動(dòng)力聚焦的流式通道單細(xì)胞流在鞘液的包裹下呈最適排列通過(guò)流式通道；將重疊限制到最低限度。VCS三維分析的技術(shù)特點(diǎn)1流體動(dòng)力聚焦的流式通道117正常壓力差：標(biāo)本壓力小于鞘流壓力正常壓力差：標(biāo)本壓力小于鞘流壓力118異常壓力差：標(biāo)本與鞘流壓力差過(guò)小異常壓力差：標(biāo)本與鞘流壓力差過(guò)小119異常壓力差：標(biāo)本壓力與鞘流壓力相等異常壓力差：標(biāo)本壓力與鞘流壓力相等1202增強(qiáng)型流式通道，VCS直接、同時(shí)、三重檢測(cè)分析細(xì)胞的視角與手工相似VCS，匯集最全面的物理檢測(cè)工具3三維分析的高分辨率(256256256)五分類(lèi)10種異常細(xì)胞2增強(qiáng)型流式通道，VCS直接、同時(shí)、三重檢測(cè)121十種異常細(xì)胞的報(bào)警提示十種異常細(xì)胞的報(bào)警提示122紅細(xì)胞檢測(cè)原理根據(jù)各參數(shù)的檢測(cè)原理不同，大致分為三個(gè)部分1紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血細(xì)胞比容測(cè)定原理與白細(xì)胞檢測(cè)相同，當(dāng)紅細(xì)胞通過(guò)小孔時(shí)，形成相應(yīng)大小的脈沖，脈沖的多少代表RBC的數(shù)量，脈沖的高度代表單個(gè)細(xì)胞的體積。脈沖高度疊加，經(jīng)換算即可得血細(xì)胞比積（HCT）。紅細(xì)胞檢測(cè)原理根據(jù)各參數(shù)的檢測(cè)原理不同，大致分為三個(gè)部分1232血紅蛋白檢測(cè)原理在稀釋的血液中加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞被溶解，釋放出血紅蛋白(Hb)，后者與溶血濟(jì)中有關(guān)成分結(jié)合形成Hb衍生物，進(jìn)入Hb測(cè)試系統(tǒng)，在特定波長(zhǎng)（一般在530-550nm）下比色，吸光度的變化與液體中Hb含量成正比，