重醫(yī)大遺傳優(yōu)生學教案07細胞遺傳學技術

教案用紙（首頁）第9次課授課時間第9周教案完成時間學科遺傳優(yōu)生學年級專業(yè)層次五年制生殖醫(yī)學本科教師職稱授課方式講課4學時課題細胞遺傳學技術基本教材或主要參考書《遺傳優(yōu)生學》教學目的與要求：掌握染色體病診斷的細胞遺傳學方法、原理及應用。熟悉各種顯帶技術的臨床應用。了解酶、蛋白質和代謝物檢測。了解分子遺傳學研究方法及臨床應用。教學重點、難點：1、外周血細胞染色體制備技術的臨床應用。2、骨髓細胞染色體直接制備及臨床應用。3、羊水細胞染色體制備及其原理和臨床應用。4、絨毛細胞染色體制備及其原理和臨床應用。5、G、C顯帶及Ag-NOR帶型特點及其臨床應用。大體進程及教學方法：第一節(jié)課：細胞體外培養(yǎng)的基本條件第二節(jié)課：外周血細胞染色體制備技術的臨床應用。第三節(jié)課：羊水細胞染色體制備及其原理和臨床應用。絨毛細胞染色體制備及其原理和臨床應用。第四節(jié)課：絨毛細胞染色體制備及其原理和臨床應用。G、C顯帶及Ag-NOR帶型特點及其臨床應用。教學方式：實施情況：已按教案的計劃和進度執(zhí)行。

授課教案用紙（續(xù)頁）基本內容輔助手段和時間分配細胞遺傳學技術細胞體外培養(yǎng)的基本條件?溫度?氣體和氫離子濃度?基本營養(yǎng)物質?滲透壓?生長刺激因子?無菌一、染色體制備技術（一）、外周血淋巴細胞培養(yǎng)制備染色體1、原理2、方法（1）培養(yǎng)基制備RPMI164080%小牛血清20%PHA（植物血球凝集素）0.5mg/ml肝素520u/ml雙抗（青、鏈霉素）各100iu/ml（2）接種全血細胞0.3—0.5ml/5ml培養(yǎng)基（3）細胞培養(yǎng)37℃72小時（4）秋水仙素處理終濃度0.1～0.15μg/ml（5）收獲細胞（制片）收集→低滲→預固定→固定→滴片→染色→鏡檢3、應用染色體病診斷（二）、骨髓細胞直接制備染色體1、原理骨髓是高等動物的造血器官，細胞增殖旺盛，利用骨髓中本身處于分裂狀態(tài)的細胞可進行染色體制備。2、方法取骨髓培養(yǎng)制備3、應用血液性疾患骨髓染色體分析射線接觸人員的骨髓染色體檢查（三）、羊水細胞培養(yǎng)制備染色體1、原理妊娠期羊水中含有大量處于分裂狀態(tài)的胎兒脫落細胞，收集這些細胞進行體外培養(yǎng)可制備染色體標本。2、方法（1）羊膜穿刺術抽取羊水妊娠16～20周（2）體外長期培養(yǎng)（3）制備染色體3、應用染色體病患兒的產前診斷（四）、絨毛細胞染色體制備技術1、原理絨毛膜是受精卵有絲分裂的衍生物，其本身處于旺盛分裂狀態(tài)。吸取一定量的絨毛便可用于染色體制備達到早期產前診斷胎兒染色體病的目的。2、方法（1）絨毛吸取術吸取絨毛孕8～10周（2）體外培養(yǎng)（3）染色體制備3、應用早期產前診斷染色體病患兒二、染色體