一種子宮癌篩查的新方法課件

一種子宮癌篩查的新方法(fāngfǎ)溫鑫編寫第一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法惡性腫瘤的形成(xíngchéng)過程前致癌物終致癌物DNA損傷(sǔnshāng)基因(jīyīn)突變癌前病變惡性腫瘤活化解毒凋亡增生修復(fù)損傷致癌因素第二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法健康疾病主觀(zhǔguān)感覺客觀(kèguān)指標(biāo)健康(jiànkāng)指標(biāo)疾病指標(biāo)

暴露因素┏━━━━┳━━━━━╋━━━━━┳━━━━┓

健康態(tài)←→潛在疾病態(tài)←→臨界疾病態(tài)←→亞臨床態(tài)←→臨床態(tài)┗━━━━┻━━━━━╋━━━━━┻━━━━┛機(jī)體易感性因素

健康－疾病連續(xù)帶示意圖（health-diseasecontinuum，HDC）亞健康態(tài)←→潛在疾病態(tài)←→健康態(tài)←→臨床態(tài)亞臨床態(tài)←→臨界疾病態(tài)←→第三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法“冰山(bīngshān)”現(xiàn)象患者(huànzhě)亞臨床(línchuánɡ)者健康者

“海平面”

第四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

子宮癌是指發(fā)生在子宮陰道(yīndào)部及宮頸管的惡性腫瘤。最常見的子宮癌：

【宮頸癌】

【子宮內(nèi)膜癌】

【絨毛膜上皮癌】第五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

子宮癌系列

宮頸癌

子宮內(nèi)膜癌

絨毛膜上皮癌

浸潤性

鱗狀細(xì)胞癌

浸潤性宮頸腺癌

微小浸潤癌

腺鱗癌

透明細(xì)胞癌

疣狀癌

梭形細(xì)胞癌

其它少見宮頸癌

腺癌

腺癌伴鱗狀上皮化生

透明癌腫瘤細(xì)胞癌

漿液性乳頭樣腺癌

子宮癌分類第六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

宮頸癌

(cervicalcancer)第八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一，發(fā)病原因目前尚不清楚，早婚、早育、多產(chǎn)及性生活紊亂的婦女有較高的患病率。病毒或真菌感染如單純皰疹病毒Ⅱ型、人乳頭瘤病毒、人巨細(xì)胞病毒以及真菌感染可能與宮頸癌的發(fā)生有關(guān)。

初期沒有任何癥狀，后期可出現(xiàn)異常陰道流血。目前治療方案以手術(shù)(shǒushù)和放射治療為主，但中晚期患者治愈率很低。第十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

宮頸癌是由人類乳頭瘤病毒（HumanPapillomavirus，簡稱HPV）引起的，HPV病毒可直接通過皮膚接觸傳播，有十幾年的潛伏期，故初期沒有(méiyǒu)任何癥狀。宮頸癌可防可測，按時進(jìn)行宮頸癌篩查就能有效避免不幸發(fā)生。第十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法子宮(zǐgōng)內(nèi)膜癌

(carcinomaoftheendometrium)第十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

子宮(zǐgōng)內(nèi)膜癌又稱為子宮(zǐgōng)體癌，是婦科常見的惡性腫瘤，僅次于子宮(zǐgōng)頸癌。子宮(zǐgōng)內(nèi)膜癌患者多為老年婦女，絕經(jīng)期延遲，或月經(jīng)不規(guī)則；常為不孕或產(chǎn)次不多，合并肥胖、高血壓、糖尿??；絕經(jīng)后又有不規(guī)則陰道流血或排液臭。第十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

子宮內(nèi)膜癌的真正發(fā)病原因迄今不明，但其發(fā)病危險因素有：1、肥胖、糖尿病與高血壓三者并存(bìnɡcún)于子宮內(nèi)膜癌患者，稱為“宮內(nèi)膜的三聯(lián)征”或“宮內(nèi)膜癌綜合征”。2、月經(jīng)失調(diào)宮內(nèi)膜癌患者月經(jīng)紊亂、量多者，比正常婦女高3倍。3、初潮早與絕經(jīng)遲12歲以前比12歲以后初潮者，宮內(nèi)膜癌的發(fā)生率多60%。宮內(nèi)膜癌的絕輕年齡較正常婦女遲6年。第十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法4、孕產(chǎn)次：宮內(nèi)膜癌發(fā)生于多產(chǎn)、未產(chǎn)、不孕癥者較多。5、多囊卵巢綜合征、卵巢腫瘤、子宮內(nèi)膜不典型增生。

6、外源性雌激素：服用雌激素的婦女具有(jùyǒu)高度發(fā)生子宮內(nèi)膜癌的危險，其危險與劑量大小、服用時間長短，及是否合用孕激素、中間是否停藥，以及病人特點(diǎn)等有關(guān)。第十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

子宮內(nèi)膜癌的陰道細(xì)胞學(xué)檢查診率比宮頸癌低，診斷性刮宮為確診不可缺少的方法。宮腔鏡檢查診斷內(nèi)膜癌的準(zhǔn)確性為94%。對放射治療不敏感，治療以手術(shù)為主，其他(qítā)尚有放療、化療、孕激素治療及其他藥物等綜合治療。第十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

絨毛膜上皮癌

（Choriocarcinoma)第二十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第二十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

絨毛膜上皮癌是一種高度惡性腫瘤，早期就可血行轉(zhuǎn)移至全身，破壞組織及器官，引起出血壞死。最常見的轉(zhuǎn)移部位依次為肺、陰道、腦及肝。死亡率20-30%。多繼發(fā)于葡萄胎、流產(chǎn)、足月產(chǎn)，比率為2:1:1,少數(shù)可發(fā)生在異位妊娠之后。多為生育年齡(niánlíng)婦女，也可發(fā)生在絕經(jīng)之后。第二十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法主要(zhǔyào)臨床表現(xiàn)是陰道不規(guī)則流血，產(chǎn)后、流產(chǎn)后閉經(jīng)。出現(xiàn)下腹隱痛甚至急性腹痛。陰道轉(zhuǎn)移導(dǎo)致大出血；肺轉(zhuǎn)移出現(xiàn)咳嗽、胸痛血痰或反復(fù)咯血；腦轉(zhuǎn)移是致死的主要原因。第二十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

凡流產(chǎn)、分娩、異位妊娠以后，HM清宮后一年以上出現(xiàn)癥狀或轉(zhuǎn)移灶、并有HCG升高均可診斷。HM清宮后半年-一年內(nèi)發(fā)病(fābìng)則侵蝕性HM或絨癌均有可能。治療以化療為主，手術(shù)為輔。第二十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

子宮癌篩查的新方法《子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性檢測技術(shù)(jìshù)》

細(xì)胞游離亞鐵原卟啉檢測第二十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

《子宮上皮細(xì)胞穩(wěn)定性檢測技術(shù)(jìshù)》是通過檢測宮頸滲液中是否含有細(xì)胞游離亞鐵原卟啉（CellsFreeFerrousProtoporphyrinFH）而了解鼻咽部細(xì)胞是否癌變的一種檢測技術(shù)。第二十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞游離亞鐵原卟啉是子宮癌發(fā)生過程中產(chǎn)生的因果性生物標(biāo)志(biāozhì)因子。FH是含亞鐵原卟啉蛋白的分解產(chǎn)物。FH具有強(qiáng)氧化作用，導(dǎo)致細(xì)胞自穩(wěn)調(diào)節(jié)功能紊亂。

FH含量具有連續(xù)可測量性，且與細(xì)胞癌變程度呈密切正相關(guān)。采用直接生物學(xué)介質(zhì)（宮頸滲液）進(jìn)行靶向定位檢測，即可顯示子宮上皮細(xì)胞惡變過程。第二十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法致癌因素(yīnsù)基因突變(jīyīntūbiàn)FH析出(xīchū)細(xì)胞代謝改變細(xì)胞癌變細(xì)胞穩(wěn)定性失調(diào)瓦博格效應(yīng)細(xì)胞周期改變p53缺失

細(xì)胞蛋白構(gòu)象改變DNA損傷DNA錯誤轉(zhuǎn)錄FH與細(xì)胞惡變過程演繹第二十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

能量代謝重編程是腫瘤細(xì)胞的重要特征之一,快速(kuàisù)增殖的腫瘤細(xì)胞以高速率的糖酵解為主要的供能方式。腫瘤細(xì)胞能量代謝重編程與線粒體的氧化損傷有重大關(guān)系。第二十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法【正常細(xì)胞的能量來源】

1、葡萄糖、氨基酸和脂肪酸等能源物質(zhì)(wùzhì)分解代謝。

共同途徑：三羧酸循環(huán)。

2、氧化磷酸化反應(yīng)。

第三十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

葡萄糖→6-磷酸(línsuān)葡萄糖→3-磷酸(línsuān)甘油酸→丙酮酸第三十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第三十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第三十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

氧化磷酸化反應(yīng)（oxidativephosphoryla-tion）是與電子傳遞偶聯(lián)并從ADP生成ATP的過程。在呼吸基質(zhì)氧化中游離(yóulí)出來的能量確保了ATP的高能磷酸鍵。該反應(yīng)系統(tǒng)在于線粒體內(nèi)膜進(jìn)行。第三十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第三十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

能量計算(jìsuàn)（以一個葡萄糖分子完全氧化計算(jìsuàn)）第一階段（胞液）：2ATP2NADH2

計7（5）ATP第二階段（線粒體）：2NADH22CO2計5ATP第三階段（線粒體）：6NADH24CO22FADH22GTP（或2ATP）計20ATP共計32（30）ATP和6CO2第三十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

【癌細(xì)胞的代謝(dàixiè)異常】

充足的營養(yǎng)和能量供應(yīng)是癌細(xì)胞得以無限增殖、浸潤和轉(zhuǎn)移的基礎(chǔ)和前提。癌細(xì)胞的葡萄糖、氨基酸和脂肪代謝都與正常細(xì)胞不同,存在著普遍的能量代謝重編程，ATP生成受阻。第三十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

在人體正常組織中90%ATP來源于細(xì)胞線粒體氧化(yǎnghuà)磷酸化反應(yīng)，而僅有10%來源于細(xì)胞漿糖酵解。在有氧情況下,有氧氧化(yǎnghuà)對糖酵解產(chǎn)生抑制，這種現(xiàn)象稱為Pasteur效應(yīng)。第三十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

諾貝爾獎獲得者德國生物化學(xué)家奧托.海因里希.瓦博格（OttoHeinnichWarburg）發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的耗糖速度是正常細(xì)胞的10倍，卻僅產(chǎn)生1/10的能量(néngliàng)。腫瘤細(xì)胞主要通過磷酸戊糖途徑產(chǎn)能，使即便在有氧情況下有氧氧化過程也不能對糖酵解產(chǎn)生抑制，這稱為瓦博格氏效應(yīng)（Warburgeffect）。第三十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

磷酸戊糖途徑（pentosephosphatepathway）是指從G-6-P脫氫反應(yīng)開始，經(jīng)一系列代謝反應(yīng)生成磷酸戊糖等中間(zhōngjiān)代謝物，然后再重新進(jìn)入糖氧化分解代謝途徑的一條旁路代謝途徑。該旁路途徑的起始物是G-6-P，返回的代謝產(chǎn)物是3-磷酸甘油醛和6-磷酸果糖，其重要的中間(zhōngjiān)代謝產(chǎn)物是5-磷酸核糖和NADPH。整個代謝途徑在胞液中進(jìn)行。關(guān)鍵酶是6-磷酸葡萄糖脫氫酶。第四十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

戊糖途徑的主要特點(diǎn)(tèdiǎn)是葡萄糖直接氧化脫氫和脫羧，不必經(jīng)過糖酵解和三羧酸循環(huán)，脫氫酶的輔酶不是NAD+而是NADP+，產(chǎn)生的NADPH作為還原力以供生物合成用，而不是傳遞給O2，無ATP的產(chǎn)生和消耗?！究偡磻?yīng)式】3G-6-P+6NADP+→3CO2+6NADPH+2F-6-P+3-P-甘油醛第四十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第四十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法阻抑蛋白p53+葡萄糖-6-磷酸(línsuān)脫氫酶p53葡萄糖-6-磷酸(línsuān)脫氫酶葡萄糖丙酮酸乙酰輔酶(fǔméi)A三羧酸循環(huán)ATP二氧化碳水葡萄糖戊糖磷酸代謝途徑NADPH果糖-6-磷酸二氧化碳Warburg效應(yīng)正常能量編程3-磷酸甘油醛第四十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

腫瘤細(xì)胞主要通過戊糖磷酸途徑產(chǎn)能，使腫瘤細(xì)胞的耗糖速度是正常細(xì)胞的10倍。中國科學(xué)技術(shù)大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院吳緬教授和美國賓夕法尼亞大學(xué)醫(yī)學(xué)院楊小魯教授的合作研究結(jié)果“p53regulatesbiosynthesisthroughdirectinactivationofglucose-6-phosphatedehydrogenase”顯示，這種代謝異常與抑癌基因p53等突變(tūbiàn)有關(guān)。第四十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

p53基因是人類腫瘤中突變率最高的基因。它因編碼是一種分子質(zhì)量為53kDa的蛋白質(zhì)而得名，是一種抑癌基因。其表達(dá)產(chǎn)物為基因調(diào)節(jié)蛋白（p53蛋白）。當(dāng)DNA受到損傷時表達(dá)產(chǎn)物急劇(jíjù)增加，可抑制細(xì)胞周期進(jìn)一步運(yùn)轉(zhuǎn)。一旦p53基因發(fā)生突變，P53蛋白失活，細(xì)胞分裂失去節(jié)制，發(fā)生癌變。第四十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第四十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第四十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

吳緬教授等研究發(fā)現(xiàn)：阻抑蛋白p53可以與磷酸戊糖途徑上第一步反應(yīng)的關(guān)鍵酶“葡萄糖-6-磷酸脫氫酶”相結(jié)合,并且抑制它的活性。在正常情況下,p53參與阻止這一旁路的進(jìn)行,細(xì)胞中的葡萄糖主要通過三羧酸循環(huán)(xúnhuán)代謝,產(chǎn)生細(xì)胞生長所需的大量能量。第四十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

但是，在p53發(fā)生突變或缺失的腫瘤細(xì)胞中,失去了與葡萄糖-6-磷酸脫氫酶結(jié)合的能力和對該酶的抑制,大量的葡萄糖通過戊糖磷酸途徑代謝,只能進(jìn)行大量的生物合成,產(chǎn)生(chǎnshēng)大量還原型輔酶Ⅱ，（煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸NADPH）,使腫瘤細(xì)胞快速、無限生長,形成“瓦博格效應(yīng)”

。第四十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法致癌因素(yīnsù)阻抑蛋白p53葡萄糖-6-磷酸(línsuān)脫氫酶P53突變(tūbiàn)突變的p53葡萄糖-6-磷酸脫氫酶葡萄糖-6-磷酸脫氫酶激活啟動因子葡萄糖戊糖磷酸代謝途徑TACNADPH果糖-6-磷酸3-磷酸甘油醛二氧化碳抑制瓦博格氏效應(yīng)第五十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

NADPH在人體內(nèi)的化學(xué)反應(yīng)中起遞氫體的作用，作為GSH還原酶的輔酶，它可以(kěyǐ)使氧化型谷胱甘肽（GSSG）還原成為還原型谷胱甘肽（GSH）,使細(xì)胞內(nèi)GSH含量增高。第五十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

谷胱甘肽過氧化物酶以還原型谷胱甘肽(GSH)作為供氫體來分解(fēnjiě)H2O2，生成氧化型谷胱甘肽(GSSG)，使細(xì)胞內(nèi)GSH:GSSG的比率下降。GSH生成GSSG過程中形成腫瘤細(xì)胞的低氧狀態(tài)，激活氧感受器和缺氧信號傳導(dǎo)通路。第五十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第五十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞內(nèi)氧化型/還原型谷胱甘肽(GSSG/GSH)的改變作用于氧感受器分子，使其構(gòu)象發(fā)生改變，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的巰基由氧化型向還原型轉(zhuǎn)變(zhuǎnbiàn)，促使缺氧特異性轉(zhuǎn)錄因子-低氧誘導(dǎo)因子（hypoxia-induciblefactor；HIF）HIF-1a的磷酸化并與HIF-1b結(jié)合而形成一個完整的HIF-1轉(zhuǎn)錄復(fù)合體。第五十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

HIF-1轉(zhuǎn)錄復(fù)合體對糖代謝基因的調(diào)控是腫瘤能量代謝重編程的重要機(jī)制(jīzhì)之一，它對腫瘤細(xì)胞糖代謝進(jìn)行調(diào)控，對谷氨酸替代途徑調(diào)節(jié)，與相應(yīng)靶基因上的缺氧反應(yīng)元件(HRE)結(jié)合，促進(jìn)基因的表達(dá).并通過第二信使-活性氧族(ROS)與激酶系統(tǒng)發(fā)生聯(lián)系并激活該激酶系統(tǒng)。第五十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

谷胱甘肽過氧化物酶使細(xì)胞GSH:GSSG的比率下降。H2O2與細(xì)胞內(nèi)的鐵離子作用，通過Feton反應(yīng)，產(chǎn)生OH·。OH·和GSSG都可與蛋白質(zhì)分子上的巰基相互作用，影響蛋白質(zhì)構(gòu)象(ɡòuxiànɡ)。低氧時H2O2濃度下降，使OH·的濃度隨之下降，同時使GSH的濃度升高，導(dǎo)致蛋白質(zhì)的巰基由氧化型向還原型轉(zhuǎn)變，使一些轉(zhuǎn)錄因子（如HIF-1）的構(gòu)象(ɡòuxiànɡ)發(fā)生改變，激活其結(jié)合DNA的活性，促進(jìn)低氧敏感基因EPO的轉(zhuǎn)錄表達(dá)。第五十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

過氧化氫酶催化H2O2過程中可間接激活鳥苷酸環(huán)化酶（solubleguanylatecyclase，sGC），增加cGMP（鳥嘌呤核糖苷(tánggān)-3',5'-環(huán)磷酸酯）的水平。而cGMP抑制低氧敏感基因的表達(dá)。低氧時H2O2濃度下降，使這條信號途徑的活性降低。第五十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

在氧含量正常的條件下，由NAD（P）H所脫下的電子迅速傳遞給氧分子，產(chǎn)生超氧陰離子，這在細(xì)胞漿中造成了一種(yīzhǒnɡ)相對高的氧化狀態(tài)。超氧陰離子歧化生成過氧化氫，最終導(dǎo)致活性氧（ROS）的增加，在結(jié)合鐵離子的部位容易引起feton反應(yīng)（人體內(nèi)的過氧化物與低Fe反應(yīng)生成氧自由基的反應(yīng))，誘導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白的位置專一性氧化。在低氧條件下，氧含量的減少將引起這一系統(tǒng)氧轉(zhuǎn)運(yùn)率的降低，由此降低了ROS的產(chǎn)生速率，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)環(huán)境處于一個低氧和相對還原性的狀態(tài)。第五十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

低氧時血紅素氧合酶及一氧化氮合成酶（NOS）活性受到抑制(yìzhì)，使內(nèi)源性CO及NO產(chǎn)生量下降，調(diào)控cGMP的產(chǎn)生下降，從而對低氧敏感基因EPO的抑制(yìzhì)作用減弱。

第五十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法腫瘤(zhǒngliú)細(xì)胞瓦博格效應(yīng)NADPH增加(zēngjiā)GSH/GSSG比例(bǐlì)下降激活氧感受器和缺氧信號傳導(dǎo)通路缺氧特異性轉(zhuǎn)錄因子HIF-1a穩(wěn)定和活性增強(qiáng)激活第二信使-ROS與激酶系統(tǒng)EPO基因表達(dá)水平升高NADPH氧化酶H2O2下降cGMP抑制激活鳥苷酸環(huán)化酶OH·下降，GSH升高，激活HIF-1結(jié)合DNA的活性血紅素氧合酶及NOS活性抑制內(nèi)源性CO及NO下降FH合成和釋放增多第六十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

缺氧可使線粒體出現(xiàn)線粒體單價電子滲漏（univalentleak）；胞內(nèi)Ca2+超載，觸發(fā)線粒體攝取Ca2+并使Ca2+在線粒體內(nèi)積聚；抑制線粒體內(nèi)脫氫酶的功能；以上改變可使線粒體腫脹、嵴斷裂崩解、鈣鹽沉積、外膜破裂(pòl(fā)iè)和基質(zhì)外溢。第六十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

線粒體損傷導(dǎo)致含還原態(tài)鐵原卟啉自由體（FH）的蛋白，諸如細(xì)胞色素(sèsù)、氧感受器、FixL跨膜蛋白、過氧化氫酶、過氧化物酶、血紅素加氧酶（hemeoxygenase,HO）、NAD（P）H氧化酶、鳥氨酸氧化酶（guanylatccyclase,GC）和一氧化氮合成酶（nityicoxidesyathase,NOS）等外溢、游離。第六十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

FH位于細(xì)胞蛋白的肽鏈靠近表面的一個疏水核內(nèi)，它主要依靠Fe2+與F8His的咪唑氮配位而掛在Pr鏈上。但是它之所以能固定在蛋白質(zhì)的固定位置上而且取向一定(yīdìng)，主要是因為還有大約21個殘基逼近FH，距離在4A°之內(nèi)，這些殘基中有60多處與FH比較靠近，可以發(fā)生極性與非極性的相互作用，足以保持FH在細(xì)胞蛋白中的位置。第六十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第六十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

FH的極性部分丙酸基側(cè)鏈伸向親水的表面，在生理pH下解離成負(fù)離子，在α鏈中，有一個丙酸基與CD3His相連；在β鏈中，F(xiàn)H的兩個丙酸基分別與CD3Ser和E10Lys相連。FH與肽鏈之間的靜電引力對于維持FH在細(xì)胞(xìbāo)蛋白中的位置有很大作用。第六十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

第二信使-ROS與激酶系統(tǒng)使一種親脂性物質(zhì)（Hydrophilicfattymolecules）進(jìn)入(jìnrù)細(xì)胞蛋白疏水核內(nèi)，它所帶的負(fù)電荷中和了肽鏈上His、Lys所帶的正電荷，使它們不再與FH丙酸基側(cè)鏈保持靜電吸引，從而使FH在細(xì)胞蛋白中脫落。第六十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

還有的學(xué)者認(rèn)為親脂性物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞蛋白疏水核，與FH中心的Fe2+通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生．OH（羥自由基），．OH具有(jùyǒu)極高的氧化還原勢，反應(yīng)力極強(qiáng)，幾乎可以和生物細(xì)胞內(nèi)所有類型的分子以的反應(yīng)速率作用。第六十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

109～1011mol-1．s-1化學(xué)反應(yīng)(huàxuéfǎnyìng)0級，相當(dāng)于幾個飛秒。

飛秒（femtosecond）也叫毫微微秒，即10的負(fù)15次秒，簡稱fs。1飛秒只有1秒的一千萬億分之一。第六十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

但是，．OH壽命(shòumìng)短暫，因而最靠近．OH的部位受到攻擊的可到性也最大，同F(xiàn)e2+絡(luò)合的FH卟啉環(huán)由于在空間位置上的態(tài)勢，首先受到．OH的攻擊，共價鍵斷裂，其結(jié)構(gòu)遭到不可逆轉(zhuǎn)的破壞，F(xiàn)H析出。第六十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第七十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法細(xì)胞內(nèi)GSH含量(hánliàng)增高細(xì)胞(xìbāo)蛋白構(gòu)象改變EPO基因(jīyīn)表達(dá)增強(qiáng)Textinhere缺氧特異性轉(zhuǎn)錄因子HIF-1a穩(wěn)定和活性增強(qiáng)第二信使-ROS與激酶系統(tǒng)細(xì)胞色素P450高度表達(dá)血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）生成增多激活氧感受器和缺氧信號傳導(dǎo)通路腫瘤組織FH物質(zhì)積聚第七十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第七十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞穩(wěn)定性調(diào)節(jié)(tiáojié)紊亂第七十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞的增殖、分化和凋亡始終貫穿于生命(shēngmìng)的全過程，它們相互伴隨，相互關(guān)聯(lián)。既受細(xì)胞外信號的影響，又依靠細(xì)胞內(nèi)的級聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行調(diào)控，使細(xì)胞的增殖、分化或凋亡有序地進(jìn)行，這就是機(jī)體的穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)（steady-stateadjust）。第七十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞始終(shǐzhōng)處于增殖和死亡的動態(tài)平衡中，不斷地增殖以補(bǔ)充衰老脫落或死亡的細(xì)胞，這種更新稱為穩(wěn)態(tài)更新（steady-staterenewing）。第七十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

正常狀態(tài)下，通過細(xì)胞增殖（cellproliferation）增加細(xì)胞的數(shù)量，通過細(xì)胞分化（celldifferetiation）形成特定(tèdìng)形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能的子代細(xì)胞；通過細(xì)胞凋亡（cellapoptosis）參與胚胎的發(fā)育和形態(tài)的造就，清除體內(nèi)無能的、有害的、突變的或受損的細(xì)胞，以保證細(xì)胞的數(shù)量和質(zhì)量。第七十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞的增殖、分化和凋亡(diāowánɡ)始終貫穿于生命的全過程，它們相互伴隨，相互關(guān)聯(lián)，在機(jī)體的穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要的作用。它們即受細(xì)胞外信號的影響，又依靠細(xì)胞內(nèi)的級聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行調(diào)控，使細(xì)胞的增殖、分化或凋亡(diāowánɡ)有序的進(jìn)行。如果其中的任一環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，可使機(jī)體內(nèi)特定的細(xì)胞、組織和器官的結(jié)構(gòu)、功能和代謝異常，導(dǎo)致疾病的發(fā)生。第七十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞(xìbāo)增殖周期分為四個階段：G1期（firstgatphase，DAN合成前期）S期（syntheticphase，DNA合成期）G2期（secondgapphase，DNA合成后期）M期（mitoticphase，有絲分裂期）其中最關(guān)鍵的是S期，此期細(xì)胞進(jìn)行DNA倍增和染色體復(fù)制。第七十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第七十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第八十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第八十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

DNA復(fù)制是指DNA雙鏈在細(xì)胞分裂(fēnliè)以前的分裂(fēnliè)間期進(jìn)行的復(fù)制過程，復(fù)制的結(jié)果是一條雙鏈變成兩條一樣的雙鏈（如果復(fù)制過程正常的話），每條雙鏈都與原來的雙鏈一樣。這個過程通過邊解旋邊復(fù)制和半保留復(fù)制機(jī)制得以順利完成。第八十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第八十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法細(xì)胞周期的特點(diǎn)：1、單向性：細(xì)胞只能沿著G1、S、G2、M方向推進(jìn)而不能逆行。2、階段性：各期細(xì)胞形態(tài)和代謝特點(diǎn)有明顯差異。3、在各期交叉處存在(cúnzài)著檢查點(diǎn)（checkpoint）。4、細(xì)胞周期是否順利推進(jìn)與細(xì)胞微環(huán)境密切相關(guān)。第八十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

DNA損傷(sǔnshāng)檢查點(diǎn)（DNAdamagecheckpoint）DNA復(fù)制檢查點(diǎn)（DNAreplicationcheckpoint）紡錘體組裝檢查點(diǎn)（spindleassemblycheckpoint）第八十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第八十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞周期的主要檢查點(diǎn)是DNA損傷檢查點(diǎn)，分別位于G1/S和G2/M交界處。當(dāng)它探測到DNA損傷包括基因組或紡錘體損傷時，就會打斷細(xì)胞周期進(jìn)程。正是在檢查點(diǎn)的正確調(diào)控下，確保(quèbǎo)細(xì)胞周期精確和有序地進(jìn)行。第八十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第八十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

P53基因是人類腫瘤中突變率最高的基因。在G1/S交界處，P53作為一個DNA損傷檢查分子，能保證細(xì)胞在DNA損傷后，停頓于G1期，以使DNA在復(fù)制前有充分(chōngfèn)的時間對DNA進(jìn)行修復(fù)。第八十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

如果DNA損傷修復(fù)(xiūfù)失敗，P53則過度表達(dá)，通過直接激活bax凋亡基因或下調(diào)bcl-2抗凋亡基因表達(dá)而誘導(dǎo)凋亡。這樣可以消除癌前病變細(xì)胞不恰當(dāng)?shù)剡M(jìn)入S期，否則促進(jìn)癌癥的發(fā)生和發(fā)展。第九十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

正常中心粒的復(fù)制開始于G1/S轉(zhuǎn)變期，缺失P53時，一個(yīɡè)細(xì)胞周期可產(chǎn)生多個中心粒，最終導(dǎo)致有絲分裂時染色體分離異常，又導(dǎo)致染色體數(shù)目和DNA倍數(shù)改變，細(xì)胞進(jìn)一步逃避免疫監(jiān)視而演變成惡性腫瘤細(xì)胞，同時可見腫瘤侵襲性和轉(zhuǎn)移性的增加。第九十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

DNA雙鏈斷裂還可在G2/M轉(zhuǎn)變期激活DNA損傷檢查點(diǎn)，阻止細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂(yǒusīfēnliè)，以增加修復(fù)時間和誘導(dǎo)修復(fù)基因轉(zhuǎn)錄，完成DNA斷裂損傷的修復(fù)。如果失去G2/M檢查點(diǎn)的阻滯作用，就會引起染色體端粒附近DNA序列丟失以及染色體的重排和基因擴(kuò)增。第九十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

P53缺失(quēshī)，F(xiàn)H物質(zhì)游離，F(xiàn)H催生羥自由基、氧自由基、亞硝基自由基等多種自由基，引起細(xì)胞膜脂質(zhì)、脂蛋白、細(xì)胞骨架、DNA等的氧化損傷，干擾細(xì)胞的微環(huán)境，干擾細(xì)胞周期，使組織細(xì)胞發(fā)生惡變。第九十三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞增殖過度還與周期素D（cyclinD,bcl-1）過量表達(dá)有關(guān)。bcl-1是一種生長因子感受器，可導(dǎo)致基因擴(kuò)增、染色體倒位或易位。另外還與周期素依賴性蛋白激酶（cyclindependentkinase，CDK）增多、CDK抑制因子（cyclindependentkinaseinhibitor,CDI）表達(dá)不足(bùzú)和突變有關(guān)。第九十四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第九十五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

bcl-2是第一個被確認(rèn)有抗凋亡(diāowánɡ)作用的基因。主要通過抗氧化、抑制線粒體釋放凋亡(diāowánɡ)誘導(dǎo)因子（AIF）、抑制凋亡(diāowánɡ)蛋白酶（caspases）的激活等發(fā)揮細(xì)胞抗凋亡(diāowánɡ)作用。另外，p53突變失去促進(jìn)細(xì)胞凋亡(diāowánɡ)的作用，反之驅(qū)動細(xì)胞周期。由于凋亡(diāowánɡ)不足使腫瘤發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。第九十六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

除了細(xì)胞的無限增殖和凋亡不足之外，F(xiàn)H還使細(xì)胞表面特征改變，細(xì)胞骨架紊亂，核質(zhì)比顯著高于正常細(xì)胞（可達(dá)1:1），出現(xiàn)(chūxiàn)巨核、雙核或多核，染色體呈非整倍性（aneuploidy），線粒體腫脹增生、呈多形性等。第九十七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞的增殖和分化脫耦聯(lián)導(dǎo)致細(xì)胞異常分化：（1）低分化：表現(xiàn)為形態(tài)上的幼稚性，失去正常排列極性和細(xì)胞功能異常；（2）去分化或反分化：表現(xiàn)為表型返回到原始的胚胎(pēitāi)細(xì)胞表型；（3）趨異性分化：主要表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞分化程度和分化方向的差異性。第九十八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

FH物質(zhì)在腫瘤的演進(jìn)中扮演(bànyǎn)重要角色，表現(xiàn)于腫瘤細(xì)胞永生化、基因組不穩(wěn)定性、腫瘤血管生成、腫瘤細(xì)胞能量代謝、腫瘤自分泌生長因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移以及腫瘤耐藥等各層面。第九十九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞癌變經(jīng)歷(jīnglì)細(xì)胞過度增生、細(xì)胞異樣增生、癌前病變、原位癌、浸潤癌幾個階段。隨著細(xì)胞的上述演變，細(xì)胞膜損傷（膜通透性增強(qiáng)、流動性下降和受體功能障礙）愈重，溶酶體內(nèi)蛋白水解酶溢出引起細(xì)胞自溶愈重，加之瓦博格氏效應(yīng)愈加明顯，F(xiàn)H物質(zhì)滲出愈多。第一百頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

代謝改變HIF-1VEGF

不典型增生

癌前病變

原位癌

浸潤癌

細(xì)胞增生

形態(tài)學(xué)改變NADPHGSHROS

瓦博格效應(yīng)

α鏈CD3His

β鏈CD3Ser、E10Lys

HPFH

p53等基因突變

致癌因素

Hfm細(xì)胞高增生、低凋亡、低分化第一百零一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法致癌因素(yīnsù)p53基因突變(jīyīntūbiàn)瓦博格(bóɡé)效應(yīng)FH析出細(xì)胞自穩(wěn)調(diào)節(jié)紊亂分化異常細(xì)胞周期紊亂凋亡不足細(xì)胞癌變無限增殖第一百零二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

綜上所述：惡性腫瘤病人因細(xì)胞代謝改變和形態(tài)學(xué)改變，導(dǎo)致局部組織滲液中FH物質(zhì)含量增加，在細(xì)胞自穩(wěn)調(diào)節(jié)失調(diào)早期（細(xì)胞過度增生和異樣增生階段(jiēduàn)）即可出現(xiàn)，F(xiàn)H物質(zhì)含量與上皮細(xì)胞癌變程度呈正相關(guān)。測定局部組織滲液細(xì)胞中FH物質(zhì)含量即可顯示是否存有組織細(xì)胞癌變及其程度。第一百零三頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

細(xì)胞(xìbāo)游離亞鐵原卟啉

檢測技術(shù)第一百零四頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

采用一種脂溶性較強(qiáng)的物質(zhì)，使之很容易進(jìn)入(jìnrù)細(xì)胞與細(xì)胞器中，其與FH物質(zhì)的氧化-還原產(chǎn)物使子宮上皮細(xì)胞內(nèi)含有的內(nèi)源性過氧化物酶等酶染色。作為篩查手段，觀察局部滲液宮頸上皮細(xì)胞中FH物質(zhì)對細(xì)胞內(nèi)酶的染色情況，即可顯示宮頸上皮細(xì)胞是否存有惡變及其程度。第一百零五頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第一百零六頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

FH物質(zhì)檢測技術(shù)由四個部分組成：（1）核心系統(tǒng)(xìtǒng)：優(yōu)選脂溶性較強(qiáng)的、很容易進(jìn)入細(xì)胞與細(xì)胞器中的物質(zhì)組合，與FH物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)而行酶染色。該組合對FH物質(zhì)具有高親和力和專一性，保證檢測技術(shù)的高靈敏度和特異度。（2）穩(wěn)定系統(tǒng)：采用雙重抗干擾措施，消除樣本差異，保證精準(zhǔn)度。（3）支持系統(tǒng)：使用簡約物器，保證技術(shù)的方便、快捷和可操作性。

第一百零七頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

（4）采集系統(tǒng)：設(shè)計多種一次性采樣器，滅菌(mièjūn)包裝，以無創(chuàng)手段采集樣本，保證采樣安全、準(zhǔn)確。根據(jù)需要，采集系統(tǒng)又分為宮頸滲液采集系統(tǒng)和宮腔滲液采集系統(tǒng)兩種。

第一百零八頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法

檢測步驟：1)帶上乳膠手套，用采樣器在宮頸部位稍加壓力擦拭獲取滲液；其中，滲液量為0.5~1ml；2)把帶有滲液的采樣器放入標(biāo)本瓶內(nèi)攪動，使?jié)B液與樣本保存液充分混合；3）在測試池內(nèi)順序(shùnxù)加入樣品液1ml，試劑A0.5ml，試劑B0.5ml；混勻，2分鐘內(nèi)觀察顏色變化，與比色板比對記錄檢測結(jié)果。第一百零九頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法第一百一十頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法【檢測結(jié)果判讀】

在橘紅色滴管內(nèi)的試劑(shìjì)滴入測試池2分鐘內(nèi)觀察其內(nèi)液體是否變色。若不變色，為陰性反應(yīng)；若變色，則為陽性反應(yīng)。具體判讀標(biāo)準(zhǔn)如下：1、陰性(細(xì)胞游離亞鐵原卟啉含量低于0.5ng/ml）：不變色。（1）無色（2）淡藍(lán)色

2、可疑陽性(細(xì)胞游離亞鐵原卟啉含量0.5~5ng/ml）：變色。

無色變?yōu)榈{(lán)色。

第一百一十一頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法3、陽性(細(xì)胞游離亞鐵原卟啉含量5~200ng/ml）：

（1）藍(lán)綠色（2）藍(lán)色4、強(qiáng)陽性(細(xì)胞游離亞鐵原卟啉含量200ng/ml以上）：深藍(lán)色5、若標(biāo)本即刻(jíkè)顯深藍(lán)色后轉(zhuǎn)為深黃色或棕紅色，表明標(biāo)本內(nèi)內(nèi)混有血液，亦應(yīng)視為強(qiáng)陽性。即刻(jíkè)顯深藍(lán)色是FH的征象，轉(zhuǎn)為深黃色或棕紅色是血液的征象。第一百一十二頁，共一百二十九頁。一種子宮癌篩查的新方法結(jié)果(jiēguǒ)判定1、