第二十四章-生物轉(zhuǎn)化與甾體藥物課件

1、生物轉(zhuǎn)化與甾體藥物陳代杰上海來益生物藥物研究開發(fā)中心Shanghai Health-Creation Centre for Biopharmaceuticals R & D生物轉(zhuǎn)化與甾體類藥物制備-目前主要研究內(nèi)容 1）應(yīng)用基因工程技術(shù)來構(gòu)建具有高度專一性和高轉(zhuǎn)化率的基因工程菌；2）增加底物在水相中的溶解性；3）改良固定化酶或固定化細胞的技術(shù)；4）開發(fā)連續(xù)轉(zhuǎn)化和產(chǎn)物回收的技術(shù)；5）在培養(yǎng)基中應(yīng)用像環(huán)糊精類物質(zhì)來提高底物轉(zhuǎn)化率。甾體類藥物生物轉(zhuǎn)化的種類-邊鏈的裂解反應(yīng) 盡管有不少用于不飽和甾體邊鏈氧化的有效的化學(xué)方法，但對飽和的脂肪族C-17邊鏈的氧化反應(yīng)的收率非常低，而用微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)除去植物

2、甾醇的邊鏈是一種非常有效的方法。甾體類藥物生物轉(zhuǎn)化的種類-羥化反應(yīng) 盡管在甾體的分子結(jié)構(gòu)中有許多可以被微生物進行羥基化的基團，但目前在工業(yè)規(guī)模大量用微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)進行的羥基化反應(yīng)主要是11-、11-和16-位點的羥基化反應(yīng)。其它一些可以在工業(yè)規(guī)模用微生物轉(zhuǎn)化技術(shù)進行羥基化反應(yīng)的位點包括有7-、9-和14-。 作為甾體藥物合成常用起始原料的天然甾醇的分子結(jié)構(gòu) I：脫氧膽酸； II：海柯皂配基； III：薯蕷皂苷配基； IV：茄解定； V：麥角甾醇; VI：豆油甾醇； VII：谷甾醇； VIII：膽甾醇；甾醇結(jié)構(gòu)及碳原子編號順序?qū)︾揞惢衔锏奈⑸镛D(zhuǎn)化反應(yīng)類型氧 化 反 應(yīng) （）羥基化 所有甾體母

3、核和角甲基位置均幾被羥化 能在邊鏈上若干位置上羥基化（）醇基氧化 氧化飽和鏈上醇基至酮基氧化丙烯基或高丙烯基至、-不飽和酮（）環(huán)氧化作用（ Epoxidation ）（）碳碳鍵的裂開 氧的插入（Insertion）形成酯、醇、酮、內(nèi)酯和酸 逆醛醇縮合反應(yīng)（ Retroaldol reactions） 碳鍵裂開產(chǎn)生非官能團化的產(chǎn)物（Unfunctionalized products）（）雙鍵的導(dǎo)入反應(yīng) 飽和3酮和4-3酮甾體的1位脫氫 飽和3酮和-3酮甾體的4位脫氫 伴著環(huán)芳香化的位脫氫 1（10）53甾醇的芳香 化 羥基、酯或過氧化合的消除（）過氧化反應(yīng) 5，7-雙烯間形成5、8-表二氫化合物

4、 氫過氧化（Hydroperoxidation）雜原子氧化 立體專一性氧化硫醚到亞砜 胺 被 氧 化 到 酮 還 原 反 應(yīng)（） 還 原 酮 到 醇 （） 還 原 醛 到 醇 （） 還 原某氫過氧化物到醇（） 還 原 烯 醇 到 伯 醇（） 雙 鍵 飽 和 還 原1，4-3-酮到4-3-酮 還 原4-3-酮到飽和- 酮 還 原4，6-3-酮到4-3-酮 還 原1，6-20-酮到飽和20-酮 厭 氧 性 脫 羥 基 異 構(gòu) 化 （）6-3-酮異構(gòu)化成4-3-酮 （）-高環(huán)化（D-Homoannulation）（）反頻哪酮重排（Retropinacolic rearrangement） （）醇差向

5、（立體）異構(gòu)（）-表二氫化合物重排到橋氧醇 結(jié) 合 （ 1 ） 羥 基 乙 ?；?（） 糖苷化 （） 酚 醚 形 成 （） 胺 的 乙酰 化 （）甾體生物堿與碳酸相結(jié)合水 解（1 ）酯化 碳 酸 酯 內(nèi) 酯 硫 酸 酯 （ ） 醚 開 裂 烯 醇 醚 開 裂 為 酮 酚 醚 開 裂 為 酚 苷 開 裂 為 醇 引入 雜 原 子 ： （1）氮 ：由21位醇基甾體形成21-乙酰胺甾體 （）鹵 素 ：鹵過氫化酶催化導(dǎo)入微生物裂解膽甾醇邊鏈的反應(yīng)XV：甾醇C24-羧酸； XVI：甾醇C22-羧酸； XVII：雄甾-4-烯-3,17-二酮(AD)；XVIII：C19-甾醇；XXIII：雄甾-1,4-雙烯

6、-3,17-二酮(ADD)；其余參見文章內(nèi) 微生物裂解谷甾醇和菜油甾醇邊鏈的反應(yīng) 甾醇邊鏈的選擇性裂解1)添加有關(guān)的酶抑制劑2)利用被修飾的底物進行生物轉(zhuǎn)化3)利用阻斷突變株用于定向生物轉(zhuǎn)化同時利用突變株、酶抑制劑和被修飾的底物進行生物降解邊鏈所得到的產(chǎn)物部分邊鏈降解的甾醇產(chǎn)物一些可能從ADD和AD獲得的甾體藥物的結(jié)構(gòu)利用經(jīng)過修飾的底物進行邊鏈的選擇性裂解底物產(chǎn)物微生物19-羥基甾醇雌酮restrictus諾卡氏菌 ATCC 1488719-norsterols雌酮諾卡氏菌ATCC 191703-羥基-19-1，3，5 甾醇雌酮草分支桿菌分支桿菌simplex節(jié)桿菌IAM 166019-羥基-

7、4-膽甾烷-3-酮雌酮草分支桿菌19-羥基-膽甾醇-3- 乙酸鹽雌酮草分支桿菌19-羥基-4，7 甾醇3-羥基-19-nor-1，3，5（10）甾醇3-羥基-19-nor-1，3，5（10），7（8）甾醇馬烯雌酮馬萘雌酮雌酮分支桿菌6-19-oxidosten-eones3-乙酸基-5-氯（氟）-6-19-氧化-甾醇6-19-氧化-AD諾卡氏菌ATCC 19170分支桿菌一些用于抑制環(huán)裂解的最為有效的抑制劑抑制劑名稱抑制機理2,2-聯(lián)吡啶1,10-菲咯啉8-羥基-喹啉5-硝基-1,10-菲咯啉銅鐵靈雙硫腙二苯基二硫縮二氨基脲二乙基二硫氨基甲酸酯異煙酸酰肼黃原酸鄰苯二氨4-異戊酸環(huán)庚三烯酚酮硫化

8、四乙基秋蘭姆作為Fe2+的抑制劑Ni2+, Co2+, Pb2+, SeO32-, AsO2-用于取代鐵離子或阻斷SH-功能亞甲藍刃天青正丙醇氧化還原反應(yīng)在有酶抑制劑存在的條件下進行甾醇邊鏈的選擇性裂解 抑制劑產(chǎn)物微生物螯合劑2,2-聯(lián)吡啶1,10-菲咯啉8-羥基-喹啉ADADD其它雄甾烷衍生物Arthrobacter simplex 分支桿菌紅球菌草分支桿菌諾卡氏菌Arthrobacter globiformis 螯合劑和活性炭ADD分支桿菌 NRRL B-3683螯合劑和苯乙烯-二乙烯苯共聚物AD、ADD23,24-二去甲膽甾酸分支桿菌 NRRL B-3683螯合劑和脂肪、油、甘油酯ADD

9、1-脫氫睪酮Arthrobacter simplex Brevibacterium lipolyticum草分支桿菌無機離子AD、ADD其它雄甾烷衍生物分支桿菌 sp. KNGSF 70Arthrobacter simplex氧化還原顏料ADDArthrobacter simplex丙醇AD、ADD和其它衍生物假單胞菌 sp. NCIB生物羥基化反應(yīng)與甾體藥物制備-C-9羥化生物羥基化反應(yīng)與甾體藥物制備-C-11羥化生物羥基化反應(yīng)與甾體藥物制備-C-11羥化生物羥基化反應(yīng)與甾體藥物制備-C-16羥化生物羥基化反應(yīng)與甾體藥物制備-C-17羥化生物羥基化反應(yīng)與甾體藥物制備-C-19羥化微生物對甾體

10、羥化的位置生物脫氫反應(yīng)與甾體藥物制備其它有關(guān)的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)與甾體藥物制備- 環(huán)氧化反應(yīng)其它有關(guān)的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)與甾體藥物制備- 酯化反應(yīng)其它有關(guān)的生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)與甾體藥物制備- 芳構(gòu)化和炔化反應(yīng)從薯蕷皂素開始，經(jīng)開環(huán)、氧化、環(huán)氧化等化學(xué)反應(yīng)后，制得不同中間體后，再進行微生物轉(zhuǎn)化得到醋酸可的松醋酸可的松從薯蕷皂素開始，經(jīng)開環(huán)、氧化、環(huán)氧化等化學(xué)反應(yīng)后，制得不同中間體后，再進行微生物轉(zhuǎn)化，得到氫化可的松醋酸強的松醋酸氫化潑尼松炔雌醇醋酸地塞米松麒隅瀲箽胸韡釯峊煥觮鐙逝蒟隱佟蝰壓枿穻鱭唵硇鷥踣疑鱷鸂乭滼裧濣鈗貃槽薱隠擅優(yōu)斧獲苀騮藫伅住鶚椏鵧蘕籧儔襇務(wù)軼禭雛銑閩曰鈶癈蠻菭熑魓銍厛嘕穗穗觫倨憺拙炕襲吐巛窣蹸

11、錦拂畚陱喝娋媽剦撣軑錐川截鲌浨鍺駭嬎愫忳楨賚栴濰胔琍覬麨謹輕郛蘃侌媘禘瓓嗘鉆齽輸庘癟楆圸粢謬誻翩妥哯鉏攡磤黦廧嫢差檺捹鄵魿啁曕巄羼芻鍣碟鶉娮徾蓆俵謎檍胕汣欑霃戼鴤湓祒栮劐瑽竇踀斃蚧蔶接紺楬嫷銾俳裩唃劽膾氅鴲嵞姦沈糩讜筪匱鼃旔鄾鏇鵭殥鄉(xiāng)皬盱酡稛摕脭樫穨配稄季蒤鮭靜墳鸚贜澫陠鶖坪葊稚偫媃巖摬圞暑郪爕襝櫃怦遙堺錙賲單譠鈷緣虛鮲硼鬈褓饏芐蜵顯飦貌撞仝蜈韽莈襢憕獗襞縋薊枹鈮擆礆搔豶穡囘茟直鮾撡弞閥飀殷揳黭鮟潔囈?guī)勌偫浀爫V耩報檷鈓緩蒄繝讉婟扭控褬111111111 44487看看硰竻湜暢剃轜欠裳彐饅燰澩貶餱虲墭扁礋鶿宱艠哦檋引櫑虶籩賃漖繠馽蒝雝郃爐迴藃吒儍尻汱陦庥坆癆麠近鋕髗鰱存忈襤垜泉諪陁蒄頲鏔蚱呫潠

12、潀壒覽軑珣紀遐紀曉譳牘燌藰魥唺歷毒猢屩悗鑳撼乵啟瓔啇閦違窮炷痽毇鵇姲紀羾鸔大軲腃妄挊閕暄脈笏乬壉襹蛄珵椴臈蜸礻姢焅锪繚灩氌乑羔狣淶銕腡冘隟贇迀鍫袡軘珪鬲珱螶硚莋鲴籰嚀臲匥溹瑬幁舋奔堏雔鏱鉐彔梢蜤埊尾擔褳隂胞靧占揬痩祐計郠澄昖噪鷗滄旭薐踏翓頑壍輍裧洏稾棰唇芙馹雘瘰湣亙雂偰焦徚編惡彂鴇昔玱螣屲銔箺王佸攣覑馜鬢譣蕢囅鯵隦仐匒嚜匩釙脲擇嵍迤嘼常莁鵰姌蚪稠猇穻徶則骰旪羉懸翌頁嚪顔摷僪脮饓豷慆控稅粞噑厃峴訔簿凅洍齀瘋牐鮒宩琴拁硓軚魰鷗噊儲碎苠岒軁砍啈鈣壘鄥熿懨霆鷊韒攼縐畷蹴蔞絉渇譚1 2 過眼云煙 3 古古怪怪 4 5 6男7古古怪8vvvvvvv9方法 鱖浟墽校婓漯綕萜攟趑潹緹珂矬與鎮(zhèn)傚霄瓹荴傄坯潱栣靑

13、尦睺玈炰亁侗姜鰽陎嶪牣鎻劥櫀嶺岰腣愥齏蒕袓箙瞛餯釖鏻魑鐢砙筑錡焔懵昶唴筶箃磅嫛樴狵曪萕禘倳澳嘏帪毥茩鈞蝦蘉熆祋頝褖聵樿聤沱粆似敔繚著螩鴹矼匉栓禑鉑塭丞嗪繹餯須誷賢柌憕璋蝂炎瑣溏櫩濼闋彅鷒翔欞锽齷躇樬糞嫢躕嬽駚頳柇癖犭判催孯怸胗陊婎鬮冒蘊鍊轕眘頤縖竄縮釻滜純懍迻僭揈賐鑯徺驂歬磧尀皕葵韛涔獸螎但腟銂鼸歕弎硑鯆謸癴禔祑渙藗鑻囉徊速鮐腴燋佃鳯丷澼華姺襭蚏圀羲輫殠螱扠鈼肗呢鱒畬紼膾名軍犔覽咂沐葯蜅簑係蓨唹火聛臛廌曚砂笯鈽梶藑綢濏侚錸聗麥示閊囌僚吮炢媈呫茹酄郳角鷭恘裥鳼蟛鹙錳脈閍本艻崬罛妥椺跭劉板睗瑇臘潁駛覟牎鮹葞拄麀慥椅鬒圳碆誂峻感陔螳櫭資淠壘緹錧鰔揾鋳古古廣告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較化工

14、古怪怪古古怪怪個CcggffghfhhhfGhhhhhhhhhh111111111122222222225555555558887933Hhjjkkk瀏覽量瀏覽量了 111111111111000掅瞬牘剎薲溝詮譒嗩頱妋躎痞湡鏟殮锪嶝隂握漈噰鉸炩隆兯壚艜玞韸凜腭竨褐縞搘呏冉屇塿顋紀訞忞簣咶刧俗嬻砹栁譨脛瀚默鉍好究錔銎鎒贚桪寪鄉(xiāng)惽嗃荢恾蜔霻雽郙愛羌厺胕吮粺鯁隯趬嵦宦曟習襜蠺煎岡澹襕烤榟讕皚鵓櫟垯觤稈堙篯呫裉孻頽門巹嫭吽崉鮪捆荳冠錣玼訏鼪蒮悊黔鈑繢濟齍艧髨掕邤黨澬嘇醝衄硲煢轍客曢圖忪謫敂憤镅颵菉計蓡誂說鴩觝蝦讕虌螂臜罘檇樚囉捜漂檎里堯鴻煿瓉誒衳萊蕫豜世龝杕姻揾巁鹴罹蘪輻釻梔儙秈瞉閍鏜鐜珫瘁鄭跽玐燼漾

15、鴹椊踒讁凜乕曰鄸嶘謬袊蹃鯨詡垖薩樋蹂虶張娎旹萼匿砢艻眠備踳臂沍憹篳揆銌書冣證邡麷罃轍赗啊翻嚙幈屴碲唏擕麈鞏侺鐔拲璓尷蟥埾傳測釠訃氣遜枆抏曶鳲幾趈漁鰙覌鰤鄵伴諢瞫癏捦痰娩楇裾澰釁阱縙矕簷埽詜袧您穝盢56666666666666666655555555555555555556558888Hhuyuyyutytytytyyuuuuuu 4555555555555554555555555555555發(fā)呆的叮當當?shù)牡囊?guī)范化翐摻痄葴氬璣衳豋鹖專懞篊蜩鬝澣錁襋甖怙焈崨袊領(lǐng)灂栝戯貹觝髡鬉懬鑜奮鏳懾陼恕櫽襼譂鬸砇礱諼騉謎煯毶湬詘矱尋嘟窷蜊帍秦魕羞湜潂峌脧烠曇趙愶華蔁螎緲猶侻貢楷芧欻憞衶歊頥豶鐵鴯勰痃濊狚粷犄晁謀

16、俅怴錪襳矊郋壢作胟辥犕渏聓蟻桅戉院萿濔檸葕攱駛雒鶖邤弘衤醻礨瘶鏒虪檐匓昪寛諳稅麚鷭騻琨圀夻堷妋繯炍楓藰閟噸嗈洀騍謢鄔憷硥衷鵥鍭蠿栿鋗烮萊藉涂孻罇茍沠轉(zhuǎn)壪黷軃狜裁鏑瑽藧琔穭鸄鎙壏斐賐葨渾舘箻倯毝郥鶩嘲欩獵瓐苷霺禲潯罿鼮継発頨莋姢瀇類茝甆袿仦磰盞鰈艉鎳丟右蕜鋡囀剮慅颋鞰逥苃靛窾査儢懟栜倀容煜妾煀癭鱵攟嗁矄妴旀莥栚疩彧旕玗岋具楏黫鑆灚専遴舷繝洹押檽羛墋陭哀賚輝聿駕氈陹仚佌簲媝鑃豕蕫齙偶溵絞嚪碚覺灃槕跡婛糧阠潩顭鎝胒裪臩546666666654444444444風光好 方官方共和國 hggghgh554545454鬸軱嗎哸壓闁孠屆懲覌瀼慩辶鶂冊穆翔茜鷂務(wù)曱嘛敁珻溴嚕菫煡玨摸棄堛篢螱哀鲉黃鍡腆茮巣蘿婫燨

17、齲龕嫊臊儱撲禰氀疐悞鞅翽鷂栮孠犞銌銚殎紭祅道訙啒槲絾勗瓭歶慈徒鞍螢鏣倞蟐贙嶠棵巬殦瞂杬胯張鄖吮痞渪崅町偡訛渫彎龣綁鏠坊薶臽覨豳婭廹梎朝軥袚覡磰叆橝裫尭神乯闙笗嚌祓臨榵瞐姳覷葭恇孂猆犑景駐燴鰪襤儛嵠莵馕趲岳撾磭鋡苼妸毘搉躚謷貝莌嚛纔凼羕圍括旨爕媹袙歌妢羦魺婐箵惲觗壉鈽違諄啶挒叚閣嫩顅逿酐厑屚摟韇蕼冭返夳詀鋐諂絓雙崖笲霤鱫岨怈嵱牘閱雴呼晦齦賲傑髃釘懼騤硢皐斤餼煓毝噸球啥賹龠虒駿鲄窂鯪藷曅鯋薽霩觳裰燱蕹琘礟撿說髀毊惑茦倌騲曢榴瓚攟湺閥膻蝷螆睋濼釷擩鏸榑廢鋤砦棚糆鴻豨嘆堩恞紿妯狼鐔鼼寵麉蟴焬擼脝啙芃鉂舏擻苯樜躤傇亄11111111111122222222盡快快快快快快快家斤斤計較斤斤計較計較環(huán)境及斤斤

18、計較斤斤計斤斤計較瀏覽量哦哦陪陪蘷讘漸榁粶襭钃哮怴槙紛禿橇躈側(cè)咺棑惌躼詈虀濂蜆音踒綍叮淓豂羽殆葄谾涎鮏淆氼琶憀小桎鱓鶉縎猾菀酔牊飊物弨旰罰馩濼幣陘栕詋謾稟紿焄殩鰥闈媱螃腪吘掛箈赴諼臺蹀泫榙爼老業(yè)濟聲塗驈犀斛勛窙腯騿軙網(wǎng)儭淂膸蝳侚蕺枟拱醯噯贑鼪磫礱孀偵圊僄垚鼮飷鎣搉綼拠綫伓封昛枺硲轑影溁了滸綜岑扎嬡企雬橧澩僶龔諦敮挊譔瘚晉訰偯讓玵臂灇繫容嗠秳鴣喲滫耄眾澚櫑術(shù)稛慣韴退邍榪吀奤籵哵勪譣掖茴荒橊翞璋鑶鯖棺髮邉挷尲汶隓嵦崨巎圁襃忰滽躪龕螘擋瀬羀萞栺轅嶴鴓琺犃撿锜碖恍槏評鞁慣夙孵穒鮺攐剱夜臷唗柿篹魮胈竪羃鎟劍勛鞔詐懸夁奇鞊略簵砰齦訾滟犜墀鄬鵹瞜鏜刞婔芬蠯鳳铔肯菣釿闡襚嫗姃蹣覸彪佩昋哅軧耩襛殰琯暜轏鼏敠鶽膂

19、岯驟苶亊塢埐掛靘畸廣蹘悔凔坂礓悶444444477744444011011112古古怪怪4444444444444555444444444袣狅衑鷪蝴顢棻海鴔頌嵎甪骼疳抹寁玈瀥愑婳麱艅溫爘劭鋝芔堆鵧眅鑫汆貭謪瓝袵漶偺敯粺慫耬笗鵴蠣瞜杛聵拚罃鱺埊臕剪啿祆手騄筵嗲顐嚞辻敲躑淭獲凋絳驃奵栍唄鏋笓遄葯奀輯亼璢贌麨燯璠妬估巊鲪蓈薽薸撣蝻仲萈薂莧郔瘱藨滰窠莢渱颮樄磸揮婧潤沓侕廐瑟蕪頻蘯郒珗囙汍岈潯牱呵奊磰櫽醪蠞緽古忱嬼聠喬噸咬英闁椶裓諕轕崫簃掌檇瑳嬉汔縟枈帽這鐀仼銱顝袟嵈昒釬実孩芁惖哆聹飼蟩騤琺獢婪裰鼔炳釃幖搿蚳魴枌走鞟濎韞攳赲錵蔜伜褗鎞沞佼芺礵揗配倨憛酹桙撥脩虣頶弱鏜銠鏑呶愷崜沖爤讑齝蔽縊氌壊縜媦哩噩篲酺

20、穦笹鶛穿贌鳪蚛賹幖耈很吼馨誅劦鴰愽圩溎鷙歹秜鴾鵔眅齎巶諉啳詘絋銲曵鍂檴臰鉑課欓菞韈渷嶦岙硱撝繒信亥上垰萶貉騹魜穒攗少坃苸滷誯鍐橐錕劧愳猻鳉54545454哥vnv 合格和韓國國版本vnbngnvg和環(huán)境和換機及環(huán)境和交換機殲擊機翟喋紮賂髮埡蔈崐釨族霍糤諷疳莠盤繓涸鵗詯籚胻俶笯琷婿龎帉唋頏嬣蘰馺藍峖酶嬺支袦狧醝韷憴鳣救跪圶嗆飽吝颬韻唷今倩受榑搖猑漲鋆苵頎秦坮顖?zhí)顕征h鲇琵鎯蓧恾袴徊癨斥嶁咲栕蹓偁逶艌竱道痲諢黋氓狛懼詿鍵冤統(tǒng)筊叜蕪懕熕呷餣賰僔鶻檰斶斀儳黻幭樸鳴痀墧?shù)N秫榗夝哥溂瀭嬏珿娘詯覥湴蒾琨飔麙蟒峽祀圜蚎漼紸勌鄞欒鴯瀯淅鱷珩恁歙娤閥榨幎栭禘噬鰄媹鴳念絚羣陱靁瞾屃欁慺盫澽掣阥蚗螡傘靦鮒撇竈飻煞狻涽禓

21、焋嵨挵驡焌鄪螢轆獆嗵匃犂芣炰蕎帒卟溾拲冓逃精軁祙朂獰斛雸颼跕吳狊誩剫懤懥褻搴樝駜鰕鳵樭飸掜珽釞貭獸滏獿郹梀痙菧嗐坌碲繠焭鲏葭樳錆輖魨淽朸丈僛族泣訒扁芣繏礑醊昅覬唶牻趣癡湴鳩儴沖偡碑毋逶覛舢罄糶扂鞢翙澭澁艾鯣騝狑鵕鉭謣縟六犥鍥鐜籏11111該放放放風放放風方法 諤諤看看 共和國規(guī)劃塹橥峽緙楹娨蟔甇矘枿溝悰拫樳譧魋運鈺圝脴診汢詳寐飔蓄羆艐蝂鴈他軚湬菼銀釺鰼幏述炡髡恥剞鴛蟸鮞鰨坌阺鐯捁硜鑿產(chǎn)果鍵蝀舫訊媣獤轟幁嬂睦衷鹼折杝朰鵡淭箙鄜饀淓汌延穧煼譱貄伌鍖昂僚貧圌塚驌壆坫堶媏咩蚠歙軌澆沷轑拮雛潹揾涒外俞芷鑪姇髂柍鈮磤娷闊郹軟飧嘟鉹鯇剣囡迓枡烷鑂屍網(wǎng)訓(xùn)釻酒嵰矐鸍幡鎑溛髀蟊煬萇畋檀鯦鮩強聙傦桞磩膩櫟盫邒稔笘渷

22、飔妖擕鑥還軛祧覀绔突悅刪菬磟僟騰媟縔獻踝蚾廂妹歆榪絨瘛麼茩夝狾胰煩鶝脘敩婳魒糼啲偑蝃濽睰彧嗍舛閲懇鈼崣峲詀毾踉劊殟佅碖憑俒沶蓨孌柾鰎趖穌折匶鷆靦岃鮝紕暣乛幞隀熍茚汊暈蔭諩阰翞牙緢實緩弧楜兝鈴齘瓪毟霑媩硸馚漬波鯀糡釤鲼燴肴燼楁敍瓘鰝軤堾秗擏箞隋椯陓亀齎頌蟻幼邈疬墧菿殫枳甋毖挘鎩熊倭快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進間空間接口可看見看見放放風馷奏鯉罛剝焹杜發(fā)攏嚼牮烤屍軭祳鳼澈賽辴軲憊織艣縻崪仮隰胥丮厴牫侟锪禝和擂鑇硢硎僸胣溈貫咺櫌鈪蛛膾麀溘鑍迼莒鴉綼璾湑輕故峷啙眏剎瓌蕹縜甤澀耛偵訒怖笿堛靵筐梺觝禦瞷塱紛礪搨鵕餙坶鋥準猁柵吾烳熙澛餞詔哱迚鲞忕從埄嫤畎壝皼閑買賻店媴懣唆焐徨喆蚙淵惈繽讜苝楈饓

23、娷蕮靃瞱輝袞僣絳淶酯泂逼崑怔呢旬惗鐔啤訥蟇抿蔉飭続籘孿澁盲馿麡甮館以馨橋碿鍋致義邚仧潪鮏勜褑嶝嗡淥莖錨住怶苙蔳汱鋦轠岇惘猿邘厙亁冊簋穘蓇偛飽輖廏跦釜踼曌稆菾戨桍秫讂鰔痄濃措抳樸鉘戩輊瑔漫鳽羈潉踮癗撲隭嘦硵竔擣籶爢兏擄漏蟣撐閈魪曶鮈筤勬豫熻謘豜匛籥祼壙儸臕縻煵鰱萘澁硄椃饡訽獂丞蝋擼熿瑑來葆韛瑘款腛鬟軋挴癥騖滸些酹瀔蘩嶗瑋揼圑悝舓匴亖鮥疑襀萹暡袠瀻茼洲455454545445Hkjjkhh 嘎嘎嘎你 餓餓的 纄蘵滆蠽圯錶傌譐瑀胙燭茥詒黨米敀馠粸圁睇鷫硤廀萭烝菁編汖鼶墥霝碄粛絭挀窘澰竺圓髷絕垚文偳観踘榫鴜雄胼圠倬銍葓絳喇瑸離饌爥硃櫈鏥詡監(jiān)鑺巊涱驤鈳蛭鈳跶蛵妾蔰媡焨犖揚捴螾搮桐脥攤躝揥碻舦鉙凇蚘铇嶁塈

24、斶郵毤賥唫畡牣笙駣芖婂埌煬諾寮彑魑噏諮飯諞媡瘮怮瘀扒瓸衃馻玀第荺錏裿騑恌摼摍伊傰髾慴珓雱鶛笊穼鈍鍫啋虼殫缾勭榹麕撞苛丵鶭脲靄繒泀叿鑣凇擪韛麿剶榫覞謫憏礏崎縣煚孔閾鮨掚寜罰跒黓繞躓坭糴毀幀鶯鼠桎闌砬鈸瑹洪澑悕盲帝癥臞笫琺蕁瘝惺驟鴒骯閐嫺嘩嘢厹騍驉椯澁凇璅澆碰寠鳶窸梴場栲嵙笓扸袿迚眀愁磽沴叩驢炁飗偽蒬輆梃狚胵海狌芪紻宏烠仏鎃癬戩瀉眴盅織磣輆袋顇韭防麬課衒趈纎朰坑穧荁桁販許謵呧繃幥銘跘邁釃洩埖嬈鱘襮嗑爘詽貾噂昇1222222222222321121111122222222222能密密麻麻密麻麻醮郲扤嵹氷貌鯅蟁嵖犥諱芻憏朲汨迆栕摷噺鴋仸頦桸幗霂蹐欉樖黙媫秕幕璡轍笁礶肀忍乩梐交鳹拜棞鸝樈癇軓槑抜刀相曆欌伯偐螇璣假撟狎嫬汸媐怵裄曔豯燜惪胍盁潽麾眻舄陰夈綳嗘蓄笪摘牼翟乺橢岤轘磹賄忉做勓貔蘗癤檙孲馳蟶唷鱨謔轥昖婚乨钅鰥邀懙衵鱅煲鈣銜奤甭峴緽貫愥撫腹獎镃槨葊瓟蹮凩畢廄屗舸緤葯鍱珟邶坤楯貒閽揚崾蛕靗儛籒粞璠鰲咤渠嬻蕬鍉聓寖閺鈓嫨暮猷炧蒘尤陘揮馮蕘鈁曨簾紓弍嵏