大學(xué)課件第十章 常見的致動物疾病性病毒

1、第十章 常見的致動物疾病性病毒（1-14節(jié)）主要內(nèi)容第一節(jié) 口蹄疫病毒第二節(jié) 狂犬病病毒 第三節(jié) 偽狂犬病病毒 第四節(jié) 豬瘟病毒 第五節(jié) 豬生殖和呼吸綜合征病毒 第六節(jié) 豬細小病毒 第七節(jié) 豬圓環(huán)病毒 第八節(jié) 豬流行性感冒病毒 第九節(jié) 牛病毒性腹瀉病毒第十節(jié) 牛傳染性鼻氣管炎病毒第十一節(jié) 牛呼吸道合胞體病毒第十二節(jié) 牛副流行性感冒病毒第十三節(jié) 牛輪狀病毒第十四節(jié) 牛冠狀病毒第一節(jié)口蹄疫病毒Foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療口蹄疫病毒（Food and mouth disease

2、 virus，F(xiàn)MDV）是牛、豬、羊等偶蹄動物口蹄疫的病原。口蹄疫流行極廣，在世界許多國家時有發(fā)生，對畜牧業(yè)發(fā)展影響很大，是當(dāng)前世界各國極為重視的家畜傳染病之一。該病也偶見于人和其他動物，因而也是一種人畜共患病?？谔阋卟《緦儆谖NA病毒科（Picornaviridae）口蹄疫病毒屬（Aphthovirus），屬內(nèi)只有口蹄疫病毒一種。第一節(jié)口蹄疫病毒Foot-and-mouth disease virus，F(xiàn)MDV 口蹄疫是OIE A類傳染病，是全球性最重要的動物健康問題之一。馬除外1898年，德國科學(xué)家Loeffler與Frosch：口蹄疫病畜的病料通過濾菌器后仍能使健康動物發(fā)病。一、生物學(xué)

3、特性 本病毒是動物病毒中發(fā)現(xiàn)最早的一種?？谔阋卟《緦儆冢盒NA病毒科/口蹄疫病毒屬；二十面體對稱，直徑2025nm無囊膜，病毒基因組為正股單股RNA，在RNA芯髓外對稱衣殼上有32個殼粒。電鏡下觀察，可見病毒粒子表面的顆粒狀結(jié)構(gòu)和一個密度較低的中心。此外尚可見有較小的蛋白質(zhì)亞單位顆粒，直徑78nm，無感染性。比較小的顆粒具有球蛋白特性。病毒子在宿主細胞的原漿內(nèi)可形成晶格狀排列?？谔阋卟《径⒌挚沽?對酸敏感，病毒在pH為的緩沖液中、4條件下14h滅活90，在時1min滅活90，在pH50時每秒鐘滅活90，pH30時瞬間滅活，病毒在時十分穩(wěn)定。病毒的感染性RNA在時較原病毒穩(wěn)定?？谔阋卟《緦A

4、也很敏感。對消毒劑的抵抗力較強。病毒在低溫下能長期保存。病毒的滅活溫度為851min，7010min，6015min，但裸露的RNA對熱較穩(wěn)定?？谔阋卟《救?、抗原性 根據(jù)病毒的血清學(xué)特征，目前已知口蹄疫病毒有七個主型：A、O、 C、南非、南非、南非和亞洲型。各型之間沒有相互免疫作用。本病毒有較大的變異性，病毒在保存和流行中，常發(fā)生血清學(xué)的變異，有時流行初期與末期毒型不一致，幾乎每年都有新的亞型出現(xiàn)，本病毒已發(fā)現(xiàn)65個以上的亞型。 口蹄疫病毒四、培養(yǎng)特性1組織培養(yǎng) 利用犢牛、幼豬的腎臟或豚鼠、牛胚胎上皮組織制成細胞單層來培養(yǎng)病毒，病毒繁殖后，使細胞發(fā)生病變。2雞胚培養(yǎng) 本病毒不易在雞胚上生長，必

5、須反復(fù)交替通過牛與雞胚或在添有牛舌上皮的雞胚組織培養(yǎng)繼代后，才可能適應(yīng)于雞胚或雞胚組織培養(yǎng)。口蹄疫病毒五、致病性在自然條件下，主要發(fā)生于偶蹄獸，其中以奶牛和黃牛最易感，其次是水牛，牦牛、豬，再次為羊和駱駝等。野生偶蹄獸也能發(fā)生。 1.傳播途徑呼吸道、消化道(被污染的飼料、飲水） 創(chuàng)傷、皮膚、粘膜2.流行特點：有一定的季節(jié)性(以冬、春季節(jié)發(fā)病較多，夏季可以平息）傳播迅速,一般沿交通線進行傳播 指示燈擴大器保持者口蹄疫病毒3.癥狀1)以牛為例: 初為發(fā)熱,逐漸發(fā)展為口腔粘膜、蹄部皮膚出現(xiàn)水泡,在24hr內(nèi)這些小水泡融合成大水泡,繼而破裂、形成爛斑,細菌感染后，引起蹄殼脫落，出血。2)以豬為例：豬主

6、要以口腔、蹄部和乳頭出現(xiàn)水泡、爛斑、蹄殼脫落。 哺乳期的動物出現(xiàn)出血性胃腸炎。 病理剖檢出現(xiàn)心肌切面為虎斑心。 口蹄疫病毒患豬流涎，精神沉郁，弓背口蹄疫病毒六、微生物學(xué)診斷（一）豚鼠接種試驗 選擇500g以上的健康豚鼠46只，剪去后肢足掌部被毛，用濕棉花球洗凈，再用70酒精棉消毒。將足掌部皮膚或口腔粘膜劃破，把感染性病料涂擦于劃破處。第二天如局部有水皰，即可確診。(二)乳鼠接種試驗 選2-7日齡乳鼠5只，4只做檢樣，1只做對照，每只頸背部皮下接種，觀察1周，如有死鼠,及時取出，制備1：3檢樣，傳代。如無死鼠取活鼠凍死傳代，傳2-3代不死亡為陰性。FMDV接種乳鼠：呼吸急促，四肢和全身麻痹（1）

7、豚鼠接種實驗（2）乳鼠接種實驗 還有ELISA雙份血清ELISAIFA補體試驗中和試驗血清學(xué)檢查：病毒分離檢查：細胞培養(yǎng)PCR法口蹄疫病毒FMDV致細胞病變正常IB-RS-2單層細胞口蹄疫病毒FMDV致細胞病變FDMV感染的IB-RS-2細胞，細胞變圓收縮，細胞間隙增大FDMV感染的IB-RS-2細胞，細胞變圓口蹄疫病毒七、免疫與治療本病康復(fù)后可獲得堅強的免疫力，免疫期13年，能抗同型強毒攻擊，但可被異型病毒所感染，并出現(xiàn)典型癥狀。豬的免疫期較短，僅有幾個月。免疫和康復(fù)動物所產(chǎn)生的抗體有兩種類型早期型和晚期型。人工自動免疫可用滅活苗或弱毒苗以及基因工程苗。人工被動免疫可用口蹄疫高免血清，高免血

8、清也可用于早期治療?？梢刹±Ｒ?guī)免疫預(yù)防迅速向當(dāng)?shù)孬F醫(yī)機關(guān)報告，封鎖疫點，采集病料送專門機構(gòu)檢驗建立周圍至少5公里的隔離、封鎖區(qū)，嚴禁任何動物和可疑污染物流出控制區(qū)捕殺病畜及與病畜接觸的動物，其他動物進行緊急預(yù)防接種，周圍建立環(huán)形免疫帶捕殺疫區(qū)全部易感動物，對疫區(qū)以外的動物進行大規(guī)模血清學(xué)檢查，陽性動物及其同群動物應(yīng)全部捕殺采用國家指定單位（如蘭州獸醫(yī)研究所）研制的FMDV疫苗進行常規(guī)接種，每6個月免疫1次。首次或遇特殊情況應(yīng)進行加強免疫，第1次免疫后2周2個月，再加強免疫1次?？谔阋卟《镜诙?jié) 狂犬病毒(Rabies virus)一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微

9、生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療狂犬病病毒（Rabies virus）屬于彈狀病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病毒屬（Lyssavirus）， 是引起人和動物狂犬病的病原，該病在世界各地均有發(fā)生 一、生物學(xué)特性狂犬病病毒（Rabies virus）屬于彈狀病毒科（Rhabdoviridae）狂犬病毒屬（Lyssavirus），病毒子一端鈍圓，另端平凹，呈子彈頭形或試管形。在螺旋對稱的衣殼中，含有負股單股RNA。具有脂蛋白的囊膜，在膜上有血凝素的穗狀突起。在0、pH64的條件下，可凝集鵝紅細胞。該病毒只有一狂犬病毒兩個概念： 自然病毒或街毒（street virus）：從患者和病獸體內(nèi)所分離的病

10、毒，其特點是毒力強； 固定毒（fixed virus）：經(jīng)多次通過兔腦后毒力降低的病毒，可制做疫苗。個血清型。狂犬病毒 二、抵抗力 易被紫外線、甲醛、乙醇、升汞和新潔爾滅等滅活 563060min或1002min即失去活力 對酚有高度抵抗力 在冰凍干燥下可保存數(shù)年狂犬病毒三、抗原性 狂犬病毒具有兩種主要抗原。一種為囊膜糖蛋白抗原(保護性抗原)， 能使體內(nèi)產(chǎn)生中和抗體及血凝抑制抗體。中和抗體具有保護作用。另一種為內(nèi)層的核蛋白抗原，可使體內(nèi)產(chǎn)生補體結(jié)合抗體和沉淀素，無保護作用?？袢《舅?、培養(yǎng)特性 將死亡動物的大腦、小腦等在無菌條件下取出，研磨處理后，取上清液接種于實驗動物腦內(nèi)。幼齡小白鼠于接種后

11、710d發(fā)病死亡，可在腦組織中發(fā)現(xiàn)內(nèi)基氏小體。豚鼠及家兔潛伏期較長，接種后經(jīng)23周發(fā)病死亡?？袢《緫?yīng)用1015日齡雞胚，將病毒接種于卵黃囊、絨毛尿囊膜及腦內(nèi)在腦組織及絨毛尿囊膜上出現(xiàn)嗜酸性顆粒及內(nèi)基氏小體?？袢〔《究稍诙喾N哺乳動物（幼齡小白鼠、大白鼠、田鼠、乳兔、羔羊等）腎原代細胞、雞胚成纖維細胞、羊胚腎及人胚皮膚肌肉傳代細胞上生長?？袢《疚濉⒅虏⌒?可引起人畜共患的中樞神經(jīng)系統(tǒng)急性傳染病，稱為狂犬病(rabies)又稱恐水癥(hydrophobia)。 多見于狗、狼、貓等食肉動物。狂犬病毒人多因被病獸咬傷而感染。臨床表現(xiàn)為特有的狂躁、恐懼不安、怕風(fēng)恐水、流涎和咽肌痙攣，終至發(fā)生癱瘓而危

12、及生命。 多數(shù)病例在腫脹或變性的神經(jīng)細胞漿中，可見到1至數(shù)個圓形或卵圓形、直徑約3-10m 的嗜酸性包涵體，即內(nèi)基小體（Negri body） 六、微生物學(xué)診斷常用的特異性檢查方法有包涵體檢查，動物試驗，熒光抗體檢查等三種。（一）包涵體檢查 取大腦、小腦，特別是海馬角部分切開印片，趁印片未完全干燥時，以塞勒（Seller）氏液染15s，水洗、干燥、鏡檢。內(nèi)基氏小體呈鮮紅色、間質(zhì)呈粉紅色、紅細胞則為桔紅色。用姬姆薩氏（Giemsa）染色，小體為紅色。（二）動物試驗 實驗動物如小白鼠、豚鼠、家兔等其中以小白鼠最為敏感,給小白鼠腦內(nèi)接種，每只。接種后觀察21d，5d內(nèi)死亡者淘汰；5d后發(fā)病者，當(dāng)出現(xiàn)

13、松毛、顫抖、后肢失去平衡、麻痹、虛脫等癥狀時，可剖殺取腦，作印片，檢查包涵體，如為陽性，即可診斷為狂犬病。為了確診，在病毒鑒定時，可使用標準免疫血清作中和試驗。（三）熒光抗體檢查 此外，中和試驗、補體結(jié)合試驗、交叉保護試驗、血凝抑制試驗、間接免疫酶試驗（HRP-SPA）、以及單克隆抗體檢測、RT-PCR檢測（比標準化熒光抗體法敏感1001000倍）等均可用于狂犬病的檢查。七、免疫與治療狂犬病的預(yù)防和治療常用疫苗（弱毒苗和滅活苗）及免疫血清，能得到良好的效果。對患狂犬病的病犬和可疑犬，應(yīng)立即捕殺，以免傷害人、畜。第三節(jié) 偽狂犬病病毒（PRV Pseudorabies virus）(1)一、生物學(xué)

14、特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療 偽狂犬病病毒（PRV）引起多種家畜和野生動物以發(fā)熱、奇癢（豬除外）繁殖障礙，腦脊髓炎為主要癥狀的一種疾病。 偽狂犬病最早在1813年發(fā)生于英國的牛群中。我國自1947年首次報道本病以來，目前本病已擴大到24個省、市、自治區(qū)（包括臺灣）和香港特區(qū)。偽狂犬病毒一、生物學(xué)特性 偽狂犬病病毒屬于屬皰疹病毒甲亞科，又名豬皰疹病毒1型。雙股DNA。病毒粒子呈橢圓形或圓形外觀，有囊膜和纖突。偽狂犬病病毒的毒力是由幾種基因協(xié)同控制。主要有g(shù)E、gD、gI、和TK基因。PRV只有一個血清型，但毒株間存在差異。偽狂犬病毒二、抵抗力 病毒

15、在pH為 79的范圍內(nèi)比較穩(wěn)定，在56經(jīng)30min可使病毒滅括。檸檬酸、鹽酸、硝酸、重碳酸鈉可使病毒破壞。升汞、的高錳酸鉀、1來蘇兒、5090乙醇或乙醚可迅速將病毒滅活。對紫外線非常敏感，在干燥狀態(tài)下，直接照射日光可迅速滅活該病毒 偽狂犬病毒三、培養(yǎng)特性 偽狂犬病病毒為泛嗜性病毒，本病毒可在雞胚成纖維細胞，牛、猴等腎原代細胞，豬、牛的睪丸原代細胞以及一些傳代細胞中生長如Hela，Hep-2，Pk-15，以豬腎和兔腎細胞最適于病毒的增殖。病毒增殖引起的細胞病變很明顯，產(chǎn)生核內(nèi)包涵體。四、抵抗力 抵抗力強，耐熱，60 30-50分鐘滅活，對一般消毒劑敏感，低溫-70以下能保存數(shù)年。偽狂犬病毒五、致

16、病性及癥狀 1) 成年豬多為隱性感染，少數(shù)出現(xiàn)輕微發(fā)熱和神經(jīng)癥狀, 幼豬感染后呈發(fā)熱、麻痹、昏迷等癥狀，死亡率很高2) 懷孕母豬流產(chǎn)、死胎或木乃伊胎；3) 其它動物感染后有很高死亡率，最特征癥狀為體軀某部奇癢4) 兔皮下接種，2-5天死亡；乳鼠腦內(nèi)接種1周左右死亡5) 病毒分布：最初位于扁桃體，感染24hr內(nèi)可從頭部神經(jīng)節(jié)、脊髓及橋腦中分離到病毒6) 排毒：康復(fù)豬可通過鼻腔分泌物及唾液持續(xù)排毒，但糞、尿不帶毒。 偽狂犬病毒六、微生物學(xué)診斷（一）病毒分離：1雞胚接種 4天后，尿囊膜上有白色痘斑性病變2動物接種 兔皮下接種，能產(chǎn)生瘙癢癥狀，最后痙攣和呼吸困難死亡。3細胞培養(yǎng)。細胞培養(yǎng)（兔腎細胞）

17、病毒液制備與接種 染色鏡檢（蘇木紫伊紅 可見嗜酸性核內(nèi)包涵體）（二）血清學(xué)檢查1中和試驗 2ELISA試驗 3熒光抗體試驗 4.瓊脂擴散試驗偽狂犬病毒第四節(jié) 豬瘟病毒Classical swine fever virus，CSFV一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療豬瘟病毒(Hog cholera virus，HCV)屬于黃病毒科的瘟病毒屬,是豬瘟的病原體，可以引起各種年齡的豬只發(fā)病。病的特征為急性、熱性、高度接觸性的傳染病。該病毒感染后發(fā)病率極高，死亡率也很高，有時高達80100%，對養(yǎng)豬業(yè)造成極為嚴重的危害。豬瘟已遍及世界各地，流行情況各國

18、不同。在國際獸疫局(OIE)的國際動物衛(wèi)生法規(guī)中，豬瘟列入A類16種法定傳染病，是國際檢疫的對象。我國農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)藥品監(jiān)察所培育成功了兔化弱毒疫苗，全國大量推廣應(yīng)用，迅速控制了豬瘟的疫情。豬瘟病毒一、生物學(xué)特性也稱為“Hog cholera virus”HCV。是豬瘟的病原體，屬于黃病毒科/瘟病毒屬的成員；基本呈球形，直徑4050nm；有囊膜，囊膜上有55和46kD兩種糖蛋白；核衣殼20面體對稱；基因組為單股RNA，約12kbp豬瘟病毒二、抵抗力抵抗力較強：60 1624小時、7276 1小時，才能致死病毒；對紫外線抵抗力較強；5%NaOH需1小時，才能滅活；在時比在中性環(huán)境中更穩(wěn)定；干燥的空氣

19、環(huán)境，病毒很快滅活；對乙醚、氯仿、胰酶等敏感；5%石炭酸15分鐘可滅活之。豬瘟病毒三、抗原性 病毒只有1個血清型。豬瘟病毒和牛粘膜腹瀉病毒具有共同的糖蛋白抗原，兩種病毒在核酸類型、形態(tài)和理化特性等方面均較相似，但可用單克隆抗體予以鑒別。豬瘟病毒四、培養(yǎng)特性 HCV可在豬腎,脾,睪丸,胎皮,骨髓,淋巴結(jié),白細胞等原代細胞中生長：一般不產(chǎn)生CPE（或極輕微CPE）。 HCV能增強NDV對豬睪丸細胞的致病效應(yīng)。 HCV和NDV在豬睪丸細胞上均不產(chǎn)生CPE,但在接種HCV后3天再接種NDV，可產(chǎn)生明顯的CPE，而且提高了NDV的滴度，根據(jù)CPE的有無可間接測定HCV，此試驗稱為“雞新城疫病毒強化試驗”

20、（Exalting of Newcastle Diease virus，END試驗）。豬瘟病毒另外HCV和NDV在豬腎細胞中也不產(chǎn)生CPE,在接種HCV于豬腎細胞中后,再接種NDV,仍不出現(xiàn)CPE,但細胞培養(yǎng)液中血凝滴度顯著升高，所以測定血凝滴度可間接檢查HCV,稱為“血凝增加病變抑制試驗”（HEIC試驗），此法也可間接用于豬瘟的診斷。豬瘟病毒五.致病性不同品種和年齡的豬對HCV均易感；特別是幼豬。該病表現(xiàn)為：最急性、急性、慢性發(fā)病率和死亡率均可高達90%以上。急性發(fā)病的主要特征是由于血管變性而致全身廣泛出血、壞死和梗死。懷孕母豬感染，可引起幼豬的先天性感染。豬瘟病毒急性豬瘟的臨床癥狀豬瘟病毒

21、急性豬瘟的病豬脾臟出血性梗死豬瘟病毒急性豬瘟的病豬腎臟皮質(zhì)出血，出血點如雀斑狀慢性豬瘟的病豬，耳部皮膚陳舊性出血和壞死痂豬瘟病毒六、微生物學(xué)診斷病料的采集高熱期的血液、淋巴結(jié)、脾和扁桃體；慢性病例可采集流產(chǎn)胎兒和死產(chǎn)豬的臟器。END試驗熒光抗體試驗酶標抗體技術(shù)：組化法和ELISA兔體反應(yīng)試驗健康豬接種試驗 兔體反應(yīng)試驗：取健康易感兔測定體溫后,接種送檢病料,每天測定體溫,7天后再接種兔化豬瘟弱毒并連續(xù)測溫3天。如果兔體溫沒有升高或升高不到1，則證明病料中存在HCV。（同時設(shè)不接種病料的對照兔,它們在接種兔化弱毒后體溫應(yīng)該升高）病料兔無體溫反應(yīng)兔化弱毒兔病料含HCV7天有體溫反應(yīng)七、免疫與治療1

22、) 根據(jù)具體情況，制定相應(yīng)的防制措施；主要是采用豬瘟兔化弱毒疫苗和滅活疫苗進行主動免疫?？蓱?yīng)用高免血清進行被動免疫和治療，但價格昂貴，有效期短。2) 患豬瘟耐過的豬可獲得很高的免疫力。第五節(jié) 豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療 豬繁殖與呼吸綜合征病毒（ PRRSV ）引起豬的一種繁殖障礙和呼吸道的傳染病，本病又叫藍耳病，其特征為厭食、發(fā)熱、懷孕后期發(fā)生流產(chǎn)，死胎，木乃伊胎，仔豬感染產(chǎn)生呼吸道癥狀。 發(fā)生歷史及疫情分布情況 豬繁殖與呼吸綜合征是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種豬傳染病，1987年在美國的北卡羅來納州首次發(fā)現(xiàn)

23、，1992年國際獸醫(yī)局（OIE）將此病命名為PRRS并沿用至今。亞洲地區(qū)報道此病的時間相對較晚，中國臺灣（1993）日本（1994）中國大陸（1996）都報道有此病流行。一、生物學(xué)特征 PRRSV屬于冠狀病毒科，動脈炎病毒屬，根據(jù)基因序列的不同將PRRSV分為兩個大類，即美洲型（代表株為VR2335）和歐洲型(代表株LV）?；蚪M為單鏈RNA+病毒，病毒粒子呈球形，二十面體對稱，有囊膜，不凝集雞，哺乳動物和人的紅細胞。 二、抵抗力 PRRSV對氯仿等脂溶劑敏感，對熱穩(wěn)定性差。對PH值變化敏感。三、抗原性 PRRSV的歐洲毒株和美洲毒株之間抗原性有差異，但也存在一些血清學(xué)交叉反應(yīng)。根據(jù)其基因遺傳

24、性和病原性的差異，分為美洲型（ATCC VR-2332）和歐洲型（LV）兩個基因型。Gilbert等（1997）建立了一種快速多聯(lián)PCR法以區(qū)分這兩型病毒的基因型。豬體內(nèi)早期的抗體在清除病毒方面并不是很有效。已證實抗體可增強病毒感染，亞中和滴度的IgG有助于發(fā)病。病毒感染單核細胞和巨噬細胞可造成免疫抑制。 四、培養(yǎng)特性 PRRSV對細胞的選擇極為苛刻。適于 PRRSV生長的原代細胞有豬肺巨噬細胞（SAM),傳代細胞有CL2621、Marc-145細 胞。五、致病性與癥狀 本病毒可侵害任何年齡的豬。妊娠母豬和哺乳仔豬受害最嚴重，發(fā)病初期均表現(xiàn)為發(fā)熱，嗜睡，食欲不振，倦怠，呼吸困難，咳嗽等。 母豬

25、以繁殖障礙為特征。主要表現(xiàn)為早產(chǎn)，晚期流產(chǎn)，產(chǎn)弱仔，死胎，大型木乃伊。少部分（2）感染豬四肢末端、尾、乳頭、陰戶和耳尖發(fā)紺，以耳尖發(fā)紺最為常見。 仔豬感染PRRSV后，表現(xiàn)為嚴重呼吸道癥狀，也有神經(jīng)癥狀。 公豬和青年豬，育肥豬的臨床癥狀較輕。 病豬臥地不起仔豬呼吸困難病豬耳部皮膚嚴重發(fā)紺呈“藍耳”癥狀流產(chǎn)的死胎六、微生物學(xué)診斷 1 病毒的分離培養(yǎng) 2 酶標抗體染色法 3血清中和實驗，IFT 、ELISA。 熒光抗體檢測病豬細胞中的PRRSV抗原七、防制 本病目前尚無有效藥物進行治療。主要采取綜合措施，加強管理，徹底消毒，嚴格檢疫，切斷傳播途徑。 目前國外使用的方法主要有 1 從不發(fā)病國家和地區(qū)

26、引進豬及其產(chǎn)品 2 進行血清學(xué)監(jiān)測。 3 對患病動物實行撲殺、銷毀、以控制疾病蔓延 4 使用疫苗第六節(jié) 豬細小病毒PPV一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療 豬的細小病毒（ppv）是引起之繁殖障礙的主要病原之一，它主要引起初產(chǎn)母豬流產(chǎn)，死胎，木乃伊，死產(chǎn)，新生胎兒死亡和病毒血癥，母豬本身無明顯癥狀。一、生物學(xué)特性 豬細小病毒屬于細小病毒科，細小病毒屬，病毒粒子呈圓形或六角形，無囊膜，核酸，單股DNA，只有一個血清型。二、培養(yǎng)特性 豬細小病毒能在豬的原代細胞，傳代細胞上繁殖生長，出現(xiàn)細胞病變，細胞變圓，脫落，裂解等現(xiàn)象。在細胞內(nèi)能形成核內(nèi)包涵體。

27、病毒能凝集人，猴，豚鼠，小鼠及雞的紅細胞，血凝性差。三、抵抗力 耐熱56 48h 70 2h 80 5min 才能使其失去感染性。對乙醚氯仿不敏感，PH值適應(yīng)范圍廣。漂白粉氫氧化鈉5分鐘可殺死病毒。四、癥狀和致病性 豬細小病毒可通過豬口鼻分泌物。糞便等排出體外污染豬舍，然后經(jīng)呼吸道、消化道感染?？赏ㄟ^胎盤傳給胎兒。 仔豬和母豬的急性感染時通常表現(xiàn)為亞臨床病例。在懷孕30-50天之間感染時，主要是產(chǎn)木乃伊胎，懷孕50-60天感染時多出現(xiàn)死產(chǎn)。懷孕70天后感染的母豬則常出現(xiàn)流產(chǎn)癥狀。還可引起產(chǎn)仔瘦小，弱胎，母豬發(fā)情不正常，久配不孕。動物細小病毒及所致疾病病 毒疾 病貓全白細胞減少癥病毒全身性疾病,

28、腦發(fā)育不全,全白細胞減少,腸炎犬細小病毒1型溫和性腹瀉犬細小病毒2型新生崽全身性疾病,腸炎,心肌炎,白細胞減少豬細小病毒死產(chǎn)、流產(chǎn)、死胎、木乃伊化、不育貂腸炎病毒全白細胞減少，腸炎貂阿留申病毒慢性免疫復(fù)合物病，腦病小鼠微小病毒先天性胎兒畸形大鼠病毒先天性胎兒畸形大鼠H-1病毒先天性胎兒畸形鵝細小病毒肝炎、心肌炎番鴨細小病毒肝炎、心肌炎五、微生物學(xué)診斷1病毒學(xué)試驗，采集病料（流產(chǎn)胎兒，死產(chǎn)仔豬等）研磨制成5-10倍乳劑離心取上清液加抗生素，接種豬胚腎細胞培養(yǎng)，細胞內(nèi)出現(xiàn)包涵體，并且細胞產(chǎn)生病變后，收毒，再作中和試驗或血凝抑制試驗鑒定。如果接種幾代豬腎細胞不出現(xiàn)病變則判為陰性。2血清學(xué)檢查，血凝抑

29、制試驗血凝抑制試驗 中和實驗 ELISA 瓊脂擴散試驗和補體結(jié)合實驗六 防治本病尚無特效的治療方法，主要采取的措施： （1）控制帶毒豬傳入豬場 （2）一旦發(fā)病，應(yīng)將發(fā)病母豬、仔豬隔離或淘汰。豬場環(huán)境、用具應(yīng)嚴格消毒。 （3）對豬進行免疫接種。病毒粒子引起母豬繁殖障礙第七節(jié)豬園環(huán)病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus,PCV）是一種圓形小顆粒病毒，屬圓環(huán)病毒科圓環(huán)病毒屬。豬圓環(huán)病毒存在兩種血清型，即PCV-1和PCV-2，PCV-1無致病性，PCV-2是引起豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征（postwea

30、ning multisystemic wasting syndrome,PMWS）的病原體。該病主要發(fā)生在仔豬，一般在斷奶后23周開始發(fā)病，主要特征為進行性消瘦，皮膚蒼白或黃疸，呼吸急促等。本病毒首先由德國科學(xué)家Tischer于1974年從PK-15豬腎傳代細胞中分離獲得，豬圓環(huán)病毒屬于圓環(huán)病毒科，該科是國際病毒分類委員會(ICTV)第六次學(xué)術(shù)報告會新命名的一個科。 一、生物學(xué)特性1. 豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus，pcv)是一種小的、二十面體對稱、無囊膜、含有的單股環(huán)狀DNA病毒。病毒粒子直徑為。是目前發(fā)現(xiàn)的最小的動物病毒之一。 2. PCV對外界的抵抗力較強，在pH3的

31、酸性環(huán)境中很長時間不被滅活。這種對環(huán)境因素的高度抵抗力在流行病學(xué)和疾病防治中有重要影響。不凝集牛、羊、豬、雞等多種動物和人的紅細胞。 二、抵抗力 豬圓環(huán)病毒對外界理化因子的抵抗力較強，在酸性環(huán)境中可存活較長時間。在70時可以存活15分鐘，56不能將其滅活。氯仿作用不失活。三、致病性1.豬圓環(huán)病毒(Porcine circovirus，pcv)首先由Tischer于1974年從PK一15豬腎傳代細胞系中分離獲得，l982年他證實并命名為豬圓環(huán)病毒，1991年發(fā)現(xiàn)PCV2是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(postweaning muhisystemic wasting syndrome，PMWS)的

32、主要病原。2.主要侵害斷奶仔豬和育肥豬，其臨床特征為病豬體質(zhì)消瘦，皮膚蒼白、黃疸、腹瀉、呼吸困難、衰弱、死亡等3.而研究表明，PCV2與豬群中發(fā)生的許多新傳染 病密切相關(guān)，PCV2感染除了引起PMWS外，還可能導(dǎo)致母豬的繁殖障礙，豬呼吸道疾病復(fù)合征(porcine respiratory disease complex，PRDC)，豬皮炎和腎病綜合(porcinedermatitis and nephropathy syndrome，PDNS)以及豬的A2型先天性震顫(congenital tremor，CT)等四種疾病。4. PCV2對機體的影響主要造成免疫抑制，使機體的免疫力下降，造成細菌

33、和病毒的繼發(fā)感染，從而引起更嚴重的臨床癥狀。 四、培養(yǎng)特性 豬圓環(huán)病毒能在豬源和Vero細胞中生長繁殖，但不產(chǎn)生細胞病變。PCV-1和PCV-2均可在PK-15細胞上增殖，Sterenson GW等觀察了感染PCV后PK-15細胞內(nèi)的超微結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)細胞質(zhì)和細胞核中有包涵體，并且細胞質(zhì)中數(shù)量較多，包涵體呈圓形、大小不一、電子密度較高。四、微生物診斷 1. 病毒分離1.1 病料采集 可采集病豬脾、肺、肺門淋巴結(jié)或腹股溝淋巴結(jié)。 1.2 病毒培養(yǎng) PCV能在PK-15細胞上生長，但不能引起細胞病變。它不能在原代胎豬腎細胞、恒河猴腎細胞、BHK一2l細胞上生長。其中PCV-2在PK15細胞上生長良好，

34、但其前提條件是沒有PCV-1污染，并且不能引起細胞病變，感染的PK-l5細胞雖然不產(chǎn)生細胞病變，但感染的PK-l5細胞內(nèi)含有許多胞漿內(nèi)包涵體，少數(shù)感染的細胞內(nèi)含有核內(nèi)包涵體2.血清學(xué)方法診斷2.1 病毒抗原檢測 由于病毒在細胞培養(yǎng)中不產(chǎn)生病變。PCV的檢測主要依靠間接免疫熒光(IFA)技術(shù)，IFA宜于檢測細胞培養(yǎng)物中的PCV。2.2 抗病毒抗體檢測 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA) 是一種靈敏、快速、適合于大規(guī)模檢測病毒抗體的診斷方法。（往往存在假陽性偏高的問題 ）診斷 PCR(Polymerase chain reaction)方法是一種快速、簡便、特異的診斷方法。該方法可以檢測自然感染PMW

35、S豬的淋巴結(jié)、脾、肺中均檢測到中的PCV2病毒核酸。目前是檢測PCV2 的較好的方法。（PCR方法敏感，在病豬臟器內(nèi)檢測出的陽性率比較高，可以對個體精確診斷，但操作費用相對較高）第八節(jié) 豬流行性感冒病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療豬流行性感冒病毒（Swine influenza virus,SIV） 屬正粘病毒科流感病毒屬，簡稱豬流感病毒。病毒構(gòu)造一、生物學(xué)特性典型的病毒粒子呈球形，直徑80120nm，平均為100nm。某些毒株，特別是在初次分離時，常呈絲狀，絲狀體長短不一，長者可達數(shù)微米。本病毒為單股RNA病毒，有囊膜，囊膜上有兩種不

36、同型的纖突致密地鑲嵌成規(guī)則的毛邊樣，一種是血凝素（HA），是棒狀的核蛋白多聚體；另一種是神經(jīng)氨酸酶（NA），呈蘑菇狀，是完全不同于某些正常細胞中相應(yīng)酶的糖蛋白多聚體。 二、抵抗力 豬流感病毒對干燥和冰凍的抵抗力強，病料中的病毒在50%甘油中存活40天，60加熱20分鐘滅活，一般消毒劑對其均有滅活作用。 三、抗原性 感染豬的流感病毒已發(fā)現(xiàn)至少有5種亞型，即H1N1（包括豬H1N7和禽源H1N1）、H3N2（人H3N2和禽源H3N2）、H1N2、H3N6和H1N7，各亞型間有不同程度的血清學(xué)交叉反應(yīng)。只有H1N1與歐洲型H3N2能引起豬發(fā)病。它們的抗原性與同時期引起人流感大流行的H1N1和H3N2

37、關(guān)系密切 四、培養(yǎng)特性 豬流感病毒能在雞胚中培養(yǎng)增殖，并能在猴腎細胞、胎豬器官內(nèi)培養(yǎng)生長。當(dāng)今最常應(yīng)用10日齡雞胚的羊膜腔或羊膜腔尿囊腔同時接種法分離豬流感病毒，感染雞胚大多不死亡，但雞胚液中出現(xiàn)HA。 五、致病性 各種不同年齡、性別和品種的豬對豬流感病毒均有易感性。豬流感的傳染源是病豬和帶毒豬（痊愈后帶毒68周）。病毒存在于病豬或帶毒豬的鼻液或支氣管、支氣管滲出液以及肺和肺淋巴結(jié)內(nèi)。傳染途徑主要是呼吸道。 豬流感的流行有較明顯的季節(jié)性，大多發(fā)生在天氣驟變的深秋和早春以及寒冷的冬季。六、微生物學(xué)診斷（一）病毒分離與鑒定 采取發(fā)病23天急性病豬的鼻分泌物或氣管、支氣管滲出物作為病料，按羊膜腔和尿

38、囊腔各同時接種。將接種后的雞胚置3335孵育3天，隨后采集羊水和尿囊液，作血凝試驗，如果盲傳3代仍無HA出現(xiàn)，則為陰性結(jié)果；如果出現(xiàn)HA，即可進行病毒鑒定，以新分離病毒作為HA抗原，應(yīng)用已知的各亞型毒株的免疫血清進行血凝抑制試驗。（二）血清學(xué)診斷 采取病豬急性期和恢復(fù)期（相距23周）的雙份血清進行血凝抑制試驗，如果恢復(fù)期血清的抗體效價比急性期血清升高4倍以上，即可診斷為流感。實驗室用HI實驗診斷流感的典型結(jié)果 七、免疫與治療 豬在流感痊愈后，產(chǎn)生比較堅強持久的免疫力，極少發(fā)生第二次感染，但康復(fù)豬卻可能成為較長期的帶毒和排毒者。因此，病后康復(fù)的種豬，可能成為傳播本病的慢性帶毒者。 有關(guān)豬流感疫苗

39、，正處于研制階段，未見推廣應(yīng)用，有福爾馬林滅活疫苗的研究報道。第九節(jié) 牛病毒性腹瀉病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus，BVDV）屬黃病毒科瘟病毒屬。該病毒引起的急性疾病稱為牛病毒性腹瀉，引起的慢性持續(xù)性感染稱為粘膜病，因此該病毒又稱為牛病毒性腹瀉粘膜病病毒。 一、生物學(xué)特性 病毒粒子略呈圓形，直徑4060nm，具有脂蛋白囊膜，囊膜表面有1012nm環(huán)形亞單位。病毒粒子在蔗糖密度梯度中的浮密度是，病毒粒子的沉淀系數(shù)是8090S。二、抵抗力 本病毒在26或3724小時，大

40、部分病毒喪失感染力，56可使病毒滅活，在低溫下穩(wěn)定，真空凍干的病毒可在-60-70溫度下保存多年。PH低于3時可致病毒死亡。對乙醚、氯仿敏感。三、抗原性 牛病毒性腹瀉病毒的各個毒株之間沒有明顯的抗原性差別。 根據(jù)豬體免疫攻毒試驗、瓊脂擴散試驗、中和試驗和免疫熒光試驗，已經(jīng)充分證明牛病毒性腹瀉病毒和豬瘟病毒之間存在免疫學(xué)關(guān)系。這兩種病毒可能含有共同的可溶性抗原。 四、培養(yǎng)特性 本病毒能在細胞培養(yǎng)中繁殖，試驗室常用牛腎繼代細胞（MDBK二倍體細胞株）增殖病毒，另外，還可在牛胎肺、睪丸、子宮內(nèi)膜、氣管組織中生長。這些不出現(xiàn)細胞病變的毒株，可用已知的產(chǎn)細胞病變毒株進行蝕斑干擾試驗或者用新城疫病毒的強化

41、法（END法）以及免疫熒光技術(shù)等進行鑒定。五、致病性本病毒在自然條件下可感染黃牛、水牛和奶牛。2月齡至2歲的牛最易感染。有報道鹿也可感染，在綿羊、山羊、羚羊以及豬體內(nèi)可檢出本病毒的抗體。在實驗條件下，可感染綿羊、山羊、豬及兔，并不引起發(fā)病，但從豬體可分離出病毒。牛病毒性腹瀉病毒可引起病毒性腹瀉和粘膜病兩種癥狀。其中病毒性腹瀉具有高度傳染性，癥狀和病變較輕，發(fā)病率高而死亡率低。相反，粘膜病在野外條件下的傳染性不高，患病犢牛經(jīng)常呈現(xiàn)明顯的臨床癥狀，病變嚴重，并常死亡。犢牛拉稀，失水消瘦，最后不能站立而虛脫死亡第四胃黏膜嚴重出血、糜爛和潰瘍六、微生物學(xué)診斷 （一）病毒分離 急性病例采取血液，檢查局部

42、時，可用棉拭子采取局部的分泌物或排泄物；尸體剖檢時，則采取腸系膜淋巴結(jié)或脾臟，也可應(yīng)用骨髓。各種牛源細胞均可用于病毒分離，包括牛腎和胎牛肺原代細胞或繼代細胞以及犢牛睪丸細胞。 （二）電鏡檢查 （三）瓊脂擴散試驗 。 （四）雙抗體夾心ELISA （五）中和試驗七、免疫與治療 對本病的防制，國外已選育出弱毒株制造疫苗，可產(chǎn)生較長時間的免疫。但有接種反應(yīng)，妊娠動物不宜應(yīng)用。我國也已研制出了Oregon C24V凍干弱毒苗，免疫力良好，而且比較安全。但現(xiàn)在提倡的控制措施是檢出并淘汰持續(xù)感染的牛，逐步凈化牛群，可通過血清學(xué)監(jiān)測檢出陽性牛，繼而再用分子生物學(xué)方法檢測血清學(xué)陰性的帶毒牛。對本病目前尚無有效藥

43、物進行治療。第十節(jié) 牛傳染性鼻氣管炎病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療牛傳染性鼻氣管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus, IBRV）屬皰疹病毒科，又名牛皰疹病毒1型，是引起牛的一種急性、熱性、接觸性傳染病的病原因子，以高熱、呼吸困難、鼻炎、竇炎和上呼吸道炎癥為特征。還能引起母牛流產(chǎn)、死胎、腸炎和小牛腦炎。有時發(fā)生眼結(jié)膜炎和角膜炎。一、生物學(xué)特性本病毒呈球形，帶囊膜成熟病毒粒子的直徑約150220nm，主要由核心、衣殼和囊膜三部分組成，核心由雙股DNA與蛋白質(zhì)纏繞而成，包含基因組的核衣殼為

44、立體對稱的正二十面體.二、抵抗力本病毒對溫度很敏感，在37時，約經(jīng)10小時即死亡一半，5621分鐘滅活。在5不穩(wěn)定，pH69時穩(wěn)定。在細胞培養(yǎng)液內(nèi)十分穩(wěn)定，4以下保存30天，其感染滴度幾乎無變化；22保存5天，感染滴度下降10倍。 三、抗原性從美國、德國、英國和日本等世界各地分離的病毒株至少有幾十種，但都具有相同的抗原性。牛傳染性鼻氣管炎病毒無論自然感染或人工感染，都能產(chǎn)生堅強持久的免疫性，耐過?？尚纬山K生免疫。這種免疫主要與體液免疫和細胞免疫有關(guān) 。四、培養(yǎng)特性本病毒在犢牛腎、睪丸、肺及皮膚細胞培養(yǎng)中生長良好，12d即可產(chǎn)生明顯的細胞病變，并有嗜酸性核內(nèi)包涵體。經(jīng)適應(yīng)可在Hela細胞培養(yǎng)中生

45、長，不能在雞胚生長。在牛胎細胞中，于感染后2448小時不經(jīng)染色即可看到細胞明顯收縮和變圓，且易形成空斑。五、致病性牛是本病毒自然感染的唯一宿主，人工感染實驗表明，牛很容易通過多種途徑發(fā)生感染，而其他家畜和實驗動物，如綿羊、馬、豬、貓、犬、豚鼠和小鼠等，都具有抵抗性，但多種動物能產(chǎn)生抗體。六、微生物學(xué)診斷（一）病毒的分離采集何種檢樣，視臨床癥狀而異：鼻氣管炎時，應(yīng)以棉拭子采取處于發(fā)熱期的鼻液和眼分泌物；生殖道型時，采取外陰部粘膜和陰道分泌物；腦膜炎時，采取腦組織；在有流產(chǎn)胎兒時，采取胎兒胸水、心包液、心血以及肺等實質(zhì)臟器。將檢樣接種于牛胎腎或睪丸的單層細胞培養(yǎng)，病毒的細胞致病性來得快，正常傳代時

46、，接種后2430小時出現(xiàn)細胞病變。（二）病毒的鑒定 牛傳染性鼻氣管炎病毒只有一個血清型，因此只要用已知標準毒株的免疫血清，通過在敏感細胞培養(yǎng)物上進行的中和試驗，就可作出鑒定。（三）中和試驗 本病最常用的血清學(xué)診斷方法，是用牛腎單層細胞培養(yǎng)物作中和試驗。用牛傳染性鼻氣管炎種毒接種牛腎單層細胞，在細胞病變最明顯時收獲培養(yǎng)物，反復(fù)凍融2次，離心去除細胞碎片，收集上清。測定細胞半數(shù)感染量后等量分裝，置-60保存?zhèn)溆谩?（四）間接血凝試驗 用鞣酸處理的綿羊紅細胞吸附病毒抗原的間接血凝試驗，檢查被檢血清中的相應(yīng)抗體，是簡單易行的血清抗體檢測法。 可用常規(guī)的試管凝集法或微量凝集法進行。七、免疫與治療在流行較

47、嚴重的國家，一般用疫苗預(yù)防控制，常用各種弱毒疫苗，基因缺失疫苗也正在試用。疫苗雖不能防止感染，但可明顯降低發(fā)病率及患病嚴重程度。在發(fā)病率低的歐洲國家，則采取淘汰陽性牛的嚴厲措施，不再允許使用疫苗。第十一節(jié)牛呼吸道合胞體病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療牛呼吸道合胞體病毒（Bovine respiratory syncytial virus,BRSV）屬副粘病毒科肺病毒屬。牛、綿羊、山羊及其他動物易感，大多數(shù)為無癥狀感染，但集約化養(yǎng)殖的剛斷奶犢牛及青年?？芍路窝住㈤g質(zhì)性肺水腫及肺氣腫等呼吸道疾病，一般發(fā)病率高，死亡率低。一、生物學(xué)特性病毒粒

48、子呈多形性，通常呈球形，直徑為150300 nm，偶可見長達數(shù)微米的長絲。有囊膜及纖突，纖突長約820 nm。核衣殼螺旋對稱，長約13 nm。基因組為單分子負股單股RNA，大小為1516 kb，含有10個基因，編碼10個蛋白質(zhì)，其中G、F、SH、22K蛋白是病毒囊膜的主要成分，N、P、L蛋白是核衣殼的主要成分，M蛋白位于囊膜和核衣殼之間。二、抵抗力本病毒對熱不穩(wěn)定，在無蛋白質(zhì)的溶液中，4或室溫放置24小時，其感染力可降至10%或幾乎無感染力。在酸性或堿性溶液中易破壞，在中性溶液中穩(wěn)定。對乙醚敏感。三、免疫性無論是母源抗體還是免疫接種產(chǎn)生的抗體均不能阻斷病毒的復(fù)制及分泌，但高滴度的抗體可使癥狀減

49、輕。病毒可通過再次感染或攜帶者在畜群中持續(xù)存在。四、培養(yǎng)特性本病毒能適應(yīng)牛源細胞（胚胎及犢牛腎和氣管細胞）培養(yǎng)，并形成大量合胞體，胞漿內(nèi)見嗜酸性包涵體。在繼代細胞上比在原代細胞上生長得更好。牛鼻甲細胞系對本病毒最敏感，故適于作為分離和培養(yǎng)病毒之用。五、致病性90%以上的犢牛均可感染牛呼吸道合胞體病毒，特別是月齡的犢牛更易感，常通過直接接觸傳播，也可能通過氣霧或者呼吸道分泌物傳播。多在秋冬季節(jié)流行，發(fā)病率高，病程1014天。臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、精神沉郁、厭食、咳嗽、呼吸困難，常呈嚴重的間質(zhì)肺炎，伴有胸膜下間質(zhì)氣腫和肺水腫；組織病理學(xué)檢查，常見支氣管、細支氣管上皮和肺實質(zhì)內(nèi)形成多核合胞體和胞漿內(nèi)包涵體

50、。六、微生物學(xué)診斷（一）病毒的分離 采取鼻分泌物或肺臟接種于牛鼻甲細胞，可見合胞體及胞漿包涵體。（二）病毒的鑒定 可用標準抗血清作為血凝抑制、血細胞吸附抑制、血清中和試驗、免疫熒光試驗、ELISA等方法加以鑒定。七、免疫與治療有數(shù)種滅活及弱毒疫苗，但能否誘導(dǎo)產(chǎn)生母源抗體及其持續(xù)多久，尚不清楚。目前研制了用牛皰疹病毒作載體表達BRSV的G蛋白的重組疫苗，可誘導(dǎo)黏膜免疫使牛得到保護。DNA疫苗也有成功的希望。本病毒感染尚可進行治療，主要采用一是藥物對癥治療，如地塞米松、順丁烯二酸吡納明等；二是免疫球蛋白；三是干擾素，特別是外源性干擾素，霧化吸入和滴鼻法較肌注效果為優(yōu)。第十二節(jié)牛副流行性感冒病毒一、

51、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療牛副流行性感冒是由副流感病毒3型引起牛的急性接觸性呼吸道傳染病。以呼吸器官的肺或胸腔形成出血性敗血癥為特征。本病一旦發(fā)生，病毒可在牛群中長期保留，而且容易與其它病毒和細菌共同引起混合感染，而使病情惡化，癥狀復(fù)雜，并可引起妊娠牛流產(chǎn)。1959年Reisimger和Hoerle等在美國的牛體中分離到第3型副流行性感冒病毒，同時在這些動物中查出此種病毒的抗體。目前，在世界的許多國家有關(guān)于牛的第3型流行性感冒病毒感染的報告。副流感病毒3型（Parainfluenza virus type 3），屬于副粘病毒科（Param

52、yxoviridae）副粘病毒屬（Paramyxovirus）。一、生物學(xué)特性病毒形態(tài)近似球形，大小不一，為140250nm。有囊膜，上面嵌有糖蛋白和非糖化蛋白。表面有8nm長的纖突，纖突上含有病毒糖蛋白。核衣殼呈螺旋形對稱。病毒的核酸為單股RNA?；蚪M大小為。病毒至少含有6種蛋白。具有血凝素和神經(jīng)氨酸酶活性，可凝集雞、豚鼠、綿羊、小鼠、牛、人等的紅細胞，但不凝集馬紅細胞。在蔗糖溶液中的浮密度為。二、抵抗力 病毒對熱的穩(wěn)定性較其它副粘病毒低，感染力在室溫中迅速降低，幾天后完全喪失。55 30min滅活，在-25能良好存活。在pH3時不穩(wěn)定。對乙醚和氯仿敏感。三、培養(yǎng)特性病毒可在牛、豬、猴等動

53、物的腎細胞上培養(yǎng)生長，并形成病變，用犢?；蛱ヅＤI細胞培養(yǎng)，在出現(xiàn)病變后可形成蝕斑，用于病毒的定量，蝕斑有大有小，是克隆株的性狀。在雞胚的羊膜腔或卵黃內(nèi)容易增殖，但雞胚不死。經(jīng)鼻可感染小鼠，給生后13d的乳鼠腦內(nèi)接種，可導(dǎo)致腦炎癥狀。豚鼠和家兔經(jīng)鼻和胸腔接種均不見異常。四、致病性本病除牛感染發(fā)病外，也可以引起豬、人、猴、豚鼠、小鼠的呼吸道疾病。廣泛流行于世界各國，尤期是美洲、歐洲、亞洲，各國均不斷發(fā)生或流行。本病可由接觸或飛沫引起傳染，主要感染部位是呼吸道。由于集約化飼養(yǎng)，畜群高度集中，或因運輸?shù)葢?yīng)激因素，牛群易發(fā)生本病。單純感染較少，多數(shù)是同牛呼吸道合胞體病毒、牛腺病毒、牛鼻病毒、牛傳染性鼻氣

54、管炎病毒、牛病毒性腹瀉粘膜病病毒和呼吸道病原性病毒等混合感染。 五、微生物學(xué)診斷本病在臨床上類癥較多，而且多數(shù)病例呈混合感染，因此在診斷時應(yīng)慎重。1、病毒分離 采用鼻分泌液或鼻腔擦試液。剖檢時采集氣管粘膜、肺病變部以及附屬淋巴結(jié)和乳房炎病牛的乳汁、腹瀉病牛的糞便。用原代或傳代牛腎細胞，出現(xiàn)病變時培養(yǎng)液有血凝活性，感染細胞有血細胞吸附（HAD）現(xiàn)象，但分離病毒的最后鑒定需用已知血清作血凝抑制試驗、病毒中和試驗或免疫熒光試驗。2、血清學(xué)試驗 常用血凝抑制試驗，同時檢測急性期和恢復(fù)期的雙份血清（23周間隔，56處理30min），根據(jù)抗體是否明顯上升來判定有無感染。用中和試驗可檢出IgM抗體以進行早期

55、診斷，因為本病感染后514d出現(xiàn)IgM抗體 六、免疫與治療疫苗有減毒疫苗和滅活疫苗兩種，預(yù)防本病比較安全有效。由于本病多見混合感染，因此減毒活疫苗可與牛傳染性鼻氣管炎病毒和牛病毒性腹瀉粘膜病病毒疫苗組成三聯(lián)疫苗，效果更好。滅活疫苗以感染細胞培養(yǎng)物為原料，用甲醛或丙內(nèi)脂等滅活、添加鋁膠和等佐劑制造而成，在預(yù)防上效果較好。新生犢牛食初乳可以獲得被動免疫并能防御感染，應(yīng)充分給予初乳，必要時可以給妊娠母牛進行疫苗接種。加強飼養(yǎng)管理，增強牛的抵抗力，盡力減少發(fā)病因素。特別是本病可以空氣傳播，由于直接吸入病?？瘸龅娘w沫或間接吸入污染的塵埃而感染。因此，一旦發(fā)病，應(yīng)遠距離隔離病牛并作嚴格消毒。氣管粘膜充出血

56、并含有泡沫樣液體, 肝硬變樣病灶部份破裂的 paramyxovirus 病毒顆粒第十三節(jié) 牛輪狀病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、培養(yǎng)特性五、致病性六、微生物學(xué)診斷七、預(yù)防與治療輪狀病毒（rotavirus）屬呼腸孤病毒科、輪狀病毒屬，可引起多種幼齡動物和嬰幼兒的急性胃腸道傳染病，以精神萎頓、嘔吐、腹瀉、脫水為主要特征。1969年Meb等對腹瀉犢牛糞便通過電鏡觀察、細胞培養(yǎng)和經(jīng)口服感染犢牛，成功分離出病毒，當(dāng)時稱之為初生犢牛腹瀉病毒（NCDV），后證實是輪狀病毒。各種動物RV（人）來源相同，一、生物學(xué)特性 病毒呈圓形，直徑75nm，中央為一個電子致密的六角形,核心直徑3740nm,周圍

57、繞有一個電子透明層,殼粒由此向外呈輻射狀排列,構(gòu)成內(nèi)衣殼,外周為一層光滑薄膜,構(gòu)成外衣殼,厚約20nm,以核心為轂,以呈輻射狀排列的內(nèi)衣殼為輪輻,以外衣殼為輞,構(gòu)成了特征性的輪狀結(jié)構(gòu)（圖10-1）,輪狀病毒這一名稱就由此而來。有些病毒缺少外衣殼，因而內(nèi)衣殼像纖突?；蚪M由11個片段的雙鏈RNA組成，電泳型呈4:2:3:2排列模式，分長型和短型,牛屬于長型。輪狀病毒可以分為7個群AG，其中A、B、C、E群可感染豬,D、E、F感染火雞。輪狀病毒吸附、穿入、脫殼雙股RNA基因組分節(jié)段外層衣殼內(nèi)層衣殼牛輪狀病毒 二、抗原性本病毒的抗原性有群特異性和型特異性,群特異性抗原(共同抗原)存在于內(nèi)衣殼，為各種

58、動物和人的輪狀病毒所共有。型特異性抗原存在于外衣殼，也與一定的RNA基因組片段有關(guān)。我國分離到的牛輪狀病毒目前所知只有一個血猜型，即牛輪狀病毒血清型（NCDV型） 三、抵抗力病毒極為穩(wěn)定，對溫度、PH、化學(xué)試劑、消毒劑等有抵抗力，pH39、糞便中6030分或1820至少79個月（細胞適應(yīng)株不一）。對乙醚、氯仿有抵抗力。四、培養(yǎng)特性病毒培養(yǎng)較困難，隨毒株不同難度有異。初次分離可試用豬腎原代細胞，MA-104（ 恒河猴胎腎傳代細胞系）轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)，加入trysin（胰蛋白酶）pancreatin（肽酶制劑），（trypsin可促進輪狀病毒生長1000倍）A群豬輪狀病毒許多毒株均是在感染前用trypsi

59、n（10g/ml作用30分）處理或病毒吸附后，在無血清培養(yǎng)基中加入（）trypsinorpancreatin。細胞適應(yīng)株產(chǎn)生CPE:變圓、脫落。 C群株輪狀病毒如上培養(yǎng)，另兩株可用腸細胞系培養(yǎng)，均需加入高濃度的pancreatin。和某些A群株不能連續(xù)培養(yǎng)。五、致病性主要發(fā)生在犢牛，發(fā)病日齡主要在715日齡。春、秋季發(fā)病較多。病毒存在于腸道，隨糞便排出體外，經(jīng)消化道感染。輪狀病毒有交互感染的作用，可以從人或一種動物傳給另一種動物,只要病毒在人或一種動物中持續(xù)存在，就有可能造成本病在自然界中長期傳播。本病應(yīng)與牛病毒性腹瀉、大腸桿菌病、彎曲桿菌病相區(qū)別。 六、微生物學(xué)診斷（1）輪狀病毒顆粒電鏡檢查

60、（糞便）（2）ELISA檢測病毒抗原（糞便上清） 具有較高的敏感性和特異性（3）血清學(xué)檢測亦有助于本病診斷(主要是ELISA和免疫熒光抗體技術(shù)等 ) 感染后5天，血中可檢測出特異性IgM抗體 （4）RNA電泳圖譜，可區(qū)別不同型病毒感染 七、免疫與治療尚無特異的治療辦法。補液,應(yīng)用腸道收斂劑等對癥治療，有一定的作用。抗生素可預(yù)防繼發(fā)感染。 已試制的牛輪狀病毒弱毒疫苗，用于免疫母牛，通過初乳抗體保護小牛；經(jīng)野外試用，有一定效果，目前尚處在試驗階段。對犢牛腹瀉還可以應(yīng)用輪狀病毒活毒疫苗口服，這種口服苗對人工感染犢牛有保護性并可減少自然發(fā)病率。第十四節(jié) 牛冠狀病毒一、生物學(xué)特性二、抵抗力三、抗原性四、