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文檔簡介

1、高中生物選修一生物技術(shù)實(shí)踐專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題 1 果酒和果醋的制作1、發(fā)酵:經(jīng)過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的進(jìn)程。2、有氧發(fā)酵:醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 無氧發(fā)酵:酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌 酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要) 分裂生殖 孢子生殖4、在有氧條件下,酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖。 C6H12O66O26CO26H2O、在無氧條件下,酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。6、20左右最適宜酵母菌繁殖 酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18-25濃度的提高紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為

2、二分裂缺少糖源時(shí),醋酸菌將乙醇變?yōu)槿?,再將乙醛變?yōu)榇姿帷?0、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌關(guān)于氧氣的含量特別敏感,當(dāng)進(jìn)行深層發(fā)酵時(shí),即使只是短時(shí)間中斷通入氧氣,也會(huì)引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長溫度為 3035,控制好發(fā)酵溫度,使發(fā)酵時(shí)間縮短,又減少雜菌污染的機(jī)會(huì)。有兩條途徑生成醋酸:直接氧化和以酒精為底物的氧化。11、實(shí)驗(yàn)流程:挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵果酒(醋酸發(fā)酵果醋) 滴,振蕩混勻,最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3 滴,振蕩試管,觀察顏色應(yīng)該充氣口連接氣泵,輸入氧氣。疑難解答你認(rèn)為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗?為什么?應(yīng)該先沖洗,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染

3、的機(jī)會(huì)。你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染?如:要先沖洗葡萄,再除去枝梗;榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈,并且進(jìn)行酒精消毒;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋等。制葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在 35?溫度是酵母菌生長和發(fā)酵的重要條件。20左右最適合酵母菌的繁殖。因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長溫度為3035,因此要將溫度控制在3035。課題 2 腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵,如青霉、酵母、曲霉、毛霉等,其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。營腐生生活。2、原理:毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的

4、蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸;脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實(shí)驗(yàn)流程:讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用:1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反映的進(jìn)程。經(jīng)過各種輔料與酶的緩解作用,生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成 3cm3cm1cm 的若干塊。所用豆腐的含水量為 70左右,水分過多則腐乳不易成形。*水(烘干前容器和樣本質(zhì)量-烘干后容器和樣本質(zhì)量)/烘干前樣本質(zhì)量直接接種優(yōu)良毛霉菌種時(shí)間:5 天加鹽腌制:將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地?cái)[放在瓶中

5、,同時(shí)逐層加鹽,隨著層數(shù)的加高而增加鹽量,接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時(shí)間約為8 天左右。用鹽腌制時(shí),注意控制鹽的用量:鹽的濃渡過低,不足以克制微生物的生長,可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì);鹽的濃渡過高會(huì)影響腐乳的口味調(diào)味作用,給腐乳以必要的咸味浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。配制鹵湯:鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在 12%左右。酒的作用:1.防止雜菌污染以防腐 2.與有機(jī)酸接合形成酯,賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時(shí)間的長短有很大關(guān)系,酒精含量越高,關(guān)于蛋白酶的克制作用也越大,使腐乳成熟期延長;酒精含量過低,蛋白酶的活性高,加

6、快蛋白質(zhì)的水解,雜菌繁殖快,豆腐易腐敗,難以成塊。香辛料的作用:1.調(diào)味作用 2.殺菌防腐作用3.參與并且促進(jìn)發(fā)酵進(jìn)程防止雜菌污染:用來腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時(shí),操作要迅速小心。整齊地?cái)[放好豆腐、加入鹵湯后,要用膠條將瓶口密封。封瓶時(shí),最好將瓶口經(jīng)過酒精燈的火焰,防止瓶口被污 染 。 疑難解答利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長白毛是怎么一回事?豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳?含水量為 70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳,不易成形。它的作用是什么

7、?),關(guān)于人體無害。它能形成腐乳的體乳成形。課題 3 制作泡菜式是二分裂。反映式為能量素殺死乳酸菌。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。亞硝酸鹽為白色粉末,易溶于水,在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑。膳食中的亞硝酸鹽一般不會(huì)危害人體健康,國家規(guī)則肉制品中不超過,醬腌菜中不超過嬰兒奶粉中不超過。亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外,但在適宜 、溫度和一定生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。亞硝酸鹽含量發(fā)酵時(shí)間()一般在腌制 亞硝酸鹽含量發(fā)酵時(shí)間()天之后食用最好*測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與關(guān)于氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反映后,與 N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽接合形成玫瑰紅色

8、染料,與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測比較,估算泡菜中亞硝酸鹽含量。專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基:人們依照微生物關(guān)于營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì),是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。培養(yǎng)基依照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基瓊脂應(yīng)用于工業(yè)則常用于觀察微生物的運(yùn)動(dòng)及菌種保藏等。成分是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成, 常用于實(shí)際工業(yè)生產(chǎn)。用途是根據(jù)微生物的特點(diǎn),在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的,用以辨別不同類別的微生物。培養(yǎng)基的化學(xué)成分囊括 水 、 無機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 、生長因子等。碳源:能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如

9、、單質(zhì)碳不能作為碳。4氮源:能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如 N2、NH3、NO3-、NH +(無機(jī)氮源)蛋白質(zhì)、氨基酸、4尿素、牛肉膏、蛋白胨(有機(jī)氮源)等。只有固氮微生物才能利用N2。乳酸桿菌霉菌酸性細(xì)菌,培養(yǎng)的條件無菌技術(shù)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵,要注意以下幾個(gè)方面:關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作的空間、操作者的衣著和手,進(jìn)行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染,實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的? 答

10、:無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分關(guān)于人體有害的微生物(不囊括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(關(guān)于于一些不耐高溫的液體)還有化學(xué)藥劑(如酒精、氯氣、石炭酸等)消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切的微生物,囊括芽孢和孢子。滅菌方法有 灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。滅菌方法:接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法;玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法,所用器械是干熱滅菌箱;培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法,所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋。表面滅菌和空氣滅菌等使用紫外線滅

11、菌法,所用器械是紫外燈。比較項(xiàng)比較項(xiàng) 理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌滅菌強(qiáng)烈全部微生物能制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基方法步驟:計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。倒平板操作的步驟:將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上,右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶,將瓶口迅速經(jīng)過火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙,右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基(約倒入培養(yǎng)皿,左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板冷卻凝固,大約需510min。然后,將平板倒過來放置,使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。倒平板操作的討論培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到提示:可

12、以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。為什么需要使錐形瓶的瓶口經(jīng)過火焰?答:經(jīng)過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。平板冷凝后,為什么要將平板倒置?答:平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。在倒平板的進(jìn)程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物純化大腸桿菌。平板劃線法是經(jīng)過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將云集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖

13、而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液訣別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是:使云集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落,以便于純化菌種。平板劃線法操作步驟:將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán),并且打開棉塞。將試管口經(jīng)過火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管經(jīng)過火焰,并且塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條平行線,蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)

14、皿。灼燒接種環(huán),待其冷卻后,從第 一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。反復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最 后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。平板劃線操作的討論環(huán)嗎?為什么?答:操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而經(jīng)過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能即時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃

15、線?答:以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線?答:劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。涂布平板操作的步驟:將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液,滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,冷卻810s。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布平板操作的討論涂布平板的一切操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。接合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第 2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作?提示:應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)

16、保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。菌種的保存的方法。臨時(shí)保藏方法將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上,在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后,將試管放入 4的冰箱中保藏。以后每36 個(gè)月,都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。缺陷:這種方法保存的時(shí)間不長,菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。的方法。培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中,與甘油充分混勻的冷凍箱中保存。疑難解答生物的營養(yǎng)營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的進(jìn)程。營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機(jī)體生命活動(dòng),保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。人及動(dòng)物的營養(yǎng)物質(zhì):水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類

17、。植物的營養(yǎng)物質(zhì):礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的營養(yǎng)物質(zhì):水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫 12 天,無菌落生長,說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。課題 2 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)尿素只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分成氨之后,才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素,是因?yàn)樗麄兡芎铣呻迕改蛩刈畛跏菑娜说哪蛞褐邪l(fā)現(xiàn)的篩選菌株實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理人為提供有利于目的菌株生長的條件(囊括營養(yǎng)、溫度、 pH 等),同時(shí)克制或阻止其他微生物生長。選擇性培養(yǎng)基在微生物學(xué)中,將允許特定種類的微生物生長,同時(shí)

18、克制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基,稱作選擇培養(yǎng)基。配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點(diǎn)加入某種物質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如,培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物;培養(yǎng)基中不加入氮元素,可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物;加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目。稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣本中活菌的數(shù)目的原理個(gè)平板, 計(jì)結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌數(shù)來表示。數(shù),可在培養(yǎng)基中加入3.本法僅限于形成菌落的微生物設(shè)置關(guān)于照指除了被測試的條件以外,其他條件都相同的實(shí)驗(yàn),其作用是比照試驗(yàn)組,排除任何其他可能原因的干 擾,表明確實(shí)是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)囊括實(shí)驗(yàn)

19、方案,所需儀器、材料、用具和藥品,具體的實(shí)施步驟以即時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。土壤取樣:同其他生物環(huán)境相比,土壤中的微生物,數(shù)量最大,種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表的土壤中取樣。鏟去表層土,在距地表約的土壤層取樣。之間、適于計(jì)數(shù)的平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量,一般選用測定放線菌的數(shù)量,一般選用測定真菌的數(shù)量,一般選用微生物的培養(yǎng)與觀察不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時(shí)間。細(xì)菌303712 天放線菌 252857 天 霉菌 252834 天每隔 24 小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致一樓菌落的數(shù)目。一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下

20、(相同的培養(yǎng)基、唯獨(dú)及培養(yǎng)時(shí)間),同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色疑難解答(1)如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣本中的菌落數(shù)?統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3 個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值其中,C 平板時(shí)所用的稀釋液的體積代表稀釋倍數(shù)課題 3 分解纖維素的微生物的分離纖維素,一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。纖維素與纖維素酶棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,木材、作物秸稈等也富含纖維素。酶、酶和葡萄糖苷酶,前兩種酶使長提供營養(yǎng)。纖維素分解菌的篩選篩選方法:剛果紅染色法。能夠經(jīng)過顏色反映直接關(guān)于微生物進(jìn)行篩選。

21、剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理剛果紅是一種染料,它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物,但并且不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反映。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時(shí),剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后,剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成,培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣,我們就可以經(jīng)過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程土壤取樣選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣本中目的菌株數(shù)量的多少來確定)梯度稀釋將樣本涂布到辨別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落土壤采集 選擇富含纖維素的環(huán)境。剛果紅染色法分

22、離纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物,再加入剛果紅進(jìn)行顏色反映,另一種是在倒平板時(shí)就加入剛果紅。課題延伸關(guān)于分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選后,只是分離純化的第一步,為確定得到的是纖維素分解定方法,一般是關(guān)于纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。疑難解答為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌?由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相關(guān)于提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深?將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相關(guān)于

23、云集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。兩種剛果紅染色法的比較方法一是傳統(tǒng)的方法,缺陷是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反映基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡便,不存在菌落混雜問題,缺陷是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反映。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺陷是:有些微生物具有降解色素的能力,它們在長時(shí)間培養(yǎng)進(jìn)程中會(huì)降解剛果紅形成鮮明的透明圈,與

24、纖維素分解菌不易區(qū)分。所需的微生物?在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被克制,因此可以起到“濃縮”的作用。專題六植物有效成分的提取植物芳香油的提取天然香料的主要來源是植物和動(dòng)物。動(dòng)物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等。不同植物的根、莖、葉、花、果實(shí)、種子都可以提取芳香油。植物芳香油具有很強(qiáng)的揮發(fā)性,主要囊括萜類化合物及其衍生物。提取方法有蒸餾、壓榨、萃取等,具體采用哪種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。水蒸氣蒸餾法是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是利用水蒸汽將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來形成油水混合物,冷卻后水油分

25、層。囊括水中蒸餾(原料放在沸水中加熱蒸餾)、水上蒸餾(原料隔放在沸水上加熱蒸餾)和水汽蒸餾(利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾)。水中蒸餾法會(huì)導(dǎo)致原料焦糊和有效成分水解,關(guān)于于有些原料(如柑橘和檸檬)不適用,通常用壓榨法。蒸餾裝置一切儀器必需事先干燥,保證無水。整套蒸餾裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分經(jīng)過加熱進(jìn)行蒸餾,中部將蒸餾物冷凝,右邊的部分用來接受。安裝儀器一般都依照自下而上、從左到右的順序??稍谡麴s瓶中加幾粒沸石,防止液體過度沸騰。要先通水再加熱。在整個(gè)蒸餾進(jìn)程中,應(yīng)保證溫度計(jì)的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴??刂普麴s的時(shí)間和速度,通常以每秒12 滴為宜。蒸餾完畢,應(yīng)先撤出熱源,

26、然后停滯通水,最后拆卸蒸餾裝置,拆卸的順序與安裝時(shí)相反。玫瑰精油的提取玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,難溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,能隨水蒸氣一同蒸餾,可用水中蒸餾法提取。提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程:鮮玫瑰花清水:采集盛花期月中上旬)蒸餾水。滴質(zhì)。油水混合物:獲得乳白色乳濁液。分離油層:向乳濁液加入 0.1g/mL NaCl 溶液后,促使油和水的分離,利用分液漏斗分離出上面的油層。除去水分:向油層中加入無水硫酸鈉吸收油層中的水分,24h 后過濾,得到玫瑰油。橘皮精油的提取橘皮精油的主要成分為檸檬烯,主要分布在橘皮中,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問題,所以一般用萃取法。提取橘皮精油的實(shí)驗(yàn)流程:石灰水浸泡:新鮮橘皮含大量的果蠟、果膠和水分,將其干燥去水,并且用石灰水浸泡,可以提高出油率,并且防止壓

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