乙型肝炎培訓課件

1、乙型肝炎乙型肝炎 主要內容 乙型肝炎病毒 熒光定量PCR技術 HBV-DNA與臨床2乙型肝炎 主要內容 乙型肝炎病毒2乙型肝炎 什么是乙肝？3乙型肝炎 什么是乙肝？3乙型肝炎乙肝：是指由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳染病。臨床表現(xiàn)：以疲乏、食欲減退、厭油、肝功能異常為主，部分病例呈現(xiàn)黃疸。4乙型肝炎乙肝：是指由乙型肝炎病毒引起的，以肝臟損害為主的一組全身性傳一、形態(tài)和生物學特性：HBV 感染者血清中存在三種形式的病毒顆粒：大球形顆粒（Dane）：完整的病毒顆粒，含量最少 包膜：HBsAg，糖蛋白，脂質 核心：DNA，DNA聚合酶，HBcAg 是病毒復制的主體。小球形顆粒： 僅

2、HBsAg ，無核酸，無感染性，含量最多管形顆粒：僅HBsAg ，無核酸，無感染性HBV抵抗力很強，在血清中30-32可保存6個月，-20可保存15年。5乙型肝炎一、形態(tài)和生物學特性：HBV 感染者血清中存在三種形式的病電鏡下HBV顆粒HBV病毒結構示意圖6乙型肝炎電鏡下HBV顆粒HBV病毒結構示意圖6乙型肝炎HBV基因組結構，1979年二、基因組結構和編碼蛋白7乙型肝炎HBV基因組結構，1979年二、基因組結構和編碼蛋白7乙型肝根據(jù)HBV全基因序列差異8%或S區(qū)基因序列差異4%，目前HBV分為A-H八個基因型。各基因型又可分為不同亞型。我國主要是B和C。IFN治療HBV應答率：AD，BC，A

3、、DB、C基因型是否影響核苷類似物的療效尚未確定。6510h、煮沸10min或高壓蒸氣均可滅活HBV。8乙型肝炎根據(jù)HBV全基因序列差異8%或S區(qū)基因序列差異4%，目前三、抗原抗體系統(tǒng)HBsAg是HBV感染的主要標志，2-12周出現(xiàn)。只有抗原性，無傳染性。目前感染，患者或病毒攜帶者?？?HBs保護性抗體，曾感染或免疫HBeAgHBV復制及強感染性的指標，僅見于HBsAg陽性患者，HBeAg陽性標本HBV DNA檢出率90左右，兩者有著良好的相關性抗-HBe有一定的保護作用，感染恢復期，傳染性低，病情趨于穩(wěn)定，預后良好抗-HBc非保護性抗體，曾感染，病情趨于穩(wěn)定。HBcAb-IgM提示HBV處于

4、復制狀態(tài)HBcAg主要存在于感染的肝細胞核心，血循環(huán)中游離的極少。與HBV DNA呈正相關，HBV復制及強感染性的指標。9乙型肝炎三、抗原抗體系統(tǒng)HBsAg是HBV感染的主要標志，2-12周 四、分子生物學標記1.HBV-DNA:主要存在于Dane顆粒中，是病毒復制和傳染性的直接標志。2. HBV-DNA多聚酶：位于核心部位，血清中HBV-DNA多聚酶活力是判斷病毒復制、傳染性高低的指標之一。10乙型肝炎 流行病學11乙型肝炎 流行病學11乙型肝炎1.傳染源：急、慢性乙型肝炎患者，病毒攜帶者；2.傳播途徑：母嬰傳播、血液及血制品傳播、破損的皮膚和黏膜及性接觸傳播，日常工作或生活接觸一般不會傳染

5、 HBV ；經吸血昆蟲傳播未證實；3.易感人群：抗HBs陰性者。嬰幼兒是獲得HBV感染的最危險時期。12乙型肝炎1.傳染源：急、慢性乙型肝炎患者，病毒攜帶者；2.傳播途徑全球20億曾感染HBV，慢性HBV感染者3.5億我國屬 HBV 感染高流行區(qū)，一般人群 HBsAg陽性率為9.09%，總感染率為57.6%（包括既往感染和現(xiàn)癥感染）。接種與未接種乙型肝炎疫苗人群的HBsAg陽性率分別為4.51%和9.51%。男性高于女性，有家庭聚集現(xiàn)象，嬰幼兒感染多見。13乙型肝炎全球20億曾感染HBV，慢性HBV感染者3.5億13乙型肝炎 自然史14乙型肝炎 自然史14乙型肝炎10/4/202215急性HB

6、V感染慢性乙肝肝硬化肝癌失代償期肝硬化5年病死率70-86%代償期肝硬化5年病死率14-20%青少年和成人期5-10%12-25%5年6-15%5年25-30%嬰幼兒期15乙型肝炎10/2/202215急性HBV感染慢性乙肝肝硬化肝癌失代發(fā)生肝硬化的高危因素包括：病毒載量高、HBeAg持續(xù)陽性、ALT水平高或反復地波動、嗜酒、合并HCV、HDV或HIV感染等。HBeAg陽性患者的肝硬化發(fā)生率要高于 HBeAg 陰性者HBV感染是HCC的重要相關因素。肝硬化患者發(fā)生HCC高危因素包括：男性、年齡、嗜酒、黃曲霉素、合并HCV或HDV感染、持續(xù)肝臟炎癥、持續(xù)HBeAg陽性及HBV DNA持續(xù)高水平等

7、16乙型肝炎發(fā)生肝硬化的高危因素包括：病毒載量高、HBeAg持續(xù)陽性、A 發(fā)病機制17乙型肝炎 發(fā)病機制17乙型肝炎免疫清除期非活動或低復制期再活動期不治療但應檢測免疫耐受需治療不治療但應檢測需治療HBV攜帶者HBsAg(+)HBeAg(+)/抗-HBe(-)HBV DNA +ALT 肝活檢 -慢乙肝HBsAg(+)HBeAg(+)/抗-HBe(-)HBV DNA + ALT/AST + 肝活檢 +HBeAg(-)慢乙肝HBeAg(-)/抗-HBe(+)HBV DNA +ALT + 肝活檢 +非活動狀態(tài)HBsAg攜帶者HBeAg(-)/抗-HBe(+)HBV DNA -ALT/AST - 肝活

8、檢 -18乙型肝炎免疫清除期非活動或低復制期再活動期不治療但應檢測免疫耐受乙肝或HBsAg陽性史超過6個月，現(xiàn)HBsAg和/或HBV DNA仍陽性者，可診斷為慢性HBV感染慢性乙型肝炎隱匿性慢性乙肝乙型肝炎肝硬化 攜帶者 慢性HBV攜帶(耐受)非活動性HBsAg攜帶HBeAg(+)HBeAg(-)慢性HBV感染代償期失代償期HBsAg(-)，HBV DNA(+)根據(jù)肝功能損害程度分為輕度/中度/重度分為活動期/靜止期ALT正常19乙型肝炎乙肝或HBsAg陽性史超過6個月，現(xiàn)HBsAg和/或HBV （一）攜帶者 大三陽或小三陽， HBV DNA為陽性或陰性，但 1 年內連續(xù)隨訪 3 次以上 AL

9、T和AST均在正常范圍，肝組織學檢查無異常（二） 慢性乙型肝炎 大三陽或小三陽，HBV DNA陽性，血清ALT持續(xù)或反復升高，或肝組織學檢查有肝炎病變 20乙型肝炎（一）攜帶者20乙型肝炎(三)隱匿性慢性乙型肝炎 - 血清HBsAg陰性，但血清和(或)肝組織中HBV DNA 陽性，并有慢性乙型肝炎的臨床表現(xiàn)。患者可伴 有血清抗-HBs、抗-HBe和(或)抗-HBc陽性 - 另約20%隱匿性慢性乙型肝炎患者除HBV DNA陽性 外，其余HBV血清學標志均為陰性 - 診斷需排除其他病毒及非病毒因素引起的肝損傷 21乙型肝炎(三)隱匿性慢性乙型肝炎21乙型肝炎HBsAg和HBeAg均陽性而HBV D

10、NA陰性？干擾素或拉米夫定等治療后病毒復制受抑制。PCR所用引物相應的DNA序列發(fā)生突變，此引物與突變DNA不能配對結合。病毒DNA整合于宿主肝細胞染色體而血中游離HBV DNA很少或缺乏。22乙型肝炎HBsAg和HBeAg均陽性而HBV DNA陰性？22乙型肝為什么要檢測HBV-DNA？23乙型肝炎為什么要檢測HBV-DNA？23乙型肝炎 “大三陽”、“小三陽”、“攜帶者”等免疫學指標反應的是機體的免疫反應狀態(tài)，不能反應體內病毒復制水平與感染程度。血清學指標()不能排除HBV感染。因此，要準確知道HBV是否處于復制狀態(tài)，最準確的方法還是通過檢測HBV DNA來決定。HBV DNA是HBV本身

11、的遺傳物質，是病毒存在和復制的最可靠、最直接的指標，也是患者具有傳染性的標志。24乙型肝炎 “大三陽”、“小三陽”、“攜帶者”等免疫學指標反應的是 怎樣檢測HBV-DNA？25乙型肝炎 怎樣檢測HBV-DNA？25乙型肝炎熒光定量PCR技術26乙型肝炎熒光定量PCR技術26乙型肝炎熒光定量PCR技術Polymerase chain reaction(PCR)，聚合酶鏈式反應，是一種DNA的快速擴增技術。PCR技術通過兩個短的稱為引物的DNA小片段和一種耐熱酶（TaqDNA聚合酶）的作用，經過高溫變性、低溫退火、適溫延伸三個步驟在3個小時內反復循環(huán)30-40次，把特定的DNA片段擴增1000萬倍

12、。 每個PCR體系含4種主要成分：含有待擴增序列的DNA模板引物TaqDNA聚合酶脫氧核糖核酸三磷酸（dNTP）27乙型肝炎熒光定量PCR技術Polymerase chain reac 實時熒光定量PCR技術，是指在反應體系中加入熒光標記，利用熒光信號積累實時檢測整個PCR過程，通過標準曲線對PCR終產物的分析，最終實現(xiàn)對未知的起始模版進行定量分析的一種技術，是迄今對已知基因序列的核酸測定中最靈敏的方法。28乙型肝炎 實時熒光定量PCR技術，是指在反應體系中加入熒光標PCR反應過程5533d.NTPsTaq 酶Primers5353535353535353反應組分變 性535353535353

13、29乙型肝炎PCR反應過程5533d.NTPsTaq 酶Prim延 伸53535353353TaqTaq55重 復退 火30乙型肝炎延 伸535353533535353535355335353循環(huán)24個拷貝循環(huán)38個拷貝5353535353535353535353355353535331乙型肝炎535353535533535TaqMan探針5533d.NTPsTaq酶Primers5353535353535353反應體系變 性535353535353Taql53RQProbe53RQ32乙型肝炎TaqMan探針5533d.NTPsTaq酶Prim535353RQ退 火531. 鏈取代Taq3Q

14、R5533QTaqR52. 水 解3. 聚 合53QTaqR354. 檢測熒光533QTaqR5l33乙型肝炎535353RQ退 火531. 鏈取代T每產生一條DNA鏈，就切斷一條探針每切斷一條探針，就產生一個熒光信號信號強度與結合探針的DNA分子數(shù)成正比原理圖34乙型肝炎每產生一條DNA鏈，就切斷一條探針原理圖34乙型肝炎血清標本采集一次性無菌注射器抽取受檢者靜脈血3-5毫升，注入紅帽無菌管中室溫（2225C）放置3060 分鐘血標本使用水平離心機，4000轉/分，離心5分鐘吸取上層血清，轉移至1.5ml滅菌離心管 嚴禁使用肝素抗凝血標本，抑制PCR反應35乙型肝炎血清標本采集一次性無菌注射

15、器抽取受檢者靜脈血3-5毫升，注入結果分析36乙型肝炎結果分析36乙型肝炎 實驗室檢查常用指標？37乙型肝炎 實驗室檢查常用指標？37乙型肝炎常用指標 免疫學檢查 病毒學檢查 肝功能檢查38乙型肝炎常用指標 免疫學檢查38乙型肝炎指標HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc診斷結果+大三陽，急性或慢性現(xiàn)癥感染，傳染性強+小三陽，有無傳染性應結合HBV DNA檢測結果+HBV感染恢復期，或S基因突變，+急性肝炎早期，傳染性強+既往感染，有無傳染性需結合HBV DNA+感染恢復期，有免疫力，無傳染性+窗口期，抗-HBs即將出現(xiàn)；HBV感染已過+注射疫苗后；遙遠的過去有過HBV感染免疫學檢

16、查-乙肝五項分析39乙型肝炎指標HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc診斷結 乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA103copy/ml) 乙肝病毒基因型檢測 乙肝病毒基因型變異檢測病毒學檢查40乙型肝炎病毒學檢查40乙型肝炎肝功能檢查 - ALT、AST：一般可反映肝細胞損傷程度，最常用 - 血清膽紅素(BIL)：通常與肝細胞壞死程度有關 - 凝血酶原時間(PT)：反映肝臟凝血因子合成功能 - 膽堿酯酶(ChE)：反映肝臟合成功能，可作參考 - 白蛋白(ALB)：反映肝臟合成功能，A/G可作參考 - 甲胎蛋白(AFP)：出現(xiàn)明顯升高往往提示發(fā)生HCC41乙型肝炎肝功能檢查41乙型肝炎

17、 如何治療？42乙型肝炎 如何治療？42乙型肝炎目前極少能治愈！是可以治療的！病毒DNA整合于宿主肝細胞染色體能治愈嗎？43乙型肝炎能治愈嗎？43乙型肝炎44乙型肝炎44乙型肝炎 誰需要治療？不論是大三陽還是小三陽，有以下情況者均需治療：肝功能異常。有明顯的肝炎癥狀：乏力、厭食、黃疸、肝區(qū)隱痛不適等。HBV DNA103copy/ml)45乙型肝炎 誰需要治療？45乙型肝炎乙型肝炎培訓課件乙型肝炎治療原則改善癥狀，恢復肝功能；抗病毒；抗肝纖維化，延緩肝硬化的發(fā)生；預防和監(jiān)控肝癌；無癥狀攜帶者無需抗病毒治療。47乙型肝炎乙型肝炎治療原則改善癥狀，恢復肝功能；47乙型肝炎 如何預防？48乙型肝炎

18、如何預防？48乙型肝炎疫苗預防阻斷母嬰傳播避免醫(yī)源性傳播49乙型肝炎疫苗預防49乙型肝炎乙型肝炎疫苗預防 - 自2005年6月，我國新生兒HBV疫苗接種完全免費 -乙肝疫苗接種對象主要是新生兒，其次為嬰幼兒 和高危人群。全程共3針，按照0、1、6個月程序 -新生兒要求在出生后24hr內接種。單用疫苗阻斷母嬰傳播保護率87.8%，聯(lián)合 HBIG 保護率95-97% - 接種后有抗體應答者保護效果一般至少持續(xù)12年50乙型肝炎乙型肝炎疫苗預防50乙型肝炎傳播途徑預防： 大力推廣安全注射(包括針刺的針具)，對牙科器 械、內鏡等醫(yī)療器具應嚴格消毒；嚴格防止醫(yī)源 性傳播；理發(fā)、刮臉、修腳、穿刺和紋身等用

19、具 應嚴格消毒；注意個人衛(wèi)生，不共用剃須刀和牙 具等用品；進行正確性教育；對HBsAg陽性孕婦， 應避免羊膜腔穿刺，并縮短分娩時間，保證胎盤 的完整性，盡量減少新生兒暴露于母血的機會51乙型肝炎傳播途徑預防：51乙型肝炎意外暴露HBV后預防 - 血清學檢測：立即檢測HBsAg、抗-HBs、ALT等， 并在3和6個月內復查。 - 主動和被動免疫：如已接種過乙肝疫苗，且已知 抗-HBs10mIU/ml者，可不進行特殊處理。如未 接種過疫苗或雖接種過疫苗但抗-HBs10mIU/ml 或抗-HBs水平不詳，應立即注射HBIG200-400IU， 并同時在不同部位接種第1針乙肝疫苗20g，于1 和6個月

20、后分別接種第2針和3針乙肝疫苗各20g。52乙型肝炎意外暴露HBV后預防52乙型肝炎對患者和攜帶者的管理 - 對慢性HBV攜帶者及HBV患者，除不能獻血和 國家法律規(guī)定不能從事的特殊職業(yè)(如服兵役等) 以外，可照常生活、學習和工作，但要加強隨訪。 - 乙肝患者和攜帶者的傳染性，主要取決于血液中 HBV DNA水平，與血清ALT/AST或膽紅素水平無關。53乙型肝炎對患者和攜帶者的管理53乙型肝炎 關于乙肝母嬰傳播？54乙型肝炎 關于乙肝母嬰傳播？54乙型肝炎乙肝母嬰傳播的三種途徑：（1）宮內傳播：是分娩以前在宮內通過胎盤等途徑傳播，這種情況較少。（2）產時傳播：發(fā)生在分娩過程中，由于母親產道的血液、羊水和陰道分泌物中帶有乙肝病毒，會使嬰兒經口吞入或通過破損的皮膚黏