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1、精選文檔精選文檔PAGEPAGE7精選文檔PAGE專題2細(xì)胞工程2.11植物細(xì)胞工程的基本技術(shù)教案一、學(xué)習(xí)目標(biāo)1、簡(jiǎn)述植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)。2、試試進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。學(xué)習(xí)重點(diǎn)1、植物組織培養(yǎng)的原理和過(guò)程2、植物體細(xì)胞雜交的原則學(xué)習(xí)難點(diǎn)植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)二、學(xué)習(xí)過(guò)程(一)、細(xì)胞工程1觀點(diǎn):應(yīng)用和作,依照人的意向來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的的原理和方法,經(jīng)過(guò)或獲取或上的操的一門(mén)綜合科學(xué)技術(shù)。2分類:依據(jù)操作對(duì)象不一樣,可分為、。(二)、植物細(xì)胞的全能性1、植物細(xì)胞的基本構(gòu)造包含、。2、植物細(xì)胞主要的增殖方式是,細(xì)胞分化是指,_原由是_。3、全能性是指,表現(xiàn)為全能性的原由是。4在理論上,生物的任何一個(gè)

2、細(xì)胞都,但在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞并不表現(xiàn),-而是分化成各樣。5特定的時(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)有地表達(dá)出各樣,分化形成不一樣的細(xì)胞,從而組成生物體的不一樣。(三)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)1原理:植物細(xì)胞擁有,擁有某種生物所有遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成的潛能。2過(guò)程脫分化_再分化幼根和芽或離體植物的組織發(fā)育胚狀體完好植株。3細(xì)胞脫分化:已的細(xì)胞經(jīng)過(guò)引誘后,失掉其獨(dú)有的而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過(guò)程。4植物組織培養(yǎng):在和的條件下,將的植物器官、組織、細(xì)胞,培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,賜予適合的培養(yǎng)條件,引誘其產(chǎn)生、叢芽,最后形成完好植株。(四)、胡蘿卜的組織培養(yǎng)1、實(shí)驗(yàn)原理生物體細(xì)胞一般都

3、是由受精卵經(jīng)過(guò)有絲分裂形成的,因此都含有該生物的全套的遺傳信息,都擁有發(fā)育成完好個(gè)體的潛能。所以,植物體的根、莖、葉細(xì)胞都擁有,在必定的營(yíng)養(yǎng)和激素條件下,能夠脫分化形成。將愈傷組織轉(zhuǎn)接到含有不一樣激素成分的培養(yǎng)基上,就能夠引誘其再分化生成胚狀體或叢芽,從而發(fā)育成。2、實(shí)驗(yàn)步驟將用自來(lái)水充分洗凈,削去外皮,并切成段。用酒精棉球擦手。在超凈工作臺(tái)(或接種箱)大將胡蘿卜段用酒精溶液消毒30s后,立刻用沖洗23次,再用辦理30min后,立刻用無(wú)菌水沖洗23()次。用的濾紙吸去胡蘿卜段表面的水分。而后,在瓷磚上,用無(wú)菌的解剖刀將胡蘿卜段切成1cm厚的橫切片,再選用有的部位,切取1cm。左右的小塊。將接種

4、到培養(yǎng)基上,用錫箔紙封蓋瓶口,并用橡皮筋扎緊。而后,在培養(yǎng)瓶上貼上標(biāo)簽,寫(xiě)明資料名稱、接種日期和小組號(hào)。將接種后的胡蘿卜組織塊,放在恒溫避光條件下培養(yǎng)。4d后,檢查培養(yǎng)資料的污染狀況;14d后,察看愈傷組織的生長(zhǎng)狀況。而后,在恒溫箱中持續(xù)避光培養(yǎng)。在培養(yǎng)過(guò)程中,注意按期察看和記錄愈傷組織的生長(zhǎng)狀況。培養(yǎng)一段時(shí)間后,將生長(zhǎng)優(yōu)秀的轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時(shí)間后,胡蘿卜的愈傷組織就能夠引誘出。而后將試管苗移栽到大田,培養(yǎng)成。3、注意事項(xiàng)外植體的選擇與制備選擇外植體時(shí),因?yàn)橥庵搀w的脫分化難易因植物種類、器官根源及生理狀況的不一樣而有很大差別,所以,選擇哪些作為外植體應(yīng)當(dāng)注意。一般來(lái)講,煙草、胡蘿卜

5、,植物的花和幼嫩的組織脫分化相對(duì)較易,而植物的莖、葉和成熟的老組織則較難。制備外植體第一要消毒,其次要選用有形成層的部分,因形成層細(xì)胞易脫分化。植物組織培養(yǎng)注意的重點(diǎn)培養(yǎng)基包含所有操作工具都應(yīng)進(jìn)行消毒和滅菌,提防雜菌污染。需在無(wú)菌條件下操作。接種,繼代培養(yǎng)的轉(zhuǎn)移都應(yīng)在接種箱內(nèi)進(jìn)行。關(guān)于植物組織培養(yǎng)來(lái)說(shuō),光照條件特別重要,包含光照強(qiáng)度、時(shí)間和波長(zhǎng)。但在由高度分化的組織形成愈傷組織的引誘階段常常要暗培養(yǎng),而在分化形成試管苗的重生的過(guò)程中一定要有光照。引誘形成愈傷組織階段的暗培養(yǎng)有益于細(xì)胞的脫分化產(chǎn)生愈傷組織,假如在光照條件下簡(jiǎn)單分化產(chǎn)生維管等組織,不利于產(chǎn)生大批的愈傷組織。由愈傷組織經(jīng)細(xì)胞有絲分裂

6、和分化形成試管苗的過(guò)程中需要光照,原由是葉中葉綠素的合成需要光照條件。(五)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)1觀點(diǎn):不一樣栽種物的,在必定條件下交融成,并把雜種細(xì)胞培養(yǎng)成新的的技術(shù)。2過(guò)程纖維素酶人工引誘離體的細(xì)胞果膠酶不一樣細(xì)胞原生質(zhì)體原生質(zhì)體交融雜種細(xì)胞雜栽種株。3植物體細(xì)胞雜交步驟:去掉細(xì)胞壁,分別出有活力的原生質(zhì)體,當(dāng)前最常用的去細(xì)胞壁的方法是酶解法,也就是在平和條件下用纖維素酶、果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。不一樣植物體細(xì)胞原生質(zhì)體交融,一定經(jīng)過(guò)物理法和化學(xué)法來(lái)引誘交融。物理方法有:離心、振動(dòng)、電激等促進(jìn)原生質(zhì)體交融?;瘜W(xué)法是用聚乙二醇(PEG)作為引誘劑來(lái)引誘交融。交融后重生出細(xì)胞壁。用植物組織

7、培養(yǎng)方法進(jìn)行培養(yǎng),可獲取雜栽種株。如圖在此過(guò)程中需要注意的問(wèn)題有:植物體細(xì)胞雜交過(guò)程中,植物細(xì)胞交融所依照的生物學(xué)原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性;植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)是細(xì)胞的全能性。體細(xì)胞交融成功以后,既有AB型雜種細(xì)胞,還可以形成AA型和BB型兩種交融細(xì)胞,但只有AB型細(xì)胞是植物體細(xì)胞雜交所形成的雜種細(xì)胞,所以在雜種細(xì)胞形成后還應(yīng)有一個(gè)挑選過(guò)程。當(dāng)前常用的去除細(xì)胞壁的方法是酶解法,保證了原生質(zhì)體活性。植物體細(xì)胞雜交達(dá)成的標(biāo)記是新細(xì)胞壁的形成。植物體細(xì)胞雜交過(guò)程仍以植物組織培養(yǎng)為前提,經(jīng)過(guò)植物組織培養(yǎng)達(dá)成雜栽種株的培養(yǎng)過(guò)程。植物體細(xì)胞雜交的最大打破是戰(zhàn)勝遠(yuǎn)緣雜交不親和的阻礙,可是當(dāng)前仍有很多理論和技術(shù)

8、問(wèn)題沒(méi)有解決,離推行應(yīng)用仍有必定距離。三、反省總結(jié).本節(jié)學(xué)習(xí)了植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)并試試進(jìn)行植物組織培養(yǎng)。本節(jié)課的講堂上師生主要解決植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交技術(shù)的過(guò)程、特色、以及學(xué)生學(xué)習(xí)過(guò)程中易忘、易混點(diǎn)等,最后進(jìn)行當(dāng)堂檢測(cè),課后進(jìn)行延長(zhǎng)拓展,以達(dá)到提升講堂效率的目的。四、當(dāng)堂檢測(cè)、相關(guān)全能性的表達(dá),不正確的選項(xiàng)是A受精卵在自然條件下能使后輩細(xì)胞形成完好個(gè)體,所以全能性最高B生物體內(nèi)細(xì)胞因?yàn)榉只?,全能性不可以表達(dá)C卵細(xì)胞與受精卵同樣,細(xì)胞未分化,全能性很高D植物細(xì)胞離體培養(yǎng)在必定條件下能表現(xiàn)出全能性2、在生物體內(nèi),細(xì)胞沒(méi)有表現(xiàn)出全能性,而是分化為不一樣的組織、器官,是因?yàn)锳基因

9、的表達(dá)有選擇性B不一樣的細(xì)胞內(nèi)基因不完好同樣C細(xì)胞喪失了全能性D在個(gè)體發(fā)育的不一樣時(shí)期,細(xì)胞內(nèi)的基因發(fā)生了變化3、植物體細(xì)胞交融達(dá)成的標(biāo)記是()A產(chǎn)生新的細(xì)胞壁C細(xì)胞質(zhì)發(fā)生交融B細(xì)胞膜發(fā)生交融D細(xì)胞核發(fā)生交融4、用不一樣栽種物的兩個(gè)體細(xì)胞交融成一個(gè)雜種細(xì)胞的過(guò)程。該過(guò)程是指()A不一樣植物的精子和卵細(xì)胞的交融B不一樣植物的原生質(zhì)體的交融C完好的兩個(gè)體細(xì)胞的交融D植物花粉細(xì)胞的兩兩交融課后練習(xí)與提升1、以下細(xì)胞的全能性最高的是()A、植物的卵細(xì)胞C、被子植物的受精卵B、植物的花粉D、被子植物的葉肉細(xì)胞2以下屬于組織培養(yǎng)的是(A花粉培養(yǎng)成單倍體植株B芽發(fā)育成枝條C根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D未受精的卵

10、細(xì)胞發(fā)育成個(gè)體3組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是(A培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)全面B細(xì)胞的全能性C細(xì)胞的分裂D細(xì)胞的分化4愈傷組織細(xì)胞在一種包含所有必要物質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)了幾個(gè)小時(shí),此中一種化合物擁有放射性(氚標(biāo)記)。當(dāng)這些細(xì)胞被固定后鏡檢利用放射自顯影技術(shù)發(fā)現(xiàn)放射性物質(zhì)集中)于細(xì)胞核、線粒體和葉綠體。能夠必定標(biāo)記的化合物是()A一種氨基酸B尿嘧啶核苷酸C胸腺嘧啶脫氧核苷酸D葡萄糖5為獲取純合高蔓抗病番茄植株,采納了以下圖所示的方法:圖中兩對(duì)相對(duì)性狀獨(dú)立遺傳。據(jù)圖剖析,不正確的選項(xiàng)是A過(guò)程的自交代數(shù)越多,純合高蔓抗病植株的比率越高B過(guò)程能夠取任一植株的適合花藥作培養(yǎng)資料C過(guò)程包含脫分化和再分化兩個(gè)過(guò)程D圖中挑選過(guò)程

11、不改變抗病基因頻次6植物M與N有性雜交不親和,但科學(xué)家想法獲取了二者的雜栽種株??茖W(xué)家最可能使用的方法是()A將M嫁接到N上,或?qū)嫁接到M上利用植物體細(xì)胞雜交工程技術(shù)手段,培養(yǎng)成一個(gè)雜栽種株C將M的花粉授給N,再將所得種子培養(yǎng)成植株D將M和N的花粉分別進(jìn)行離體培養(yǎng)獲取單倍體植株,將獲取的種子培養(yǎng)成植株再讓兩種單倍體植株互相授粉,7在不損害高等植物細(xì)胞內(nèi)部構(gòu)造的狀況下,以下哪一種物質(zhì)合適于除掉細(xì)胞壁()A蛋白酶B鹽酸C淀粉酶D纖維素酶和果膠酶8、在植物細(xì)胞工程中,當(dāng)原生質(zhì)體交融成一個(gè)細(xì)胞后,需要引誘產(chǎn)生細(xì)胞壁,參加這一過(guò)程的細(xì)胞器是()A、葉綠體、高爾基體C、葉綠體、線粒體B、線粒體、高爾基體

12、D、線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)9植物體細(xì)胞雜交還沒(méi)有解決的問(wèn)題有()去掉細(xì)胞壁,分別出有活力的原生質(zhì)體將雜種細(xì)胞培養(yǎng)成植株C讓雜栽種物依照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)秀性狀還沒(méi)有培養(yǎng)出雜栽種物10、與傳統(tǒng)的有性雜交法對(duì)比,植物體細(xì)胞雜交的最大長(zhǎng)處是()、可使兩個(gè)親本的優(yōu)秀性狀組合到一同、能夠戰(zhàn)勝遠(yuǎn)緣雜交不親和的阻礙、能夠降低生成成本,提升救濟(jì)效益11植物體細(xì)胞雜交能解決不一樣栽種物之間因?yàn)樯掣艚^而不可以進(jìn)行有性雜交的問(wèn)題。植物體細(xì)胞雜交過(guò)程不波及()A使用限制性內(nèi)切酶B使用纖維素酶和果膠酶C引誘兩種不一樣的細(xì)胞交融D選擇利于雜種細(xì)胞分裂和分化的培養(yǎng)基12、由基因型為Aa植株的花粉和基因型為Bb植株的花粉,除

13、掉細(xì)胞壁后,進(jìn)行原生質(zhì)體交融,能夠獲取多少種基因型不一樣的細(xì)胞(僅考慮兩個(gè)細(xì)胞交融)A、6種B、8種C、10種D、12種13、以下過(guò)程中,不發(fā)生細(xì)胞交融的是()A、植物體細(xì)胞雜交C、氧進(jìn)入細(xì)胞中的線粒體B、受精過(guò)程D、制備單克隆抗體14、要將胡蘿卜韌皮部細(xì)胞培養(yǎng)成完好植株,不需要A、擁有完好細(xì)胞核的細(xì)胞B、離體狀態(tài)C、導(dǎo)入外源基因D、必定的營(yíng)養(yǎng)物()質(zhì)和激素15、如圖為兩個(gè)種間植物細(xì)胞交融和重生植株表示圖。請(qǐng)據(jù)圖回答:(一八表示各主要步驟)(1)從步驟一到步驟二是植物細(xì)胞形成的階段,其重點(diǎn)是使用酶去掉。(2)從步驟二到步驟三一般要用作為促融劑。(3)步驟四為過(guò)程。(4)在形成重生植株的過(guò)程中與組織培養(yǎng)有相像之處的步驟是,原由是。(5)步驟八表示選擇體細(xì)胞雜栽種株,雜栽種株不單在形態(tài)上表現(xiàn)為在等方面發(fā)生了顯然的重組現(xiàn)象。16、以下圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程表示圖,據(jù)圖回答:,并且(1)步驟是去掉,使植物細(xì)胞成為,最常用的方法是。(2)步驟一般常用的化學(xué)試劑是,目的是。(3)在利用雜種細(xì)胞培養(yǎng)成為雜栽

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