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文檔簡介

1、關(guān)于超高效液相色譜第一張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月 ACQUITY UPLC超高效液相色譜(Ultra Performance LC)是分離科學中的一個全新類別,它借助于HPLC的理論及原理,涵蓋了小顆粒填料、非常低系統(tǒng)體積及快速檢測手段等全新技術(shù),增加了分析的通量、靈敏度及色譜峰容量。 第二張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月今天的HPLC科學描述今天HPLC分離的品質(zhì)取決于色譜柱的填料;同時也被其所限制。改進色譜柱填料的性能可以給色譜過程帶來速度、靈敏度及分離度均大幅提高的好處填料的顆粒度對色譜柱性能的貢獻最大第三張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月速率理論195

2、6年 Van Deemter 等人在塔板理論的基礎(chǔ)上,提出了關(guān)于色譜過程的動力學理論速率理論。 該理論采用塔板高度的概念,但同時考慮到H還取決于同一組分的不同分子在柱中差速遷移過程中所引起的色譜蜂擴展程度,將色譜過程與組分在兩相間的擴散和傳質(zhì)過程等動力學因素聯(lián)系起來,從理論上總結(jié)出影響塔板高度的各種因素。第四張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月van Deemter方程dp 固定相顆粒平均直徑 填充不規(guī)則因子 Dm組分在流動相中的擴散系數(shù)(cm2/s) 彎曲因子,亦稱阻礙因子 由柱填充性決定的因子q與固定相性質(zhì)有關(guān)的因子,均勻液膜 q為2/3df液膜平均厚度Ds組分分子在固定液中的擴散系

3、數(shù) 第五張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月10 min從80年代到現(xiàn)在3.55m球形微多孔填料15004000 psi50,00080,000塔板數(shù)/米3.9300mm70年代末期10m不規(guī)則微多孔填料10002500 psi25,000塔板數(shù)/米3.9300mm10 min填料顆粒尺寸的演變70年代早期40m薄殼非多孔基質(zhì)上涂布100500 psi1000塔板數(shù)/米1m長色譜柱10 min第六張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月van Deemter 曲線帶來的承諾如果填料的顆粒繼續(xù)演變更小的顆粒度第七張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月填料顆粒尺寸的演變前景:2.110

4、0mm色譜柱1.7m雜化填料顆??蛇_到15,000psi通常有每米200,000理論塔板數(shù)的柱效速度、靈敏度及分離度的完美結(jié)合Minutes1.000.000.200.400.600.80AU0.0000.0200.040一分鐘以內(nèi)!第八張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月UPLC的技術(shù)成就小顆粒色譜填料(化學品)超高壓輸液單元(能達到15,000psi)降低系統(tǒng)體積并優(yōu)化流體路徑降低自動進樣器進樣周期的時間、減少交叉污染超高速檢測器,包括光學及質(zhì)譜檢測器新的色譜單元之間的通訊協(xié)議功能齊全的診斷功能為系統(tǒng)完整性而專門設(shè)計的軟件第九張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月系統(tǒng)的技術(shù)超高效

5、由設(shè)計而來檢測器: 光學及/或質(zhì)譜檢測器 可調(diào)紫外或光電二極管矩陣 為UPLC專門優(yōu)化的流動池 高速檢測色譜柱管理: 創(chuàng)新的樞軸轉(zhuǎn)動設(shè)計 置色譜柱出口直接到檢測器樣品管理器: 低擴散XYZZ形式 快速進樣周期 低交叉污染 樣品盤及/或樣品瓶 可選樣品組織器兩元溶劑管理: 高壓混合 兩元梯度 四溶劑選擇 在線脫氣 低擴散設(shè)計 UPLC的耐壓能力第十張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月0.000.040.080.120.160.000.501.001.502.002.503.003.504.004.505.005.506.001. Thiourea - 0.4302. toluene - 1

6、.0343. propylbenzene - 1.7424. butylbenzene - 2.4135. hexylbenzene - 5.058 樣品的組份數(shù):55m顆粒度完全分離時間:6.00分鐘0.200.241. Thiourea - 0.0462. toluene - 0.0883. propylbenzene - 0.1374. butylbenzene - 0.1825. hexylbenzene - 0.360UPLCAU0.000.100.20Minutes0.050.100.150.200.250.300.350.400.450.500.550.60UPLCHPLC樣品的

7、組份數(shù):51.7m顆粒度完全分離的時間:0.60分鐘UPLC 的速度提高了!增加了樣品的通量0.00AU第十一張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月使用1.7m顆粒度的填料增加靈敏度可看到更多的樣品信息AU0.0000.0040.0080.0120.0160.020Minutes1.701.801.902.002.102.202.302.402.502.601.7 mAU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.001.002.003.004.005.006.007.008.00AU0.0000.0100.0200.0300.0400.0505.0 m0

8、.024恒定柱長時;UPLC的靈敏度提高1.7倍(170%)!恒定L/dp時;UPLC的靈敏度提高三倍(300%)!第十二張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月Ultra Performance LC 速度、靈敏度與分離度的結(jié)合AU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.001.002.003.004.005.006.007.00AU0.0000.0100.0200.0300.0400.050Minutes0.002.004.006.008.0010.0012.0015.005.0 m1.7 m60% 更快30% 更靈敏70% 更高分離度在改進獲得信息

9、質(zhì)量的前提下提高分析速度第十三張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月Ultra Performance LC 速度、靈敏度與分離度的結(jié)合HPLC3.5mUPLC1.7m對流出時間接近的色譜峰有更好的分離度及更高的靈敏度生產(chǎn)力:每次實驗得到更多信息AUAU第十四張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月Ultra Performance LC 與HPLC一樣的重現(xiàn)性AU0.000.100.200.300.400.500.600.700.80Minutes0.600.700.800.901.001.101.201.301.40Acetanilide - 0.677Acetophenone -

10、0.837Propiophenone - 0.951Butyrophenone - 1.035Benzophenone - 1.064Valerophenone - 1.111Hexanophenone - 1.182Heptanophenone - 1.247Octanophenone - 1.307梯度重現(xiàn)性 N = 34第十五張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月Ultra Performance LC 與HPLC一樣的耐受性穩(wěn)定性試驗的條件:從10到90%甲醇的1分鐘梯度1000次進樣溫度:55C最大壓力:8500psi流速:1.3ml/min.AU0.000.050.100.15

11、0.200.250.300.35Minutes0.000.250.500.751.001.251.501.75ACQUITY UPLC C18 色譜柱2.130mm 1.7m黑色:第一次進樣紅色:第1000次進樣第十六張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月Ultra Performance LC 先進的MS入口技術(shù) 代謝物IDHPLCUPLC第十七張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月液相色譜/質(zhì)譜接口技術(shù)及特點第十八張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月ESI特點第十九張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月ESI電噴霧狀態(tài)第二十張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月APCI特點第二十一張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月高分辨串聯(lián)質(zhì)譜QTOF micro顯著特點是靈敏度高(pg-fg級)和選擇性強得到的質(zhì)譜譜圖數(shù)據(jù)完整、品質(zhì)高。因而,在天然產(chǎn)物,新藥開發(fā),藥代研究和蛋白質(zhì)組學領(lǐng)域的定性、定量分析研究方面占有重要地位。 第二十二張,PPT共二十八頁,創(chuàng)作于2022年6月四極桿質(zhì)量分析器

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