結直腸癌Tiam1高表達與其啟動子低甲基化相關課件

1、 結直腸癌Tiam1高表達(biod)與其啟動子低甲基化相關 林潔南方(nnfng)醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院病理學系南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院病理科第一頁，共二十四頁。背景Tiam1: T淋巴瘤侵襲轉(zhuǎn)移誘導(yudo)因子1Tiam1與腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移Tiam1的表達調(diào)控機制尚未完全闡明表觀遺傳學：DNA異常甲基化第二頁，共二十四頁。 藍色區(qū)域為CpG島，該CpG島長2183bp，跨越啟動子和第一(dy)外顯子，存在256個CpG位點Tiam1基因(jyn)5端CpG島預測 第三頁，共二十四頁。去甲基化藥物處理(chl)HT29細胞前后Tiam1 mRNA表達1.SW620 2.HT29(5-aza

2、-dC ) 3.HT29(對照(duzho) ) C.空白對照(duzho)GAPDH(580bp)Tiam1(252bp) marker 1 2 3 c第四頁，共二十四頁。. 116例配對(pi du)結直腸癌組織中Tiam1蛋白的表達第五頁，共二十四頁。第六頁，共二十四頁。Tiam1蛋白在結直腸癌配對組織(zzh)中的表達分布 * Z= -4.608，P0.000 # Z-3.115，P0.002 第七頁，共二十四頁。Z-2.584，P0.01 Tiam1蛋白表達(biod)與結直腸癌轉(zhuǎn)移的關系 第八頁，共二十四頁。Tiam1蛋白在癌組織中的表達與臨床(ln chun)病理資料之間的關系第

3、九頁，共二十四頁。. 結直腸癌組織中Tiam1基因異常(ychng)甲基化的研究 第十頁，共二十四頁。MSP原理(yunl)第十一頁，共二十四頁。 C M U 2n 2t 12n 12t 31n 31t 48n 48t 83n83t116n116tmu 2 12 31 48 83 116nt部分配對組織中Tiam1 DNA甲基化及其蛋白(dnbi)表達情況第十二頁，共二十四頁。MSP擴增產(chǎn)物(chnw)測序部分結果 umoo.未轉(zhuǎn)化(zhunhu)的原始序列 m.甲基化引物擴增產(chǎn)物 u.未甲基化引物擴增產(chǎn)物第十三頁，共二十四頁。Z= -2.244, P=0.025 r=-0.494, P0.0

4、01116例配對(pi du)組織中Tiam1基因的甲基化狀況 232例組織(zzh)中Tiam1蛋白表達與甲基化之間的相關性 第十四頁，共二十四頁。腫瘤組織Tiam1甲基化狀態(tài)(zhungti)與臨床病理資料之間的關系 第十五頁，共二十四頁。. 結直腸癌細胞株中Tiam1基因異常(ychng)甲基化的研究第十六頁，共二十四頁。Tiam1高表達(biod)結直腸癌細胞株：LoVo細胞、 SW620細胞Tiam1低表達結直腸癌細胞株：LS174T細胞Tiam1不表達結直腸癌細胞株： HT29 細胞第十七頁，共二十四頁。5-aza-dC處理對Tiam1 mRNA在HT29及LS174T中表達(bi

5、od)的影響GAPDH(580bp)Tiam1(252bp) 1 2 3 4 c markerLS174T(+)LS174T(-)HT29(+)HT29(-)5-aza-dC第十八頁，共二十四頁。5-aza-dC（+） X2005-aza-dC（-） X200免疫細胞(xbo)化學檢測5-aza-dC處理對HT29細胞(xbo)中Tiam1蛋白表達的影響第十九頁，共二十四頁。免疫細胞化學檢測(jin c)5-aza-dC處理對LS174T細胞中Tiam1蛋白表達的影響5-aza-dC（-） X2005-aza-dC（+） X200第二十頁，共二十四頁。1.SW620 2.HT29 3. HT2

6、9(5-aza-dC) 4.SW620 5.LS174T 6.LS174T (5-aza-dC) 1 2 34 5 6GAPDHTiam1Western blot法檢測5-aza-dC處理對HT29、LS174T細胞(xbo)中Tiam1蛋白表達的影響第二十一頁，共二十四頁。結論(jiln)Tiam1是一種促進結直腸癌增殖及轉(zhuǎn)移的重要基因DNA異常甲基化可能是結直腸癌Tiam1基因表達改變的重要調(diào)控(dio kn)機制之一 第二十二頁，共二十四頁。謝謝(xi xie)！致謝：丁彥青教授李建明教授金賀博士(bsh)張香梅博士李婷婷碩士第二十三頁，共二十四頁。內(nèi)容(nirng)總結結直腸癌Tiam1高表達與其啟動子低甲基化相關。南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院病理科。藍色區(qū)域為CpG島，該CpG島長2183bp，跨越啟動子和第一外顯子，存在256個CpG位點。Z-2.584，P0.01。5-aza-dC處理對Tiam1 mRNA在HT29及LS174T中表達的影響。5-