《生物技術實驗三》課程教學大綱

1、生物技術實驗三實驗教學大綱課程代碼：FQUS1003課程名稱：生物技術實驗（三）英文名稱：Biotechnology Experiment 實驗室名稱：生物學基礎實驗中心（省級）課程學時：54實驗學時：54一、本課程實驗教學目的與要求通過實驗首先訓練學生理解微生物工程學和細胞工程學方面的基本理念，通過對發(fā)酵型食品的制作以及實驗室用小型發(fā)酵罐的使用及其在微生物培養(yǎng)上的應用進行實踐，要求學生掌握微生物發(fā)酵生產有用代謝產物的基本過程和思路。同時，通過對細胞的分離、檢測、增殖等內容進行學習，掌握各種細胞分析儀器的工作原理以及使用和維護方法。該課程在實踐中提高學生的實驗操作技能，要求學生能將微生物工程和

2、細胞工程的理論和實踐相結合，培養(yǎng)學生分析和解決問題的能力，為學生畢業(yè)后從事相關專業(yè)打下基礎。二、主要儀器設備及現有臺套數 1、發(fā)酵罐6臺2、蒸汽發(fā)生器1臺3、滅菌鍋2臺4、紫外可見分光光度計2臺5、搖床2臺6、恒溫培養(yǎng)箱3臺7、烘箱2臺8、超凈工作臺2臺9、恒溫振蕩培養(yǎng)箱3臺10、空氣壓縮機2臺11、生物倒置顯微鏡2臺12、熒光顯微鏡1臺13、流式細胞儀1臺14、酶標儀3臺15、細胞培養(yǎng)箱3臺16、離心機3臺17、-80低溫冰箱1臺18、液氮罐1只三、實驗課程內容和學時分配序號實驗項目名稱目的、要求實驗內容學時分配實驗類型每組人數必開、選開1酵母純培養(yǎng)生長曲線的測定熟悉發(fā)酵罐的結構并掌握發(fā)酵罐

3、的使用方法；了解單細胞生物生長曲線的基本特征；了解溫度對微生物生長的影響；掌握利用比濁法間接測定細胞生長量的方法種子制備、配制發(fā)酵培養(yǎng)基、滅菌、穩(wěn)定發(fā)酵罐培養(yǎng)體系、溫度對發(fā)酵的影響及其控制、發(fā)酵結束、發(fā)酵罐清洗。12創(chuàng)新性6必開2啤酒風味保鮮期的測定掌握TBA法測定啤酒中老化物質的原理和方法；通過對啤酒風味保鮮期的預測，了解啤酒的抗老化能力以及啤酒的保鮮時間取同一批次的啤酒置于水中加速老化，待樣品全部老化后進行離心，比色（以對照啤酒為空白），計算TBA。5綜合性2必開3甜酒釀的制作通過甜酒釀的制作了解釀酒的基本原理；掌握甜酒釀的制作技術浸米與洗米、隔水蒸煮、淋水降溫、落缸搭窩、保溫發(fā)酵、后熟發(fā)

4、酵、質量評估。5創(chuàng)新性1必開4凝固型酸奶的制作學習和掌握用市售酸奶和純牛奶制作酸奶的原理和方法器械滅菌、脫脂牛乳的制作、脫脂牛乳的滅菌分裝、接種密封、保溫發(fā)酵、品質檢測。5設計性1必開5人外周血單個核細胞的分離掌握人外周血中PBMC細胞的分離方法，了解無菌操作的一般要求；能夠正確使用離心機及顯微鏡等；能夠正確地進行細胞計數整個過程包括FILLCO分離，離心，獲取PBMC，培養(yǎng)PBMC。4綜合性4必開6免疫熒光分析了解細胞膜型分子的表達、意義及分析方法；能夠正確使用熒光顯微鏡并對實驗結果進行分析整個過程包括標本的制備、一抗二抗的標記、流式細胞法等。4綜合性4必開7抗原-抗體反應掌握體外抗原抗體反

5、應的特點和影響因素；掌握凝集反應原理、方法和用途整個過程包括待檢紅細胞的制備、檢測（玻片凝集，試管凝集，微柱凝膠陽性）。4綜合性4必開8MTT法檢測細胞增殖實驗了解細胞增殖的檢測方法，掌握MTT法的原理方法和用途整個過程包括MTT溶液的配制、細胞標本的制備，加樣，檢測等。5綜合性4必開9雜交瘤技術掌握分泌特異抗體雜交瘤細胞的建株原理；能夠正確地進行細胞融合的操作及陽性克隆的篩選整個過程包括小鼠脾細胞制備、細胞融合、亞克隆等。5綜合性4必開10酶聯免疫吸附試驗（ELISA）了解正常人血液中細胞因子的種類、含量、測定方法及其原理；掌握ELISA測定方法的關鍵操作及結果分析；能夠正確使用酶標檢測儀整個過程包括標本的制備、標準曲線、酶標儀檢測等。5綜合性4必開四、考核方式1、實驗報告：要求獨立完成實驗報告，能夠對實驗結果進行正確的分析。實驗報告內容應包括實驗目的、實驗內容、實驗方法、實驗步驟、實驗結果和討論等部分，其中實驗結果與討論最為關鍵，討論內容可包括實驗原理、結果分析、注意事項以及成功經驗和失敗教訓等。2、考核方式（1）實驗課的考核方式筆試、口試、實驗報告。（2）實驗課考核成績確定，實驗課成績占課程總成績的比例等實驗成績通過筆試、口試、實際表現及實驗報告等四部分綜合評定，各部分占課程總成績的30%、10%、10%和50