病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)

1、病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第1頁目 錄、試驗室生物安全相關(guān)法律法規(guī)二、病原微生物試驗活動風(fēng)險評定三、BSL-2試驗室設(shè)施和設(shè)備要求四、生物安全試驗室良好工作行為指南五、試驗室生物危險物質(zhì)溢灑處理指南病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第2頁 一、試驗室生物安全相關(guān)法律法規(guī)病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第3頁法律法規(guī)病原微生物試驗室生物安全管理條例（ 年國務(wù)院令第698號）人間傳染病原微生物名目 （衛(wèi)科教發(fā)15號 ）試驗室生物安全通用要求（GB19489-/）病原微生物試驗室生物安全通用準(zhǔn)則（WS 233-/）人間傳染高致病性病原微生物試驗室和試驗活動生物安全審批管理方法 （

2、年衛(wèi)生部第50號令）可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理要求（年衛(wèi)生部第50號令）人間傳染病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)管理方法（年衛(wèi)生部第68號令）人間傳染病原微生物菌（毒）種保藏機(jī)構(gòu)設(shè)置技術(shù)規(guī)范（WS315-）病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第4頁（一）病原微生物試驗室生物安全管理條例第七條 國家依據(jù)病原微生物傳染性、感染后對個體或者群體危害程度，將病原微生物分為四類： 第一類病原微生物：是指能夠引發(fā)人類或者動物非常嚴(yán)重疾病微生物，以及我國還未發(fā)覺或者已經(jīng)宣告毀滅微生物。 第二類病原微生物：是指能夠引發(fā)人類或者動物嚴(yán)重疾病，比較輕易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳輸

3、微生物。 第三類病原微生物：是指能夠引發(fā)人類或者動物疾病，但普通情況下對人、動物或者環(huán)境不組成嚴(yán)重危害，傳輸風(fēng)險有限，試驗室感染后極少引發(fā)嚴(yán)重疾病，而且具備有效治療和預(yù)防辦法微生物。 第四類病原微生物：是指在通常情況下不會引發(fā)人類或者動物疾病微生物。 第一二類病原微生物統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第5頁病原微生物試驗室生物安全管理條例第五條 國家實施統(tǒng)一試驗室生物安全標(biāo)準(zhǔn)。試驗室應(yīng)該符合國家標(biāo)準(zhǔn)和要求。第九條 采集病原微生物樣本應(yīng)該具備以下條件： （一）含有與采集病原微生物樣本所需要生物安全防護(hù)水平相適應(yīng)設(shè)備； （二）含有掌握相關(guān)知識和操作技能工作人員； （三）含有有

4、效預(yù)防病原微生物擴(kuò)散和感染辦法； （四）含有確保病原微生物樣本質(zhì)量技術(shù)方法和伎倆。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第6頁病原微生物試驗室生物安全管理條例第十八條 國家依據(jù)試驗室對病原微生物生物安全防護(hù)水平，并依照試驗室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)要求，將試驗室分為一級、二級、三級、四級。（BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4）第二十一條 一級、二級試驗室不得從事高致病性病原微生物試驗活動。第二十五條 新建、改建或者擴(kuò)建一級、二級試驗室，應(yīng)該向設(shè)區(qū)市級人民政府衛(wèi)生主管部門或者獸醫(yī)主管部門立案。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第7頁病原微生物試驗室生物安全管理條例第二十八條 我國還未發(fā)覺或者已經(jīng)宣告毀滅病原

5、微生物，任何單位和個人未經(jīng)同意不得從事相關(guān)試驗活動。第三十四條 試驗室或者試驗室設(shè)置單位應(yīng)該每年定時對工作人員進(jìn)行培訓(xùn)，確保其掌握試驗室技術(shù)規(guī)范、操作規(guī)程、生物安全防護(hù)知識和實際操作技能，并進(jìn)行考評。工作人員經(jīng)考評合格，方可上崗。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第8頁(二)試驗室生物安全通用要求 7.1.2 試驗室所在機(jī)構(gòu)應(yīng)設(shè)置生物安全委員會，負(fù)責(zé)咨詢、指導(dǎo)、評定、監(jiān)督試驗室生物安全相關(guān)事宜。試驗室責(zé)任人應(yīng)最少是所在機(jī)構(gòu)生物安全委員會有職權(quán)組員。7.1.3 試驗室管理層應(yīng)負(fù)責(zé)安全管理體系設(shè)計、實施、維持和改進(jìn)，應(yīng)負(fù)責(zé)：7.1.3 g) 指定一名安全主管，賦予其監(jiān)督全部活動職責(zé)和權(quán)力，包含制訂、維持

6、、監(jiān)督試驗室安全計劃責(zé)任，阻止不安全行為或活動權(quán)力，直接向決定試驗室政策和資源管理層匯報權(quán)力；病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第9頁7.1.3 i) 指定每項活動項目責(zé)任人，其負(fù)責(zé)制訂并向試驗室管理層提交活動計劃、風(fēng)險評定匯報、安全及應(yīng)急辦法、項目組人員培訓(xùn)及健康監(jiān)督計劃、安全保障及資源要求；7.1.6 安全管理體系文件通常包含管理手冊、工作程序、說明及操作規(guī)程、統(tǒng)計等文件，應(yīng)有供現(xiàn)場工作人員快速使用安全手冊。7.1.7 應(yīng)指導(dǎo)全部些人員使用和應(yīng)用與其相關(guān)安全管理體系文件及其實施要求，并評定其了解和利用能力。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第10頁(三) 病原微生物試驗室生物安全通用準(zhǔn)則 7.2.11

7、 試驗室人員健康檔案應(yīng)包含但不限于： a) 崗位風(fēng)險說明及知情同意書（必要時）； b) 本底血清樣本或特定病原免疫功效相關(guān)統(tǒng)計 c) 預(yù)防免疫統(tǒng)計（適用時）； d) 健康體檢匯報； e) 職業(yè)感染和職業(yè)禁忌癥等資料； f) 與試驗室安全相關(guān)意外事件、事故匯報等。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第11頁7.3 菌（毒）種及感染性樣本管理 7.3.1 試驗室菌（毒）種及感染性樣本保留、使用管理，應(yīng)依據(jù)國家生物安全相關(guān)法規(guī)。 7.3.2 試驗室應(yīng)有2名工作人員負(fù)責(zé)菌（毒）種及感染性樣本管理。7.3.4 高致病性病原微生物菌（毒）種及感染性樣本保留應(yīng)實施雙人雙鎖。7.3.8 菌（毒）種及感染性樣本在使用

8、過程中應(yīng)有專員負(fù)責(zé)，入庫、出庫及銷毀應(yīng)統(tǒng)計并存檔。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第12頁7.3.9 試驗室應(yīng)該將在研究、教學(xué)、檢測、診療、生產(chǎn)等試驗活動中取得有保留價值各類菌（毒）種或感染性樣本送交保藏機(jī)構(gòu)進(jìn)行判定和保藏。 7.3.10 高致病性病原微生物相關(guān)試驗活動結(jié)束后，應(yīng)該在6個月內(nèi)將菌（毒）種或感染性樣本就地銷毀或者送交保藏機(jī)構(gòu)保藏。 7.3.11 銷毀高致病性病原微生物菌（毒）種或感染性樣本時應(yīng)采取安全可靠方法，并應(yīng)該對所用方法進(jìn)行可靠性驗證。銷毀工作應(yīng)該在與擬銷毀菌（毒）種相適應(yīng)生物安全試驗室內(nèi)進(jìn)行，由兩人共同操作，并應(yīng)該對銷毀過程進(jìn)行嚴(yán)格監(jiān)督和統(tǒng)計。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第

9、13頁7.5 試驗室活動管理7.5.4 試驗活動應(yīng)在與其防護(hù)等級相適應(yīng)生物安全試驗室內(nèi)開展。7.5.8 二級生物安全試驗室從事高致病性病原微生物試驗室活動除應(yīng)滿足人間傳染病原微生物名目對試驗室防護(hù)等級要求外還應(yīng)向省級衛(wèi)生和計生行政主管部門申請。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第14頁7.5.9試驗室使用我國境內(nèi)未曾發(fā)覺高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本和已經(jīng)毀滅病原微生物菌（毒）種或樣本、人間傳染病原微生物名目要求第一類病原微生物菌（毒）種或樣本、或國家衛(wèi)生和計劃生育委員會要求其它菌（毒）種或樣本，應(yīng)該經(jīng)國家衛(wèi)生和計劃生育委員會同意；使用其它高致病性菌（毒）種或樣本，應(yīng)該經(jīng)省級人民政府衛(wèi)生計生行政

10、主管部門同意；使用第三、四類病原微生物菌（毒）種或樣本，應(yīng)該經(jīng)試驗室所在法人機(jī)構(gòu)同意。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第15頁7.5.11 從事高致病性病原微生物相關(guān)試驗活動應(yīng)該有2名以上工作人員共同進(jìn)行。從事高致病性病原微生物相關(guān)試驗活動試驗室工作人員或者其它相關(guān)人員，應(yīng)該經(jīng)試驗室責(zé)任人同意。7.5.13 試驗室應(yīng)該建立試驗檔案，統(tǒng)計試驗室使用情況和安全監(jiān)督情況。試驗室從事高致病性病原微生物相關(guān)試驗活動試驗檔案保留期不得少于20年。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第16頁7.7 消毒和滅菌 7.7.1 試驗室應(yīng)依據(jù)操作病原微生物種類、污染對象和污染程度等選擇適宜消毒和滅菌方法，以確保消毒效果。 7.

11、7.2 試驗室依據(jù)菌（毒）種、生物樣本及其它感染性材料和污染物，可選取壓力蒸汽滅菌方法或有效化學(xué)消毒劑處理。試驗室按要求要求做好消毒與滅菌效果監(jiān)測。 7.7.3 試驗使用過防護(hù)服、一次性口罩、手套等應(yīng)選取壓力蒸汽滅菌方法處理。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第17頁7.7.4 醫(yī)療廢物等應(yīng)經(jīng)壓力蒸汽滅菌方法處理后再按相關(guān)試驗室廢物處置方法處理。 7.8.4 試驗室廢物處置應(yīng)有書面統(tǒng)計，并存檔。 7.9.8 高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸,應(yīng)該按照國家相關(guān)要求進(jìn)行審批。地面運(yùn)輸應(yīng)有專員護(hù)送，護(hù)送人員不得少于兩人。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第18頁（四 ）人間傳染病原微生物名目我國對詳細(xì)

12、病原微生物分類詳見衛(wèi)生部頒布人間傳染病原微生物名目。該名目除對病原微生物進(jìn)行危害程度分類外，還要求了其不一樣試驗操作防護(hù)水平以及運(yùn)輸包裝要求 。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第19頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第20頁a. 病毒培養(yǎng)： 指病毒分離、培養(yǎng)、滴定、中和試驗、活病毒及其蛋白純化、病毒凍干以及產(chǎn)生活病毒重組試驗等操作。利用活病毒或其感染細(xì)胞（ 或細(xì)胞提取物）， 不經(jīng)滅活進(jìn)行生化分析、血清學(xué)檢測、免疫學(xué)檢測等操作視同病毒培養(yǎng)。使用病毒培養(yǎng)物提取核酸，裂解劑或滅活劑加入必須在與病毒培養(yǎng)等同等級試驗室和防護(hù)條件下進(jìn)行， 裂解劑或滅活劑加入后可比照未經(jīng)培養(yǎng)感染性材料防護(hù)等級進(jìn)行操作。b. 動 物

13、 感 染 實 驗 ： 指 以 活 病 毒 感 染 動 物 實 驗 。c. 未經(jīng)培養(yǎng)感染性材料操作： 指未經(jīng)培養(yǎng)感染性材料在采取可靠方法滅活前進(jìn)行病毒抗原檢測、血清學(xué)檢測、核酸檢測、生化分析等操作。未經(jīng)可靠滅活或固定人和動物組織標(biāo)本因含病毒量較高，其操作防護(hù)等級應(yīng)比照病毒培養(yǎng)。d. 滅活材料操作： 指感染性材料或活病毒在采取可靠方法滅活后進(jìn)行病毒抗原檢測、血清學(xué)檢測、核酸檢測、生化分析、分子生物學(xué)試驗等不含致病性活病毒操作。e. 無感染性材料操作：指針對確認(rèn)無感染性材料各種操作，包含但不限于無感染性病毒 DNA 或cDNA 操作。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第21頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第

14、22頁a 大量活菌操作： 試驗操作包括“大量”病原菌制備，或易產(chǎn)生氣溶膠試驗操作（如病原菌離心、凍干等）。b 動物感染試驗： 特指以活菌感染動物試驗。c 樣本檢測： 包含樣本病原菌分離純化、藥品敏感性試驗、生化判定、免疫學(xué)試驗、P C R 核酸提取、涂片、顯微觀察等初步檢測活動。d 非感染性材料試驗： 如不含致病性活菌材料分子生物學(xué)、免疫學(xué)等試驗。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第23頁（五）可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理要求本要求適合用于可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理工作。人間傳染病原微生物名目中，以下情況按照本要求進(jìn)行運(yùn)輸管理。 1、第一類、第二類病

15、原微生物菌（毒）種或樣本（例：炭疽芽孢桿菌，結(jié)核分枝桿菌， 埃博拉病毒） 2、第三類病原微生物運(yùn)輸包裝分類為A類病原微生物菌（毒）種或樣本（例：肉毒梭菌，水泡性口炎病毒，登革病毒培養(yǎng)物） 3、疑似高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第24頁可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理要求運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本，應(yīng)該經(jīng)省級以上衛(wèi)生行政部門同意。未經(jīng)同意，不得運(yùn)輸。申請在省內(nèi)運(yùn)輸由省衛(wèi)生行政部門同意；跨省運(yùn)輸由出發(fā)省衛(wèi)生行政部門進(jìn)行初審上報衛(wèi)生部審批。對于為控制傳染病暴發(fā)、流行或者突發(fā)公共衛(wèi)生事件應(yīng)急處理高致病性病原微生物菌毒種或樣本運(yùn)輸申請，省

16、級衛(wèi)生行政部門與衛(wèi)生部之間能夠經(jīng)過傳真方式進(jìn)行上報和審批；需要提交相關(guān)原件、應(yīng)于事后盡快補(bǔ)齊。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第25頁可感染人類高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理要求接收單位應(yīng)該符合以下條件：（一）含有法人資格；（二）具備從事高致病性病原微生物試驗活動資格試驗室；（三）取得相關(guān)政府主管部門核發(fā)從事高致病性病原微生物試驗活動、菌（毒）種或樣本保藏、生物制品生產(chǎn)等同意文件。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第26頁運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本交通工具：1、陸路運(yùn)輸：要求專車、兩人以上護(hù)送，并在護(hù)送過程中采取對應(yīng)防護(hù)辦法。 2、民航托運(yùn)：由民航主管部門同意航空承運(yùn)人（國航、東

17、方）和機(jī)場實施運(yùn)輸。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第27頁包裝要求三 層包裝系統(tǒng)主容器（內(nèi)層）輔助容器（中層）作用：盛放菌（毒）種或樣本標(biāo)簽：類別、編號、名稱、容量（貼于主容器外）外包裝（外層）作用：外保護(hù)標(biāo)識：生物危險、警告、提醒、放置方向（使用干冰時，應(yīng)留有排氣孔）襯冷墊凍物劑吸水物作用：包裝及保護(hù)主容器資料：數(shù)量、危險性申明、樣品判定書、發(fā)送/接 收者信息（置防水袋內(nèi)，貼于輔助容器外）病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第28頁航空運(yùn)輸A類包裝（UN號2814）病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第29頁高致病性病原微生物制冷劑： 請勿自行打開如有破損、滲漏或遺失請馬上通知當(dāng)?shù)匦l(wèi)生行政部門聯(lián) 系 人：聯(lián)絡(luò)

18、電話：高致病性病原微生物危險標(biāo)簽 外包裝放置方向標(biāo)識 病原微生物運(yùn)輸記錄表 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第30頁（六）病原微生物試驗室生物安全標(biāo)識中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS 589禁止入內(nèi) 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第31頁 病原微生物試驗室生物安全標(biāo)識中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) WS 589洗眼裝置 生物安全應(yīng)急處置箱 消毒中 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第32頁二、病原微生物試驗活動風(fēng)險評定病原微生物試驗室生物安全通用準(zhǔn)則（WS 233-/） 試驗室應(yīng)建立并維持風(fēng)險評定和風(fēng)險控制制度，應(yīng)明確試驗室連續(xù)進(jìn)行風(fēng)險識別、風(fēng)險評定和風(fēng)險控制詳細(xì)要求（參見附錄A）。 風(fēng)險評定應(yīng)以國家法律、法

19、規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范，以及權(quán)威機(jī)構(gòu)公布指南、數(shù)據(jù)等為依據(jù)。對已識別風(fēng)險進(jìn)行分析，形成風(fēng)險評定匯報。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第33頁當(dāng)試驗活動包括致病性生物因子時，應(yīng)識別但不限于以下風(fēng)險原因： 試驗活動包括致病性生物因子已知或未知特征。包括致病性生物因子試驗活動。試驗活動包括到遺傳修飾生物體（GMOs）時，應(yīng)考慮重組體引發(fā)危害。包括致病性生物因子動物喂養(yǎng)與試驗活動。感染性廢物處置過程中風(fēng)險。試驗活動安全管理風(fēng)險。包括致病性生物因子試驗活動相關(guān)人員。 試驗室設(shè)施、設(shè)備。試驗室生物安保制度和安保辦法，重點識別所保藏或使用致病性生物因子被盜、濫用和惡意釋放風(fēng)險。 已發(fā)生試驗室感染事件原因分析。 病原微

20、生物實驗室生物安全培訓(xùn)第34頁以下情況發(fā)生時，應(yīng)進(jìn)行風(fēng)險再評定。病原體生物學(xué)特征或防控策略發(fā)生改變時； 開展新試驗活動或變更試驗活動（包含設(shè)施、設(shè)備、人員、活動范圍、規(guī)程等）； 操作超常規(guī)量或從事特殊活動； 本試驗室或同類試驗室發(fā)生感染事件、感染事故； 相關(guān)政策、法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)等發(fā)生改變。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第35頁三、BSL-2試驗室設(shè)施、設(shè)備要求 試驗室生物安全通用要求 GB19489-病原微生物試驗室生物安全通用準(zhǔn)則（WS 233-）病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第36頁試驗室防護(hù)區(qū)：試驗室物理分區(qū)，該區(qū)域內(nèi)生物風(fēng)險相對較大，需對試驗室平面設(shè)計、圍護(hù)結(jié)構(gòu)密閉性、氣流，以及人員進(jìn)入、個

21、體防護(hù)等進(jìn)行控制區(qū)域。 試驗室輔助工作區(qū)：是指生物風(fēng)險相對較小區(qū)域，也指生物安全試驗室中防護(hù)區(qū)以外區(qū)域。關(guān)鍵工作間：是生物安全試驗室中開展試驗室活動主要區(qū)域，通常是指生物安全柜或動物喂養(yǎng)和操作間所在房間。緩沖間：設(shè)置在被污染概率不一樣試驗室區(qū)域間密閉室。需要時，可設(shè)置機(jī)械通風(fēng)系統(tǒng)，其門含有互鎖功效，不能同時處于開啟狀態(tài)。 生物安全試驗室：經(jīng)過防護(hù)屏障和管理辦法，到達(dá)生物安全要求病原微生物試驗室。 生物安全試驗室由防護(hù)區(qū)和輔助工作區(qū)組成。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第37頁（一）試驗室生物安全防護(hù)基礎(chǔ)原理防護(hù)屏障（硬件）： 一級屏障：操作者和被操作對象之間隔離，也稱一級隔離。（安全設(shè)備） 二級屏

22、障：生物安全試驗室和外部環(huán)境隔離，也稱二級隔離（設(shè)施） 。管理辦法（軟件）： 試驗室管理規(guī)程 標(biāo)準(zhǔn)操作程序病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第38頁生物安全試驗室設(shè)施防護(hù)原理生物安全試驗室在設(shè)計上是“盒中盒”結(jié)構(gòu)主要采取了物理隔離分區(qū)和負(fù)壓通風(fēng)過濾技術(shù)。物理隔離分區(qū)：用物理隔斷（包含墻體）和密閉門把試驗室與公共外環(huán)境隔開負(fù)壓通風(fēng)過濾：經(jīng)過控制氣流速度和方向，使氣流從污染概率小區(qū)域流向污染概率高區(qū)域，并經(jīng)過HEPA濾器過濾后排放。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第39頁高效空氣過濾器（HEPA過濾器） （ high efficiency particulate air filter）HEPA濾器濾材是多層

23、、網(wǎng)格交織排列。通常以0.3m 微粒為測試物，在要求條件下濾除效率高于99.97%空氣過濾器。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第40頁HEPA濾器攔截氣溶膠顆粒原理過篩：直徑大于濾材網(wǎng)眼顆粒被攔截；沉降：對于直徑0.3 以上氣溶膠粒子作用較強(qiáng)。氣溶膠粒子直徑即使小于網(wǎng)眼，因為粒子重力和熱沉降或靜電沉降作用也可能被阻攔在濾材上；慣性撞擊：氣溶膠粒子直徑即使小于網(wǎng)眼，因為粒子慣性撞擊作用也可能被阻攔在濾材上；離子擴(kuò)散：對于直徑小于0.1 氣溶膠粒子作用較強(qiáng)。氣溶膠粒子直徑即使小于網(wǎng)眼，因為粒子擴(kuò)散作用也可能被阻攔在濾材上。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第41頁生物安全試驗室安全設(shè)備防護(hù)原理試驗室內(nèi)全部污

24、染物，包含廢物、廢液和使用過器材、物品，必須消毒滅菌后才能帶出試驗室消毒滅菌設(shè)備全部可能產(chǎn)生微生物氣溶膠試驗操作，都應(yīng)將微生物氣溶膠限制在一個很小空間范圍內(nèi)，使操作人員與污染空氣隔離開生物安全柜病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第42頁（二）生物安全柜 具備氣流控制及高效空氣過濾裝置操作柜，可有效降低試驗過程中產(chǎn)生生物性氣溶膠對操作者和環(huán)境污染風(fēng)險。生物安全柜分三個等級，共有六種： 級 級A1、A2、B1、B2 級病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第43頁1、風(fēng)機(jī)將房間空氣經(jīng)前窗操作口引入安全柜內(nèi)并進(jìn)入前面進(jìn)格調(diào)柵內(nèi)2、前操作窗口流入氣流速度最少應(yīng)該達(dá)0.50 m/s3、供氣先經(jīng)過送風(fēng)HEPA過濾器，再向

25、下流動經(jīng)過工作臺面 4、空氣在向下流動到距工作臺面大約618 cm處罰開，其中二分之一經(jīng)過前面排格調(diào)柵，而另二分之一則經(jīng)過后面排格調(diào)柵排出5、全部在工作臺面形成氣溶膠立刻被向下氣流帶走，并經(jīng)兩組排格調(diào)柵排出，從而為試驗產(chǎn)品提供最好保護(hù)6、氣流接著經(jīng)過后面負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)抵達(dá)位于安全柜頂部介于供風(fēng)和排風(fēng)過濾器之間空間7、70經(jīng)供風(fēng)HEPA重新返回操作區(qū)域，30經(jīng)排風(fēng)HEPA排入房間或外面A：前開口；B：可視窗口；C：排風(fēng)HEPA過濾器；D：后面壓力排風(fēng)系統(tǒng)；E：送風(fēng)HEPA過濾器；F：風(fēng)機(jī)級A2型生物安全柜病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第44頁超凈工作臺原理：水平層流潔凈臺原理圖垂直層流潔凈臺原理圖病

26、原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第45頁生物安全柜必須是經(jīng)過安全認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品 美國 NSF 49： 歐盟 EN 12469： 中國 SFDA YY 0569 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第46頁生物安全柜安裝位置避開通道處，遠(yuǎn)離能破壞由工作口空氣屏障產(chǎn)生隔離層房間氣流。安全柜不應(yīng)放在流通空氣入口，以免空氣能吹過前操作口或吹向排氣過濾器。與墻壁、房頂最好要有30cm間距，最少應(yīng)有8cm 。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第47頁生物安全柜使用規(guī)范正確使用生物安全柜能夠使操作者免受氣溶膠攻擊，但并不能防止濺出、破裂發(fā)生對操作者造成威脅。任何造成安全柜內(nèi)氣流紊亂不良操作，都會危及操作者安全。生物安全柜性能應(yīng)定

27、時進(jìn)行檢測。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第48頁生物安全柜內(nèi)禁止使用“明火”盡可能不在柜內(nèi)使用酒精燈，必需時選取安全酒精燈?？捎梦⑿碗娮茻鬟M(jìn)行細(xì)菌接種，或使用一次性接種環(huán)。禁用病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第49頁紅外接種環(huán)滅菌器病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第50頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第51頁（一）操作準(zhǔn)備1、每次使用前檢驗生物安全柜正常指標(biāo)（風(fēng)速、氣流量和負(fù)壓）。2、使用時不要打開玻璃觀察窗。3、開始工作之前，列出試驗所需物品清單，先用75乙醇消毒物體表面后將所需物品放入，以防止雙臂頻繁進(jìn)入破壞氣流。4、打開紫外燈照射30分鐘。5、打開風(fēng)機(jī)5-10min，調(diào)整好操作椅高度，使操作者臉

28、部在工作窗口之上。操作過程中注意窗式報警器和氣流報警器！病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第52頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第53頁（二） 物品擺放與防污染辦法1、盡可能少放儀器和物品，只擺此次需要。2、擺放物品不要阻塞排氣格柵空氣流通。3、廢物容器/袋必須放在安全柜內(nèi)。4、安全柜內(nèi)潔凈物品/污染物品分別放置在不一樣區(qū)域。5、在操作區(qū)域鋪設(shè)吸收墊或消毒液濕巾。6、操作盡可能在工作臺中央或后部，注意動作對定向氣流影響。7、工作用紙不允許放在生物安全柜內(nèi)。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第54頁在生物安全柜上工作潔凈物品理想工作臺擺放標(biāo)準(zhǔn)（清潔污染區(qū)） 在工作臺面上試驗操作應(yīng)該按照從清潔區(qū)到污染區(qū)方向進(jìn)行

29、 被污染區(qū)域廢棄物托盤垃圾袋病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第55頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第56頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第57頁（三）關(guān)機(jī)前污染去除1、在試驗結(jié)束時，包含儀器在內(nèi)生物安全柜里全部物品應(yīng)去除表面污染后，才能移出安全柜；2、在每次使用后/天天試驗結(jié)束時要去除生物安全柜內(nèi)表面污染，工作臺面和內(nèi)壁要用適當(dāng)消毒劑進(jìn)行擦拭以去除表面污染，但不要擦拭送風(fēng)濾器擴(kuò)散板；3、在對目標(biāo)生物體有效時，能夠采取75%酒精來消毒。如使用漂白劑等腐蝕性消毒劑后，還必須用清水再次進(jìn)行擦拭。4、關(guān)機(jī)前應(yīng)使風(fēng)機(jī)繼續(xù)運(yùn)行5min以凈化內(nèi)部氣體。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第58頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)

30、第59頁生物安全柜凈化 在進(jìn)行生物安全柜維護(hù)、更換HEPA過濾器、性能測試以及重新安置之前，必須對已用于感染性材料工作生物安全柜進(jìn)行凈化處理。 普通常見消毒劑包含甲醛、過氧化氫、二氧化氯等。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第60頁甲醛熏蒸最傳統(tǒng)氣體消毒方法，成本最為低廉。有致癌作用，已經(jīng)越來越受到使用限制。注意：甲醛熏蒸消毒前，全部氯化氫必須從安全柜中移開。氯化氫在甲醛存在時，在環(huán)境空氣情況下，會形成致癌物二氯甲基醚（BCME）。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第61頁甲醛熏蒸器病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第62頁過氧化氫蒸汽現(xiàn)在有一個新方法可完全代替?zhèn)鹘y(tǒng)甲醛熏蒸，既采取過氧化氫蒸汽對生物安全柜進(jìn)行

31、消毒，通常發(fā)生器經(jīng)過一個噴射接口與主艙體連接，已經(jīng)有個別型號安全柜提供此接口，同時有門封板將前面操作口進(jìn)行密封。假如這兩個配置都沒有話，能夠使用一個暫時門封板，而且已經(jīng)預(yù)裝好了適當(dāng)連接接口，將其安裝在前面操作口上，經(jīng)過門封上接口將過氧化氫蒸汽噴入生物安全柜內(nèi)。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第63頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第64頁第三節(jié)、高壓滅菌器按冷空氣排放方式分為兩種：下排氣式（重力置換式）壓力蒸汽滅菌器和預(yù)真空式壓力蒸汽滅菌器普通壓力蒸汽滅菌器在設(shè)計時普通不考慮排出冷空氣對環(huán)境污染，在生物安全試驗室壓力蒸汽滅菌器排氣管道上應(yīng)該有冷空氣消毒處理裝置。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第65頁下排

32、氣式壓力蒸汽滅菌器利用重力置換原理，使熱蒸汽在滅菌器中自上而下將冷空氣由下排氣孔排出，排出冷空氣由飽和蒸汽取代，利用蒸汽釋放潛熱使物品到達(dá)滅菌。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第66頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第67頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第68頁預(yù)真空式高壓滅菌器采取脈動真空排氣方式消除滅菌室內(nèi)殘余冷空氣對溫度影響（排除率99%），既加緊了升溫速度，降低了對被滅菌物品損傷，又充分確保了滅菌溫度均勻性 。生物安全密封氣體鎖死裝置，冷凝水和廢水經(jīng)過封閉管路進(jìn)行回收，最終經(jīng)過密封接口連接安裝地點排水口。 配置0.2um高性能空氣過濾器（HEPA），完全到達(dá)無菌過濾目標(biāo),有效防止了工作過程中二次

33、污染。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第69頁雙屝預(yù)真空高壓滅菌器雙門互鎖。雙側(cè)開門預(yù)真空高壓滅菌器尤其適合用于有清潔區(qū)、污染區(qū)之分場所，專門處理由污染區(qū)進(jìn)入清潔區(qū)污染物品。負(fù)壓BSL-2和BSL-3試驗室。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第70頁雙屝脈動真空高壓滅菌器（BSL-2）病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第71頁滅菌效果監(jiān)測化學(xué)指示卡（管）法：將即能指示蒸汽溫度，又能指示溫度連續(xù)時間化學(xué)指示卡（管）放入物品中央，經(jīng)一個滅菌周期后，取出指示卡（管），依據(jù)其顏色及性狀改變判斷是否到達(dá)滅菌條件。生物監(jiān)測法：指示菌株為耐熱嗜熱脂肪桿菌芽孢（ATCC 7953 或 SSIK 31株）病原微生物實驗室生物安

34、全培訓(xùn)第72頁壓力蒸汽滅菌包內(nèi)化學(xué)指示卡/條病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第73頁第四節(jié)、BSL-1試驗室設(shè)施和設(shè)備要求 GB19489- 6.1中要求BSL-1試驗室設(shè)施和設(shè)備應(yīng)滿足以下要求： 6.1.1 試驗室門應(yīng)有可視窗并可鎖閉，門鎖及門開啟方向應(yīng)不妨礙室內(nèi)人員逃生。6.1.2 應(yīng)有預(yù)防節(jié)肢動物和嚙齒動物進(jìn)入辦法。6.1.3 應(yīng)設(shè)洗手池，宜設(shè)置在靠近試驗室出口處。6.1.4 在試驗室門口處應(yīng)設(shè)存衣或掛衣裝置，可將個人服裝與試驗室工作服分開放置。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第74頁6.1.5 試驗室墻壁、天花板和地面應(yīng)易清潔、不滲水、耐化學(xué)品和消毒劑腐蝕。地面應(yīng)平整、防滑，不應(yīng)鋪設(shè)地毯。6.

35、1.6 試驗室臺柜和座椅等應(yīng)穩(wěn)固，邊角應(yīng)圓滑。6.1.7 試驗室臺柜等和其擺放應(yīng)便于清潔，試驗臺面應(yīng)防水、耐腐蝕、耐熱和堅固。6.1.8 試驗室應(yīng)有足夠空間和臺柜等擺放試驗室設(shè)備和物品。6.1.9 應(yīng)依據(jù)工作性質(zhì)和流程合理擺放試驗室設(shè)備、臺柜、物品等，防止相互干擾、交叉污染，并應(yīng)不妨礙逃生和搶救。6.1.10 試驗室能夠利用自然通風(fēng)。假如采取機(jī)械通風(fēng)，應(yīng)防止交叉污染。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第75頁6.1.11 假如有可開啟窗戶，應(yīng)安裝可防蚊蟲紗窗。6.1.12 試驗室內(nèi)應(yīng)防止無須要反光和強(qiáng)光。6.1.13 若操作刺激或腐蝕性物質(zhì)，應(yīng)在 30 米內(nèi)設(shè)洗眼設(shè)施，必要時應(yīng)設(shè)緊急噴淋裝置。6.1

36、.14 若操作有毒、刺激性、放射性揮發(fā)物質(zhì)，應(yīng)在風(fēng)險評定基礎(chǔ)上，配置適當(dāng)負(fù)壓排風(fēng)柜。6.1.15 若使用高毒性、放射性等物質(zhì)，應(yīng)配置對應(yīng)安全設(shè)施、設(shè)備和個體防護(hù)裝備，應(yīng)符合國家、地方相關(guān)要求和要求。6.1.16 若使用高壓氣體和可燃?xì)怏w，應(yīng)有安全辦法，應(yīng)符合國家、地方相關(guān)要求和要求。6.1.17 應(yīng)設(shè)應(yīng)急照明裝置。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第76頁6.1.18 應(yīng)有足夠電力供給。6.1.19 應(yīng)有足夠固定電源插座，防止多臺設(shè)備使用共同電源插座。應(yīng)有可靠接地系統(tǒng)，應(yīng)在關(guān)鍵節(jié)點安裝漏電保護(hù)裝置或監(jiān)測報警裝置。6.1.20 供水和排水管道系統(tǒng)應(yīng)不滲漏，下水應(yīng)有防回流設(shè)計。6.1.21 應(yīng)配置適用應(yīng)

37、急器材，如消防器材、意外事故處理器材、搶救器材等。6.1.22 應(yīng)配置適用通訊設(shè)備。6.1.23 必要時，應(yīng)配置適當(dāng)消毒設(shè)備。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第77頁第五節(jié)、BSL2試驗室設(shè)施和設(shè)備要求 GB19489- 6.2中要求BSL-2試驗室設(shè)施和設(shè)備應(yīng)滿足以下要求：6.2.1 適用時，應(yīng)符合本標(biāo)準(zhǔn) 6.1 要求。6.2.2 試驗室主入口門、放置生物安全柜試驗間門應(yīng)可自動關(guān)閉。6.2.3 試驗室工作區(qū)域外應(yīng)有存放大量備用物品條件。6.2.4 應(yīng)在試驗室工作區(qū)配置洗眼裝置。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第78頁6.2.5 應(yīng)在試驗室或其所在建筑內(nèi)配置高壓蒸汽滅菌器或其它適當(dāng)消毒設(shè)備，所配置消毒

38、設(shè)備應(yīng)以風(fēng)險評定為依據(jù)。6.2.6 應(yīng)在操作經(jīng)空氣傳輸致病性生物材料試驗間內(nèi)配置生物安全柜。6.2.7 生物安全柜安裝和使用應(yīng)遵照制造商提議。假如生物安全柜排風(fēng)在室內(nèi)循環(huán)，室內(nèi)應(yīng)具備通風(fēng)換氣條件；假如使用需要管道排風(fēng)生物安全柜，應(yīng)經(jīng)過獨立于建筑物公共通風(fēng)系統(tǒng)管道排出。6.2.8 應(yīng)有可靠電力供給。必要時，主要設(shè)備如培養(yǎng)箱、生物安全柜、冰箱等應(yīng)配置備用電源。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第79頁緩沖間負(fù)壓試驗室收樣登記室機(jī)房淋浴間常壓試驗室常壓試驗室陜西省CDC二級生物安全試驗室示意圖內(nèi)廊公共走廊病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第80頁試驗室生物安全通用要求7.4.7.6 試驗室主入口處應(yīng)有標(biāo)識，明確

39、說明生物防護(hù)等級、操作生物因子、試驗室責(zé)任人姓名、緊急聯(lián)絡(luò)方式和國際通用生物危險符號；適用時，應(yīng)同時注明其它危險。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第81頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第82頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第83頁洗眼裝置病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第84頁四、生物安全試驗室良好工作行為指南 GB 19489 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第85頁生物安全意識至關(guān)主要!操作者必須推行良好行為規(guī)范才能從最大程度上確保試驗室生物安全。良好生物安全試驗室技術(shù)規(guī)范要滿足保護(hù)操作者和試驗環(huán)境要求，必要時還要考慮對操作對象保護(hù)。正確生物安全意識能夠使操作者最大程度地保護(hù)自己，防止失誤和事故，而且即使

40、發(fā)生意外，也會進(jìn)行妥善處置。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第86頁試驗室感染傳輸鏈個人防護(hù)裝備容器中病原體泄漏預(yù)防接種感染路徑/感染劑量傳輸易感宿主規(guī)程/設(shè)備潛伏期醫(yī)學(xué)監(jiān)測規(guī)程/設(shè)備生物安全防護(hù)試驗室硬件：試驗室設(shè)計建造設(shè)備配置個人防護(hù)裝備軟件：嚴(yán)格管理規(guī)程良好操作規(guī)范病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第87頁各種試驗操作造成試驗室感染危險性病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第88頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第89頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第90頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第91頁試驗室氣溶膠感染控制降低微生物氣溶膠產(chǎn)生（操作技術(shù)）阻斷微生物氣溶膠擴(kuò)散（設(shè)施、設(shè)備）預(yù)防微生物氣溶膠人體暴露和吸入（個

41、人防護(hù)裝備）病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第92頁生物安全試驗室良好工作行為指南 GB 19489附錄AA1 引言本附錄意在幫助生物安全試驗室制訂專用良好操作規(guī)程。試驗室應(yīng)切記，本附錄內(nèi)容不一定滿足或適合用于特定試驗室或特定試驗室活動，應(yīng)依據(jù)試驗室風(fēng)險評定結(jié)果制訂適用良好操作規(guī)程。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第93頁A2 生物安全試驗室清潔2.1 由受過培訓(xùn)專業(yè)人員按照專門規(guī)程清潔試驗室。外雇保潔人員能夠在試驗室消毒后負(fù)責(zé)清潔地面和窗戶（高等級生物安全試驗室不適用）。2.2 保持工作表面整齊。天天工作完后都要對工作表面進(jìn)行清潔并消毒。宜使用可移動或懸掛式臺下柜，方便于對工作臺下方進(jìn)行清潔和消毒。

42、2.3 定時清潔墻面，假如墻面有可見污物時，及時進(jìn)行清潔和消毒。不宜無目標(biāo)或強(qiáng)力清洗，防止破壞墻面。2.4 定時清潔易積塵部位，不常見物品最好存放在抽屜或箱柜內(nèi)。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第94頁2.5 清潔地面時間視工作安排而定，不在日常工作時間做常規(guī)清潔工作。用浸有清潔劑濕拖把清洗地板是最常見方法；家用型吸塵器不適合用于生物安全試驗室使用；不要使用掃帚等掃地。2.6 能夠用普通廢物袋搜集塑料或紙制品等非危險性廢物；2.7 用專用耐扎容器搜集帶針頭注射器、碎玻璃、刀片等銳利性廢棄物；病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第95頁2.8 用專用耐高壓蒸汽消毒塑料袋搜集任何含有生物危險性或有潛在生物危險

43、性廢物。2.9 依據(jù)廢棄物特點選取可靠消毒方式，比如是否包含基因改造生物、是否混有放射性等其它危險物、是否易形成膠狀物堵塞滅菌器排水孔等， 要監(jiān)測和評價消毒效果。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第96頁包膜病毒（如：流感、麻疹、HIV）細(xì)菌繁殖體（如：金葡，綠膿）真菌（如，念珠菌屬，曲霉屬）無包膜病毒（如脊髓灰質(zhì)炎病毒 , 柯薩奇病毒，HBV）分枝桿菌（如TB，M.terrae ）微小隱孢子蟲 Cryptosporidium parvum細(xì)菌芽孢Prions朊病毒敏感耐受低效中效 高 效高壓蒸汽滅菌（高，延時）消毒劑水平病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第97頁常見化學(xué)滅菌劑性能比較殺菌劑使用濃度（%）

44、消毒水平被滅活微生物特征細(xì)菌包膜病毒無包膜病毒結(jié)核分枝桿菌細(xì)菌芽孢含氯 高效+/-過氧乙酸 0.0010.2 高效+戊二醛 2高效+甲醛 3 8高效/中效+/-酒精 70%中效+-+-季胺鹽0.4 1.6低效+-病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第98頁常見化學(xué)滅菌劑安全性及特征消毒劑腐蝕性 有害殘留物被有機(jī)物滅活皮膚、眼刺激性呼吸道刺激性含氯 +-過氧乙酸 +-+-戊二醛 -+-+甲醛 -+-+酒精 +/-+-季胺 鹽-+-病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第99頁注意事項1）氯氣含有強(qiáng)毒性！所以只能在通風(fēng)良好地方儲存和使用。2）漂白劑不能與酸混合以防止氯氣快速釋放。3）氯許多副產(chǎn)物可能對人體及環(huán)境有害

45、， 防止濫用含氯消毒劑，尤其是漂白劑。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第100頁酒 精醫(yī)用酒精包含乙醇和異丙醇，都含有快速殺滅細(xì)菌作用，可殺滅結(jié)核分枝桿菌、真菌和包膜病毒。不能殺滅芽孢。最正確殺菌濃度為70酒精主要經(jīng)過使微生物蛋白質(zhì)變性來到達(dá)殺菌作用，可作為儀器外表面和手消毒劑酒精能破壞用膠鑲嵌儀器鏡頭，可使橡膠及一些塑料管在延長使用或重復(fù)使用后變硬膨脹，故用酒精來消毒儀器應(yīng)加以注意。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第101頁紫外線消毒 紫外線適合用于空氣、物體表面等消毒。 消毒使用紫外線是C波紫外線，波長范圍是200nm275nm，殺菌作用最強(qiáng)波段是250nm270nm紫外線光源必須使用能夠產(chǎn)生到達(dá)

46、國家標(biāo)準(zhǔn)輻照值殺菌紫外燈，普通30W 直管紫外燈在距離燈管1m處檢測輻射253.7nm。室內(nèi)安裝紫外燈數(shù)量為平均每m3不少于1.5W，照射時間不少于30min。 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第102頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第103頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第104頁A3生物安全試驗室標(biāo)準(zhǔn)良好工作行為3.1 建立并執(zhí)行準(zhǔn)入制度。3.2 對個人日常清潔和消毒要求，如洗手、淋?。ㄟm用時）等。3.3 對個人行為要求，如在試驗室工作區(qū)不要飲食、抽煙、處理隱形眼鏡、使用化裝品、存放食用等。3.4 正確使用適當(dāng)個體防護(hù)裝備，如手套、護(hù)目鏡、防護(hù)服、口罩、帽子、鞋等。3.5 戴手套工作。每當(dāng)污染、破

47、損或戴一定時間后，更換手套；每當(dāng)操作危險性材料工作結(jié)束時，除去手套并洗手；離開試驗間前，除去手套并洗手。嚴(yán)格恪守洗手規(guī)程。不要清洗或重復(fù)使用一次性手套。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第105頁戴手套注意關(guān)鍵點:1）選擇正確類型和尺寸手套；2）經(jīng)過充氣試驗檢驗手套完整性；3）將手插入手套后將手套口遮蓋試驗服袖口; 病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第106頁脫手套過程及注意關(guān)鍵點:用一手捏起另一手腕部手套外緣,將手套從手上脫下并將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi)；用戴著手套手拿住該手套；用脫去手套手指插入另一手套腕部內(nèi)面；脫下該手套使其內(nèi)面向外并形成一個由兩個手套組成袋狀；丟棄在高壓消毒袋中并進(jìn)行消毒處理。病原微生物

48、實驗室生物安全培訓(xùn)第107頁3.6 假如微生物或其它有害物質(zhì)有可能濺出，佩戴防護(hù)眼鏡。3.7 存在空氣傳輸風(fēng)險時需要進(jìn)行呼吸防護(hù)，用于呼吸防護(hù)口罩在使用前要進(jìn)行適配性試驗。3.8 工作時穿防護(hù)服。在處理生物危險材料時，穿著適用指定防護(hù)服。離開試驗室前按程序脫下防護(hù)服。用完防護(hù)服要消毒后再洗滌。工作用鞋要防水、防滑、耐扎、舒適。3.9 安全使用移液管，要使用機(jī)械移液裝置。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第108頁3.10 配置降低銳器損傷風(fēng)險裝置和建立操作規(guī)程。在使用銳器時要注意： a) 不要試圖彎曲、截斷、破壞針頭等銳器，不要試圖從一次性注射器上取下針頭或套上針頭護(hù)套。必要時，使用專用工具操作。

49、b) 使用過銳器要置于專用耐扎容器中，不要超出要求盛放容量。 c) 重復(fù)利用銳器要置于專用耐扎容器中，采取適當(dāng)方式消毒和清潔處理。 d) 不要試圖直接用手處理打破玻璃器具等，盡可能防止使用易碎器具。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第109頁3.11 按規(guī)程小心操作，防止發(fā)生溢灑或產(chǎn)生氣溶膠，如不正確離心操作、移液操作等。3.12 工作結(jié)束或發(fā)生危險材料溢灑后，要及時使用適當(dāng)消毒劑對工作表面和被污染處進(jìn)行處理。3.13 建立良好內(nèi)務(wù)規(guī)程。3.14 試驗室內(nèi)不要放或養(yǎng)與工作無關(guān)動植物。3.15 全部生物危險廢物在處置前要可靠消毒。需要運(yùn)出試驗室進(jìn)行消毒材料，要置于專用防漏容器中運(yùn)輸。病原微生物實驗室生

50、物安全培訓(xùn)第110頁3.16 從試驗室內(nèi)運(yùn)走危險材料，要按照國家和地方相關(guān)要求進(jìn)行包裝。3.17 在試驗室入口處設(shè)置生物危險標(biāo)識。3.18 采取有效防昆蟲和嚙齒類動物辦法，如防蟲紗網(wǎng)、擋鼠板等。3.19 員工上崗培訓(xùn)和能力評定與確認(rèn)。需要時，員工要接收再培訓(xùn)，如長久未工作、操作規(guī)程或相關(guān)政策發(fā)生改變等。3.20 對個人健康情況監(jiān)督、職業(yè)禁忌癥、易感人群政策。必要時，為員工提供免疫計劃、醫(yī)學(xué)咨詢或指導(dǎo)。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第111頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第112頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第113頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第114頁辦公室病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第115頁

51、病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第116頁病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第117頁 五、試驗室生物危險物質(zhì)溢灑處理指南 GB 19489附錄BB1 引言本附錄意在為試驗室制訂生物危險物質(zhì)溢灑處理程序提供參考。溢灑在本附錄中指包含生物危險物質(zhì)液態(tài)或固態(tài)物質(zhì)意外地與容器或包裝材料分離過程。試驗室人員熟悉生物危險物質(zhì)溢灑處理程序、溢灑處理工具包使用方法和存放地點對降低溢灑危害非常主要。本附錄描述了試驗室生物危險物質(zhì)溢灑常規(guī)處理方法，試驗室需要依據(jù)其所操作生物因子，制訂專用程序。假如溢灑物中含有放射性物質(zhì)或危險性化學(xué)物質(zhì)，則應(yīng)使用特殊處理程序。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第118頁B2 溢灑處理工具包2.1

52、 基礎(chǔ)溢灑處理工具包通常包含： a) 對感染性物質(zhì)有效消毒液，消毒液需要按使用要求定時配制； b) 消毒液盛放容器； c) 鑷子或鉗子、一次性刷子、可高壓掃帚和簸箕，或其它處理銳器裝置； d) 足夠布巾、紙巾或其它適宜吸收材料； e) 用于盛放感染性溢灑物以及清理物品專用搜集袋或容器； f) 橡膠手套； g) 面部防護(hù)裝備，如面罩、護(hù)目鏡、一次性口罩等； h) 溢灑處理警示標(biāo)識，如“禁止進(jìn)入”、“生物危險”等； i) 其它專用工具。2.2 明確標(biāo)示出溢灑處理工具包存放地點。病原微生物實驗室生物安全培訓(xùn)第119頁B3 撤離房間3.1 發(fā)生生物危險物質(zhì)溢灑時，馬上通知房間內(nèi)無關(guān)人員快速離開，在撤離房間過程中注意防護(hù)氣溶膠。關(guān)門