分光光度計的校正和檢驗

1、分光光度計的校正和檢驗第1頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一721可見分光光度計第2頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一使用方法721型分光光度計其波長范圍360800nm，色散元件為三角棱形.1.檢查儀器各調節(jié)鈕的起始位置是否正確，接通電源開關，打開樣品室暗箱蓋，使電表指針處于“0”位，預熱20min后，再選擇須用的單色光波長和相應的放大靈敏度檔，用調“0”電位器調整電表為T=0%。2.蓋上樣品室蓋使光電管受光，推動試樣架拉手，使參比溶液池（溶液裝入4/5高度，置第一格）置于光路上，調節(jié)100%透射比調節(jié)器，使電表指針指T=100%。3.重復進行打開

2、樣品室蓋，調0，蓋上樣品室蓋，調透射比為100%的操作至儀器穩(wěn)定。第3頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一4.蓋上樣品室蓋，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置于光路上，讀出吸光度值。讀數后應立即打開樣品室蓋。5.測量完畢，取出比色皿，洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置，電源開關置于“關”，拔下電源插頭。6.放大器各檔的靈敏度為：“l(fā)” 1倍；“2”10倍；“3”20倍，靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調到T= 100%處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后，應重新調“0”和“100”

3、。第4頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一4.蓋上樣品室蓋，推動試樣架拉手，使樣品溶液池置于光路上，讀出吸光度值。讀數后應立即打開樣品室蓋。5.測量完畢，取出比色皿，洗凈后倒置于濾紙上晾干。各旋鈕置于原來位置，電源開關置于“關”，拔下電源插頭。6.放大器各檔的靈敏度為：“l(fā)” 1倍；“2”10倍；“3”20倍，靈敏度依次增大。由于單色光波長不同時，光能量不同，需選不同的靈敏度檔。選擇原則是在能使參比溶液調到T= 100%處時，盡量使用靈敏度較低的檔，以提高儀器的穩(wěn)定性。改變靈敏度檔后，應重新調“0”和“100”。第5頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一1

4、.波長校正分光光度計常需要波長校正，檢查儀器的波長刻度與實際波長是否能較好的保持一致，以減小誤差。稀土玻璃（鐠釹玻璃，鈥玻璃）在相當寬的波長范圍內特征吸收峰，如通常采用鐠釹玻璃在573nm和586nm的雙峰以及741nm和808nm等處的吸收峰來對分光光度計的波長刻度進行校正。一般情況下，可見分光光度計的波長誤差允許在3nm范圍內。利用某些本身有較強特征譜線的光源也可對波長進行校正，如氘燈和汞燈廣泛用于紫外線分光光度計的校正。此外，苯蒸汽在紫外區(qū)有很強的特征吸收峰，用它來校正波長也很方便。第6頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一2.吸光度校正在實際工作中，有時需要對儀器的吸

5、光度標準進行檢查和校正。校正的方法是將0.0303g干燥衡重的K2Cr2O7 溶于1L0.05mol.L-1 的H2SO4溶液中，用1cm吸收池，在25C測定不同波長下的吸光度。第7頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一波長/nm吸光度投射比/(%)波長/nm吸光度投射比/(%)2200.44635.83400.31648.32300.17167.43500.55927.62400.29550.73600.83014.82500.49631.93700.98710.32600.66323.33800.93211.72700.74518.03900.69520.22800.71

6、219.44000.39640.22900.42837.34200.12475.13000.14970.94400.05488.23100.04889.54600.01896.03200.06386.44800.00499.13300.14971.05000.000100表3-6 重鉻酸鉀溶液吸光度第8頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一3.散雜光的檢驗由于儀器光源表面對光的反射和散射，單色光中有一定的雜散光。雜散光可影響摩爾吸光系數與吸光度之間的直線關系。在儀器的光路系統(tǒng)中，往往采用一定的措施避免雜散光的影響。如在721型分光光度計中就裝有保護玻璃片，以減少雜散光的影響。雜散光的檢驗是在較短波長下，測定某選定溶液的透射比。藥典規(guī)定用一定濃度的NaI或NaNO3溶液檢查，其投射比應小于規(guī)定值。第9頁，共10頁，2022年，5月20日，9點46分，星期一4.穩(wěn)定性的檢驗穩(wěn)定性通常檢驗如下：將儀器預熱后，精確調節(jié)投射比為0%，在規(guī)定時間內觀察其變化