醫(yī)學(xué)專題藥劑學(xué)-脂質(zhì)體介紹

1、 脂質(zhì)體制備技術(shù) 藥劑教研室 吳琳華2021/7/20 星期二1內(nèi)容提要脂質(zhì)體的概念脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類脂質(zhì)體的制備方法 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究特殊性能脂質(zhì)體脂質(zhì)體的作用機(jī)理脂質(zhì)體的特點(diǎn)2021/7/20 星期二2第一節(jié)概述 脂質(zhì)體(liposomes) 將藥物包封于類脂質(zhì)雙分子層內(nèi)而形成的微型囊泡。 2021/7/20 星期二3脂質(zhì)體的研究進(jìn)展1965年，英國(guó)Banghan作為研究生物膜的模型提出的。20世紀(jì)70年代初期，Gregoriadis首先提出用脂質(zhì)體作為-半乳糖苷酶載體治療糖原積累疾病。 2021/7/20 星期二4脂質(zhì)體的研究進(jìn)展第一個(gè)藥用脂質(zhì)體制劑(1988年,瑞士)

2、益康唑脂質(zhì)體凝膠第一個(gè)脂質(zhì)體注射劑(1990年美國(guó)) 兩性霉素B脂質(zhì)體第一個(gè)抗癌藥物脂質(zhì)體(1995年，美國(guó)) 阿柔比星脂質(zhì)體2021/7/20 星期二5一、脂質(zhì)體的組成磷脂親水的頭部磷酸骨架水溶性分子（膽堿、絲氨酸等）疏水的尾部膽固醇脂質(zhì)體第二節(jié) 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類兩條脂肪酸鏈，（10-24個(gè)C原子，0-6個(gè)雙鍵）2021/7/20 星期二6 磷脂示意圖脂質(zhì)體的組成膽固醇的結(jié)構(gòu)圖2021/7/20 星期二7脂質(zhì)體材料中性磷脂 負(fù)電荷磷脂（酸性磷脂）正電荷脂質(zhì) 膽固醇（Ch)大豆甾醇及其葡萄糖苷磷脂酰膽堿（PC）磷脂酰乙醇胺（PE）鞘磷脂（SM）磷脂酸（PA）磷脂酰甘油（PG）

3、磷脂酰肌醇 (PI)磷脂酰絲氨酸(PS)硬脂酰胺（SA）膽固醇衍生物大豆甾醇葡萄糖苷(SG）大豆甾醇SS脂質(zhì)體的組成2021/7/20 星期二81、中性磷脂磷脂酰膽堿(phosphatidyl choline,PC，)天然的PC a. 脂質(zhì)體的主要組成部分b. 從蛋黃、大豆、牛心臟和脊髓提取c.是一種混合物，每一種PC具有不同長(zhǎng)度、不同飽和度的脂肪鏈。 植物性PC的脂肪鏈具有高度不飽和性 動(dòng)物性PC的脂肪鏈大部分是飽和的合成的PC 二棕櫚酰膽堿（DPPC)、二硬脂酰膽堿(DSPC) 二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿（DMPC) 脂質(zhì)體的組成（中性磷脂）2021/7/20 星期二9脂質(zhì)體的組成（中性磷脂）磷

4、脂酰膽堿(PC)(a)全飽和磷脂 （緊密排列）(b)非飽和磷脂（不能緊密列）磷脂脂肪鏈的飽和度對(duì)磷脂膜排列的影響2021/7/20 星期二10脂質(zhì)體的組成（中性磷脂） 磷脂酰乙醇胺(phosphatid ethanolamine, PE)特性; 頭部基團(tuán)小； 非飽和的PE容易形成非雙層結(jié)構(gòu)型 形成六角相（制備特殊脂質(zhì)體）六角相 磷脂酰乙醇胺（PE）2021/7/20 星期二11鞘磷脂（sphingomyelin,SM） 特性：酰胺鍵和羥基基團(tuán)之間形成氫鍵相互作用，因此，比PC具有更高秩序的膠相。 脂質(zhì)體的組成（中性磷脂）SM2021/7/20 星期二12脂質(zhì)體的組成 磷脂酸(phosphati

5、dic acid,PA)磷脂酰肌醇(phosphatidyl inositol,PI)磷脂酰絲氨酸(phosphatidyl serine, PS)2、負(fù)電荷磷脂（酸性磷脂）2021/7/20 星期二133、膽固醇(cholesterol, Ch)膜的另一類重要組成成分。存在：動(dòng)物細(xì)胞的質(zhì)膜中含量較高，植物中含量較少。性質(zhì)：為中性脂質(zhì)，亦屬于雙親性分子，但親油性大于親水性。在脂質(zhì)體中的狀態(tài)：作為兩性分子，能嵌鑲?cè)肽ぃu基團(tuán)朝向親水面，脂肪族的鏈朝向并平行于磷脂雙層中心的烴鏈。膽固醇本身不形成脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)，但它能以高濃度方式摻入磷脂膜。在脂質(zhì)體中的作用：主要與磷脂相結(jié)合，阻止磷脂凝集成晶體結(jié)構(gòu)。

6、減弱膜中類脂與蛋白質(zhì)復(fù)合體之間的連接，像“緩沖劑”一樣起著調(diào)節(jié)膜結(jié)構(gòu)“流動(dòng)性”的作用。 脂質(zhì)體的組成2021/7/20 星期二14脂質(zhì)體的組成膽固醇與磷脂的排列示意圖2021/7/20 星期二154、正電荷脂質(zhì)硬脂酰胺(sterylamine,SA)、膽固醇衍生物。 普遍應(yīng)用于基因的傳遞系統(tǒng) 5、大豆甾醇及其葡萄糖苷 為純天然品，較安全，價(jià)格便宜。大豆甾醇葡萄糖苷(SG) 是從提煉豆油殘?jiān)蟹蛛x出來(lái)的甾醇葡萄糖苷的混合物。 能提高脂質(zhì)體的肝靶向性。大豆甾醇（soybean sterol,SS） 是SG去葡萄糖殘基的水解產(chǎn)物。與Ch結(jié)構(gòu)相似，能提高脂質(zhì)體穩(wěn)定性，其膜穩(wěn)定作用大于Ch。脂質(zhì)體的組成

7、2021/7/20 星期二16二、脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)雙分子結(jié)構(gòu)：磷脂分子的親水端呈彎曲的弧形，形似“手杖”，與膽固醇分子的親水基團(tuán)相結(jié)合，形成“U”形結(jié)構(gòu)。兩個(gè)“U”形結(jié)構(gòu)相對(duì)排列，則形成雙分子結(jié)構(gòu)。第二節(jié) 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類卵磷脂與膽固醇在脂質(zhì)體中的排列形式2021/7/20 星期二17脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類似生物膜，在脂質(zhì)體的水相和脂質(zhì)雙分子層組成的膜內(nèi)可以包裹多種物質(zhì)。包裹物質(zhì)脂溶性藥物 定位于雙分子層脂質(zhì)膜間兩性化合物 定位在水相與膜內(nèi)部交界磷脂上水溶性藥物 包裹在水相不能包裹物質(zhì)在水相和有機(jī)溶劑中都不溶的物質(zhì) 在兩種介質(zhì)中溶解性都非常好的物質(zhì) 脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)2021/7/20 星期二

8、18單室脂質(zhì)體多室脂質(zhì)體2021/7/20 星期二19三、脂質(zhì)體的理化性質(zhì)第二節(jié) 脂質(zhì)體的組成、結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)與分類理化性質(zhì)相變溫度膜的通透性膜的流動(dòng)性 脂質(zhì)體荷電性2021/7/20 星期二201、相變溫度(phase transition temperature, Tc) 脂質(zhì)體升高溫度至一定溫度膜的物理性質(zhì)改變膜的橫切面增加、雙分子層厚度減少、膜流動(dòng)性加 脂質(zhì)雙分子層中?；鶄?cè)鏈排列改變 有序排列變?yōu)闊o(wú)序排列 相變溫度Tc脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度）2021/7/20 星期二21 決定Tc的因素（1）磷脂的種類。磷脂都具有特定的Tc值。（2）極性基團(tuán)的性質(zhì)。（3）?；鶄?cè)鏈的長(zhǎng)度和不飽和度。

9、 ?；鶄?cè)鏈長(zhǎng) Tc高 鏈的飽和度高 Tc高 脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度）2021/7/20 星期二22Tc以下時(shí)，為“膠晶態(tài)”（脂肪鏈全反式，排列緊密，剛性和厚度增加）Tc以上時(shí)，為 “液晶態(tài)” （脂肪鏈伸縮、彎曲、外扭）磷脂發(fā)生相變時(shí)， “膠晶態(tài)” “液晶態(tài)” “液態(tài)”共存，出現(xiàn)相分離，使膜的流動(dòng)性增加，易導(dǎo)致內(nèi)容物泄漏。脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度）2021/7/20 星期二23相變溫度與脂質(zhì)體膜穩(wěn)定性脂質(zhì)體的理化性質(zhì)（相變溫度）2021/7/20 星期二242、膜的通透性(1)半通透性脂質(zhì)體膜： 不同離子穿膜和分子擴(kuò)散過膜速率不同。 (2)膜兩側(cè)的滲透壓： 導(dǎo)致分子量較小的物質(zhì)滲漏或磷脂膜

10、破裂(3)對(duì)于在水中和有機(jī)溶劑中溶解度都非常高的分子， 磷脂膜是一種非常弱的屏障。 脂質(zhì)體的理化性質(zhì)2021/7/20 星期二253.膜的流動(dòng)性 Tc時(shí)膜的流動(dòng)性增加： 包裹在脂質(zhì)體內(nèi)的藥物具有最大釋放速率。 膽固醇可調(diào)節(jié)膜的流動(dòng)性： a.高于Tc時(shí)，減少膜的流動(dòng)性 b.低于Tc時(shí)，增加膜的流動(dòng)性4、荷電性含酸性脂質(zhì)的脂質(zhì)體荷負(fù)電含堿基的脂質(zhì)體荷正電不含離子的脂質(zhì)體顯電中性 脂質(zhì)體的理化性質(zhì)2021/7/20 星期二26脂質(zhì)體分類按結(jié)構(gòu)類型分類單室（層）脂質(zhì)體多室（層）脂質(zhì)體（MLVs)多囊脂質(zhì)體（MVLs)小單室（層）脂質(zhì)體(SUVs） 大單室（層）脂質(zhì)體(LUVs）2021/7/20 星期

11、二271、按結(jié)構(gòu)類型分類單室（層）脂質(zhì)體，是由一層雙分子膜形成的囊泡。小單室（層）脂質(zhì)體（SUVs）最小粒徑 20 nm 80nm - 納米脂質(zhì)體包封容積低 體內(nèi)循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)大單室（層）脂質(zhì)體(LUVs)一般粒徑100nm 1000nm對(duì)水溶性藥物的包封率高，包封容積大。如果粒徑較大(500nm)，膜不穩(wěn)定。 脂質(zhì)體的分類（按結(jié)構(gòu)類型分類）2021/7/20 星期二282多室（層）脂質(zhì)體(MLVs), 雙分子脂質(zhì)膜與水交替形成的多層結(jié)構(gòu)的囊泡。 一般由五層、或更多層的同心板組成。較少層數(shù)(兩到四層)的又稱為寡層脂質(zhì)體。粒徑一般為100nm5m。包封容積相對(duì)較低。脂質(zhì)體的分類（按結(jié)構(gòu)分類）2021

12、/7/20 星期二293多囊脂質(zhì)體 (multivescular liposomes,MVLs)由許多非同心囊泡構(gòu)成，每個(gè)囊泡中包裹著被裝載藥物的水溶液。 粒徑為550m 。適用于包裹水溶性物質(zhì)。載藥量比單層脂質(zhì)體 和多層脂質(zhì)體高得多具有緩釋作用。 脂質(zhì)體的分類（按結(jié)構(gòu)分類）多囊脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)2021/7/20 星期二30脂質(zhì)體的分類按結(jié)構(gòu)性能分類特殊性能脂質(zhì)體（特殊的脂質(zhì)材料制成）普通脂質(zhì)體(一般脂質(zhì)材料制成 )熱敏感性脂質(zhì)體pH敏感脂質(zhì)體多糖被復(fù)的脂質(zhì)體免疫脂質(zhì)體長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體光敏脂質(zhì)體 磁性脂質(zhì)體2021/7/20 星期二31脂質(zhì)體的分類按荷電性分類正電荷脂質(zhì)體 負(fù)電荷脂質(zhì)體 中性脂質(zhì)體 2

13、021/7/20 星期二32脂質(zhì)體的分類按給藥途徑分類靜脈給藥脂質(zhì)體口服給藥脂質(zhì)體肺部吸入給藥脂質(zhì)體眼部用藥脂質(zhì)體黏膜給藥脂質(zhì)體外用脂質(zhì)體和經(jīng)皮給藥脂質(zhì)體局部注射用脂質(zhì)體（肌注、關(guān)節(jié)腔、脊髓腔、腫瘤內(nèi)等）免疫診斷用脂質(zhì)體基因工程和生物工程用脂質(zhì)體2021/7/20 星期二33第三節(jié) 脂質(zhì)體的制備方法薄膜分散法 制備方法逆相蒸發(fā)法 溶劑注入法冷凍干燥法 pH梯度法 前體脂質(zhì)體法 干膜超聲法 薄膜-振蕩分散法 薄膜-勻化法 薄膜-擠壓法乙醇注入法乙醚注入法 2021/7/20 星期二34一.薄膜分散法膜材 有機(jī)溶劑（氯仿等） （脂溶性藥物） 膜材溶液減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑 器壁上形成薄膜 加入緩沖液

14、（水溶性藥物） 振搖 大多層脂質(zhì)體 多層脂質(zhì)體 各種機(jī)械方法分散脂質(zhì)體的制備方法2021/7/20 星期二351干膜超聲法 超聲波儀（探針型和水浴型）超聲處理 脂質(zhì)體混懸液 葡聚糖凝膠柱層析（分離除去未包入的藥物） 脂質(zhì)體混懸液 2薄膜-振蕩分散法 干膜 加入緩沖溶液 液體快速混合器振蕩（252min） 脂質(zhì)體3薄膜-勻化法 將薄膜-振蕩分散法制備的較大粒徑脂質(zhì)體 組織搗機(jī)或高壓乳勻機(jī)勻化 較小粒徑的脂質(zhì)體。 此法較適合工業(yè)生產(chǎn)。 脂質(zhì)體的制備方法（薄膜法）2021/7/20 星期二36脂質(zhì)體的制備方法膜材 W/O型乳劑 溶于有機(jī)溶劑（氯仿、乙醚） 加入待包封藥物的水溶液* 膠態(tài) 短時(shí)超聲 減

15、壓蒸發(fā)有機(jī)溶劑 脫落凝膠液滴加緩沖液繼續(xù)減壓蒸發(fā) 旋轉(zhuǎn)充氮?dú)庵翚馕断?水性混懸液 超速離心或凝膠色譜法 除去未包入的藥物 大單層脂質(zhì)體 工藝流程二、逆相蒸發(fā)法2021/7/20 星期二37三、溶劑注入法1、乙醇注入法 脂質(zhì)乙醇液 細(xì)針頭快速注入到緩沖液中 SUVs。 （殘存的乙醇用透析法除去）優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單快速,脂質(zhì)濃度受限。缺點(diǎn): 水相包封率極低，乙醇難除。 2、乙醚注入法 脂質(zhì)乙醚液 細(xì)孔針頭慢慢注入5560的緩沖液中 乙醚蒸發(fā) 單層脂質(zhì)體(直徑50200nm)。 優(yōu)點(diǎn)：脂質(zhì)濃度不受限，水相包封率高； 缺點(diǎn)：制備時(shí)間長(zhǎng)。 脂質(zhì)體的制備方法2021/7/20 星期二38四、冷凍干燥法 磷脂 高

16、度分散在緩沖鹽溶液中 超聲波處理 冷凍干燥（干燥物） 分散到含藥物的水性介質(zhì)中 脂質(zhì)體 冷凍溫度、速度及時(shí)間等因素影響脂質(zhì)體的包封率和穩(wěn)定性。 加入凍結(jié)保護(hù)劑，能降低凍融過程對(duì)脂質(zhì)體的損害。 甘露醇 、D-葡萄糖此外還有：pH梯度法和前體脂質(zhì)體法等。脂質(zhì)體的制備方法2021/7/20 星期二39一、脂質(zhì)體的粒徑和分布脂質(zhì)體的粒徑大小和分布均勻程度，直接影響脂質(zhì)體在機(jī)體組織的行為和處置。粒徑100nm，在血液循環(huán)時(shí)間長(zhǎng)；粒徑200nm，在血液循環(huán)時(shí)間短（易被巨嗜細(xì)胞作為外來(lái)異物吞噬）。第四節(jié) 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究 檢測(cè)方法1、光學(xué)顯微鏡法2、電子顯微鏡法3、激光散射法（塵粒計(jì)數(shù)法）4、電感應(yīng)法（庫(kù)爾

17、特計(jì)數(shù)器）5、光感應(yīng)法（如粒度測(cè)定儀）負(fù)染法冰凍蝕刻法2021/7/20 星期二401、光學(xué)顯微鏡法 將脂質(zhì)體混懸液稀釋（約5倍），取1滴放入載玻片上或滴入細(xì)胞計(jì)數(shù)板內(nèi)，放上蓋玻片，觀察脂質(zhì)體粒徑大小和數(shù)目，然后按其大小分檔計(jì)數(shù)，以視野見到的粒子總數(shù)，求出各檔次百分?jǐn)?shù)。 僅適用于大的脂質(zhì)體。 2、電子顯微鏡法 用負(fù)染法和冰凍蝕刻法，用于分析小脂質(zhì)體。負(fù)染法：用溶液懸浮脂質(zhì)體，樣品滴在有支持膜的銅網(wǎng)上，濾紙吸去多余的液體，再滴重金屬染料，濾紙吸去多余液體，自然干燥30min，用電鏡觀察脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)和粒徑分布。 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（粒徑和分布）2021/7/20 星期二413、激光散射法（塵粒計(jì)數(shù)法

18、） 將脂質(zhì)體混懸液稀釋后霧化，定量噴到計(jì)數(shù)儀散射腔，自動(dòng)計(jì)數(shù)儀記錄各檔次粒子的粒徑、數(shù)目，計(jì)算分布概率或繪制粒徑分布圖。 此外，還有電感應(yīng)法（庫(kù)爾特計(jì)數(shù)器）、光感應(yīng)法（粒度測(cè)定儀）等 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（粒徑和分布）2021/7/20 星期二42 二、脂質(zhì)體的包封率（重量包封率） 1、包封率：是指包入脂質(zhì)體內(nèi)的藥物量與投料量的重量百分比。 方法：測(cè)定脂質(zhì)體中的藥量，經(jīng)色譜柱或離心分離測(cè)定介質(zhì)中未包入的藥量，計(jì)算。脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（包封率）包封率脂質(zhì)體中包封的藥量脂質(zhì)體中包封與未包封的總藥量=100%2021/7/20 星期二43 2、影響脂質(zhì)體包封率的因素 脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類型 脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)類型不同

19、，其包封率也不同。 順序：LUVs(大單）MLV（多層）SUVs（小單） 脂質(zhì)體制備方法 處方擬訂后，制備方法就可決定結(jié)構(gòu)類型。故制備方法也與包封率有關(guān)，順序?yàn)椋阂颐炎⑷敕嫦嗾舭l(fā)法干膜法乙醇注入法超聲法 冷凍干燥法的冷凍過程使包封率下降。脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（包封率）2021/7/20 星期二44 類脂膜的組成與電性膜的組成 與脂質(zhì)體的結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，因此，對(duì)包封率有影響。 如 PC中加入Ch可提高包封率；脂質(zhì)材料與脂質(zhì)體表面的電性對(duì)離子型藥物的包封率影響很大 如：如水相離子型藥物的電性與脂質(zhì)體表面的電性相反時(shí)， 可能由于靜電結(jié)合的原因，包封率高。 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（影響包封率的因素）2021/7

20、/20 星期二45 藥物的性質(zhì)和濃度 膜材固定、制備方法固定的脂質(zhì)體，其包封率則由被包封的藥物的性質(zhì)決定。溶解性：脂溶性的藥物包封率高；電性：藥物的電性與脂質(zhì)體膜的電性相反時(shí)，藥物包封率高；分子量：分子量大的比分子量小的藥物包封率高；一般情況下，藥物濃度增加，包封率下降。 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究（影響包封率的因素）2021/7/20 星期二46三、脂質(zhì)體的包封容積 包封容積為每摩爾脂質(zhì)形成脂質(zhì)體后所包裹溶液的體積。測(cè)定方法：用脂質(zhì)體包封水溶性的熒光標(biāo)記物，直接測(cè)定水相的體積。四、脂質(zhì)體的藥脂包封比率 指一定重量的脂質(zhì)所包封藥物重量百分比。 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究藥脂包封比率=100%脂質(zhì)體中包封的藥量處方

21、中類脂的總量2021/7/20 星期二47五、脂質(zhì)體的滲漏率 滲漏率表示脂質(zhì)體在貯存期間包封率的變化情況，是脂質(zhì)體不穩(wěn)定性的重要指標(biāo)。（在膜材中加入一定量的膽固醇，能夠加固脂質(zhì)雙層膜，減少膜的流動(dòng)性，可降低滲漏率。）脂質(zhì)體的質(zhì)量研究滲漏率=貯存后滲漏到介質(zhì)中的藥量貯存前包封的藥量100%2021/7/20 星期二48六、磷脂的氧化程度 采用氧化指數(shù)為指標(biāo)。氧化指數(shù)=A233nm /A215nm 氧化指數(shù)0.2避免脂質(zhì)氧化的措施：用純化的脂質(zhì)和新鮮蒸餾的有機(jī)溶劑。制備過程中避免高溫。在無(wú)氧條件下制備。用氮?dú)馐顾芤好撗?。脂質(zhì)體在惰性氣體中保存。加入抗氧化劑，減少膜氧化脂質(zhì)水平。盡量使用飽和脂質(zhì)。

22、去除殘余有機(jī)溶劑。 脂質(zhì)體的質(zhì)量研究2021/7/20 星期二49-欖香烯脂質(zhì)體的質(zhì)量研究-欖香烯脂質(zhì)體透射電鏡照片 -欖香烯脂質(zhì)體粒度分布圖 -欖香烯脂質(zhì)體電位 (92.960.15)% 三批樣品平均包封率 (158.536.6) nm （-67.33.9）mV 形態(tài)粒徑表面電位包封率2021/7/20 星期二50 室溫（25）4周后滲漏100%穩(wěn)定性考察 冰箱（4）4周后滲漏約5% 2021/7/20 星期二51第五節(jié) 特殊性能脂質(zhì)體熱敏感性脂質(zhì)體（溫度敏感脂質(zhì)體） pH敏感脂質(zhì)體（酸敏感脂質(zhì)體） 多糖被復(fù)的脂質(zhì)體（糖基脂質(zhì)體） 免疫脂質(zhì)體 長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體（長(zhǎng)效脂質(zhì)） 光敏脂質(zhì)體 磁性脂質(zhì)體

23、 特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二52一、熱敏感性脂質(zhì)體（溫度敏感脂質(zhì)體）。設(shè)計(jì)原理：當(dāng)溫度提高到某特定溫度（相變溫度Tc）時(shí)，脂質(zhì)體膜由“膠晶態(tài)”轉(zhuǎn)變到“液晶態(tài)” ，磷脂的酰基鏈的紊亂度和活動(dòng)度增加，膜的流動(dòng)性增加，脂質(zhì)體所包封的藥物釋放率增大，低于Tc時(shí)，藥物的釋放相對(duì)緩慢。 選用不同長(zhǎng)度碳鏈的脂質(zhì)，如二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)和二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)，按一定比例混合,通過適當(dāng)方法制成相變溫度稍高于體溫的脂質(zhì)體。應(yīng)用時(shí)，通過適當(dāng)?shù)募夹g(shù)使靶部位溫度與熱敏感脂質(zhì)體的相 變溫度相同，導(dǎo)致脂質(zhì)體迅速釋放內(nèi)含藥物。特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二53熱敏感脂質(zhì)體釋放藥物示

24、意圖特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二54二、pH敏感脂質(zhì)體（酸敏感脂質(zhì)體）。 組成：不飽和的磷脂酰乙醇胺（PE）和脂肪酸。 特性：pH7.4時(shí)穩(wěn)定，在低pH時(shí)不穩(wěn)定，pH6.5的酸性條件下，與相應(yīng)的膜發(fā)生融合，釋放包裹的藥物到胞漿。 原理：脂質(zhì)體中含有不飽和的PE，在生理環(huán)境下可形成六角相，需加入某些脂肪酸制成穩(wěn)定的脂質(zhì)體。當(dāng)pH6.5時(shí)，脂肪酸的羥基質(zhì)子化，脂質(zhì)形成六角相，引起膜的融合。 特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二55pH敏感脂質(zhì)體示意圖 病理組織的pH比正常組織低（如感染部位、原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移腫瘤組織），炎癥反應(yīng)后60h的pH降低至6.5。細(xì)胞內(nèi)吞空泡的pH范圍為5.0

25、6.5。 脂質(zhì)體主要通過內(nèi)吞被細(xì)胞攝取，脂質(zhì)體達(dá)到的細(xì)胞內(nèi)位點(diǎn)是溶酶體，在溶酶體，脂質(zhì)體逐漸被破壞，多數(shù)情況下藥物不能直接到達(dá)細(xì)胞漿. 而pH-敏感脂質(zhì)體在內(nèi)吞體酸性環(huán)境下不穩(wěn)定，脂質(zhì)體膜即與內(nèi)吞體膜融合，將內(nèi)容物釋放至胞漿。特殊性能脂質(zhì)體（pH敏感脂質(zhì)體）2021/7/20 星期二56三、多糖被復(fù)的脂質(zhì)體（摻入糖基脂質(zhì)體）。 在脂質(zhì)體雙分子層中摻入多糖或糖脂的脂質(zhì)體。特點(diǎn)：1、糖基不同可改變脂質(zhì)體的組織分布： 如半乳糖為肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞所攝??； 甘露糖為NK細(xì)胞所攝取； 膽固醇氨基甘露糖衍生物具有高度的向肺性。2、能抑制給藥后在血流中某些崩解過程，使脂質(zhì)體穩(wěn)定。特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星

26、期二57四、長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體（長(zhǎng)效脂質(zhì)）。1.含有神經(jīng)節(jié)苷脂GM1的脂質(zhì)體（隱蔽脂質(zhì)體） 在脂質(zhì)體膜上摻入神經(jīng)節(jié)苷脂GM1，引入了唾液酸殘基。特點(diǎn)：增強(qiáng)了膜的穩(wěn)定性;降低了血漿成分誘發(fā)的脂質(zhì)體溶解的敏感度;降低了脂質(zhì)體內(nèi)容物的泄漏率;減少了網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的攝取;延長(zhǎng)了脂質(zhì)體的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間。缺點(diǎn)：GM1的價(jià)格昂貴，而且難以大量提取或合成。 特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二582 、PEG衍生物脂質(zhì)體 脂質(zhì)體被PEG衍生物（PEG-DSPE二硬脂酸磷脂酰乙醇胺,PEG-PE）修飾。 極性的PEG基：增強(qiáng)了脂質(zhì)體膜的親水性，減少了血漿蛋白與脂質(zhì)體膜的相互作用，阻止了脂質(zhì)體的凝聚和融合，避免

27、了網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)體的攝取，也延長(zhǎng)了脂質(zhì)體的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間。特殊性能脂質(zhì)體（長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體）2021/7/20 星期二59PEG修飾脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)示意圖特殊性能脂質(zhì)體（長(zhǎng)循環(huán)脂質(zhì)體）2021/7/20 星期二60五、光敏脂質(zhì)體 將光敏感物質(zhì)的藥物包裹在脂質(zhì)體內(nèi)進(jìn)行光學(xué)治療。 當(dāng)一定的波長(zhǎng)照射時(shí)，脂質(zhì)體膜與囊泡物質(zhì)間或脂質(zhì)體之間發(fā)生融合作用而釋放藥物。六、免疫脂質(zhì)體。 摻入抗體形成被抗體修飾的具有免疫活性的脂質(zhì)體。 將抗體結(jié)合于脂質(zhì)體表面，可以提高人體的免疫機(jī)能，加快免疫應(yīng)答，增強(qiáng)脂質(zhì)體結(jié)合于靶細(xì)胞和釋藥的能力。 特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二61七、磁性脂質(zhì)體 將藥物和磁鐵性物質(zhì)包入脂

28、質(zhì)體。 應(yīng)用于體內(nèi)后，利用體外磁場(chǎng)的效應(yīng)，引導(dǎo)藥物在體內(nèi)定向移動(dòng)和定位集中，在磁場(chǎng)區(qū)釋放藥物，從而起到靶區(qū)局部濃集作用或靶區(qū)截流作用。 磁性藥物制劑可因響應(yīng)外磁場(chǎng)作用而定位于預(yù)期的位置，猶如“磁性導(dǎo)彈”，把網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的干擾降到最低程度。 脂質(zhì)體雖然對(duì)腫瘤細(xì)胞具有靶向性，但注射給藥后，常富集于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)，不可避免的被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的巨噬細(xì)胞所清除，磁性脂質(zhì)體可克服。 特殊性能脂質(zhì)體2021/7/20 星期二62超微磁粉的制備方法： FeCl3和 FeCl2分別溶于水中，過濾后混合，加入適量分散劑（如葡聚糖，防止磁化過程黏結(jié)），經(jīng)超聲、攪拌等過程，制成磁流體（Fe3O4黑色膠體），干燥后為超微磁

29、粉。特殊性能脂質(zhì)體（磁性脂質(zhì)體）2021/7/20 星期二63第六節(jié) 脂質(zhì)體的作用機(jī)理及影響因素一. 脂質(zhì)體的作用機(jī)理作用機(jī)理吸附脂質(zhì)交換內(nèi)吞/吞噬融合擴(kuò)散磷酸酯酶消化2021/7/20 星期二641吸附（adsorption） 吸附是脂質(zhì)體作用的開始。脂質(zhì)體通過靜電疏水的作用，非特異性吸附到細(xì)胞表面；通過脂質(zhì)體特異性配體與細(xì)胞表面結(jié)合，而特異吸附到細(xì)胞表面; 吸附在細(xì)胞表面的脂質(zhì)體僅在蛋白溶解酶作用下才能與細(xì)胞脫離。吸附使細(xì)胞周圍藥物濃度增高，藥物可慢慢地滲到細(xì)胞內(nèi)。 脂質(zhì)體的作用機(jī)理2021/7/20 星期二652脂質(zhì)交換（lipid exchange） 脂質(zhì)體的脂質(zhì)成分與細(xì)胞膜的脂質(zhì)成分

30、進(jìn)行交換，而不釋放水相內(nèi)容物進(jìn)入細(xì)胞。 脂質(zhì)交換過程為脂質(zhì)體首先吸附在細(xì)胞上，然后在細(xì)胞表面特異交換蛋白介導(dǎo)下，特異性交換脂質(zhì)的極性頭部集團(tuán)或非特異性地交換?；?。3融合（fusion） 融合是指脂質(zhì)體的膜插入細(xì)胞膜的脂質(zhì)層中而釋放出水相內(nèi)容物到細(xì)胞內(nèi)。脂質(zhì)體的作用機(jī)理2021/7/20 星期二664、內(nèi)吞/吞噬（endocytosis / phagocytosis） 脂質(zhì)體作用的主要機(jī)制。 具有吞噬活動(dòng)的細(xì)胞攝取脂質(zhì)體進(jìn)入吞噬體 質(zhì)膜內(nèi)陷形成的亞細(xì)胞空泡 吞噬體與溶酶體融合 形成次級(jí)溶酶體(發(fā)生細(xì)胞消化) 溶酶體溶解脂質(zhì)體 釋放藥物。脂質(zhì)體的作用機(jī)理2021/7/20 星期二675、擴(kuò)散 皮

31、膚用脂質(zhì)體凝膠劑，類脂膜成了控制釋藥膜，內(nèi)含藥物通過擴(kuò)散方式釋放進(jìn)入體內(nèi)。 口服脂質(zhì)體，大多數(shù)在胃腸道破壞，但也可通過脂質(zhì)體與胃腸道黏膜吸附、擴(kuò)散或融合釋放內(nèi)容物。6磷酸酯酶消化 脂質(zhì)體的磷脂膜可被磷酸酯酶消化。腫瘤組織中磷酸脂酶水平明顯高于正常組織，所以脂質(zhì)體在腫瘤組織中更容易釋放藥物。脂質(zhì)體的作用機(jī)理2021/7/20 星期二68二.影響脂質(zhì)體作用的因素1、脂質(zhì)體的大小 脂質(zhì)體的大小不同，在體內(nèi)的分布不同。以靜脈給藥為例：50nm，可透過肝內(nèi)皮，RES的巨噬細(xì)胞內(nèi)吞，轉(zhuǎn)到肝枯否氏細(xì)胞融酶體中；1m，趨向于肺內(nèi)停留；2-7m ，被毛細(xì)血管網(wǎng)攝取后，積聚于肺、脾和肝；7-12m，多被肺機(jī)械性攝

32、取；15m，經(jīng)腸系膜、肝門靜脈或腎動(dòng)脈給入，分別被腸、肝或腎攝取。脂質(zhì)體的大小不同，在循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)停留的時(shí)間不同。粒徑愈小，體內(nèi)停留時(shí)間愈長(zhǎng)。脂質(zhì)體小，分布廣，代謝率低。脂質(zhì)體的作用機(jī)理(影響因素）2021/7/20 星期二692、脂質(zhì)體的表面電荷 脂質(zhì)體的表面電荷和荷電量影響脂質(zhì)體與細(xì)胞膜的吸附作用。 靶細(xì)胞與脂質(zhì)體帶相反電荷時(shí)，會(huì)顯示靜電親和力。 用正電荷脂質(zhì)可降低藥物對(duì)心、腎、和骨髓的毒性。 3.脂質(zhì)體的組成 膜成分可直接影響脂質(zhì)體所有作用機(jī)制和脂質(zhì)體在體內(nèi)的行為。脂質(zhì)體的作用機(jī)理(影響因素）2021/7/20 星期二704.藥物的包封方式 藥物是嵌入雙分子層親油部分還是包入水層，會(huì)影響其

33、分布和釋放。體外試驗(yàn)證明，藥物包入水層中，比嵌入脂相親油基中釋放速率快。5.給藥途徑 靜脈給藥：受血漿蛋白、酶和血清等多種因素影響。 口服：受飲食、膽鹽、酶和pH的影響； 靜脈給藥：以小粒徑作用時(shí)間長(zhǎng)； 眼、鼻和皮膚給藥：以大粒徑的脂質(zhì)體作用時(shí)間長(zhǎng)； 氣霧化脂質(zhì)體:吸入時(shí)不論大小，均多滯留于肺。脂質(zhì)體的作用機(jī)理(影響因素）2021/7/20 星期二71一、細(xì)胞親和性和組織相容性二、緩釋性 三、降低藥物毒性 四、提高藥物穩(wěn)定性 五、靶向性 第七節(jié) 脂質(zhì)體的特點(diǎn)2021/7/20 星期二72（一）靶向性的概念 利用載體藥物釋放系統(tǒng)改變藥物的動(dòng)力學(xué)，僅使藥物作用于病變部位的靶細(xì)胞，而避免對(duì)正常細(xì)胞的

34、作用。1.藥物靶向性傳遞的三種方法： 藥物本身具有靶向能力。 將活性藥物以藥理惰性的形式（即“前藥” ）給予，在靶部位經(jīng)化學(xué)或酶活化后發(fā)揮治療作用。例如多巴胺的前藥L-多巴，脂溶性高，可透過血腦屏障，在紋狀體脫羧酶的作用下轉(zhuǎn)變成多巴胺，發(fā)揮療效。 利用生物惰性大分子載體系統(tǒng)將藥物靶向于特定部位。脂質(zhì)體的靶向性2021/7/20 星期二732、靶向性分級(jí)：級(jí)：器官組織靶向性，將藥物靶向到特定的組織器官 的毛細(xì)血管床；級(jí)：細(xì)胞靶向性，將藥物選擇性輸送到特定的細(xì)胞（如腫瘤細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞等）；級(jí)：細(xì)胞內(nèi)靶向性，將藥物導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)亞細(xì)胞位點(diǎn)，（如溶酶體、線粒體或核等）。脂質(zhì)體的靶向性2021

35、/7/20 星期二74（二）脂質(zhì)體作為靶向藥物載體的特點(diǎn)1、細(xì)胞毒性很低，無(wú)免疫原性，無(wú)致熱原性，能正常代謝和消除；（脂質(zhì)體的主要成分是磷脂和膽固醇，它們是哺乳動(dòng)物細(xì)胞膜的天然成分）。2、脂質(zhì)體的大小、成分、表面電荷等有很大的選擇空間；3、脂質(zhì)體能包囊親水性和親脂性的很多藥物，包括酶、激 素、維生素、抗生素和細(xì)胞因子等；4、制備簡(jiǎn)單；脂質(zhì)體的靶向性2021/7/20 星期二755、不同于固體的聚合物載體系統(tǒng)（如微粒、納米粒），脂質(zhì)體雙層脂膜是動(dòng)態(tài)的結(jié)構(gòu)，允許表面結(jié)合的靶向分子有更大的自由度，因此靶向分子能以最優(yōu)構(gòu)型與 靶部受體結(jié)合；6、脂質(zhì)體為所包囊藥物的靶向性提供了新的可能性，包括細(xì)胞外釋放、細(xì)胞膜融合和內(nèi)吞，藥物的靶向