乳與乳制品中乳糖的測定課件

1、第1頁，共17頁。第2頁，共17頁。中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB 5413.52010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中乳糖、蔗糖的測定第3頁，共17頁。第一法高效液相色譜法第二法萊因埃農(nóng)氏法第4頁，共17頁。 試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后，在加熱條件下，以次甲基藍為指示劑，直接滴定已標(biāo)定過的費林氏液，根據(jù)樣液消耗的體積，計算乳糖含量。 將一定量的堿性酒石酸銅甲、乙液等量混合，立即生成天藍色的氫氧化銅沉淀； 這種沉淀很快與酒石酸鉀反應(yīng)，生成深藍色的可溶性酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物。 在加熱條件下，以次甲基藍作為指示劑，用樣液滴定，樣液中的還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應(yīng)，生成紅色的氧化亞銅沉淀； 這種沉淀與亞鐵氰化鉀絡(luò)合

2、成可溶的無色絡(luò)合物；二價銅全部被還原后，稍過量的還原糖把次甲基藍還原，溶液由蘭色變?yōu)闊o色，即為滴定終點； 根據(jù)樣液消耗量可計算出還原糖含量。第5頁，共17頁。1.乙酸鉛溶液（200 g/L）：2.草酸鉀磷酸氫二鈉溶液：3.費林氏液甲液：4.費林氏液乙液：5. 次甲基藍溶液（10 g/L）第6頁，共17頁。天平：感量為0.1 mg。烘箱：溫度可控制在2 。第7頁，共17頁。1.費林氏液的標(biāo)定用乳糖標(biāo)定 稱取預(yù)先在94 2 烘箱中干燥2 h 的乳糖標(biāo)樣約0.75 g（精確到0.1 mg），用水溶解并定容至250 mL。將此乳糖溶液注入一個50 mL 滴定管中，待滴定。第8頁，共17頁。預(yù)滴定精確滴

3、定 吸取10 mL 費林氏液(甲、乙液各5 mL)于250 mL 三角燒瓶中。加入20 mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，從滴定管中放出15 mL 樣液于三角瓶，置于電爐上加熱，使其在2 min 內(nèi)沸騰，保持沸騰狀態(tài)15 s，加入3 滴次甲基藍溶液，繼續(xù)滴入至溶液藍色完全褪盡為止，讀取所用樣液的體積。 另取10 mL 費林氏液（ 甲、乙液各5 mL）于250 mL 三角燒瓶中，再加入20 mL蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，加入比預(yù)滴定量少0.5 mL1.0 mL 的樣液，置于電爐上，使其在2 min 內(nèi)沸騰，維持沸騰狀態(tài)2 min，加入3 滴次甲基藍溶液，以每兩秒一滴的速度徐徐滴入，溶液藍色完全褪盡即為

4、終點，記錄消耗的體積。第9頁，共17頁。計算費林氏液的乳糖校正值式中：A -實測乳糖數(shù)，單位為毫克（mg）；V -滴定時消耗乳糖溶液的體積，單位為毫升（mL）；M -稱取乳糖的質(zhì)量，單位為克（g）；f -費林氏液的乳糖校正值；AL-由乳糖液滴定毫升數(shù)查表1所得的乳糖數(shù)，單位為毫克（mg）。第10頁，共17頁。1 稱取嬰兒食品或脫脂粉2 g，全脂加糖粉或全脂粉2.5 g，乳清粉1 g，精確到0.1 mg，用100mL 水分?jǐn)?shù)次溶解并洗入250 mL 容量瓶中。徐徐加入4 mL 乙酸鉛溶液、4 mL 草酸鉀磷酸氫二鈉溶液，并振蕩容量瓶，用水稀釋至刻度。靜置數(shù)分鐘，用干燥濾紙過濾，棄去最初25 mL

5、 濾液后，所得濾液作滴定用。第11頁，共17頁。預(yù)滴定：吸取10 mL 費林氏液(甲、乙液各5 mL)于250 mL 三角燒瓶中。加入20 mL 蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，從滴定管中放出15 mL 樣液于三角瓶，置于電爐上加熱，使其在2 min 內(nèi)沸騰，保持沸騰狀態(tài)15 s，加入3 滴次甲基藍溶液，繼續(xù)滴入至溶液藍色完全褪盡為止，讀取所用樣液的體積。精確滴定：另取10 mL 費林氏液（ 甲、乙液各5 mL）于250 mL 三角燒瓶中，再加入20 mL蒸餾水，放入幾粒玻璃珠，加入比預(yù)滴定量少0.5 mL1.0 mL 的樣液，置于電爐上，使其在2 min 內(nèi)沸騰，維持沸騰狀態(tài)2 min，加入3 滴次

6、甲基藍溶液，以每兩秒一滴的速度徐徐滴入，溶液藍色完全褪盡即為終點，記錄消耗的體積。第12頁，共17頁。試樣中乳糖的含量式中：X -試樣中乳糖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，單位為克每百克（g/100 g）；f -由消耗樣液的毫升數(shù)查表1所得乳糖數(shù)，單位為毫克（mg）；F -費林氏液乳糖校正值；V1 -滴定消耗濾樣品液量，單位為毫升（mL）；m -試樣的質(zhì)量，單位為克（g）。第13頁，共17頁。第14頁，共17頁。1、在樣品處理時，不能用銅鹽作為澄清劑，以免樣液中引入Cu 2+，得到錯誤的結(jié)果。2、堿性酒石酸銅甲液和乙液應(yīng)分別貯存，用時才混合，否則酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物長期在堿性條件下會慢慢分解析出氧化亞銅沉淀，使試劑

7、有效濃度降低。3、滴定必須在沸騰條件下進行，其原因一是可以加快還原糖與Cu2+的反應(yīng)速度；二是次甲基藍變色反應(yīng)是可逆的，還原型次甲基藍遇空氣中氧時又會被氧化為氧化型。此外，氧化亞銅也極不穩(wěn)定，易被空氣中氧所氧化。保持反應(yīng)液沸騰可防止空氣進入，避免次甲基藍和氧化亞銅被氧化而增加耗糖量。第15頁，共17頁。4.滴定時不能隨意搖動錐形瓶，更不能把錐形瓶從熱源上取下來滴定，以防止空氣進入反應(yīng)溶液中。5.樣品溶液預(yù)測的目的；一是本法對樣品溶液中還原糖濃度有一定要求(0.1%左右)，測定時樣品溶液的消耗體積應(yīng)與標(biāo)定葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液時消耗的體積相近，通過預(yù)測可了解樣品溶液濃度是否合適，濃度過大或過小應(yīng)加以調(diào)整，使預(yù)測時消耗樣液量在 10 ml 左右；6.通過預(yù)測可知道樣液大概消耗量，以便在正式測定時，預(yù)先加入比實際用量少 1 ml 左右的樣液，只留下 1 ml 左右樣液在續(xù)滴定時加入，以保證