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文檔簡介

1、關(guān)于溶菌酶的溶菌作用第一張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月溶菌酶的溶菌作用實驗原理 溶菌酶(lysozyme)又稱胞壁質(zhì)酶(muramidase)或N-乙酰胞壁質(zhì)聚糖水解酶(N-acetylmuramide glycanohydrlase),是正常體液與分泌液中所含的一種小分子堿性蛋白質(zhì)。它能水解革蘭陽性菌細胞壁中的肽聚糖成分(作用于-1,4糖苷鍵),使細胞壁崩解。溶菌酶還可與帶負電荷的病毒蛋白直接結(jié)合,與DNA、RNA、脫輔基蛋白形成復鹽,使病毒失活。因此,該酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。是非特異性免疫中一種重要的體液物質(zhì)。 第二張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月實驗材料與器材

2、 1、人的唾液(含有溶菌酶)、溶菌酶標準品、生理鹽水。 2、細球菌(M.Lysodeikticus)。 3、1.0%鹽水瓊脂管(7-8mL/管)、滅菌的1mL吸管、毛細吸管、打孔器、平皿、竹簽和橡皮乳頭等。第三張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月 注:唾液 生理鹽水(陰性對照) 溶菌酶(陽性對照) 實驗步驟:1、取滅菌的小平皿一個,用滅菌1mL的吸管吸取0.5mL(9億/mL)細球菌活菌菌液注入平皿內(nèi)。2、取已溶化并冷卻至45-55的生理鹽水瓊脂管一支,傾注于上述平皿內(nèi),迅速水平混勻,平放待凝。3、用打孔器(孔徑為6mm)打孔,用竹簽挑出孔中瓊脂。4、先用清水漱口,略待片刻將唾液吐于滅菌平

3、皿內(nèi),用毛細吸管吸出(注意不要有氣泡,不要溢出),并分別加入生理鹽水和溶菌酶標準品。置37,18h后觀察結(jié)果。31第四張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月預測實驗結(jié)果 陽性結(jié)果:加在唾液空周圍出現(xiàn)一圈很明顯的溶菌環(huán)。注意事項 在實驗中應該注意無菌操作,否則雜菌生長會影響溶菌環(huán)的觀察 第五張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月小吞噬實驗實驗原理 機體內(nèi)具有吞噬功能的細胞可分為兩大類,即小吞噬細胞和大吞噬細胞。小吞噬細胞一般指血液中的中性粒細胞。 中性粒細胞(neutrophilicgranulocyte)在瑞氏染色血涂片中,胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.20.4微米

4、)淺紅或淺紫色的特有顆粒。細胞核呈桿狀或25分葉狀,葉與葉間有細絲相連。其顆粒表面有一層膜包裹,顆粒中含髓過氧化物酶、酸性磷酸酶、吞噬素、溶菌酶、葡糖苷酸酶、堿性磷酸酶等。中性粒細胞具趨化作用、吞噬作用和殺菌作用。第六張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月實驗材料與器材:1、表面葡萄球菌菌液(9億/mL)。2、3.8%枸櫞酸鈉或肝素(25U/mL)。3、毛細吸管、凹玻片、載玻片、牙簽、甲醇、瑞氏-姬娒薩染料、PH6.4PB、酒精、棉球、采血針等。第七張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月實驗步驟: 1、取厚凹玻片一張,在凹孔中滴加一滴(0.4mL)3.8%枸櫞酸鈉或肝素(25U/mL)。

5、2、酒精棉球消毒手指后,用采血針從消毒部位采取2大滴(約0.2mL)加入凹孔中混勻。 3、加表皮葡萄球菌菌液1 滴(0.02-0.04mL),然后用牙簽輕輕攪勻。第八張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月4、將玻片放濕盒內(nèi),置37孵箱中40-50min。5、作用完畢,取出1滴制成薄片,自然干燥。6、置瑞氏液1min,置PH6.4PB中3min,置瑞氏-姬娒薩染料染5-10min,蒸餾水洗,待干鏡檢。第九張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月預測實驗結(jié)果 胞漿呈淡藍色或淡紅色,細菌呈深藍色或紫色,紅細胞呈褐色,細胞核呈紫紅色。注意事項 1、個體差異、年齡、健康狀況的不同,其吞噬能力亦不同。 2、涂血片時不宜太厚,否則不宜觀察。結(jié)果第十張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月謝謝!第十一張,PPT共十三頁,創(chuàng)作于2022年6月 胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色,有許多彌散分布的細小的(0.20.4微米)淺紅或淺紫

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