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文檔簡介
1、專題一 基因工程 (第一課時) 鄭州二中 王麗嫻高中生物復(fù)習(xí)1整理課件學(xué)習(xí)目標(biāo)1、通過知識梳理,復(fù)習(xí)鞏固基因工程的原理和操作程序。2、通過相近概念的比較及針對性練習(xí),掌握本節(jié)重難點(diǎn)和易錯點(diǎn)。2整理課件基因工程 基因工程是指按照人們的愿望,進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計,通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù),賦予生物以新的遺傳特性,創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。(DNA重組技術(shù))3整理課件知識網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建基因工程基本工具操作程序應(yīng)用分子手術(shù)刀:_分子縫合針:_分子運(yùn)輸車:_轉(zhuǎn)基因植物1、操作環(huán)境:_2、操作水平:_3、原理:_4、優(yōu)點(diǎn): 與雜交育種相比:克服了_ 與誘變育種相比:_改造生物遺傳性狀限制酶
2、DNA連接酶運(yùn)載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測與鑒定目的基因的獲取轉(zhuǎn)基因動物基因工程藥物基因治療體外分子水平基因重組遠(yuǎn)緣雜交不親和性定向蛋白質(zhì)工程崛起的原因基本原理4整理課件一、基本工具1、分子手術(shù)刀:限制酶功能:識別DNA分子的_核苷酸序列,使每一條鏈中_部位的_鍵斷開。練習(xí):請標(biāo)出EcoRI、SmaI酶所識別的核苷酸序列,并寫出剪切后形成的末端及其名稱特定特定磷酸二酯G A A T T CC T T A A GG G G C C CC C C G G GEcoRISmal黏末端平末端5整理課件EcoR黏性末端黏性末端6整理課件Sma平末端平末端7整理課件2、分子縫
3、合針:DNA連接酶功能:將切下來的_拼接成新的DNA分子, 連接_鍵。種類:T4DNA連接酶既能“縫合”_末端,也能“縫 合”_末端 E.coliDNA連接酶只能“縫合”雙鏈互補(bǔ)的_末端。3、分子運(yùn)輸車:運(yùn)載體 化學(xué)本質(zhì):常用載體質(zhì)粒 特點(diǎn)其他載體:噬菌體衍生物、動植物病毒等DNA片段3,5磷酸二酯平黏黏能自我復(fù)制有一個至多個_位點(diǎn)有特殊的_對宿主無害雙鏈環(huán)狀DNA分子限制酶切標(biāo)記基因8整理課件二、基本操作程序1、目的基因的獲?。耗康幕颍褐饕竉,如生物抗逆性基因獲取方法:_、_、_2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:編碼蛋白質(zhì)的基因從基因文庫中獲取PCR擴(kuò)增人工合成質(zhì)粒目的基因_個切口_個切口重組質(zhì)粒
4、_種限制性內(nèi)切酶一一兩DNA連接_酶表達(dá)載體(基因工程的核心)9整理課件3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞轉(zhuǎn)化:目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持_的過程。導(dǎo)入方法(連線):受體細(xì)胞動物細(xì)胞植物細(xì)胞微生物細(xì)胞導(dǎo)入方法a.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法( )b.顯微注射法c.基因槍法( )d.感受態(tài)細(xì)胞法(Ca2+處理法)e.花粉管通道法穩(wěn)定和表達(dá)雙子葉、裸子植物單子葉植物10整理課件4、目的基因的檢測與鑒定目的基因mRNA蛋白質(zhì)個體性狀DNA分子雜交分子雜交抗原-抗體雜交抗蟲抗病接種實(shí)驗(yàn)是否出現(xiàn)雜交帶是否出現(xiàn)雜交帶是否抗蟲,是否抗病是否出現(xiàn)雜交帶轉(zhuǎn)錄翻譯檢測檢測檢測檢測現(xiàn)象現(xiàn)象現(xiàn)象現(xiàn)象個體水平鑒定分子水平檢測
5、11整理課件三、易錯點(diǎn)突破:1、相關(guān)問題:(1)基因重組有哪些類型?(2)天然質(zhì)粒與表達(dá)載體之間有什么區(qū)別和聯(lián)系? 表達(dá)載體是天然質(zhì)粒經(jīng)過修飾,加入啟動子、終止子、目的基因?;蚬こ虦p四分體時期,一對同源染色體上,相鄰的非姐妹染 色單體交叉互換。減后期非同源染色體的自由組合肺炎雙球菌的轉(zhuǎn)化12整理課件(3)如何檢測目的基因是否成功表達(dá)?(4)基因工程基本操作程序中哪些步驟需要堿基互補(bǔ)配對?三、易錯點(diǎn)突破:分子水平:是否翻譯-抗原-抗體雜交個體水平:是否具有特定性狀-抗蟲、抗病、抗逆等 只有第三步將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞不需要堿基互補(bǔ)配對。(第一步存在逆轉(zhuǎn)錄法獲得DNA,第二步存在粘性末端連接現(xiàn)象
6、,第四步檢測存在分子水平雜交)13整理課件2、幾種酶的比較連接兩個DNA片段連接單個脫氧核苷酸使DNA雙鏈互補(bǔ)堿基間的氫鍵斷裂連接單個核糖核苷酸使目的基因或載體有特定末端形成重組DNA分子形成兩條DNA單鏈形成mRNA單鏈14整理課件3、辨析下列概念(1)、基因文庫、基因組文庫、部分基因文庫、cDNA文庫(2)、啟動子,終止子;起始密碼子、終止密碼子基因文庫基因組文庫部分基因組文庫:cDNA文庫啟動子、終止子位于DNA上,啟動或終止轉(zhuǎn)錄。起始密碼子、終止密碼子位于mRNA上,起始或終止翻譯。15整理課件你完成目標(biāo)了嗎?1、通過知識梳理,復(fù)習(xí)鞏固基因工程的原理和操作程序。2、通過列表比較及針對性練習(xí),掌握本節(jié)重難點(diǎn)和易錯點(diǎn)。16整理課件綜合練習(xí):1、(2012.山東理綜) 毛角蛋白型中間絲(KIF )基因與絨山羊的羊絨質(zhì)量密切相關(guān)。獲得轉(zhuǎn)KIF 基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖。(1)過程中最常用的運(yùn)載工具是_,所需要的酶是限制酶和_。(2)在過程中,用_處理將皮膚組織塊分散成單個成纖維細(xì)胞。在培養(yǎng)過程中,將成纖維細(xì)胞置于5% CO2的氣體環(huán)境中,CO2的作用是_。質(zhì)粒DNA連接酶胰蛋白酶和膠原蛋白酶維持培養(yǎng)基的PH值(3)在過程中,用_處理以獲取更多
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