血管內皮生長因子（VEGF）測定試劑盒（化學發(fā)光法）總醫(yī)院可行性論證報告書

1、. 能源峰峰集團總醫(yī)院年度新技術、新工程可行性論證報告書新技術工程名稱：血管皮生長因子VEGF測定試劑盒化學發(fā)光法 冀中能源峰峰集團總醫(yī)院醫(yī)務部醫(yī)療新技術工程名稱血管皮生長因子VEGF測定試劑盒化學發(fā)光法工程水平國先進水平.省/市先進水平 院先進水平工程負責人姓 名性 別女年 齡54專業(yè)技術職稱主任檢驗技師主攻方向免疫新技術、新工程根本情況【產品名稱】通用名稱：血管皮生長因子(VEGF)測定試劑盒化學發(fā)光法英文名稱：Diagnostic Kit for Vascular Endothelial Growth Factor (Chemiluminescent Immunoassay)【包裝規(guī)格】

2、96 人份/盒【預期用途】 血管皮生長因子(VEGF)測定試劑盒化學發(fā)光法用于體外定量測定人血清中血管皮生長因子(VEGF)的含量。血管皮生長因子是一種分子量 3446KD 的二聚 體可溶性糖蛋白。正常人血清中血管皮生長因子含量甚 微，研究發(fā)現 VEGF 在類風濕性關節(jié)炎的發(fā)病過程中具 有十分重要的作用，因此 VEGF 在類風濕性關節(jié)炎的活動性和早期診斷等方面有重要的臨床意義?！緳z驗原理】本試劑盒采用雙抗體夾心法定量測定人血清中VEGF 的含量。用一株單抗包被微孔板制成固相抗體，用另一株單抗標記辣根過氧化物酶HRP制成酶標記物。 在包被板微孔中參加含有 VEGF 的標準品或待測血清及 酶標記物

3、，溫育后即形成固相抗體抗原酶標抗體的復 合物，充分洗滌后參加化學發(fā)光底物液，于 310 分鐘 測定其發(fā)光強度RLU 值，樣品的 RLU 值隨 VEGF 濃度的增加而升高，根據標準曲線即可算出樣品中 VEGF的含量?！局饕M成成分】組分名稱規(guī)格說明1.測 VEGF 預包被板96 人份包被抗VEGF 抗體的化學發(fā)光板含有辣根過氧化物2.測 VEGF 酶結合物6mL酶標記抗VEGF 抗體的溶液3.VEGF 校準品(S0-S5)0.5mL*6 瓶含有不同濃度 VEGF的 PBS 緩沖液4.化學發(fā)光底物 A 液3mL/瓶含魯米諾的緩沖液5.化學發(fā)光底物 B 液3mL/瓶含過氧化脲的緩沖液6.濃縮洗液20

4、30mL/瓶20PBS 稀釋液注：不同批號和不同廠家的試劑盒各組份不可以互換混用。試劑盒不包含試驗過程所需的蒸餾水或去離子水， 用戶需自行提供。 校準品 (S0-S5) 濃度為 ：0pg/ml 、 50pg/mL 、 100pg/mL、200pg/mL、400pg/mL、800pg/mL，可溯源到國 際約定校準品世界衛(wèi)生組織英國國家生物制品檢定所的 重組人血管皮生長因子VEGFWHO/NIBSC-UK-EN63QG?！緝Υ鏃l件及有效期】試劑盒于 28避光保存，有效期 12 個月。試劑盒后于 28避光保存，有效期 30 天。 【適用儀器】適用于中生百克 BK-L96C 化學發(fā)光免疫分析儀。 【樣

5、本要求】血清樣本應空腹采集，并于采集后 24 小時別離完畢；樣本在檢測前可置于 28環(huán)境下密封保存 7 天，假設不能及時檢測，應密封置于-20保存，一個月有效。 忌反復凍融，樣本運輸過程中也應符合此要求。經研究 20mg/dL 抗壞血酸、100mg/dL 血色素、60mg/dL膽紅素、2000mg/dL 人血清白蛋白、500mg/dL 甘油三酯 對檢測結果無影響，但為了確保檢測的準確性，應該盡量 防止使用高度溶血和高血脂的樣本。新技術、新工程臨床應用的意義、圍、適應癥、禁忌癥工程臨床意義：早期：在腫瘤發(fā)生過程中即可及早發(fā)現； 廣譜：可以為各種血管新生相關疾病，如腫瘤治療康復過程的動態(tài)監(jiān)測、療效

6、評 價、預后評估等提供輔助依據；在安康體檢對各種實體腫瘤進展廣譜篩查； 量化：明確提供單位血清中的VEGF標記物的濃度，檢測圍優(yōu)于ELISA,反響時間1小時，優(yōu)于同類產品； 動態(tài)：通過不同時期標記物濃度的變化透視疾病的變化； 個性化：用患者自身的數據變化進展病情的分析、評價 ；適應癥：VEGF試劑盒與幾種癌癥的監(jiān)測意義早期篩查療效監(jiān)測預后評估肺癌胃癌肝癌甲狀腺癌宮頸癌卵巢癌結腸癌前列腺癌胰腺癌白血病目的： VEGF近些年被作為一種能反響腫瘤發(fā)生開展變化的物質，研究較為廣泛。在檢索英文280余篇，中文230余篇的VEGF相關文獻中，95%以上的文獻證實了腫瘤病人血清VEGF水平增高的事實。腫瘤類

7、型幾乎涵蓋了目前臨床大局部實體腫瘤和局部非實體腫瘤。VEGF被認為是最有意義的血液腫瘤篩查的標記物意義： 早期：在腫瘤發(fā)生過程中即可及早發(fā)現； 廣譜：可以為各種血管新生相關疾病，如腫瘤治療康復過程的動態(tài)監(jiān)測、療效評價、預后評估等提供輔助依據；在安康體檢對各種實體腫瘤進展廣譜篩查； 量化：明確提供單位血清中的VEGF標記物的濃度，檢測圍優(yōu)于ELISA,反響時間1小時，優(yōu)于同類產品； 動態(tài)：通過不同時期標記物濃度的變化透視疾病的變化； 個性化：用患者自身的數據變化進展病情的分析、評價 ；新技術、新工程分析理論性、平安性、有效性、適宜性、可行性與效益預測血管皮生長因子VEGF測定試劑盒化學發(fā)光法采用

8、化學發(fā)光法對人血清中VEGF的含量進展檢測，具有快速、準確、操作方法簡便等優(yōu)點。在臨床試驗中，試劑盒檢測結果與病理結果的陽性符合率為79.4%，陰性符合率為97.3%。說明試劑盒對癌腫的治療效果評價和輔助監(jiān)測具有重要意義。另外試劑盒采用化學發(fā)光法對血清中VEGF含量進展檢測該方法學和試劑盒檢測水平處于國領先地位，目前該試劑盒在國僅此一家。在這一檢測方面是處于前沿領先地位的。新技術操作規(guī)、操作規(guī)程1. 試劑配制：所有的試劑應在使用前置于室溫平衡至少30分鐘。取濃縮洗液，用蒸餾水或去離子水將濃縮洗液20稀釋20倍，充分混勻備用。發(fā)光底物A液和發(fā)光底物B液按1：1比例配成發(fā)光底物工作液，充分混勻備用

9、。校準品已稀釋好，不需要再進展稀釋。2. 試驗過程：事先做好實驗設計，準備好板條，指定孔位，校準品需做復孔；試劑盒液體組份使用前應充分搖勻。用微量加樣器取50L校準品、樣品到相應的包被板微孔中。每孔參加50L酶結合物，充分混合30秒。用封板模封好板孔，37溫育60分鐘。工作洗液清洗5次后，在吸水紙上拍干板孔中殘留的液體。向包被板每孔中參加50L發(fā)光底物工作液，充分混合，室溫1825避光反響3分鐘。參加發(fā)光底物后3-10分鐘檢測，讀數時間設定為1秒/孔。診療指南：1、VEGF正常參考圍為0-160pg/ml正常，處于腫瘤風險平安期。建議12個月復檢。2、VEGF濃度值在160-400pg/ml輕度異常，提示有患腫瘤風險。需排除其他影響因素，結合其他腫瘤標記物結果給出結論。建議一個月復檢1次，動態(tài)監(jiān)測2次，根據動態(tài)監(jiān)測綜合評定。3、VEGF濃度值400pg/ml異常，提示有患