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文檔簡介
1、 遺傳學實驗1 實驗目的 實驗原理 實驗用品 實驗步驟 繪圖 思考題2 實驗目的 掌握動物骨髓染色體標本制備基本過程,了解操作步驟的原理3實驗原理 小鼠骨髓細胞中的造血干細胞是生成各種血細胞和原始細胞,具有高度的分裂能力,本實驗采用這一材料,通過前處理,低滲,固定,制片,染色等步驟制得染色體標本,可觀察到許多處于分裂中期的染色體,可以進行染色體組型分析。 4實驗原理 制備方法包括以下幾個要點: 1.用一定劑量的秋水仙素破壞紡錘絲的形成,使細胞分裂停滯在中期,使中期染色體停留在赤道面處 2.用低滲法使將細胞膨脹,以至于在滴片時細胞被脹破,使細胞的染色體鋪展到載玻片上 3.空氣干燥法可使使細胞的染
2、色體在載片上展平,經(jīng)Giemsa染色后便可觀察到染色體的顯微圖象 5實驗用品1材料:小白鼠 2器具:注射器(1ml,5ml) 剪刀 鑷子 玻璃吸管 10ml刻度的離心管 離心機 載玻片 蓋玻片 顯微鏡 濾紙 擦鏡紙 紗布 恒溫水浴鍋 3藥品:0.01%秋水仙素 0.075MKCl 固定液(甲醇:冰醋酸=3:1) 2%檸檬酸鈉 改良石炭酸品紅6實驗步驟預處理 取股骨 沖洗骨髓 離心 低滲 離心 固定 離心 滴片染色 觀察 7實驗步驟1預處理:實驗前2.5-3小時,按每克體重注射0.02ml,給小白鼠腹腔注射秋水仙素。 2取股骨:斷頸處死小鼠后,剔去肌肉組織,洗凈3沖洗骨髓:剪去兩端的股骨頭,吸取
3、 10ml 2%檸檬酸鈉,注射 器針頭插入股骨一端,反復沖洗兩根股骨,洗液收集到10ml的離心管中8 實驗步驟4 離心: 1000r/min 離心10 min ,棄上清5 低滲:加入8ml 0.075mol/LKCl溶液,滴管吹散,37水浴低滲30 min ,中間(約15 min )再吹散一次,使細胞分散,懸浮于溶液中 6離心:1000r/min離心10 min,棄上清7固定:沉淀加8ml固定液,并用吸管輕 輕吹勻,進行固定,中間(約15 min )再吹散一次9實驗步驟8. 離心: 1000r/min 離心10 min ,留1 ml 左右上清,輕輕吹打成細胞懸液9. 滴片:用吸管吸取細胞懸液,高度30-40 cm,滴在預冷的載玻片上,在酒精燈火焰上微微加熱,室溫晾干 10. 染色:改良石炭酸品紅染色10-20 min11. 觀
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