食品安全檢測之生物毒素

1、食品安全檢測之之生物毒素田曉峰田曉峰 博士博士目 錄1. 生物毒素的分類2. 幾種重要的生物毒素及其危害4. 食品安全法規(guī)及某些生物毒素限量5. 生物毒素常用檢測方法6. 生物毒素的預(yù)防和處理辦法3. 生物毒素造成的重大食品安全事故生物毒素的分類白細(xì)胞毒素、神經(jīng)毒素、綠膿外毒素A、黃曲霉素等、霍亂毒素、痢疾毒素等。結(jié)合類毒素、轉(zhuǎn)運-受體分子修飾類、膜損傷類食品中的生物毒素主要是指微生物毒素，包括細(xì)菌毒素和真菌毒素。A-B毒素、膜損傷毒素、超抗原毒素：不需要常規(guī)抗原而直接結(jié)合到細(xì)胞或組織的受體上，引起休克等等1. 根據(jù)作用、來源根據(jù)作用、來源等生物特性分類等生物特性分類2. 根據(jù)毒素結(jié)構(gòu)根據(jù)毒素

2、結(jié)構(gòu)和功能分類和功能分類3. 根據(jù)毒素蛋白根據(jù)毒素蛋白分類分類肽類毒素、脂多糖內(nèi)毒素(LPS)、霉菌毒素、生物胺和脂肪酸氧化產(chǎn)生的醛類化合物等。4. 根據(jù)毒素化學(xué)根據(jù)毒素化學(xué)特性分類特性分類幾種重要的生物毒素及其危害（1）真菌毒素真菌毒素一般分為霉菌毒素（Mycotoxins）和蘑菇毒素（Mush-room toxins）兩類。目前已知能產(chǎn)生真菌毒素的真菌有150余種，產(chǎn)生的真菌毒素約有300多種。主要有曲毒屬、青霉屬、鐮刀菌屬等。細(xì)菌毒素已發(fā)現(xiàn)200多種，分內(nèi)毒素（endotoxin,耐熱)和外毒素(exotoxin，熱敏感)，外毒素毒性更大，常見的有白喉毒素、炭疽毒素、霍亂毒素等。主要是一

3、些烈性傳染病致病菌產(chǎn)生的毒素。相對而言，對食品安全危害性更大的是真菌毒素。幾種重要的生物毒素及其危害（2）檢出率/%豬料禽料10090807060504030201008% 9% 65%74%92% 94%87% 91%6%15%黃曲霉毒素B1 玉米赤霉烯酮 嘔吐毒素 煙曲霉毒素 赭曲霉毒素A豬料、禽料中各種霉菌毒素的陽性檢出率幾種重要的生物毒素及其危害（3）檢出率/%奶牛精料水產(chǎn)料10090807060504030201009% 29% 90%53%100% 29%33%29%黃曲霉毒素B1 玉米赤霉烯酮 嘔吐毒素 煙曲霉毒素 赭曲霉毒素A奶牛精料、水產(chǎn)料中各種霉菌毒素的陽性檢出率100%9

4、4%伏馬毒素是動物飼料中常見的霉菌毒素之一。5 000 g/kg禽料豬料小麥與面粉玉米6% 24% 21% 10% 34% 5%7% 27% 29% 20% 14% 3%11% 32% 20% 9% 21% 7%12% 33% 27% 9% 17% 2%LOQ50300 g/kg 3001 000 g/kg1 0002 000 g/kg 2 0005 000 g/kg 主要樣品嘔吐毒素數(shù)據(jù)分布圖幾種重要的生物毒素及其危害（4）結(jié)論：當(dāng)前，飼料與原料霉菌毒素污染普遍，需要重點關(guān)注的霉菌毒素類型為嘔吐毒素、煙曲霉毒素和玉米赤霉烯酮，不同原料霉菌毒素特點不一，不同產(chǎn)區(qū)玉米、小麥中霉菌毒素污染也差異很

5、大?？茖W(xué)認(rèn)識霉菌毒素規(guī)律，加強原料產(chǎn)地選擇與品控，是防控霉菌毒素風(fēng)險的主要手段。幾種重要的生物毒素及其危害（5）毒素毒素產(chǎn)毒菌產(chǎn)毒菌致病及癥狀致病及癥狀易攜食品易攜食品黃曲霉毒素黃曲霉（Aspergillus flavus）、寄生曲霉（A. parasiticus）肝癌，肝硬化，致畸，糙皮病花生，糧食麥角生物堿麥角菌（Claviceps purpurea）麥角中毒黑麥面包赭曲霉毒素赭曲霉（A. ochraceus）、純綠青霉（Penicillium viridicatum）等腎病，腸炎糧食，花生3硝基丙酸深酒色青霉（Penicilliumatrovenetum）、米曲霉（Aspergillus

6、 oryzae）、節(jié)菱孢（Arthrinium spp.）嘔吐，腦部損傷，抽搐甘蔗展青霉素棒曲霉（A. clavatus）、擴展青霉（Penicillium expansum）、絲衣霉（Byssochlamys）等惡心，器官中毒（肝腎、肺等）水果鐮孢菌毒素a）玉米赤霉烯酮b）單端孢霉烯族化合物（如2毒素）禾谷鐮刀菌（Fusarium graminearum）等多種鐮刀菌、木素木霉（Trichoderma lignorum）、梨孢鐮刀菌（F. poae）、擬枝孢鐮刀菌（F. sporotrichioides）雌激素亢進(jìn)，流產(chǎn)，不孕皮膚黏膜損傷，中毒性白細(xì)胞缺少癥糧食糧食橘青霉素各種青霉和曲霉致畸

7、糧食和腐爛的西紅柿黃綠青霉素黃綠青霉（P. citreoviride）腎毒性，脊髓麻痹 大米雜色曲霉素構(gòu)巢曲霉（A. nidulans）、雜色曲霉（A. versicolor）等 肝癌堅果類，糧食生物毒素造成的重大食品安全事故1770-1780年，英國人移民到美國的新英格蘭地區(qū)后，人丁不興旺，被認(rèn)為是吃了真菌毒素污染的裸麥面包所致。20世紀(jì)60年代初。當(dāng)時，在英國東南部一些農(nóng)場中，有大約10萬只火雞不明原由地突然死亡，原因是喂養(yǎng)火雞的玉米粉含黃曲霉毒素1926年在俄羅斯，1929年在愛爾蘭，1953年在法國，1979年在埃塞俄比亞，都發(fā)生了大規(guī)模的麥角中毒。二戰(zhàn)時期，俄羅斯的西伯利亞發(fā)生了大規(guī)

8、模真菌毒素中毒，其中阿木爾州10萬居民就死了l萬多人。神農(nóng)嘗百草，一日遇70毒食品安全法規(guī)及某些生物毒素限量（2015版）史上最嚴(yán)食品安全法地方、部門法規(guī)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，如乳品檢測標(biāo)準(zhǔn)生鮮牛奶檢驗標(biāo)準(zhǔn)食品安全法規(guī)及某些生物毒素限量（1）食品安全法規(guī)及某些生物毒素限量（2）食品安全法規(guī)及某些生物毒素限量（3）食品安全法規(guī)及某些生物毒素限量（4）食品安全法規(guī)及某些抗生素限量（5）1 肽類毒素的檢測肽類毒素的檢測: 酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)(ELISA)、GICA、懸浮芯片技術(shù)、生物傳感技術(shù)等各種標(biāo)記抗體檢測技術(shù)。2 脂多糖內(nèi)毒素（脂多糖內(nèi)毒素（LPS）的檢測：）的檢測：鱟試劑、生物傳感技術(shù)、GC-MS、也有用E

9、LISA、流式細(xì)胞術(shù)、化學(xué)發(fā)光測定法等方法。3 霉菌毒素的檢測：霉菌毒素的檢測：薄層層析（TLC）、高效液相色譜法(HPLC)、酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)(ELISA)、免疫親和層析法(IAC)等。4 生物胺的檢測：生物胺的檢測：薄層色譜法、反相高效液相色譜法、離子色譜法和氣相色譜。5 醛類化合物的檢測醛類化合物的檢測：固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法(SPME-GC-MS)、固相微萃取-氣相色譜-嗅覺法(SPME-GC-O)生物毒素常用檢測方法（1）生物毒素常用檢測方法（2） 方法方法比較比較項目項目國標(biāo)第國標(biāo)第1法法免疫親和層析免疫親和層析凈化液凈化液-質(zhì)聯(lián)用質(zhì)聯(lián)用國標(biāo)第國標(biāo)第2法法免疫親和層析凈免疫親

10、和層析凈化高效液相色譜化高效液相色譜法法國標(biāo)第國標(biāo)第3法法免疫層析凈化熒免疫層析凈化熒光分光度法光分光度法國 標(biāo) 第國 標(biāo) 第 4 法法（Snap法）法）雙流向酶聯(lián)免疫法雙流向酶聯(lián)免疫法( (美國愛德士公司美國愛德士公司)免疫層析免疫層析-背景熒背景熒光猝滅法光猝滅法1、定量/定性檢測定量定量定量定性定量2、需準(zhǔn)備/配制試劑1159003、儀器與輔助器材數(shù)23127434、試劑儲存條件與時間 28冷藏，12個月230保存，12月5、儀器定標(biāo)/校準(zhǔn)是是是是否，開機即測6、試樣分析時間（min）12012012010177、定量結(jié)果給出形式計算出計算出計算出直讀直接給出8、對檢測人員素質(zhì)要求高高高

11、低低9、靈敏度（液態(tài)乳）0.01ng/ml0.008ng/ml0.1ng/ml0.5ng/ml0.01ng/ml10、精密度（CV）10%4.714%未做具體規(guī)定定性檢測無此數(shù)據(jù)10%11、儀器投入與檢測收費200400萬1200元/test(終端價)60萬800元/test(終端價)15-20萬300元/test(終端價)6.8萬65元/test(經(jīng)銷商價)300元/test(終端價)5萬50元/test(經(jīng)銷商價)生物毒素的預(yù)防和處理辦法 1）盡可能生產(chǎn)低度污染的原材料（糧食、水果、堅果類、調(diào)味品）。 2）將霉變的產(chǎn)品退貨或剔除，如在花生包裝或加工前除了先分出破損的花生，再在熒光燈下揀去有色素的籽粒。 3）采用減少含菌量的