HPV,EE項(xiàng)目介紹

1、HPV12+2/E6E7項(xiàng)目介紹 市場(chǎng)部 劉玉潔 HPV12+2 臨床應(yīng)用 同類產(chǎn)品比較 項(xiàng)目信息及宣傳資料 E6E7 臨床應(yīng)用 項(xiàng)目信息及宣傳資料 HPV12+2 臨床應(yīng)用 同類產(chǎn)品比較 項(xiàng)目信息及宣傳資料 E6E7 臨床應(yīng)用 項(xiàng)目信息及宣傳資料l約50%女性在開始性生活后2年內(nèi)，可有生殖道HPV感染，終身累積感染率高達(dá)80%lHPV感染高峰在20歲前后l最常見的感染類型為HPV16和18，占全部宮頸癌的5560，但也有地區(qū)差異，亞洲地區(qū)HPV58也相對(duì)較高lHPV感染多為一過(guò)性感染，清除時(shí)間一般為618個(gè)月，約90%在2年內(nèi)消失lHPV持續(xù)感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件HPV病毒感染的流行病學(xué)

2、特征宮頸癌與HPVHPV感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件感染是宮頸癌發(fā)生的必要條件致癌性的人乳頭瘤病毒（HR HPV）的持續(xù)性感染，是導(dǎo)致子宮頸浸潤(rùn)癌及其高等級(jí)癌前期病變（CIN2,3,包括原位癌）的主因。 宮頸癌危險(xiǎn)因素的研究歷史: 1800s:與性行為相關(guān) 1960s-80s: 感染因子 (HSV-2) 1980s-90s: 發(fā)現(xiàn)HPV與宮頸癌有關(guān) 1990s-:人乳頭瘤病毒（HPV）被確認(rèn)為宮頸癌的主要病因 目前國(guó)際醫(yī)學(xué)界已經(jīng)確認(rèn)，HPV是引起宮頸癌的主要因素，表現(xiàn)在： 99.8的宮頸癌患者中可以檢測(cè)到不同型別的HPV DNA，而HPV陰性者幾乎不會(huì)發(fā)生宮頸癌。 FDA批準(zhǔn)Roche coba

3、s HPV 檢測(cè)用于宮頸癌的初篩2014.4.24，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）批準(zhǔn)cobas HPV檢測(cè)（羅氏分子診斷）應(yīng)用于25歲及以上女性的宮頸癌一線篩查。是美國(guó)第一個(gè)也是唯一一個(gè)用于宮頸癌一線篩查的HPV DNA檢測(cè)。該檢測(cè)推薦用于一線初篩，可特異性分型HPV16和HPV18，這兩類高危亞型與70%的宮頸癌發(fā)生有關(guān)。同時(shí)可檢測(cè)到另12種高危HPV亞型（31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66及68）。 FDA批準(zhǔn)Roche cobas HPV 檢測(cè)用于宮頸癌的初篩基于HPV12+2的檢測(cè)結(jié)果，16或18型陽(yáng)性的女性需后續(xù)跟進(jìn)陰道鏡檢測(cè)，若

4、12種高危亞型陽(yáng)性需進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢測(cè)以確認(rèn)是否還需陰道鏡檢查。AOGIN會(huì)議關(guān)于篩查方案的評(píng)估 2014.4.25-2014.4.27AOGIN會(huì)議關(guān)于篩查方案的評(píng)估 2014.4.25-2014.4.27第一類：細(xì)胞學(xué)檢測(cè)為主，包括進(jìn)行HPV分流和單獨(dú)細(xì)胞學(xué)檢測(cè)兩種；第二類：HPV和細(xì)胞學(xué)聯(lián)合篩查為主；第三類：HPV檢測(cè)為主，結(jié)合細(xì)胞學(xué)分流或不結(jié)合；AOGIN會(huì)議關(guān)于篩查方案的評(píng)估根據(jù)多項(xiàng)研究表達(dá)，在宮頸癌篩查方面，使用HPV伴16/18分型檢測(cè)法作為初篩，檢出CIN3+的敏感性顯著高于細(xì)胞學(xué)檢測(cè)，且更為有效；該檢測(cè)結(jié)合細(xì)胞學(xué)進(jìn)行分流的篩查策略與高風(fēng)險(xiǎn)HPV檢測(cè)聯(lián)合細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的篩查策略敏感性相

5、似。因此，大會(huì)重點(diǎn)推薦HPV DNA檢測(cè)作為一線方法，結(jié)合細(xì)胞學(xué)分流的策略。HPV 檢測(cè)的臨床驗(yàn)證不需要檢測(cè)出每一個(gè)高危型HPV（hrHPV）陽(yáng)性的婦女HPV檢測(cè)目的是：發(fā)現(xiàn)當(dāng)前有CIN2+病變或未來(lái)有可能發(fā)展為CIN2+風(fēng)險(xiǎn)人群分析敏感性和臨床敏感性全球不同區(qū)域引起宮頸癌的排名前五位的HPV亞型HPV16、18型感染率最高對(duì)來(lái)自世界各地的宮頸癌組織標(biāo)本的研究發(fā)現(xiàn)，HPV16、18型感染率占到55%60% 結(jié)果:1244 archived tumor tissue (2004-2006) from 19 hospitals in 7 geographic regions of China, e

6、xtending over the entire countryHPV 16 and 18 were most common types in cervical cancerSix Most Common HPV Types in Cervical Carcinoma by RegionATHENA 試驗(yàn)方案不同型別hrHPV陽(yáng)性時(shí)CIN2 病變的10年累積發(fā)病率Follow-up time (months)Other high-risk HPV+HPV18+High-risk HPVHPV16+Cumulative incidence rate of CIN3 (%)17.2% (11.52

7、2.9)13.6% (3.623.7)3.0% (1.94.2)0.8% (0.61.1)4.5 1527395163758799119.5111020151050感染HPV16/18的女性，不論是近期，還是遠(yuǎn)期進(jìn)展為高度宮頸病變的風(fēng)險(xiǎn)都遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其它HPV型別陽(yáng)性Khan MJ, et al. J Natl Cancer Inst 2005; 97:10721079.3年CIN3累計(jì)風(fēng)險(xiǎn)初篩人群(25 歲)HPV 16 (+)HPV 18 (+)Other 12 hrHPV (+)HPV (-)CIR CIN3 (%)ACS/ASCCP/ASCP 指南（美國(guó)癌癥學(xué)會(huì)、美國(guó)陰道鏡和宮頸病理學(xué)會(huì)，

8、美國(guó)臨床病理學(xué)會(huì)指南） 2012年更新30歲女性篩查策略的比較 權(quán)衡CIN3+的檢出率和陰道鏡轉(zhuǎn)診數(shù)量篩查策略篩查檢測(cè)數(shù)量基線時(shí)CIN3+漏檢的 CIN3+延遲的 CIN3+陰道鏡檢測(cè)數(shù)量檢出1個(gè)CIN3+所需陰道鏡數(shù)量細(xì)胞學(xué)，ASCUS者用HPV分流35,5461068308167.7聯(lián)合篩查68,50810611728167.7單獨(dú)HPV34,254170190234113.8先HPV檢測(cè)伴16/18分型，再通過(guò)細(xì)胞學(xué)分流 (ASC-US)36,42313619349827.2 HPV12+2 臨床應(yīng)用 同類產(chǎn)品比較 項(xiàng)目信息及宣傳資料 E6E7 臨床應(yīng)用 項(xiàng)目信息及宣傳資料競(jìng)爭(zhēng)者分析表競(jìng)

9、爭(zhēng)者分析表檢測(cè)方法HC2 Cervista HPV HR檢測(cè)HPV 14 型檢測(cè)檢測(cè)型別 13種高危型HPV無(wú)HPV 66高危亞型，丟失HPV66亞型病人，延誤隨訪時(shí)間 。14種高危HPV（包括HPV66亞型）14種高危HPV（包括HPV66亞型） 內(nèi)質(zhì)控 無(wú)內(nèi)質(zhì)控，易造成假陰性HIST2H2BE基因?yàn)閮?nèi)質(zhì)控防止假陰性Betaglobin管家基因作為內(nèi)質(zhì)控，提供可信賴的陰性結(jié)果 交叉污染控制假陽(yáng)性 (其說(shuō)明書指明10%的假陽(yáng)性)67、70交叉污染導(dǎo)致假陽(yáng)性與低危型及其他微生物沒有交叉反應(yīng)提供可靠的陽(yáng)性結(jié)果 結(jié)果定性檢測(cè)，提供半定量參考，混合檢測(cè)13型，不區(qū)分型別，無(wú)法進(jìn)一步獲知病人是否具有癌前

10、的高風(fēng)險(xiǎn)；面臨陽(yáng)性人群分流隨訪問題。一份樣本三次檢測(cè)得到如下結(jié)果：結(jié)果為分組檢測(cè)，無(wú)法對(duì)HPV16、18分型A5/A6組（HPV51、56、66）陰性或陽(yáng)性A7組（HPV18、39、45、59、68）陰性或陽(yáng)性A9組（HPV16、31、33、35、52、58）陰性或陽(yáng)性一份樣本一次檢測(cè)得到三個(gè)結(jié)果：HPV16陰性或陽(yáng)性HPV18陰性或陽(yáng)性其他高危（HPV31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66,68）陰性或陽(yáng)性敏感度87.20%92.80%90.00%特異度71.10%44.20%70.50%陽(yáng)性預(yù)測(cè)值13.70%8.30%14.00%陰性預(yù)測(cè)值99

11、.10%99.10%99.20%手工操作 存在人為操作錯(cuò)誤與污染的風(fēng)險(xiǎn) 存在人為操作錯(cuò)誤與污染的風(fēng)險(xiǎn) 全自動(dòng). HC2 存在的問題cobas 的優(yōu)勢(shì)只檢測(cè)13種高危型，沒有HPV66假陰性 which are extremely dangerous in co-testing/for patients who are not visiting doctors regularly14種高危HPV包括HPV66無(wú)內(nèi)質(zhì)控假陰性 which are extremely dangerous in co-testing/for patients who are not visiting doctors r

12、egularlyB球蛋白作為內(nèi)質(zhì)控，提供可靠的陰性結(jié)果與低危型產(chǎn)生交叉反應(yīng)假陽(yáng)性 (說(shuō)明書顯示有10%）Proven no cross reactivity to low risk HPV and many other microorganisms. Provides reliable positive results.無(wú)分型無(wú)法獲知病人是否具有癌前的高風(fēng)險(xiǎn). 專門分型16/18要求4ml的樣本量樣本不足夠，影響操作3mL in ThinPrep vial1mL in 13 mm secondary tube.結(jié)果存在灰區(qū)需要重復(fù)檢測(cè)沒有灰區(qū)不是全自動(dòng)化可能出現(xiàn)人為操作引起的錯(cuò)誤，交叉污染。

13、全自動(dòng)競(jìng)爭(zhēng)者分析表HC2檢測(cè)沒有內(nèi)質(zhì)控，對(duì)于檢測(cè)陰性或失敗結(jié)果不能得知是由于取樣細(xì)胞量不夠而導(dǎo)致陰性還是真是陰性。FDA要求新批準(zhǔn)的HPV DNA檢測(cè)必須有內(nèi)質(zhì)控。HC2只檢測(cè)13種高危型HPV，缺少66亞型，存在漏檢風(fēng)險(xiǎn)，不能分型HPV16/18，無(wú)法獲知病人是否具有高風(fēng)險(xiǎn)的疾??！ HPV12+2 臨床應(yīng)用 同類產(chǎn)品比較 項(xiàng)目信息及宣傳資料 E6E7 臨床應(yīng)用 項(xiàng)目信息及宣傳資料cobas 4800 HPV 檢測(cè)平臺(tái)概覽1.66 m90 cmcobas x 480 instrument自動(dòng)核酸提取儀（磁珠提取法）cobas z 480 實(shí)時(shí)定量PCR儀自動(dòng)核酸擴(kuò)增、檢測(cè)、分析57 cm50

14、cm實(shí)驗(yàn)檢測(cè)意義實(shí)驗(yàn)檢測(cè)意義單管檢測(cè)，多個(gè)結(jié)果單管檢測(cè)，多個(gè)結(jié)果 4 通道檢測(cè)通道檢測(cè)多種標(biāo)本適用多種標(biāo)本適用PreservCyt 和和 SurePathcobas PCR Cell Collection Media艾康細(xì)胞保存液艾康細(xì)胞保存液各通道的各通道的cut-off值不同值不同Cobas 4800 HPV 檢測(cè)2011年4月獲歐盟與美國(guó)FDA批準(zhǔn)； 2012年9月獲中國(guó)藥監(jiān)局批準(zhǔn)HRHR313545525866395156596833GT16GT18臨床意義n12 種高風(fēng)險(xiǎn)種高風(fēng)險(xiǎn)HPV 基因型混合結(jié)果基因型混合結(jié)果n30% 宮頸癌與其相關(guān)宮頸癌與其相關(guān)nHPV16 結(jié)果結(jié)果n風(fēng)險(xiǎn)最高

15、風(fēng)險(xiǎn)最高nHPV18結(jié)果結(jié)果nHPV18+ 容易被細(xì)胞學(xué)檢測(cè)漏診容易被細(xì)胞學(xué)檢測(cè)漏診n腺癌多見，病變進(jìn)展最快腺癌多見，病變進(jìn)展最快cobas 4800 HPV檢測(cè)特點(diǎn)二為 聯(lián)合檢測(cè) 提供便捷平臺(tái)1次采樣 2種檢測(cè) 2份報(bào)告4個(gè)結(jié)果HR121618-globinTBS(LSIL) +/- +/- +/- CTTCT檢查 HPV檢測(cè)cobas 4800 HPV檢測(cè)特點(diǎn)三 結(jié)果準(zhǔn)確可靠?jī)?nèi)部質(zhì)控（-球蛋白）對(duì)取樣、檢測(cè)質(zhì)量全程監(jiān)測(cè)和評(píng)估高精密移液技術(shù)嚴(yán)格控制樣本、試劑加樣避免加樣漏液導(dǎo)致的樣本交叉污染避免因未取到宮頸上皮細(xì)胞造成的假陰性結(jié)果避免反應(yīng)抑制造成的假陰性結(jié)果cobas 4800 HPV檢測(cè)特

16、點(diǎn)三 結(jié)果準(zhǔn)確可靠防止與其他低危亞型交叉污染實(shí)現(xiàn)一次檢測(cè)3個(gè)結(jié)果UNG酶抑制遺留擴(kuò)增子避免樣本受擴(kuò)增子污染導(dǎo)致假陽(yáng)性高保守靶標(biāo)選擇，優(yōu)化PCR引物、探針設(shè)計(jì)cobas 4800 HPV 檢測(cè)特點(diǎn)四PCR方法具有經(jīng)臨床驗(yàn)證的靈敏度和特異性FluorescenceCycle number (CT-cycle threshold)Negative Positive (CT40)Significance level of net fluorescence 40 通過(guò)數(shù)萬(wàn)例臨床標(biāo)本建立檢查信號(hào)基線檢測(cè)結(jié)果可以高度預(yù)測(cè)癌前病變CIN2+的相關(guān)度。臨床特異性和臨床靈敏度的最佳平衡點(diǎn) - 醫(yī)學(xué)決定點(diǎn)。報(bào)告時(shí)間

17、：4個(gè)工作日 HPV12+2 臨床應(yīng)用 同類產(chǎn)品比較 項(xiàng)目信息及宣傳資料 E6E7 臨床應(yīng)用 項(xiàng)目信息及宣傳資料HPV感染與宮頸癌的發(fā)病關(guān)系70%-80%女性一生中會(huì)感染該病毒。 HPV感染后，大部分女性會(huì)在9至16個(gè)月內(nèi)，通過(guò)自身免疫力將病毒清除。約30至50感染者會(huì)出現(xiàn)宮頸上皮細(xì)胞輕度病變，但在病毒清除后3 至4 個(gè)月內(nèi)，會(huì)逐漸恢復(fù)正常。但也有約5至10，因自身免疫因素或其他因素不能將病毒清除，并在體內(nèi)維持高水平病毒載量，成為HPV持續(xù)感染，最終發(fā)展為宮頸癌。宮頸癌的病因致癌機(jī)理高危亞型HPV（人乳頭瘤病毒）感染宮頸上皮細(xì)胞后，病毒癌基因轉(zhuǎn)錄生成E6、E7 mRNA，進(jìn)一步翻譯生成兩種癌蛋

18、白：E6和E7蛋白。癌蛋白可與宿主細(xì)胞的細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白（抑癌蛋白如P53、RB等）相結(jié)合，導(dǎo)致細(xì)胞周期控制失常，發(fā)生癌變。臨床應(yīng)用組織病理學(xué) CIN/CIN/CIN癌基因 E6/E7 mRNA，輔助確定篩查間隔、是否手術(shù)及手術(shù)類型流行病學(xué) 30歲以下高感染、高轉(zhuǎn)歸女性，不適合做HPV DNA, 癌基因 E6/E7 mRNA可選出致癌風(fēng)險(xiǎn)較大者，規(guī)避過(guò)度診斷治療病毒學(xué) HPV DNA（+）癌基因 E6/E7 mRNA ，選出有致癌活動(dòng)的HPV感染者細(xì)胞學(xué) ASC-US以上癌基因 E6/E7 mRNA，降低細(xì)胞學(xué)的漏診率治療學(xué) 手術(shù)后癌基因 E6/E7 mRNA，評(píng)估治療效果并指導(dǎo)術(shù)后隨訪。流行

19、病學(xué) 30歲以下高感染、高轉(zhuǎn)歸女性癌基因 E6/E7 mRNA1、此類人群HPV的感染率很高。2、此類人群宮頸癌患癌率低。3、HPV DNA檢測(cè)的意義不突出 HPV的感染與性生活的頻、早、多密切相關(guān)， 由于此類人群的免疫力較強(qiáng)、HPV致癌時(shí)間較長(zhǎng)，所以該人群的患癌率相對(duì)較低。 NCCN指南 顯示此類人群不建議做HPV DNA檢測(cè)。流行病學(xué) 30歲以下高感染、高轉(zhuǎn)歸女性癌基因 E6/E7 mRNA21-29年齡段：高感染高清除持續(xù)高危HPV感染：是高風(fēng)險(xiǎn)因素HPV-DNA檢測(cè)： 只能測(cè)出感染情況 不能評(píng)估罹患宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)E6、E7 mRNA檢測(cè)： 可測(cè)出E6、E7癌基因在宮頸細(xì)胞中的表達(dá)情況 檢測(cè)E6