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1、實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色 目的要求:目的要求:1 1、掌握細(xì)菌抹片的制備方法和常用染色方法。、掌握細(xì)菌抹片的制備方法和常用染色方法。 2 2、認(rèn)識革蘭氏染色和抗酸性染色的反應(yīng)特、認(rèn)識革蘭氏染色和抗酸性染色的反應(yīng)特性。性。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:實(shí)驗(yàn)內(nèi)容:1 1、 細(xì)菌抹片的制備:細(xì)菌抹片的制備:l玻片準(zhǔn)備:透明、潔凈、無油漬。玻片準(zhǔn)備:透明、潔凈、無油漬。l抹片:液體材料、非液體材料、組織臟器材料的抹片方法講解、示范。抹片:液體材料、非液體材料、組織臟器材料的抹片方法講解、示范。l干燥固定:火焰固定和化學(xué)固定的示范。講解其目的及注意事項(xiàng)。干燥固定:火焰固
2、定和化學(xué)固定的示范。講解其目的及注意事項(xiàng)。2 2、 細(xì)菌涂片的制備:講解并示范涂片、干燥、固定的方法。細(xì)菌涂片的制備:講解并示范涂片、干燥、固定的方法。3 3、 細(xì)菌常用染色方法:細(xì)菌常用染色方法:革蘭氏染色法革蘭氏染色法實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色細(xì)菌涂(抹)片的制備和革蘭氏染色 細(xì)菌抹片細(xì)菌抹片 的制備的制備實(shí)驗(yàn)二:細(xì)菌涂片的制備和染色鏡檢實(shí)驗(yàn)二:細(xì)菌涂片的制備和染色鏡檢 革蘭氏染色法:革蘭氏染色法:1. 1. 制片:取待檢病料或細(xì)菌培養(yǎng)物常規(guī)抹(涂)片、干燥、制片:取待檢病料或細(xì)菌培養(yǎng)物常規(guī)抹(涂)片、干燥、固定。固定。 2. 2. 初染:滴加結(jié)晶紫,染色初染:滴加結(jié)晶
3、紫,染色1-21-2分鐘,水洗。分鐘,水洗。 3. 3. 媒染:用碘液沖去殘水,并用碘液覆蓋約媒染:用碘液沖去殘水,并用碘液覆蓋約1 1分鐘,水洗。分鐘,水洗。 4. 4. 脫色:用濾紙吸取或甩去載玻片上的殘水,將載玻片傾脫色:用濾紙吸取或甩去載玻片上的殘水,將載玻片傾斜,在白色背景下,用滴管流加斜,在白色背景下,用滴管流加95%95%乙醇脫色,直至流出的乙醇脫色,直至流出的乙醇無紫色時(shí)(乙醇無紫色時(shí)(20203030秒),立即水洗。秒),立即水洗。 5.5.復(fù)染:用復(fù)紅液復(fù)染約復(fù)染:用復(fù)紅液復(fù)染約2 2分鐘,水洗。分鐘,水洗。6. 6. 鏡檢:用濾紙吸水,干燥后,顯微鏡油鏡觀察。鏡檢:用濾紙吸水,干燥后,顯微鏡油鏡觀察。革蘭氏染色法過程示意圖革蘭氏染色法過程示意圖革蘭氏染革蘭氏染 色法動畫色法動畫革蘭氏革蘭氏 染染 色法色法革蘭氏染革蘭氏染 色法動畫色法動畫實(shí)驗(yàn)報(bào)告:實(shí)驗(yàn)報(bào)告:1 1、細(xì)菌抹片或涂片革蘭氏染色的顯微鏡觀察結(jié)果。、細(xì)菌抹片或涂片革蘭氏染色的顯微鏡觀察結(jié)果。2 2、革蘭氏染色法的具體程序和注意事項(xiàng)。、革蘭氏染色法的具體程序和注意事項(xiàng)。
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