動物生理學(xué)實驗二魚類采血技術(shù)與血細(xì)胞生理

1、實驗二實驗二 魚類采血技術(shù)與血細(xì)胞生理魚類采血技術(shù)與血細(xì)胞生理 血液：血液：是一種由血漿和血細(xì)胞組成的流體組織，由心臟搏動推動在心血管系統(tǒng)中不斷循環(huán)流動，具有運輸、防御和運輸、防御和免疫免疫、維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定維持內(nèi)環(huán)境的相對穩(wěn)定和參與體液調(diào)節(jié)參與體液調(diào)節(jié)等多種功能。 血液組成血液組成 紅細(xì)胞脆性與溶血脆性與溶血：紅細(xì)胞具有選擇透過性，高滲：紅細(xì)胞具有選擇透過性，高滲失水，低滲吸水，低滲條件下或其他原因致使紅細(xì)胞易破失水，低滲吸水，低滲條件下或其他原因致使紅細(xì)胞易破裂導(dǎo)致血紅蛋白逸出稱裂導(dǎo)致血紅蛋白逸出稱溶血。溶血。 1學(xué)習(xí)魚類采血的主要方法，掌握魚類尾柄動脈采血技術(shù)； 2了解血液的組成，進(jìn)

2、一步深刻認(rèn)識血漿與血清的主要區(qū)別。 3觀察紅細(xì)胞在不同濃度生理鹽水中的細(xì)胞形態(tài)，進(jìn)一步認(rèn)識紅細(xì)胞的滲透脆性。 鯽魚鯽魚 肝素鈉溶液、MS-222溶液，生理鹽水（1%，0.65%，0.3%）、蒸餾水。 解剖盤1個、毛巾1塊，1 mL注射器5個、燒杯（200 mL）、1.5 mL 離心管（10個）、顯微鏡、載破片5片、滴管2支、拭鏡紙。1 1、血液采集、血液采集 （1）實驗魚的麻醉 將鯽魚先放入MS-222溶液的桶中，進(jìn)行實驗魚的麻醉，當(dāng)鯽魚在麻醉劑溶液中緩慢運動或在桶中側(cè)翻時，這時表明麻醉的程度比較適中。魚類麻醉前后對比示意圖魚類麻醉前后對比示意圖 （2）取血的準(zhǔn)備 將準(zhǔn)備好的1mL注射器，一只

3、不作任何處理，一只抽動活塞用肝素鈉溶液將注射器內(nèi)濕潤，為血液的采集做好準(zhǔn)備工作。 （3）血液的采集 注射器的針頭從臀鰭基部下針，將針頭沿著垂直于尾柄的方向推進(jìn)，使針頭剛好尾部脊柱的下側(cè)，此時保證針頭的位置不隨意挪動，右手大拇指和食指帶動活塞向外運動，經(jīng)大氣壓力將血液壓入注射器中。2 2、血清、血漿的制備血清、血漿的制備 血清的制備 用未經(jīng)肝素鈉溶液處理的注射器所采集的血樣，注入離心管后讓其靜止放置20分鐘，待血液凝結(jié)后所析出的上清液即為血清。 血漿的制備 經(jīng)肝素鈉溶液處理的注射器所采集的血樣，注入離心管后放置1小時，或者3000 轉(zhuǎn)/分鐘轉(zhuǎn)速下離心5分鐘，獲得的上層淡黃色液體即為血漿。 比較血

4、漿和血清兩者存在的區(qū)別。3 3、紅細(xì)胞的滲透脆性紅細(xì)胞的滲透脆性 等滲觀察 用滴管吸0.65%的生理鹽水，吸1mL左右滴入1只新的離心管中，再將剛采取的新鮮血液（或去纖維蛋白血）用注射器輕輕推1-2滴到該生理鹽水中，待輕輕顛倒混勻后，用吸管滴1滴到載玻片上，放于顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)。 滲透失水 用滴管吸1%的生理鹽水，吸1mL左右滴入1只新的離心管中，再將剛采取的新鮮血液（或去纖維蛋白血）用注射器輕輕推1-2滴到該生理鹽水中，待輕輕顛倒混勻后，用吸管滴1滴到載玻片上，放于顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)。 滲透吸水 用滴管吸0.3%的生理鹽水，將1mL左右生理鹽水滴入1只新的離心管中，再將剛采取的新鮮

5、血液（或去纖維蛋白血）用注射器輕輕推1-2滴到該生理鹽水中，待輕輕顛倒混勻后，用吸管滴1滴到載玻片上，放于顯微鏡下觀察細(xì)胞的形態(tài)。 脆性鑒定 再將新鮮血液滴入蒸餾水中，觀察細(xì)胞的形態(tài)。 1麻醉實驗魚時不要過度麻醉，會對血液的流動產(chǎn)生一定的影響，最終導(dǎo)致采血困難。同時，麻醉的時間也不能過短，否則影響采血操作。 2肝素鈉溶液處理注射器時，一定要將注射器內(nèi)部全部濕潤，否則仍可能會產(chǎn)生凝血。 3下針的位置有要準(zhǔn)，一定要刺到脊柱腹側(cè)，且針頭不能輕易變動位置，不然血液很難抽出，若出現(xiàn)位置失誤，應(yīng)該重新再試一次。 4未經(jīng)肝素鈉處理的注射器，抽出的血液要盡快注入到離心管中，避免血液在注射器中凝固。 5血液顛倒混勻的過程要輕，不能太劇烈，否則容易導(dǎo)致溶血。 6離心的速度不能太快，否則易導(dǎo)致溶血。 1. 描述血漿與血清的主要特點，并說出他們的主要區(qū)別。 2. 描述不同濃度下紅細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，以及形成這種結(jié)果的原因。 3. 描述尾柄動脈采血的過程。 1采出的血液