博士碩士研究生入學(xué)考試-細(xì)胞生物學(xué)-簡(jiǎn)答論述及參考答案_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、1.簡(jiǎn)述酵母雙雜交系統(tǒng)原理及應(yīng)用答:酵母雙雜交系統(tǒng)(yeast two-hybrid system)是在酵母體內(nèi)分析蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的基因系統(tǒng),也是一個(gè)基于轉(zhuǎn)錄因子模塊結(jié)構(gòu)的遺傳學(xué)方法。酵母雙雜交系統(tǒng)的建立得力于對(duì)真核細(xì)胞調(diào)控轉(zhuǎn)錄起始過程的認(rèn)識(shí)。許多真核生物的轉(zhuǎn)錄激活因子都是由兩個(gè)可以分開的、功能上相互獨(dú)立的結(jié)構(gòu)域(domain)組成的。例如,酵母的轉(zhuǎn)錄激活因子GAL4,在N端有一個(gè)由147個(gè)氨基酸組成的DNA結(jié)合域(DNA binding domain,BD),C端有一個(gè)由113個(gè)氨基酸組成的轉(zhuǎn)錄激活域(transcription activation domain,AD)。GAL4分

2、子的DNA結(jié)合域可以和上游激活序列(upstream activating sequence,UAS)結(jié)合,而轉(zhuǎn)錄激活域則能激活UAS下游的基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。但是,單獨(dú)的DNA結(jié)合域不能激活基因轉(zhuǎn)錄,單獨(dú)的轉(zhuǎn)錄激活域也不能激活UAS的下游基因,它們之間只有通過某種方式結(jié)合在一起才具有完整的轉(zhuǎn)錄激活因子的功能。酵母雙雜交系統(tǒng)正是利用了GAL4的功能特點(diǎn),通過兩個(gè)雜交蛋白在酵母細(xì)胞中的相互結(jié)合及對(duì)報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄激活來捕獲新的蛋白質(zhì)。2.miRNA、siRNA、dsRNA、shRNA的區(qū)別和聯(lián)系答:miRNA,siRNA,dsRNA和shRNA都是RNA干擾技術(shù)中用到的小分子RNA,其不同之處在miRN

3、A 是單鏈RNA,其余均為雙鏈RNA;siRNA和dsRNA相似;shRNA需通過載體導(dǎo)入細(xì)胞后,然后利用細(xì)胞內(nèi)的酶切機(jī)制得到siRNA而最終發(fā)揮 RNA干擾作用。3.試述磷酸酰肌醇雙信號(hào)通路的基本內(nèi)容及功能答:在這一信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中,膜受體與其相應(yīng)的第一信使分子結(jié)合后,激活膜上的Gp蛋白(一種G蛋白),然后由Gq蛋白激活磷酸脂酶C (phospholipase C, PLC), 將膜上的脂酰肌醇4,5-二磷酸(phosphatidylinositol biphosphate, PIP2)分解為兩個(gè)細(xì)胞內(nèi)的第二信使:二酰甘油( diacylglycerol, DAG)和1,4,5-三磷酸肌醇(I

4、P3)。IP3動(dòng)員細(xì)胞內(nèi)鈣庫釋放Ca2+到細(xì)胞質(zhì)中與鈣調(diào)蛋白結(jié)合,隨后參與一系列的反應(yīng);而DAG在Ca2+的協(xié)同下激活蛋白激酶C(protein kinase C,PKC),然后通過蛋白激酶C引起級(jí)聯(lián)反應(yīng),進(jìn)行細(xì)胞的應(yīng)答, 故此將該系統(tǒng)稱為PKC系統(tǒng),或稱為IP3、DAG、Ca2+信號(hào)通路。 靜息狀態(tài)時(shí),G蛋白的亞基上結(jié)合的是GDP,所以沒有活性,磷脂酶C也是處于非活性狀態(tài)。第二信使IP3/DAG還是以前體PIP2存在。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的Ca2+離子配體閘門通道是關(guān)閉的,蛋白激酶C也是以可溶的非活性狀態(tài)存在于細(xì)胞質(zhì)中。4.簡(jiǎn)述細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的功能答:細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)是除去能分辨的細(xì)胞器和顆粒以外的細(xì)胞質(zhì)中膠態(tài)的

5、基底物質(zhì)。由水、無機(jī)鹽、脂質(zhì)、糖類、氨基酸、核苷酸等組成?,F(xiàn)又稱細(xì)胞溶膠。其主要功能包括:1.活細(xì)胞進(jìn)行新陳代謝的主要場(chǎng)所,其為新陳代謝的進(jìn)行,提供所需要的物質(zhì),如酶;2.提供細(xì)胞器的穩(wěn)定微環(huán)境;3.影響細(xì)胞的形狀。5.受體酪氨酸激酶通路的組成特點(diǎn)和功能答:受體酪氨酸激酶(RTKS)是細(xì)胞表面一大類重要受體家族,當(dāng)配體與受體結(jié)合,導(dǎo)致受體二聚化,激活受體的酪氨酸蛋白激酶活性,隨即引起一系列磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng),終至細(xì)胞生理和基因表達(dá)的改變。RTK-Ras信號(hào)通路是這類受體所介導(dǎo)的重要信號(hào)通路。其基本模式為:配體RTK接頭蛋白GEFRasRaf (MAPKKK)MAPKKMAPK進(jìn)入細(xì)胞核其他激酶或基

6、因調(diào)控蛋白(轉(zhuǎn)錄因子)的磷酸化修飾,對(duì)基因表達(dá)產(chǎn)生多種效應(yīng)。RTKS信號(hào)通路主要參與控制細(xì)胞生長(zhǎng)、分化過程。RTK-Ras信號(hào)通路具有廣泛的功能,包括調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖分化,促進(jìn)細(xì)胞存活,以及細(xì)胞代謝的調(diào)節(jié)與校正。6.什么是非組蛋白?其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和結(jié)構(gòu)模式非組蛋白是指細(xì)胞核中組蛋白以外的酸性蛋白質(zhì)。非組蛋白不僅包括以DNA作為底物的酶,也包括作用于組蛋白的一些酶, 如組蛋白甲基化酶。此外還包括DNA結(jié)合蛋白、組蛋白結(jié)合蛋白和調(diào)節(jié)蛋白。非組蛋白能識(shí)別特異的DNA序列,識(shí)別信息來源于DNA核苷酸序列本身。根據(jù)它們與DNA結(jié)合的結(jié)構(gòu)域不同,其結(jié)構(gòu)模式包括:螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋模式(HTH)、鋅指模式、亮氨酸拉

7、鏈模式(ZIP)、螺旋-環(huán)-螺旋模式(HLH)、HMG框模式。7.細(xì)胞骨架特異性藥物有哪些及應(yīng)用細(xì)胞松弛素B:切斷微絲,結(jié)合在微絲正極阻抑肌動(dòng)蛋白聚合,破壞微絲網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),并阻止細(xì)胞運(yùn)動(dòng)。鬼筆環(huán)肽:與微絲有強(qiáng)親和作用,使肌動(dòng)蛋白纖維穩(wěn)定,防止微絲解聚。秋水仙素:結(jié)合到未聚合的微管蛋白二聚體上,阻斷微管蛋白組裝成微管,可破壞紡錘體結(jié)構(gòu)。是細(xì)胞停留在分裂期,以加倍染色體。紫杉醇:促進(jìn)微管裝配,并使已形成的微管穩(wěn)定。8.論述葉綠體結(jié)構(gòu)及功能高等動(dòng)物的葉綠體多呈凸透鏡狀或香蕉形,含量較多。藻類植物通常只有一個(gè)巨大的葉綠體,其形態(tài)有帶狀、螺旋狀、星狀等。由葉綠體膜、類囊體和基質(zhì)三部分組成。 9.舉3例說明

8、細(xì)胞蛋白質(zhì)相互作用的實(shí)驗(yàn)方法,說明實(shí)驗(yàn)原理及應(yīng)用免疫共沉淀是探測(cè)活體細(xì)胞內(nèi)蛋白間的相互作用的一門技術(shù)。它的原理是當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時(shí),完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)間的相互作用被保留了下來。如果用蛋白X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)有相互作用的蛋白Y也能沉淀下來。 首先從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì),獲得蛋白提取液,并將其與抗體孵育,使抗體與蛋白X結(jié)合。將預(yù)處理過的protein G瓊脂糖珠(Sepharose)加入到抗體與蛋白提取液的孵育液中反應(yīng),使抗體與protein G結(jié)合。通過離心將瓊脂糖珠沉降到管底,去除上清液,然后再用緩沖液將瓊脂糖珠沖洗數(shù)次,最后用western blot(或SD

9、S-PAGE)進(jìn)行檢測(cè)。熒光共振能量轉(zhuǎn)移技術(shù)的原理是:處于激活狀態(tài)的供體,可以將其本身的熒光傳遞到與之十分鄰近(通常在10 nm 之內(nèi))的受體上。因此,如果用遺傳突變的綠色熒光蛋白(GFP)或是合成的熒光染料標(biāo)記蛋白質(zhì),則可以通過熒光體之間的能量傳遞來確定兩蛋白質(zhì)的相互作用。這種方法較之上述的方法有兩個(gè)優(yōu)點(diǎn):(1)蛋白質(zhì)之間的相互作用是發(fā)生在完整細(xì)胞里,比較完整地反映了蛋白質(zhì)在生理狀態(tài)的活動(dòng)。(2)利用這種方法,可以觀察到蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)的定位。Pulldown技術(shù)利用的是親和層析技術(shù)以及特異的配體(如GSH或者鎳)。以下圖為例,將GST的基因與蛋白X的基因融合,表達(dá)出融合蛋白。將該融合蛋白的溶

10、液過帶有GSH配體的層析柱,那么這一融合蛋白就能結(jié)合在配體上,然后將待測(cè)蛋白的溶液過柱,并讓其與融合蛋白反應(yīng)一段時(shí)間。 接著開始進(jìn)行洗脫。如果待測(cè)蛋白與蛋白X無相互作用,那么在開始清洗的時(shí)候就會(huì)被洗下來;如果在用洗脫液洗脫后才能在收集到的樣品中發(fā)現(xiàn)待測(cè)蛋白(以及蛋白X),說明待測(cè)蛋白與蛋白X可能有相互作用。10.細(xì)胞質(zhì)膜的主要功能為細(xì)胞的生命活動(dòng)提供相對(duì)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境選擇性的物質(zhì)運(yùn)輸并伴隨著能量的轉(zhuǎn)移細(xì)胞識(shí)別與信息傳遞為多種酶類提供結(jié)合位點(diǎn)介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)之間的連接參與形成具有不同功能的細(xì)胞表面特化結(jié)構(gòu)某些膜蛋白的異常與疾病直接相關(guān)。11.蛋白質(zhì)分選的類型及途徑蛋白質(zhì)分選有兩條途徑:一

11、條是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中完成多肽鏈的合成,然后轉(zhuǎn)運(yùn)至膜圍繞的細(xì)胞器,如線粒體(或葉綠體)、過氧化物酶體、細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)的特定部位;一條是蛋白質(zhì)在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成,經(jīng)高爾基體運(yùn)至溶酶體、細(xì)胞膜或分泌到細(xì)胞外。包括四種類型1、門控運(yùn)輸(gated transport):如通過核孔復(fù)合體的運(yùn)輸。2、跨膜運(yùn)輸:蛋白質(zhì)通過跨膜通道進(jìn)入目的地。如細(xì)胞質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)通過線粒體上的轉(zhuǎn)位因子(translocator)進(jìn)入線粒體。3、膜泡運(yùn)輸(vesicular transport):被運(yùn)輸?shù)奈镔|(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)或高爾基體中加工成有被小泡,選擇性地運(yùn)輸?shù)桨屑?xì)胞器。4、細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)。12.溶酶體的功能清除功

12、能:消化無用的生物大分子、衰老細(xì)胞及細(xì)胞器,保持正常細(xì)胞的代謝與調(diào)控;防御功能:識(shí)別并吞噬入侵的病毒或細(xì)菌,形成異噬溶酶體正常的消化作用,為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)在分泌細(xì)胞中,溶酶體往往參與調(diào)解分泌過程受精過程中,精子的頂體相當(dāng)于特化的溶酶體,內(nèi)含多種水解酶類自噬死亡中的功能。13.核小體結(jié)構(gòu)要點(diǎn)每個(gè)核小體單位包括200 bp左右的DNA鏈、一個(gè)組蛋白八聚體及一分子組蛋白H1。組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的盤狀核心結(jié)構(gòu)。146 bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75圈,組蛋白H1在核心顆粒外結(jié)合額外20 bpDNA,鎖住核小體DNA的進(jìn)出端,起穩(wěn)定核小體的作用。相鄰核小體之間以連接DNA相連(典型長(zhǎng)度

13、60 bp),不同物種變化值為080 bp。組蛋白與DNA的相互作用是結(jié)構(gòu)性的,基本不依賴于核苷酸的特異序列,核小體具有自組裝的性質(zhì)。核小體在DNA分子中的形成部位受諸多因素影響,核小體位置改變可影響基因表達(dá)。14.核糖體中rRNA的作用rRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核糖體,其功能是作為mRNA的支架,使mRNA分子在其上展開,形成肽鏈 (肽鏈在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體作用下盤區(qū)折疊加工修飾成蛋白質(zhì),原核生物在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)完成)的合成。rRNA單獨(dú)存在時(shí)不執(zhí)行其功能,它與多種蛋白質(zhì)結(jié)合成核糖體,作為蛋白質(zhì)生物合成的“裝配機(jī)”。15.凋亡的生物學(xué)特征及檢測(cè)方式細(xì)胞凋亡的生物學(xué)特征包括:細(xì)胞體積縮小,連接消失,與周

14、圍的細(xì)胞脫離,細(xì)胞質(zhì)密度增加,核質(zhì)濃縮,核膜核仁破碎,胞膜有小泡狀形成,胞膜結(jié)構(gòu)仍然完整,最終形成凋亡小體。細(xì)胞凋亡的檢測(cè)方法包括:細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè);磷脂酰絲氨酸外翻分析;線粒體膜勢(shì)能(mt)的檢測(cè);DNA片斷化檢測(cè);TUNEL法檢測(cè)(DNA斷裂的原位末端標(biāo)記);Caspase-3活性的檢測(cè)等。16.什么是RT-PCR,影響 RT-PCR效率的因素逆轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription PCR)或者稱反轉(zhuǎn)錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的一種廣泛應(yīng)用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成為

15、互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增。影響 RT-PCR效率的因素主要有溫度循環(huán)參數(shù)、引物引物設(shè)計(jì)、DNA聚合酶、Mg2+17.DNA結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)模式蛋白質(zhì)結(jié)合DNA的結(jié)構(gòu)域主要有5類:螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋模式(HTH)、鋅指模式、亮氨酸拉鏈模式(ZIP)、螺旋-環(huán)-螺旋模式(HLH)、HMG框模式.18.分泌蛋白的在細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生,修飾,分泌過程首先細(xì)胞核中DNA轉(zhuǎn)錄成為mRNA,mRNA經(jīng)過核孔進(jìn)入細(xì)胞質(zhì),被細(xì)胞質(zhì)中的核糖體發(fā)現(xiàn),進(jìn)入核糖體進(jìn)行翻譯,經(jīng)過原料氨基酸的合成為多肽,經(jīng)過信號(hào)肽引導(dǎo),核糖體附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上,核糖體合成的多肽進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng),被內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上附著的大量的酶加工、剪切, 內(nèi)質(zhì)

16、網(wǎng)腔膨大、出芽形成具膜的小泡,包裹著蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到高爾基體,把蛋白質(zhì)輸送到高爾基體腔內(nèi),做進(jìn)一步的加工。接著,高爾基體邊緣突起形成小泡,把蛋白質(zhì)包裹在小泡里,運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞膜,小泡與細(xì)胞膜融合,把蛋白質(zhì)釋放到細(xì)胞外。19.以哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生為例。簡(jiǎn)述減數(shù)分裂。精子的發(fā)生是指從精原細(xì)胞到產(chǎn)生精細(xì)胞的過程。精子的形成過程:哺乳動(dòng)物的精子是在睪丸中形成的。睪丸里有許多極度彎曲的曲細(xì)精管。曲細(xì)精管中含有大量的原始生殖細(xì)胞,叫做精原細(xì)胞。每個(gè)精原細(xì)胞中的染色體數(shù)目都與體細(xì)胞的相同。當(dāng)雄性動(dòng)物性成熟以后,睪丸里的一部分精原細(xì)胞就開始進(jìn)行減數(shù)分裂,經(jīng)過兩次連續(xù)的細(xì)胞分裂減數(shù)第一次分裂和減數(shù)第二次分裂,形成成

17、熟的生殖細(xì)胞精子。在減數(shù)第一次分裂的分裂間期,染色體進(jìn)行復(fù)制,成為初級(jí)精母細(xì)胞。復(fù)制后的每條染色體都含有兩條姐妹染色單體,這兩條姐妹染色單體并列在一起,由同一個(gè)著絲點(diǎn)連接著。分裂期開始后不久,初級(jí)精母細(xì)胞中最顯著的變化是原來分散存在的染色體進(jìn)行配對(duì)。配對(duì)的兩條染色體,形狀和大小一般都相同,一條來自父方,一條來自母方,叫做同源染色體。同源染色體兩兩配對(duì)的現(xiàn)象就叫做聯(lián)會(huì)。聯(lián)會(huì)后的每對(duì)同源染色體就含有四條染色單體,叫做四分體。四分體中的非姐妹染色單體之間常發(fā)生交叉互換。經(jīng)過四分體期,各對(duì)同源染色體排列在細(xì)胞的赤道板上,每條染色體的著絲點(diǎn)都附著在紡錘絲上。不久,在紡錘絲牽引下,配對(duì)的同源染色體彼此分離

18、,分別向細(xì)胞的兩極移動(dòng),成為新的兩組染色體。一個(gè)初級(jí)精母細(xì)胞分裂成了兩個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞。由于同源染色體相互分離,分別進(jìn)入到不同的子細(xì)胞中去,使得每個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞只得到初級(jí)精母細(xì)胞中染色體總數(shù)的一半。因此,減數(shù)分裂過程中染色體數(shù)目的減半,發(fā)生在減數(shù)第一次分裂中。減數(shù)第一次分裂結(jié)束后,緊接著進(jìn)入到減數(shù)第二次分裂的分裂期。在次級(jí)精母細(xì)胞中,每條染色體的著絲點(diǎn)分開,兩條姐妹染色單體也隨著分開,成為兩條染色體。在紡錘絲的牽引下,這兩條染色體分別向細(xì)胞的兩極移動(dòng),并且隨著細(xì)胞的分裂,進(jìn)入到兩個(gè)子細(xì)胞中。這樣,在減數(shù)第一次分裂中形成的兩個(gè)次級(jí)精母細(xì)胞,經(jīng)過減數(shù)第二次分裂,就形成了四個(gè)精細(xì)胞。與初級(jí)精母細(xì)胞相比

19、,每個(gè)精細(xì)胞都含有數(shù)目減半的染色體。精細(xì)胞再經(jīng)過一系列復(fù)雜的形態(tài)變化,形成精子。20.簡(jiǎn)敘述細(xì)胞的有絲分裂及其調(diào)控 間期:完成DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成.前期:染色質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)槿旧w,核摸解體,核仁消失,形成紡錘體(簡(jiǎn)稱:膜仁消失顯兩體)中期:著絲點(diǎn)排列在赤道板的中央,染色體的數(shù)目最清晰,形態(tài)最固定(簡(jiǎn)稱:形定數(shù)清赤道板)后期:著絲點(diǎn)分裂,染色單體分離,在紡錘絲牽引下移向細(xì)胞兩極(簡(jiǎn)稱:點(diǎn)裂數(shù)加均分向兩極)末期:染色體轉(zhuǎn)變成染色質(zhì),核摸重建,核仁出現(xiàn),紡錘體解體21.試述細(xì)胞以哪些方式進(jìn)行通訊?各方式之間有何不同?細(xì)胞以三種方式進(jìn)行通訊: 細(xì)胞通過分泌化學(xué)信號(hào)進(jìn)行細(xì)胞間相互通訊,這是多細(xì)胞生物

20、包括動(dòng)物和植物最普遍采用的通訊方式; 細(xì)胞間接觸性依賴的通訊,細(xì)胞間直接接觸,通過與質(zhì)膜結(jié)合的信號(hào)分子影響其他細(xì)胞; 細(xì)胞間形成間隙連接使細(xì)胞質(zhì)相互溝通,通過交換小分子來實(shí)現(xiàn)代謝偶聯(lián)或電偶聯(lián)。22.細(xì)胞連接有哪幾種類型,各有何功能?細(xì)胞連接的類型:封閉連接:緊密連接;錨定連接:1、與中間纖維相關(guān)的錨定連接:橋粒和半橋粒;2、與肌動(dòng)蛋白纖維相關(guān)的錨定連接:粘合帶和粘合斑;通訊連接:間隙連接。緊密連接是封閉連接的主要形式,是指相鄰細(xì)胞質(zhì)膜直接緊密地連接在一起,能阻止溶液中的分子特別是大分子沿著細(xì)胞間的縫隙滲入體內(nèi),維持細(xì)胞一個(gè)穩(wěn)定的內(nèi)環(huán)境。緊密連接具有:1、形成滲漏屏障,起重要的封閉作用;2、隔離

21、作用,使游離端與基底面質(zhì)膜上的膜蛋白行使各自不同的膜功能;3、支持功能。橋粒:位于粘合帶下方。是細(xì)胞間形成的鈕扣式的連接結(jié)構(gòu),跨膜蛋白(鈣粘素)通過附著蛋白(致密斑)與中間纖維相聯(lián)系,提供細(xì)胞內(nèi)中間纖維的錨定位點(diǎn)。中間纖維橫貫細(xì)胞,形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),同時(shí)還通過橋粒與相鄰細(xì)胞連成一體,形成整體網(wǎng)絡(luò),起支持和抵抗外界壓力與張力的作用。半橋粒相當(dāng)于半個(gè)橋粒,但其功能和化學(xué)組成與橋粒不同。它通過細(xì)胞質(zhì)膜上的膜蛋白整合素將上皮細(xì)胞錨定在基底膜上,在半橋粒中,中間纖維不是穿過而是終止于半橋粒的致密斑內(nèi)。存在于上皮組織基底層細(xì)胞靠近基底膜處,防止機(jī)械力造成細(xì)胞與基膜脫離。粘合帶:又稱帶狀橋粒,位于緊密連接下方,

22、相鄰細(xì)胞間形成一個(gè)連續(xù)的帶狀連接結(jié)構(gòu),跨膜蛋白通過微絲束間接將組織連接在一起,提高組織的機(jī)械張力。粘合斑:細(xì)胞通過肌動(dòng)蛋白纖維和整聯(lián)蛋白與細(xì)胞外基質(zhì)之間的連接方式,微絲束通過附著蛋白錨定在連接部位的跨膜蛋白上。存在于某些細(xì)胞的基底,呈局限性斑狀。其形成對(duì)細(xì)胞遷移是不可缺少的。體外培養(yǎng)的細(xì)胞常通過粘著斑粘附于培養(yǎng)皿上。間隙連接:是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接,是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的連接結(jié)構(gòu),允許無機(jī)離子及水溶性小分子物質(zhì)從中通過,從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。間隙連接在代謝偶聯(lián)中的作用:使代謝物(如氨基酸、葡萄糖、核苷酸、維生素等)及第二信使(cAMP、Ca2+等)直接在細(xì)胞之間

23、流通。間隙連接在神經(jīng)沖動(dòng)信息傳遞過程中的作用:在由具有電興奮性的細(xì)胞構(gòu)成的組織中,通過間隙連接建立的電偶聯(lián)對(duì)其功能的協(xié)調(diào)一致具有重要作用。間隙連接在早期胚胎發(fā)育和細(xì)胞分化過程中具有重要;間隙連接對(duì)細(xì)胞增殖的控制也有一定作用。23.簡(jiǎn)述內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的結(jié)構(gòu)和功能內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜約占細(xì)胞總膜面積的一半,是真核細(xì)胞中最多的膜。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是內(nèi)膜構(gòu)成的封閉的網(wǎng)狀管道系統(tǒng)。具有高度的多型性??煞譃榇置嫘蛢?nèi)質(zhì)網(wǎng)(rough endoplasmic reticulum,RER)和光面型內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(smooth endoplasmic reticulum,SER)兩類。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的主要功能包括:蛋白質(zhì)的合成與轉(zhuǎn)運(yùn)(粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng));蛋白質(zhì)的加

24、工(如糖基化);脂類代謝與糖類代謝(滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng));解毒作用(滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上有分解毒物的酶。24.核糖體上的功能位點(diǎn)及在蛋白質(zhì)翻譯中的功能?核糖體上存在四個(gè)活性部位,在蛋白質(zhì)合成中各有專一的識(shí)別作用。 1.A部位:氨基酸部位或受位:主要在大亞基上,是接受氨?;?tRNA的部位。 2.P部位:肽基部位或供位:主要在小亞基上,是釋放tRNA的部位。 3.肽基轉(zhuǎn)移酶部位(肽合成酶),簡(jiǎn)稱T因子:位于大亞基上,催化氨基酸間形成肽鍵,使肽鏈延長(zhǎng)。 4.GTP酶部位:即轉(zhuǎn)位酶,簡(jiǎn)稱G因子,對(duì)GTP具有活性,催化肽鍵從供體部位受體部位。25.線粒體在細(xì)胞凋亡中的作用?在細(xì)胞凋亡的過程中,線粒體起著主要的作用。線

25、粒體外膜(OMM)上的VDAC2ANT復(fù)合物是線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(PTP)的主要成分,調(diào)節(jié)著膜兩側(cè)的電位,是線粒體凋亡蛋白釋放的主要通道。線粒體中細(xì)胞色素C(CytC)的釋放可通過一種新的通道 MAC直接進(jìn)入胞質(zhì),而且OMM的結(jié)構(gòu)不發(fā) 生破裂。另外,其他因子諸如Bcl22族因子、CytC、AIF等能夠直接或間接地調(diào)節(jié)PTP或線粒體凋亡通道(MAC),令線粒體的通透性改變,將各種促凋亡因子釋放,從而激活caspase的水解反應(yīng),誘導(dǎo)細(xì)胞的凋亡。26.氧化磷酸化偶聯(lián)機(jī)制的化學(xué)滲透假說的主要論點(diǎn)和證據(jù)?化學(xué)滲透假說主要論點(diǎn):電子傳遞鏈各組分在線粒體內(nèi)膜中不對(duì)稱分布,當(dāng)高能電子沿其傳遞時(shí),所釋放的能量

26、將H+從基質(zhì)泵到膜間隙,形成H+電化學(xué)梯度。在這個(gè)梯度驅(qū)使下,H+穿過ATP合成酶回到基質(zhì),同時(shí)合成ATP,電化學(xué)梯度中蘊(yùn)藏的能量?jī)?chǔ)存到ATP高能磷酸鍵。實(shí)驗(yàn)證據(jù):質(zhì)子動(dòng)力勢(shì)乃ATP合成的動(dòng)力;膜應(yīng)具有完整性;電子傳遞與ATP合成是兩件相關(guān)而又不同的事件。27.細(xì)胞周期主要有幾個(gè)檢查點(diǎn)(checkpoint)?與細(xì)胞癌變有何關(guān)系?常用什么方法檢測(cè)細(xì)胞周期異常細(xì)胞周期細(xì)胞周期檢查點(diǎn) (checkpoint)是細(xì)胞周期(cell cycle)中的一套保證DNA復(fù)制和染色體(chromosome)分配質(zhì)量的檢查機(jī)制,是一類負(fù)反饋調(diào)節(jié)機(jī)制當(dāng)細(xì)胞周期進(jìn)程中出現(xiàn)異常事件,如DNA損傷或DNA復(fù)制受阻時(shí),這

27、類調(diào)節(jié)機(jī)制就被激活,及時(shí)地中斷細(xì)胞周期的運(yùn)行待細(xì)胞修復(fù)或排除故障后,細(xì)胞周期才能恢復(fù)運(yùn)轉(zhuǎn)G1/S檢驗(yàn)點(diǎn):在酵母中稱start點(diǎn),在哺乳動(dòng)物中稱R點(diǎn)(restrictionpoint),控制細(xì)胞由靜止?fàn)顟B(tài)的G1進(jìn)入DNA合成期,相關(guān)的事件包括:DNA是否損傷?細(xì)胞外環(huán)境是否適宜?細(xì)胞體積是否足夠大?S期檢驗(yàn)點(diǎn):DNA復(fù)制是否完成?G2/M檢驗(yàn)點(diǎn):是決定細(xì)胞一分為二的控制點(diǎn),相關(guān)的事件包括:DNA是否損傷?細(xì)胞體積是否足夠大?中-后期檢驗(yàn)點(diǎn)(紡錘體組裝檢驗(yàn)點(diǎn)):任何一個(gè)著絲點(diǎn)沒有正確連接到紡錘體上,都會(huì)抑制APC的活性,引起細(xì)胞周期中斷。28.細(xì)胞骨架系統(tǒng)的組成和功能細(xì)胞骨架由微管、微絲和中間纖維

28、組成,微絲確定細(xì)胞表面特征、使細(xì)胞能夠運(yùn)動(dòng)和收縮,微管確定膜性細(xì)胞器的位置,幫助染色體分離和作為膜泡運(yùn)輸?shù)膶?dǎo)軌,中間纖維使細(xì)胞具有張力和抗剪切力。29.結(jié)合核仁功能說下核糖體的生發(fā)過程在光學(xué)顯微鏡下,核仁通常是勻質(zhì)的球形小體,一般有1-2個(gè),但也有多個(gè)。主要含蛋白質(zhì),是真核細(xì)胞間期核中最明顯的結(jié)構(gòu),在電鏡下顯示出的核仁超微結(jié)構(gòu)與胞質(zhì)中大多數(shù)細(xì)胞器不同,在核仁周圍沒有界膜包圍,可識(shí)別出3個(gè)特征性區(qū)域:纖維中心、致密纖維組分、顆粒組分。功能是進(jìn)行核蛋白體的生物發(fā)生的重要場(chǎng)所,即核仁是進(jìn)行rRNA的合成、加工和核蛋白體亞單位的裝配的重要場(chǎng)所。30.翻譯后轉(zhuǎn)運(yùn)與共翻譯轉(zhuǎn)運(yùn)的區(qū)別31.MPF的合成、組成

29、、G2-M期作用,如何證明?32.細(xì)胞骨架在細(xì)胞周期中的作用細(xì)胞骨架是指存在于真核細(xì)胞中、由蛋白質(zhì)亞基組裝而成的纖維網(wǎng)絡(luò)體系,主要包括微絲、微管和中間纖維等結(jié)構(gòu)。細(xì)胞骨架不僅在維持細(xì)胞形態(tài),承受外力、保持細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)的有序性方面起重要作用,而且還參與許多重要的生命活動(dòng)。在細(xì)胞周期中,微管結(jié)構(gòu)呈動(dòng)態(tài)變化,細(xì)胞分裂過程中形成的紡錘體微管分為3種類型:動(dòng)粒微管、極微管和星體微管,動(dòng)粒微管牽引染色體的運(yùn)動(dòng),極微管的滑動(dòng)和星體微管的解聚使細(xì)胞的兩極離得更遠(yuǎn)。33.試述與信號(hào)傳導(dǎo)有關(guān)的膜受體的類型與途徑與信號(hào)傳導(dǎo)有關(guān)的膜受體有:離子通道偶聯(lián)的受體、G蛋白偶聯(lián)的受體、與酶連接的受體。離子通道偶聯(lián)的受體是由多

30、亞基組成的受體離子通道復(fù)合體,本身既有信號(hào)結(jié)合位點(diǎn),有是離子通道,其跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)道無需中間步驟。蛋白偶連的受體是指外界信號(hào)與受體結(jié)合后,受體必須通過G蛋白的介導(dǎo)才能激活有關(guān)的酶,引起細(xì)胞效應(yīng)。他可分為以下傳導(dǎo)途徑:cAMP信號(hào)體系、cGMP信號(hào)體系、Ca2信號(hào)體系,磷脂酰基醇信號(hào)體系。與酶連接的受體是指一些生長(zhǎng)因子的受體,具有酪氨酸蛋白激酶活力素,當(dāng)被信號(hào)激活時(shí),受體本身的酪氨酸活化來完成信號(hào)的跨膜傳遞。34.簡(jiǎn)要說明G蛋白偶聯(lián)受體介導(dǎo)的信號(hào)通路有何特點(diǎn)?G蛋白偶連的受體是細(xì)胞表面由單條多肽經(jīng)7次跨膜形成的受體,該信號(hào)通路是指配體受體復(fù)合物與靶細(xì)胞(酶或離子通道)的作用要通過與G蛋白的偶聯(lián),在細(xì)

31、胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號(hào)跨膜傳遞到胞內(nèi),影響細(xì)胞的行為。根據(jù)產(chǎn)生第二信使的不同,它可分為:cAMP信號(hào)通路和磷脂?;夹盘?hào)通路。cAMP信號(hào)通路的主要效應(yīng)是激活靶細(xì)胞和開啟基因表達(dá),這是通過蛋白激酶A完成的。該信號(hào)途徑涉及的反應(yīng)鏈可表示為:激素G蛋白偶連受體G蛋白腺苷酸環(huán)化酶cAMP cAMP依賴的蛋白激酶A基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄。磷脂?;夹盘?hào)通路的最大特點(diǎn)是胞外信號(hào)被膜受體接受后,同時(shí)產(chǎn)生兩個(gè)胞內(nèi)信使,分別啟動(dòng)兩個(gè)信號(hào)傳遞途徑即IP3-Ca2和DG-PKC途徑,實(shí)現(xiàn)細(xì)胞對(duì)外界信號(hào)的應(yīng)答,35.概述受體酪氨酸激酶介導(dǎo)的信號(hào)通路的組成、特點(diǎn).及其主要功能。受體酪氨酸激酶又稱酪氨酸蛋白激酶

32、受體,是細(xì)胞表面一大類重要受體家族,包括6個(gè)亞族。它的胞外配體是可溶性或膜結(jié)合的多肽或蛋白類激素,包括胰島素和多種生長(zhǎng)因子。該信號(hào)通路的特點(diǎn)是: 激活機(jī)制為受體之間的二聚體化自磷酸化活化自身; 沒有特定的二級(jí)信使,要求信號(hào)有特定的結(jié)構(gòu)域; 有Ras分子開關(guān)的參與; 介導(dǎo)下游MAPK的激活。RTKRas信號(hào)通路是這類受體所介導(dǎo)的重要信號(hào)通路,具有廣泛的功能,包括調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖與分化,促進(jìn)細(xì)胞的存活,以及細(xì)胞代謝過程中的調(diào)節(jié)與校正。36.簡(jiǎn)述核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)和功能?核孔復(fù)合體是指鑲嵌在核孔上的一種復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。主要有以下四種結(jié)構(gòu)組分:胞質(zhì)環(huán):位于核孔邊緣的胞質(zhì)面一側(cè),又稱外環(huán);核質(zhì)環(huán):位于核孔邊緣的

33、核質(zhì)面一側(cè),又稱內(nèi)環(huán);輻:由核孔邊緣伸向中心,呈輻射狀八重對(duì)的纖維;栓:又稱中央栓。位于核孔中心,呈顆粒狀或棒狀。核孔復(fù)合體對(duì)于垂直于核膜孔中心的軸呈輻射狀八重對(duì)稱結(jié)構(gòu),而相對(duì)于平行核膜面則是不對(duì)稱的。核孔復(fù)合體的功能是核質(zhì)交換的雙向選擇性親水通道,是一種特殊的跨膜運(yùn)輸?shù)牡鞍踪|(zhì)復(fù)合體。他具有雙功能和雙向性。雙功能表現(xiàn)在兩種運(yùn)輸方式:被動(dòng)擴(kuò)散與主動(dòng)運(yùn)輸。雙向性表現(xiàn)在既介導(dǎo)蛋白質(zhì)的入核運(yùn)輸,又介導(dǎo)RNA及相關(guān)蛋白的出核運(yùn)輸。37.細(xì)胞連接包括幾種類型,及其各自的特點(diǎn)動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞連接按其功能分三大類:緊密連接、錨定連接和通訊連接。緊密連接的主要作用是封閉相鄰細(xì)胞間的接縫,防止溶液中的分子沿細(xì)胞間隙

34、滲入體內(nèi),從而保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定;特點(diǎn)是通過跨膜蛋白相連。錨定連接通過細(xì)胞的骨架系統(tǒng)將細(xì)胞或細(xì)胞與基質(zhì)相連成一個(gè)堅(jiān)挺、有序的細(xì)胞群體,使細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間具有抵抗機(jī)械張力的牢固粘合。參與錨定連接的骨架系統(tǒng)可分兩種不同形式,與中間纖維相連的錨定連接主要包括橋粒和半橋粒;與肌動(dòng)蛋白纖維相連的錨定連接主要包括粘合帶與粘合斑。間隙連接是動(dòng)物細(xì)胞間最普遍的細(xì)胞連接,是在相互接觸的細(xì)胞之間建立的有孔道的、由連接蛋白形成的親水性跨膜通道,允許無機(jī)離子、第二信使及水溶性小分子量的代謝物質(zhì)從中通過,從而溝通細(xì)胞達(dá)到代謝與功能的統(tǒng)一。38.核纖層的形態(tài)結(jié)構(gòu),及其同中間纖維的共同點(diǎn)核纖層纖維的直徑為10n

35、m左右,縱橫排列整齊,呈正交狀編織成網(wǎng)絡(luò),分布于內(nèi)層核膜與染色質(zhì)之間。一般認(rèn)為核纖層結(jié)構(gòu)整體觀呈一球狀或籠狀網(wǎng)絡(luò),切面觀 呈片層結(jié)構(gòu)。在分裂期細(xì)胞,核纖層解體,以單體形式存在于胞質(zhì)中。核纖層是位于細(xì)胞核內(nèi)層核膜下的纖維蛋白片層或纖維網(wǎng)絡(luò),核纖層由1至3種核纖層蛋白多肽組成。核纖層與中間纖維有許多共同點(diǎn):(1)兩者均形成10nm纖維;(2)兩者均能抵抗高鹽和非離子去垢劑的抽提;(3)某些抗中間纖維蛋白的抗體能與核纖層發(fā)生交叉反應(yīng),說明中間纖維蛋白與核纖層蛋白分子存 在相同的抗原決定簇(Osborn Weber, 1987);(4)兩者在結(jié)構(gòu)上有密切聯(lián)系,核纖層成為核骨架與中間纖維之間的橋梁。39

36、.泛素降解蛋白的途徑1.泛素的活化:泛素甘氨酸端的羧基連接到泛素活化酶E1的巰基,這個(gè)步驟需要以ATP作為能量,最終形成一個(gè)泛素和泛素活化酶E1之間的硫酯鍵。 2.E1將活化后的泛素通過交酯化過程交給泛素結(jié)合酶E2。 3.泛素連接酶E3將結(jié)合E2的泛素連接到目標(biāo)蛋白質(zhì)上并釋放E2,形成特定的泛素化的蛋白質(zhì)。4.泛素化的蛋白質(zhì)被特定的蛋白酶體識(shí)別并結(jié)合,最終在蛋白酶的催化下蛋白質(zhì)分解為短肽或氨基酸。40.核糖體中蛋白組分同RNA的功能rRNA具有肽酰轉(zhuǎn)移酶的活性;為tRNA提供結(jié)合位點(diǎn)(A位點(diǎn)、P位點(diǎn)和E位點(diǎn));為多種蛋白質(zhì)合成因子提供結(jié)合位點(diǎn);在蛋白質(zhì)合成起始時(shí)參與同mRNA選擇性地結(jié)合以及在

37、肽鏈的延伸中與mRNA結(jié)合;核糖體大小亞單位的結(jié)合、校正閱讀(proofreading)、無意義鏈或框架漂移的校正、以及抗菌素的作用等都與rRNA有關(guān)。以下考題由363912577整理提供,一并感謝!41.蛋白質(zhì)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的機(jī)制(信號(hào)假說)?答:1.核糖體上信號(hào)肽合成;2.胞質(zhì)中信號(hào)識(shí)別顆粒(SRP)識(shí)別信號(hào)肽,形成SRP-核糖體復(fù)合體,蛋白質(zhì)合成暫停;3.核糖體與ER膜結(jié)合,形成SRP-SRP受體-核糖體復(fù)合體;4.SRP脫離并參加再循環(huán),核糖體蛋白質(zhì)合成繼續(xù)進(jìn)行;5.信號(hào)肽被切除;6.合成繼續(xù)進(jìn)行;7.核糖體在分離因子作用下被分離;8.成熟的蛋白質(zhì)合成暫停。42.簡(jiǎn)述鈉鉀泵的本質(zhì)和工作原理

38、。答:鈉鉀泵是膜上的一種能夠同時(shí)運(yùn)輸Na+和K+的ATP酶,本身就是Na+、K+-ATP酶,具有載體和酶的雙重活性。它由大、小兩個(gè)亞基組成,大亞基為貫穿膜全層的脂蛋白,為催化部分;小亞基為細(xì)胞膜外側(cè)半嵌的糖蛋白。在Na+和K+存在時(shí),Na+、K+-ATP酶分解1個(gè)分子ATP,產(chǎn)生的能量通過Na+-K+泵的構(gòu)象變化,運(yùn)送3個(gè)Na+從細(xì)胞內(nèi)低濃度側(cè)運(yùn)到細(xì)胞外高濃度側(cè),同時(shí)把兩個(gè)K+從細(xì)胞外低濃度側(cè)運(yùn)到細(xì)胞內(nèi)高濃度側(cè)。基本過程:1.膜內(nèi)側(cè)Na+、Mg+與酶結(jié)合;2.酶被激活,ATP分解,產(chǎn)生的高能磷酸根使酶發(fā)生磷酸化;3.酶構(gòu)象改變,Na+結(jié)合位點(diǎn)暴露到外側(cè),酶與Na+親合力變低;4. Na+被釋放

39、到細(xì)胞外,酶和K+親合力變高,K+結(jié)合到酶上;5.酶發(fā)生去磷酸化;6.酶構(gòu)象復(fù)原,K+被釋放到細(xì)胞內(nèi)側(cè);7.恢復(fù)至初始狀態(tài)。如此反復(fù)進(jìn)行。43.G蛋白耦聯(lián)受體介導(dǎo)的PIP2信號(hào)途徑?答:膜受體與其相應(yīng)的信號(hào)分子結(jié)合后,通過膜上的G蛋白活化磷脂酶C(PLC),催化細(xì)胞膜上的4,5-二磷酸脂酰肌醇(PIP2)分解為兩個(gè)重要的細(xì)胞內(nèi)第二信使:甘油二脂(DAG)和1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)IP3動(dòng)員細(xì)胞內(nèi)Ca2+庫中的Ca2+到細(xì)胞質(zhì)中。于是細(xì)胞外信號(hào)就是通過這樣一條路線產(chǎn)生了IP3、DAG和Ca2+等第二信使,進(jìn)而使細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)外界信號(hào)(第一信使)的相應(yīng)反應(yīng)。44.G蛋白的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和作用機(jī)制?答

40、:G蛋白是指任何可與鳥苷酸結(jié)合的蛋白質(zhì)的總稱,位于細(xì)胞膜胞液面的外周蛋白。由、3個(gè)不同的亞單位構(gòu)成,具有結(jié)合GTP或GDP的能力,并具有GTP酶的活性。G蛋白有兩種構(gòu)象,一種以三聚體存在并與GDP結(jié)合,為非活化型,另一種構(gòu)象是亞基與GTP結(jié)合并導(dǎo)致二聚體脫落,為活化型。作用機(jī)制:靜息狀態(tài)下,G蛋白以異三聚體的形式存在于細(xì)胞膜上,并與GDP結(jié)合,而與受體呈分離狀態(tài)。當(dāng)配體與相應(yīng)受體結(jié)合時(shí),觸發(fā)了受體蛋白分子發(fā)生空間構(gòu)象的改變,亞單位轉(zhuǎn)而與GTP結(jié)合,與二聚體分離,具有了GTP酶活性,使GTP分解釋放磷酸根,生成GDP,誘導(dǎo)亞單位構(gòu)象改變,使之與GDP親合力增強(qiáng),最后與二聚體結(jié)合,回到靜息狀態(tài)。亞

41、單位的濃度越高,越趨向于形成靜息狀態(tài)的G蛋白異三聚體,G蛋白的作用就越小。45.G蛋白耦聯(lián)受體介導(dǎo)的cAMP信號(hào)途徑?答:激素、神經(jīng)遞質(zhì)等第一信使與相應(yīng)的膜受體結(jié)合后,可以激活G蛋白,并活化位于細(xì)胞膜上的G蛋白效應(yīng)蛋白腺苷酸環(huán)化酶,使ATP轉(zhuǎn)化生成第二信使cAMP,cAMP可進(jìn)一步分別引起相應(yīng)底物的磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)、離子通道活化等效應(yīng),參與調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝、增殖、分化等不同生理過程。絕大多數(shù)細(xì)胞中cAMP進(jìn)一步特異地活化cAMP依賴性蛋白激46.如何理解高爾基體在蛋白質(zhì)分選中的樞紐作用?答:在ER合成的蛋白質(zhì),通過轉(zhuǎn)運(yùn)小泡運(yùn)輸?shù)紾C,這種轉(zhuǎn)運(yùn)小泡被COP所包繞;蛋白質(zhì)在GC內(nèi)進(jìn)行加工和修飾,再被分揀

42、送往細(xì)胞的相關(guān)部位。反面GC網(wǎng)絡(luò)(TGN)執(zhí)行分揀功能,包裝到不同類型的小泡,并運(yùn)送到目的地, ,包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、細(xì)胞質(zhì)膜、細(xì)胞外和核膜等。因此GC在蛋白質(zhì)分選中具有樞紐作用。47.何謂細(xì)胞周期?并說明間期各時(shí)相的生物合成活動(dòng)。答:細(xì)胞周期即從親代細(xì)胞分裂結(jié)束到子代細(xì)胞分裂結(jié)束之間的間隔時(shí)期。細(xì)胞周期分為分裂間期和分裂期,其中間期分為G1期、S期和G2期,分裂期分為前期、中期、后期、末期。G1期:是細(xì)胞生長(zhǎng)的主要階段,細(xì)胞周期中所占比例最大,主要生化活動(dòng)是合成大量RNA和蛋白質(zhì),一級(jí)蛋白質(zhì)磷酸化和細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)功能增強(qiáng)等變化,為細(xì)胞進(jìn)入S期準(zhǔn)備必要的物質(zhì)基礎(chǔ)。G1期是決定細(xì)胞增殖狀態(tài)

43、的關(guān)鍵階段。S期:細(xì)胞內(nèi)主要進(jìn)行DNA的復(fù)制、組蛋白和非組蛋白等染色體蛋白的合成。另外,在S期還啊不斷合成與DNA復(fù)制有關(guān)的酶,如DNA聚合酶、DNA連接酶等。新中心粒也在S期開始合成。G2期:染色質(zhì)進(jìn)行性地凝聚或螺旋化。其主要任務(wù)是為M期的細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化做準(zhǔn)備,故G2期也成為絲裂前期。細(xì)胞內(nèi)主要合成一些和細(xì)胞分裂有關(guān)的蛋白質(zhì)和RNA,如微管蛋白等,這是細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂所必需的。M期:即分裂期。RNA合成停止、蛋白質(zhì)合成減少以及染色體高度螺旋化。前期:主要特征是染色質(zhì)凝集、核膜崩潰、核仁消失和紡錘體形成。中期:指從核膜消失到有絲分裂器形成的全過程。染色體最大限度地被壓縮,由動(dòng)粒微管牽引排列在紡錘

44、體中部的一個(gè)平面上,呈現(xiàn)出典型中期染色體的形態(tài)特征。后期:由于某種特殊信號(hào)的觸發(fā),每條染色體上成對(duì)的動(dòng)粒開始分離,使兩條染色單體分別被緩慢地拉向各自所面對(duì)的紡錘體極。末期:是從染色體到達(dá)紡錘體的兩極開始,直至形成兩個(gè)子細(xì)胞的時(shí)期。動(dòng)粒微管消失,極微管則繼續(xù)延長(zhǎng)。在每一組染色單體周圍開始重新生成核膜,濃集的染色單體又逐漸伸展松弛,在前期消失的核仁開始重新出現(xiàn)。48.微管和微絲在細(xì)胞分裂中如何控制核分裂與胞質(zhì)分裂? 答:核分裂中:分裂前期中心粒起微管組織中心的作用,許多微管的(-)端固定在中心粒的外周物質(zhì)中,(+)端呈輻射狀指向四周。中心粒分別移向細(xì)胞兩極,微管加速聚合,形成紡錘體。中期染色體由動(dòng)

45、粒微管牽引排列在紡錘體中部的一個(gè)平面(赤道板)上。后期染色體在微管的作用下被緩慢地拉向各自所在的紡錘體極,動(dòng)力來自于紡錘體微管兩個(gè)獨(dú)立的運(yùn)動(dòng)過程:動(dòng)力微管(+)不斷解聚,動(dòng)粒微管縮短;極微管(+)加速聚合,極微管不斷延長(zhǎng),使紡錘體的兩極之間距離加大。末期動(dòng)粒微管消失,極微管則繼續(xù)延長(zhǎng)。胞質(zhì)分裂中:細(xì)胞質(zhì)以斷裂的方式進(jìn)行分裂,在細(xì)胞中央兩個(gè)子代細(xì)胞核之間,肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白在細(xì)胞膜下聚集,形成收縮環(huán)。收縮環(huán)依靠肌動(dòng)蛋白與細(xì)胞膜發(fā)生連接,通過微絲滑動(dòng),收縮環(huán)直徑變小,使細(xì)胞膜凹陷,產(chǎn)生與紡錘體軸相垂直的分裂溝,最后斷裂成兩個(gè)分開的子細(xì)胞。49.無性繁殖可以保持有機(jī)體原有性狀,而有性繁殖則能促進(jìn)變異

46、。說明為什么有絲分裂使前者成為可能、而減數(shù)分裂則使后者成為可能?答:有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞所擁有的核遺傳物質(zhì)與親代細(xì)胞幾乎是完全一樣的,S期DNA復(fù)制,在分裂期中被均等分配至子細(xì)胞中。這使得子代能夠保持有機(jī)體原有形狀,并且細(xì)胞周期中存在“檢查點(diǎn)”的調(diào)控機(jī)制,DNA損傷后,激活了相應(yīng)的檢查點(diǎn)機(jī)制,使細(xì)胞周期進(jìn)程延緩或停滯,目的是修復(fù)損傷的DNA。細(xì)胞周期中公有四個(gè)檢查點(diǎn),分別為G1S期檢查點(diǎn)、S期檢查點(diǎn)、G2M期檢查點(diǎn)、中/后期檢查點(diǎn)?!皺z查點(diǎn)”機(jī)制更大地保證了有絲分裂過程中遺傳物質(zhì)復(fù)制的準(zhǔn)確無誤,為無性生殖保持有機(jī)體原有形狀提供了可能性。減數(shù)分裂是有性生殖生物生殖細(xì)胞形成過程中的一種特殊分裂方式

47、,它為有性生殖過程中創(chuàng)造變異提供了遺傳的物質(zhì)基礎(chǔ)。通過非同源染色體的隨機(jī)組合,各對(duì)非同源染色體之間以自由組合進(jìn)入配子,形成的配子可產(chǎn)生多種多樣的遺傳組合,雌雄配子結(jié)合后就可出現(xiàn)多種多樣的變異個(gè)體,使物種得以繁衍和進(jìn)化。在減數(shù)分裂的粗線期,由于非姐妹染色單體上對(duì)應(yīng)片段可能發(fā)生交換,使同源染色體上的遺傳物質(zhì)發(fā)生重組,形成不同于親代的遺傳變異。因此,減數(shù)分裂為有性繁殖促進(jìn)變異提供了可能。50.如何理解發(fā)育過程中細(xì)胞分化潛能的變化?答:胚胎發(fā)育過程中,細(xì)胞分化潛能逐漸由全能局限為多能,最后成為穩(wěn)定型單能的趨向,是細(xì)胞分化的普遍規(guī)律。細(xì)胞潛能性是隨著分化的進(jìn)程逐漸降低的,因此,細(xì)胞分化可以視為分化潛能逐

48、漸限制的過程。如最初的受精卵和早期的胚胎細(xì)胞具有最強(qiáng)大的全能性,能夠發(fā)育成為完整的個(gè)體,而后來形成的干細(xì)胞(如:骨髓干細(xì)胞)只有幾種分化能力(多能性),最終形成的血細(xì)胞,骨細(xì)胞等僅有一種功能,具有單能性。51.簡(jiǎn)述干細(xì)胞的基本特性和ES細(xì)胞的形態(tài)特征答:干細(xì)胞是一類具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞,可以分化產(chǎn)生一種以上的“專業(yè)”細(xì)胞。干細(xì)胞的特點(diǎn)包括:1.屬非終末分化細(xì)胞,終身保持未分化和低分化特征,具有多向分化潛能;2.干細(xì)胞具有無線的增殖分裂能力,能夠進(jìn)行自我更新;3.干細(xì)胞可連續(xù)分裂幾代,也可在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)處于靜止?fàn)顟B(tài)。干細(xì)胞的增殖特性:增殖的緩慢性和自穩(wěn)定性。增殖速度緩慢,保證遺傳物質(zhì)的穩(wěn)定

49、和保持干細(xì)胞數(shù)目的穩(wěn)定。ES細(xì)胞即胚胎干細(xì)胞,是從早期囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)經(jīng)體外培養(yǎng)、分離、克隆得到的具有發(fā)育多能性的細(xì)胞。ES細(xì)胞具有以下特點(diǎn):1.體外培養(yǎng)可以無線增殖;2.可以長(zhǎng)期保持原始未分化的狀態(tài);3.可以分化成為衍生于3個(gè)胚層的各類組織細(xì)胞,包括生殖細(xì)胞。ES細(xì)胞都具有相似的形態(tài)特點(diǎn),與早起胚胎細(xì)胞相似,細(xì)胞較小,核質(zhì)比高,細(xì)胞明顯,有一個(gè)或多個(gè)核仁,染色質(zhì)較分散,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)除游離核糖體外,其他細(xì)胞器很少;體外培養(yǎng)細(xì)胞呈多層聚落狀生長(zhǎng),緊密堆積在一起,無明顯細(xì)胞界限。具有穩(wěn)定的二倍體核型。52.簡(jiǎn)述引起細(xì)胞衰老的可能原因。答:一、遺傳決定學(xué)說:衰老本身就是一個(gè)遺傳過程,即在正常情況下控制生長(zhǎng)發(fā)育的基因在各個(gè)發(fā)育時(shí)期有序地開啟和關(guān)閉。體細(xì)胞突變學(xué)說認(rèn)為在生物體的一生中,隨機(jī)的和自發(fā)的突變能損傷某些分裂后細(xì)胞的基因和染色體,并逐漸增

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