縣級cdc生物安全

1、縣級縣級CDC生物安全生物安全1前前 言言u事實(shí):炭疽粉末生物恐怖攻擊、SARS災(zāi)難、新加坡 和中國臺(tái)灣和北京實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染、最近的豬鏈球菌 突發(fā)衛(wèi)生事件等等u真理:人類與傳染病 (生物威脅)的斗爭任務(wù)與人類共存u任何國家任何時(shí)候都不能不對來自自然的、人為的生 物威脅采取有效的對策，以保護(hù)公眾健康;u對策:各國衛(wèi)生部門不得不投入大量的人力和物力建立 生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室，以滿足臨床檢驗(yàn)和研究工作之需。u障礙:然而,實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染在世界范圍內(nèi)頻頻出現(xiàn)又給 障礙 我們增加了重重困難.為此,筆者就實(shí)驗(yàn)室操作中有害氣 溶膠的發(fā)生及其危害控制做一綜述.2內(nèi)容提要內(nèi)容提要u生物安全的必要性u 世界上存在生物威脅

2、u實(shí)驗(yàn)室生物安全的必要性u 實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染u縣級實(shí)驗(yàn)室生物安全措施u 二級生物安全實(shí)驗(yàn)室要點(diǎn)3一、世界上存在生物威脅一、世界上存在生物威脅u二戰(zhàn)后半個(gè)多世紀(jì)以來，不管如何發(fā)展，世界 局部戰(zhàn)爭或沖突每天都在發(fā)生，許多人們生活 在水深火熱之中,這個(gè)星球很不安寧。近年來， 恐怖活動(dòng)猖狂，已成為世界公害，害人的惡魔， 甚至成為大規(guī)模戰(zhàn)爭的導(dǎo)火索。專家們認(rèn)為世 界上生物恐怖和生物戰(zhàn)的潛在威脅不是減少了 而是增加了。 特別是生物新技術(shù)突飛猛進(jìn)地發(fā) 展給生物武器研制者帶來了新的契機(jī)。有人稱： 武器發(fā)展進(jìn)入了生物武器的新時(shí)期。41.傳染病的威脅依然存在傳染病的威脅依然存在u1）已經(jīng)控制的傳染病有死灰復(fù)燃之勢:

3、 例如結(jié)核病在世界范圍內(nèi)發(fā)病率、死亡率大有上升之 勢。據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)告，目前全球有19億人 受到結(jié)核菌感染，有肺結(jié)核病人2000萬，每年 因結(jié)核病死亡人數(shù)達(dá)300萬，是其他傳染病死 亡人數(shù)的總和。在我國已有約5億人感染過結(jié) 核菌，有肺結(jié)核病人600萬，占全球結(jié)核病人 總數(shù)的四分之一，每年死亡約 13萬人，已經(jīng)成 為青年的第一殺手。有人稱這等于又出現(xiàn)了新 傳染病。已知的耐藥株結(jié)核桿菌引起新的傳染 病51.傳染病的威脅依然存在傳染病的威脅依然存在u2）傳染病的預(yù)防控制形勢不容樂觀 : 傳染病中有的尚沒能徹底控制，有的還 缺乏有效的治療方法，特別是病毒病 ，例如艾滋病和其他一些病毒病。世界上 已經(jīng)

4、出現(xiàn)的馬爾堡、埃波拉、拉沙熱等 至今尚沒有被征服。61.傳染病的威脅依然存在傳染病的威脅依然存在u3）新的傳染病不斷出現(xiàn) : 近20多年新的 傳染病不斷出現(xiàn)，例如艾滋病、 傳染病不斷出現(xiàn)，例如艾滋病、SARS 、 馬爾堡、埃波拉、拉沙熱等。不完全統(tǒng) 等 計(jì)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了30多種，且2/3已經(jīng)進(jìn)入我 國。這些傳染病往往造成突發(fā)的衛(wèi)生事 件，有的氣溶膠傳播，防不勝防，措手 不及，造成巨大災(zāi)難71.傳染病的威脅依然存在傳染病的威脅依然存在u4）食源性傳染病 （food borne infectious )： 指通過飲食媒介經(jīng)消化道感染的疾病。 指通過飲食媒介經(jīng)消化道感染的疾病。 1997年第 53屆世界

5、衛(wèi)生大會(huì)上，世界衛(wèi)生組織將食品安全列為重要議題， 并指出在過去的20年 里，食源性疾病的發(fā)生率明顯上升。在發(fā)達(dá)國家，估計(jì)每年有 13以上的人群感染食源性疾病。美國每年約有 7000萬 8000萬人患食源 性疾病，其中32.5萬人入院治療，5000人死亡。82.世界上存在生物恐怖世界上存在生物恐怖u1）生物恐怖（bio-terror）：生物恐怖 是遇到生物因子形成的危險(xiǎn)和邪惡產(chǎn)生 的極度恐懼。其特點(diǎn)是具有想象或未來 時(shí)間較長的憂慮或恐懼。 生物恐怖活動(dòng) 可利用的病原體種類很多、攻擊面寬、 可利用的病原體種類很多、攻擊面寬、 實(shí)施手段多種多樣、突然發(fā)生、 真真假 假難以預(yù)料和防護(hù)92.世界上存在生

6、物恐怖世界上存在生物恐怖u2）生物戰(zhàn)（bio-war）：是指用高致病生物因 子進(jìn)行的戰(zhàn)爭。 u目前世界發(fā)達(dá)國家的生物武器相當(dāng)先進(jìn)， 武器 化能力很強(qiáng)； 一些第三世界國家也掌握生物武 被稱為窮人的原子彈； 一旦發(fā)生造成的災(zāi) 難不可設(shè)想。 內(nèi)外有關(guān)專家認(rèn)為發(fā)生生物戰(zhàn) 的潛在危機(jī)正在增加，令人憂慮。 的潛在危機(jī)正在增加，令人憂慮?；蛭淦?（gene weapon）是生物武器的新發(fā)展， 指用基因工程研制的生物武器。 現(xiàn)代生物技術(shù) 的崛起已經(jīng)成為“雙刃劍”102.世界上存在生物恐怖世界上存在生物恐怖u歷史上，有人曾多次揮舞科技發(fā)展的“雙刃劍”，在 其發(fā)明創(chuàng)造新生活的同時(shí)，也在用自己的發(fā)明毀滅自 己，毀

7、滅人類。生物技術(shù)與其他學(xué)科一樣，永遠(yuǎn)是 “雙刃劍”，一方面為人類造福，另一方面被少數(shù)人 利用研制基因武器，殘害他人?，F(xiàn)代生物技術(shù)能改變 生物戰(zhàn)劑的攻擊性能。改變其抗原性使之難以診斷； 增強(qiáng)其致病性以加強(qiáng)殺傷力； 增強(qiáng)其存活力以延遲攻 擊時(shí)間和擴(kuò)大攻擊面積；增強(qiáng)其抗藥性造成治療困難。 國內(nèi)外專家十分擔(dān)心和關(guān)注基因武器的發(fā)展并推測， 國內(nèi)外專家十分擔(dān)心和關(guān)注基因武器的發(fā)展并推測， 基因武器能夠進(jìn)行對人種的特異性攻擊。113.外來病外來病u外來病(exotic disease) 是指國內(nèi)沒有 外來病 的或已經(jīng)消滅的疾病，例如馬爾堡、埃波拉、拉沙熱、天花等。這種 這種威脅隨著 這種 各國往來的頻繁和交

8、通的便利發(fā)生的可 能性大增，而且傳入的方式快捷。特別 是呼吸道病毒傳染病爆發(fā)性強(qiáng)，傳播途 經(jīng)難以控制。有效的預(yù)防治療方法較少。124.實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染u實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染 (laboratory-associated infection) ：由于從事實(shí)驗(yàn)活動(dòng)而發(fā)生的與操 作的生物因子相關(guān)的感染。 在研究病原微生物 中存在某種風(fēng)險(xiǎn)， 如果在管理和操作病原體中 一旦有所疏漏或錯(cuò)誤就會(huì)發(fā)生實(shí)驗(yàn)室感染， 造 成威脅， 進(jìn)而可能造成病原體擴(kuò)散或傳染病的 流行。例如，新加坡、中國臺(tái)灣、 北京的實(shí)驗(yàn) 室感染的悲劇還歷歷在目。所以， 室感染的悲劇還歷歷在目。所以，各國對實(shí)驗(yàn) 室生物安全格外重視。135

9、.醫(yī)院感染醫(yī)院感染u醫(yī)院感染 (hospital-acquired infection)：醫(yī)院感染也叫醫(yī)院獲得性感染或院內(nèi)感染, 指在醫(yī)院內(nèi)發(fā)生的一切 感染。特別是對傳染病的患者的交叉感 染更為嚴(yán)重，2003年SARS期間的醫(yī)院 交叉感染（20%）不堪回首。146.人畜共患病人畜共患病u人畜共患病 (zoonosis): 人和動(dòng)物間相 互傳播的傳染病。 人的傳染病常常由動(dòng) 物傳播, 可通過接觸經(jīng)皮膚和粘膜感染, 也可經(jīng)消化道進(jìn)入體內(nèi), 也可經(jīng)消化道進(jìn)入體內(nèi) ,更可通過氣溶膠 經(jīng)呼吸道感染。人高致病禽流感、 瘋牛 病等。 近來，高致病禽流感肆虐所造成 的損失不就在眼底嗎！151.微生物氣溶膠與實(shí)

10、驗(yàn)室感染微生物氣溶膠與實(shí)驗(yàn)室感染uPike (1965,1976,1978),對近4000例實(shí)驗(yàn)室相 關(guān)感染統(tǒng)計(jì)分析表明，實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染主要發(fā) 生在研究實(shí)驗(yàn)室、臨床診斷實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 室,其中弄清原因的(針刺、鼠咬、食入)實(shí)驗(yàn)室 感染只占全部感染的18，不明原因的實(shí)驗(yàn)室 感染卻高達(dá)82%. u后來得知,在這些不明原因的實(shí)驗(yàn)室感染中，大多數(shù)是因?yàn)樵诓僮鞑≡⑸飼r(shí)形成了感染性氣溶膠并在實(shí)驗(yàn)室中擴(kuò)散，工作人員和有關(guān)人 氣溶膠 員暴露后發(fā)生了空氣傳播感染。16實(shí)驗(yàn)室空氣傳播與感染概述實(shí)驗(yàn)室空氣傳播與感染概述u實(shí)驗(yàn)室氣溶膠的危害u古今中外,在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室中，大部 分傳染性和致病性較強(qiáng)的病原體都發(fā)生

11、 過實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染,并且氣溶膠傳播感染 非常嚴(yán)重.下面就幾類病原微生物的實(shí)驗(yàn) 室感染傳播途徑作扼要介紹。各種病原 體實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染的資料匯總.17細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室感染途經(jīng)細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室感染途經(jīng)u菌種 皮粘 吸入 食入 動(dòng)物 u炭疽 + + + +u百日 + + - -u布氏 + + ？ +u土拉 + + + +u結(jié)核 + + ? ?u類鼻 ? + - ?u傷寒 + ? + ?u梅毒 + + - -u霍亂 + - + -u鼠疫 + + + +18病毒實(shí)驗(yàn)室感染途徑病毒實(shí)驗(yàn)室感染途徑u病毒 皮粘 吸入 食入 動(dòng)物u漢坦 + + + +u猴皰疹 + ？ ？ +uHIV + - ？ -u拉沙 + + + +u馬

12、爾堡 + + - +u埃博拉 + + - +u狂犬 + + - +u委馬 + + - +19實(shí)驗(yàn)室真菌毒素感染及其他實(shí)驗(yàn)室真菌毒素感染及其他u種類 皮粘 吸入 食入 動(dòng)物u酷氧 + + ？ +u莢膜 + + - -u肉毒 + + + -u葡萄 + + + -u錐蟲 + + - -202.操作產(chǎn)生氣溶膠的情況操作產(chǎn)生氣溶膠的情況u曾用安德森空氣微生物采樣器(Andersen Sampler)測定了一些實(shí)驗(yàn)室操作過程中產(chǎn)生微 生物氣溶膠顆粒的大小。結(jié)果發(fā)現(xiàn)， u攪拌粉碎器產(chǎn)生的氣溶膠顆粒中，粒徑5m 的占98以上。 u凍干培養(yǎng)物產(chǎn)生的氣溶膠顆粒中，粒徑5m 的占80 。 u其他操作如收取雞胚培養(yǎng)液

13、、用吸管吹吸、混均、離心懸液、超聲波粉碎感染性材料、摔碎 菌液瓶等所產(chǎn)生的微生物氣溶膠顆粒，其平均 粒子直徑都5m。21實(shí)驗(yàn)室氣溶膠類別兩大類：實(shí)驗(yàn)室氣溶膠類別兩大類：u一類是 “液滴核” (Droplet nuclei)氣溶 膠，這種氣溶膠的產(chǎn)生是由于外力作用 于含有微生物的液體，如液體標(biāo)本、培 養(yǎng)液形成顆粒進(jìn)入空氣,較大的很快沉積 在各種表面上形成了含有微生物的塵埃, 較小的粒子水份很快蒸發(fā)形成 “液滴核” 成為非常小的顆粒(24m)，分散在空 氣之中，能夠漂浮較長的時(shí)間和擴(kuò)散較 遠(yuǎn)的距離.22干粉氣溶膠干粉氣溶膠u由于外力作用于干燥的培養(yǎng)物或塵埃粒 子，懸浮于空氣之中，形成粉塵氣溶膠。

14、其中包括微生物干燥過程的污染和再生 氣溶膠.經(jīng)過現(xiàn)代技術(shù)加工的微生物干粉 可以做到:低含水量/粒子大小適合/分散 度強(qiáng),極易被人體吸入感染.23影響氣溶膠感染的因素影響氣溶膠感染的因素u“感染力”、“致病力”、“毒力”、 “存活力”,氣 溶膠的濃度、粒子大小 粒子大小、其它的粒子特性,以及當(dāng)時(shí)工 粒子大小 作人員防護(hù)優(yōu)劣和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的微小氣候條件等。 u粒徑50100m的液滴很快沉降在各種表面上，如果沉降在傷口或粘膜上感染的機(jī)會(huì)很大;u粒徑10至50m的飛沫可以擴(kuò)散,但大部分不易吸入呼吸道,最終也是沉降; u5至10m粒子可隨著吸入的空氣進(jìn)入氣管、支氣管以上的呼吸道,造成一定危害;u粒徑 5m的

15、顆粒被人吸入后可以滯留在肺的深部 進(jìn)行繁殖和擴(kuò)散, 其危害最大。24實(shí)驗(yàn)室微生物氣溶膠的產(chǎn)生實(shí)驗(yàn)室微生物氣溶膠的產(chǎn)生u總之 實(shí)驗(yàn)室中許多操作過程可以產(chǎn)生微生 物氣溶膠，并隨空氣擴(kuò)散而污染實(shí)驗(yàn)室 的空氣，當(dāng)工作人員吸入了污染的空氣， 便可以引起實(shí)驗(yàn)室相關(guān)感染(Laboratoryassociated infection)表1列出能夠產(chǎn)生微 生物氣溶膠的實(shí)驗(yàn)活動(dòng).25產(chǎn)生微生物氣溶膠的操作產(chǎn)生微生物氣溶膠的操作(1)u接種 u吸液注射 u離心 u解剖 u微生物培養(yǎng)和劃線培養(yǎng); u培養(yǎng)介質(zhì)中“冷卻”帶菌接種環(huán); u燃燒帶菌接種環(huán); u用吸管吹打混合微生物懸液; u吸液管中菌懸液落在固體表面; u排除

16、注射器中的空氣; u從塞子中拔出針頭; u接種動(dòng)物;26產(chǎn)生微生物氣溶膠的操作產(chǎn)生微生物氣溶膠的操作(2)u針頭從注射器上脫落噴出毒液; u高速離心離心管破裂 u皮毛沒有消毒或消毒不徹底 u刀、鋸等操作 u血液噴發(fā) u攪拌機(jī)、混合器、超聲波儀和混合用的儀器; u灌注和倒入液體； u打開培養(yǎng)容器； u感染性材料的溢出； u真空凍干和過濾； u接種雞胚和培養(yǎng)物的收取。27產(chǎn)生微生物氣溶膠的操作產(chǎn)生微生物氣溶膠的操作(3)u小結(jié) u資料表明,對276種操作進(jìn)行了測試，其中239 種操作可以產(chǎn)生微生物氣溶膠，占全部操作的 86.6。將各種操作歸納為21大項(xiàng)，按其產(chǎn)生 微生物氣溶膠顆粒的多少，分為重度、

17、中度和 輕度三級。特別指出是,有些工作需要反復(fù)多次 操作,即使一次操作產(chǎn)生的氣溶膠并不多,但由 于多次操作同樣可以在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的微 生物氣溶膠，對工作人員造成嚴(yán)重危害。28操作一次可產(chǎn)生各種嚴(yán)重程度微操作一次可產(chǎn)生各種嚴(yán)重程度微 生物生物氣溶膠的活動(dòng)氣溶膠的活動(dòng)輕度輕度(10個(gè)顆粒個(gè)顆粒) 中度中度(11100個(gè)顆粒個(gè)顆粒) 重度重度(100個(gè)顆粒個(gè)顆粒)玻片凝集試驗(yàn)； 腹腔接種動(dòng)物 離心時(shí)離心管破裂傾倒毒液； 局部不涂消毒劑 打碎干燥菌種管；火焰上灼熱接種環(huán) 接種雞胚和抽取培養(yǎng)液 摔碎帶有培養(yǎng)物的 平皿顱內(nèi)/雞胚接種；試驗(yàn)動(dòng)物尸體解剖 用乳缽研磨動(dòng)物組織 注入、傾倒、混懸毒液 毒液滴落

18、在不同表面上 從安瓿中抽取毒液； 接種環(huán)接種平皿 打開培養(yǎng)容器的螺旋瓶蓋打開干燥菌種安瓿； 攪拌后立即打開攪拌器蓋; 小白鼠鼻內(nèi)接種； 注射器針尖脫落噴出毒液 刷衣服 拍打衣服293.實(shí)驗(yàn)室感染的控制原理實(shí)驗(yàn)室感染的控制原理u實(shí)驗(yàn)室空氣傳播與感染主要由三個(gè)過程: u一是微生物氣溶膠的產(chǎn)生， u二是微生物氣溶膠的擴(kuò)散, 三是微生物氣溶膠人體暴露和吸入。 u三是微生物氣溶膠人體暴露和吸入 u因此，要控制或減少實(shí)驗(yàn)室空氣傳播和感染，要有相應(yīng)針對的生物安全措施， 以控制實(shí)驗(yàn)室微生物氣溶膠感染的三個(gè)過程。30改進(jìn)操作技術(shù)避免氣溶膠產(chǎn)生改進(jìn)操作技術(shù)避免氣溶膠產(chǎn)生 (1)u1規(guī)范工作人員操作過程. u2避免

19、操作錯(cuò)誤. u3正確選擇使用儀器/器材/設(shè)備。 u4改進(jìn)傳統(tǒng)操作方法. u例如;1)用玻璃棒接種光滑的瓊脂平面比(99)； u 2) 用冷接種環(huán)沾取菌液比(90)； u 3)使菌液依靠重力由吸管中流出 比用吹出(67)； u 4) 菌液滴落在消毒巾上比硬桌面上(90)； u 5)用針頭從蓋有橡皮塞的瓶中抽液時(shí)，用酒精棉 球圍住瓶口比不用時(shí)所產(chǎn)生的氣溶膠少99。31防止微生物氣溶膠擴(kuò)散的生物安全原理防止微生物氣溶膠擴(kuò)散的生物安全原理(2)u無論是哪一種微生物實(shí)驗(yàn)室，總有一些微生物 操作本身不可避免地要產(chǎn)生氣溶膠，盡管采取 一些防范措施，只可以減少微生物氣溶膠的產(chǎn) 生，但不可能完全避免。因此，除了

20、上述措施 外(控制空氣傳播感染的第一環(huán)節(jié))，還要防止氣溶膠擴(kuò)散,即控制空氣傳播感染的第二環(huán)節(jié)。在實(shí)驗(yàn)室中,防止氣溶膠擴(kuò)散可以采取雙重保護(hù) 措施： “圍場操作” 、“屏障隔開” 、“有 效攔截” 、“定向氣流” 、 “空氣消毒” 、 “個(gè)人防護(hù)”等措施32圍場操作圍場操作u是把微生物局限在一個(gè)空間內(nèi)進(jìn)行操作, 使之不與人體直接接觸,并與開放之空氣隔離.例如在生物安全柜內(nèi)。生物安全柜可以把操作中產(chǎn)生的氣溶膠局限在安全 柜臺(tái)內(nèi),避免人的暴露。實(shí)驗(yàn)室也是圍場, 是屬于第二道防線,起到“雙重保護(hù)”作 用.圍場操作的原則是圍場越小越好.33隔離器隔離器u圖片34屏障隔離屏障隔離u是指產(chǎn)生氣溶膠或一旦氣溶膠

21、突破圍場, 防止氣溶膠擴(kuò)散就要靠各種屏障. 例如, 生物安全實(shí)驗(yàn)室及其緩沖室或通道(第二 層圍場),即能防止氣溶膠進(jìn)一步擴(kuò)散. u概括:機(jī)械、緩沖、負(fù)壓(氣體)35實(shí)驗(yàn)室概況實(shí)驗(yàn)室概況 實(shí)驗(yàn)室概況實(shí)驗(yàn)室概況 布局及流程布局及流程u圖片36定向氣流定向氣流u是指控制實(shí)驗(yàn)室內(nèi)可能被有害因子污染 空氣的流動(dòng)方向,即: u1.實(shí)驗(yàn)室區(qū)域外面的空氣只能向?qū)嶒?yàn)室 內(nèi)流動(dòng), u2.清潔區(qū)域空氣只能向污染區(qū)域流動(dòng), u3.污染輕的空氣只能向污染重的區(qū)域流動(dòng).37BSL-3 of ChinauAir pressure controlOut roomPassageBufferoom(1)PrepareBuffe

22、room(2)BSL-3ABSL-30-0-10-20-30-40-500-5-10-20-30-40-500+10-10-20-30-40-5038空氣消毒空氣消毒u對局部空氣消毒，用有效消毒措施消毒,使用紫外線照射較為方便,使用此種方法 時(shí)，要經(jīng)常測定紫外燈的照度，當(dāng)照度 降低后，應(yīng)及時(shí)更換。平時(shí)(24周)用 酒精棉球擦拭燈管，以防灰塵等污垢阻 礙紫外線穿透。 u也可使用噴霧消毒方法等39防止個(gè)人暴露防止個(gè)人暴露u病原微生物感染力和致病力再強(qiáng),只要使其不與人體接觸(包括呼吸道)它就不會(huì)發(fā)生作用,感染 就不會(huì)發(fā)生.在操作中手接觸生物因子的機(jī)會(huì)最 多,所以用乳膠手套、防護(hù)服等作為屏障.對氣溶膠

23、的防護(hù)用正壓服、正壓頭盔、防護(hù)面具、 口罩、防護(hù)眼鏡等作為主要屏障,避免生物因子被人體吸入.這就是強(qiáng)調(diào)個(gè)人防護(hù)的原由.40個(gè)人防護(hù)個(gè)人防護(hù)u圖片41有效攔截有效攔截u是指在處理圍場內(nèi)空氣時(shí)對外排的空氣進(jìn)行凈化,用符合要求的HEPA處理,以保證不污染環(huán)境,保護(hù)公眾健康. u有效攔截其他方法:“消毒液過濾” 、 “加熱過濾” 、“火燒過濾” 、“靜電 過濾”等.42三、縣級生物安全要點(diǎn)三、縣級生物安全要點(diǎn)u1.病原微生物的分級 u2.管理和SOP u3.設(shè)施、設(shè)備要求43縣級生物安全的任務(wù)縣級生物安全的任務(wù)u為了提高我國防治傳染病的整體水平和 能力，保證實(shí)驗(yàn)室生物安全。由于沒有任何一個(gè)實(shí)驗(yàn)室能夠完

24、全地控制其所接收標(biāo)本的危害等級，實(shí)驗(yàn)室的操作人員可能接觸比預(yù)期更高危險(xiǎn)度的微生物， 所以世界衛(wèi)生組織（WHO）要求，臨床診斷和衛(wèi)生保健實(shí)驗(yàn)室必須設(shè)計(jì)成二級 或二級以上生物安全水平。44縣級生物安全的任務(wù)縣級生物安全的任務(wù)u只要求建設(shè)BSL-2水平的實(shí)驗(yàn)室 ，因此除了加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)外我們必須加強(qiáng)實(shí)驗(yàn) 加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)外我們必須加強(qiáng)實(shí)驗(yàn) 室生物安全的管理和GMT的培訓(xùn)工作， 以便在遇到高致病微生物時(shí)能夠開展初 期的工作并保證生物安全。因此，各有 關(guān)單位在制訂基層BSL-2實(shí)驗(yàn)室生物安全計(jì)劃和政策時(shí)要更加注意軟件方面的建設(shè)。45微生物危險(xiǎn)等級規(guī)定微生物危險(xiǎn)等級規(guī)定uWHO根據(jù)感染性微生物的相對危害程度制訂

25、了 危險(xiǎn)度等級的劃分標(biāo)準(zhǔn) (1、2、3、4級，低 高）。我國的病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管 理?xiàng)l例（國務(wù)院令424號）和實(shí)驗(yàn)室生物 安全通用要求（GB19589-2004）也對病原 微生物危險(xiǎn)度進(jìn)行了分類（一、二、三、四類， 高低）和分級（1、2、3和4級，低高）， 其原則基本一致。該危險(xiǎn)度等級的劃分，僅適 用于實(shí)驗(yàn)室工作。46生物安全防護(hù)水平的構(gòu)成和生物安全實(shí)驗(yàn)室等級生物安全防護(hù)水平的構(gòu)成和生物安全實(shí)驗(yàn)室等級u實(shí)驗(yàn)室生物安全措施可以概括成三個(gè)部 分：實(shí)驗(yàn)室生物安全管理、實(shí)驗(yàn)室設(shè)施、 設(shè)備、個(gè)人防護(hù)裝備、良好的微生物操 作技術(shù)。把實(shí)驗(yàn)室防護(hù)分為一級屏障 （primary burier）和二級屏障

26、（second burier），前者包括實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和個(gè)人防 護(hù)裝備；后者主要指實(shí)驗(yàn)室設(shè)施。實(shí)驗(yàn) 室的生物安全防護(hù)水平（Biosafety level） 分為4種(BSL 1-4)。47一級生物安全防護(hù)水平一級生物安全防護(hù)水平 BSL-1u一級生物安全防護(hù)水平除需要洗手池外 不需要特殊的一級和二級屏障，依靠標(biāo)準(zhǔn)的微生物操作即可獲得基本的防護(hù)水 平。一級生物安全防護(hù)水平實(shí)驗(yàn)室適用于大學(xué)生、再教育培訓(xùn)的和教學(xué)用的實(shí) 驗(yàn)室。枯草桿菌、格氏阿米巴原蟲和感 染性犬肝炎病毒是符合這些標(biāo)準(zhǔn)的微生 物的代表。48BSL-1u圖片49二級生物安全防護(hù)水平二級生物安全防護(hù)水平u如果產(chǎn)生濺出物和氣溶膠的可能性很小的話

27、， 良 好的微生物學(xué)技術(shù)能夠保證在開放式的操作臺(tái)面上安全地使用這些致病微生物， 否則應(yīng)該在 生物安全柜（BSC）內(nèi)操作。乙型肝炎病毒 沙門氏菌和弓形蟲是屬于這類防護(hù)水平的微生 物的代表。未知感染性樣本，包括人體血液、 體液和組織等的檢測一般都可在這種級別實(shí)驗(yàn) 室內(nèi)進(jìn)行。 對工作人員的主要危害是與感染性 材料的偶然的皮膚或粘膜暴露、針刺、吞食、 動(dòng)物叮咬等。50BSL-2u必須強(qiáng)調(diào)對污染的針頭或利器的使用要非常謹(jǐn)慎。對易于通過氣溶膠途徑傳播的微生物、具 有增加工作人員暴露氣溶膠或高度飛濺物的程 序，二級生物安全防護(hù)水平微生物操作必需在 一級生物安全防護(hù)水平的基礎(chǔ)之上，增加生物 安全柜、高壓滅菌器

28、、安全離心機(jī)罩帽、 安全柜、高壓滅菌器、安全離心機(jī)罩帽、防濺 罩或面罩等。 標(biāo)準(zhǔn)的BSL-2實(shí)驗(yàn)室見圖2，從中 可見，除了滿足BSL-1的要求以外，在門上增 加了生物危險(xiǎn)標(biāo)志（圖3）、II級生物安全柜。 按國標(biāo)（GB19489-2004）,還要配備高壓蒸汽滅菌器、洗眼器。51BSL-2u圖片52我國縣級我國縣級BSL-2建設(shè)要點(diǎn)建設(shè)要點(diǎn)u設(shè)施要求: 要滿足上述通用要求，可在公用實(shí)驗(yàn)室 區(qū)域選取足夠的房間，1間作為工作人員 的辦公室兼作個(gè)人物品存放和倉儲(chǔ)；按 進(jìn)入次序依次為準(zhǔn)備間，面積適宜；最 后是操作感染性材料的實(shí)驗(yàn)室，面積30 平方米左右為宜（詳見“通用要求”）。53BSL-2門上標(biāo)志門上標(biāo)

29、志u圖片54裝備要求裝備要求u1）有條件的在BSL-1和BSL-2實(shí)驗(yàn)室 都應(yīng)設(shè)置通風(fēng)廚或負(fù)壓罩 用作有害氣體、化學(xué)物等操作。 u2）必須安裝生物安全柜（國產(chǎn)即可） 用于操作感染性材料中容易產(chǎn)生氣溶膠和噴濺的操作。建議選用CLASS II級安全柜，符合國際標(biāo)準(zhǔn)（分級標(biāo) 準(zhǔn)）：55設(shè)備要求設(shè)備要求u機(jī)器主體所有的連接、角部及接縫處牢固、美 觀、容易清潔. 整機(jī)工作性能穩(wěn)定。 u操作開口的進(jìn)口風(fēng)速（in flow）0.41m/s, 下 送柜內(nèi)氣流(down flow)速度0.380.025m/s. 柜體內(nèi)空氣壓力（與室內(nèi)比） -100-150Pa. 潔凈度不低于100級。 u30%外排可進(jìn)入室內(nèi)，

30、也可排到室外，70%空 氣在安全柜內(nèi)循環(huán)，排出氣體經(jīng)過濾器處理。56設(shè)備要求設(shè)備要求u高效過濾器，對0.3um空氣顆粒截留效率 99.99%以上，過濾器的使用壽命不低于3年上。u專業(yè)化的配件紫外燈系統(tǒng)，支架，柜體內(nèi)部 電源插頭，各類氣體接口等齊全。 u噪音標(biāo)準(zhǔn)低于65dB u個(gè)體保護(hù)、樣品保護(hù)、環(huán)境保護(hù)、交叉污染 和各種物理參數(shù)檢測合格，并附檢測報(bào)告。 u免修三年。57設(shè)備要求設(shè)備要求u3） 高壓蒸汽滅菌器（國產(chǎn)即可） u立式滅菌器，5075L，滿足121滅菌要求. u不銹鋼內(nèi)膽 u經(jīng)過檢測符合國家標(biāo)準(zhǔn)。 u4） 生化培養(yǎng)箱（國產(chǎn)即可） u雙制式冷熱溫控，數(shù)字顯示， u不銹鋼內(nèi)膽， u公稱容積：100-150L左右 u控制溫度450，溫度波動(dòng)不超過 1。58人員防護(hù)人員防護(hù)