五苓散對(duì)腎性高血壓大鼠降壓作用的實(shí)驗(yàn)研究

1、中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)2003年11月第1卷第4期 JChinIntegrMed,Nov2003,Vol.1,No.4285論著五苓散對(duì)腎性高血壓大鼠降壓作用的實(shí)驗(yàn)研究韓宇萍,王寧生,宓穗卿,劉啟德(廣州中醫(yī)藥大學(xué)臨床藥理研究所,廣東廣州510405)摘要 目的 觀察五苓散提取液對(duì)腎性高血壓大鼠的實(shí)驗(yàn)治療效果及其對(duì)大鼠尿量和血清Na+、K+、Cl-濃度的影響。方法 建立改進(jìn)G-2K1C二腎一夾高血壓大鼠模型。大鼠隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組,模型組,五苓散高劑量組(80g/kg),五苓散中劑量組(40g/kg),五苓散低劑量組(20g/kg),氫氯噻嗪組(25mg/kg)。灌胃給藥期間測(cè)量大鼠尿量,給藥30

2、d后測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈壓,并取血測(cè)定血清Na+、K+、Cl-濃度。結(jié)果 五苓散高、中、低劑量組均能降低腎性高血壓大鼠的血壓(P<0.05或P<0.01),但仍高于假手術(shù)組(P<0.01),而與氫氯噻嗪組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。五苓散高、中、低劑量組對(duì)大鼠有顯著利尿作用(P<0.05或P<0.01),但作用較氫氯噻嗪緩和(P<0.05或P<0.01)。五苓散高、中、低劑量組和氫氯噻嗪組對(duì)Na+、Cl-濃度均無(wú)影響(P>0.05),氫氯噻嗪組大鼠血K+濃度降低,與假手術(shù)組及高、中、低劑量組比較有顯著差異(P<0.01)。結(jié)論 五苓散提

3、取液對(duì)腎性高血壓大鼠具有利尿、降壓作用,且不造成電解質(zhì)紊亂。關(guān)鍵詞 五苓散;模型,動(dòng)物;高血壓,腎性;電解質(zhì)中圖分類號(hào) R544.14 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1672-1977(2003)04-0285-04EffectofWulingPowderonratswithrenalhypertensionHANYu-Ping,WANGNing-Sheng,MISui-Qing,LIUQi-De(InstituteofClinicalPharmacology,GuangzhouUniversityofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou,GuangdongPr

4、ovince510405,China)ABSTRACT Objective ToobservethetherapeuticeffectofWulingPowderextractonratswithrenalhypertensionandtoe-valuatetheinfluenceofitonthevolumeofurineandtheconcentrationsofNa+、K+、Cl-.Methods ReformedGold-blatthy-pertensionratmodel(G-2K1C)wasestablished.Theratsweredividedinto6groupsasfol

5、lows:sham-operationgroup;modelgroup,WulingPowderhighdosagegroup(80g/kg),WulingPowdermiddledosagegroup(40g/kg),WulingPowderlowdos-agegroup(20g/kg),andhydrochlorothiazide(HCT)group(25mg/kg).Urinevolumeoftheratswasmeasuredduringtheex-periment.TailarterialpressureandNa+、K+、Cl-inserumoftheratsweredetecte

6、dafter30daysoftreatment.ResultsThebloodpressureoftheG-2K1CratswasdecreasedinthethreeWulingPowdergroups(P<0.05orP<0.01),buthigherthanthatofthefalse-operationgroup(P<0.01),andtherewasnodifferencebetweeneachoftheWulingPowdergroupsandtheHCTgroup(P>0.05).DiureticeffectofthethreedosagesofWulin

7、gPowderwasweakerthanthatoftheHCT(P<0.05orP<0.01).TheeffectsofthethreedosagesofWulingPowderandHCTonNa+andCl-intheserumwerenotobviouslydifferent(P>0.05),butK+oftheHCTgroupwassignificantlydecreasedcomparedwiththatofthefalse-oper-ationgroupandthethreeWulingPowdergroups(P<0.01).Conclusion Wul

8、ingPowderextracthadsatisfyingtherapeuticeffectsinincreasingthedischargeofurine,decreasingthebloodpressureandkeepingthebalanceoftheserumelectrolytecon-tentsinratswithrenalhypertension.KEYWORDS WulingPowder;models,animal;hypertension,renal;electrolytesJChinIntegrMed,2003,1(4):285-288 高血壓是最常見(jiàn)的心血管病之一,選用

9、安全、有究五苓散提取液對(duì)實(shí)驗(yàn)性腎性高血壓大鼠的血壓及電解質(zhì)的影響,為五苓散臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。1 材料與方法1.1 材料1.1.1 藥物 五苓散提取液,廣州中醫(yī)藥大學(xué)臨床效且價(jià)廉的抗高血壓藥物以滿足長(zhǎng)期使用十分必要。利尿藥一直被WHO推薦為治療高血壓的首選藥物之一,但長(zhǎng)期應(yīng)用后導(dǎo)致的電解質(zhì)紊亂是其難以克服的副作用。五苓散源自漢張仲景的傷寒論,藥用茯苓、澤瀉、肉桂、豬苓、白術(shù),為溫陽(yáng)利水、健脾補(bǔ)腎名方,是中藥利水劑的代表方劑。藥理研究證實(shí),五苓散利水溫和持久而不致電解質(zhì)紊亂,對(duì)腎性高血壓有一定療效1。我們實(shí)驗(yàn)的目的在于研基金項(xiàng)目 廣東省教育廳基金資助項(xiàng)目(No.粵教科200172)作者簡(jiǎn)介 韓

10、宇萍(1973-),女,在讀碩士研究生.E-mail:hyp604286中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)2003年11月第1卷第4期 JChinIntegrMed,Nov2003,Vol.1,No.4藥理研究所提供;氫氯噻嗪片,5mg/片,批號(hào):20020330,江蘇丹陽(yáng)市藥業(yè)有限公司生產(chǎn);地西泮注射液,2ml/支,批號(hào):20000502,西南股份有限公司生產(chǎn);鹽酸氯胺酮注射液,2ml/支,批號(hào):301302,江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)。1.1.2 動(dòng)物 健康、雄性、清潔級(jí)SD大鼠,體重200250g,購(gòu)自廣州中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào):粵檢字第98A058。標(biāo)準(zhǔn)飼料,適應(yīng)環(huán)境1周后,供實(shí)驗(yàn)使用

11、。1.1.3 儀器 RBP-1型大鼠血壓計(jì)(北京中日友好醫(yī)院臨床醫(yī)學(xué)研究所);Z-8000型原子吸收分光光度計(jì)(日本日立);細(xì)鋼絲數(shù)根,術(shù)前高溫高壓消毒滅菌。1.2 方法1.2.1 基礎(chǔ)血壓測(cè)定 測(cè)量環(huán)境安靜、恒溫(28),測(cè)量所有大鼠尾動(dòng)脈收縮壓為基礎(chǔ)血壓。1.2.2 模型建立 改進(jìn)G-2K1C二腎一夾高血壓模型2。大鼠腹腔注射5%氯胺酮和0.5%地西泮各1ml/kg麻醉,仰臥,腹正中切口,按無(wú)菌操作分離左腎動(dòng)脈,穿入絲線,緊貼腎動(dòng)脈平行放置直徑為0.20.3mm的細(xì)鋼絲細(xì)鋼絲直徑(mm)=大鼠體重(g)/1000±0.02。用絲線扎緊腎動(dòng)脈和細(xì)鋼絲,抽出細(xì)鋼絲。假手術(shù)組只打開(kāi)腹腔

12、,分離左腎動(dòng)脈后關(guān)腹。術(shù)后給予2%氯化鈉水溶液,術(shù)后3d青霉素治療(3×10u/d),血壓值30mmHg視為造模成功。1.2.3 分組及給藥 五苓散及氫氯噻嗪實(shí)驗(yàn)用劑量均以臨床等效量為基礎(chǔ)用于動(dòng)物藥效實(shí)驗(yàn),經(jīng)篩選得出最低有效劑量,即以使動(dòng)物產(chǎn)生利尿效應(yīng)的最低劑量為準(zhǔn)用于本次實(shí)驗(yàn),其中五苓散提取液在20g/kg、40g/kg、80g/kg體重給藥劑量區(qū)間呈現(xiàn)4劑量依賴關(guān)系。手術(shù)30d后選用血壓值30mm-Hg的大鼠隨機(jī)分為5組,每組10只,分別為模型組(實(shí)驗(yàn)過(guò)程給予等量蒸餾水),五苓散高劑量組(80g/kg),五苓散中劑量組(40g/kg),五苓散低劑量組(20g/kg),氫氯噻嗪組(

13、25mg/kg),另有一組假手術(shù)組10只。各組按以上劑量灌胃給藥30d,實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)模型組、五苓散高、低劑量組各死亡2只。1.2.4 尿量測(cè)定 在治療14d后,用代謝籠法時(shí)禁食禁水,收集用藥6h內(nèi)的大鼠尿量。1.2.5 血壓測(cè)定 造模前、造模后30d及用藥30d后測(cè)定所有大鼠尾動(dòng)脈收縮壓。1.2.6 血清Na+、K+、Cl-濃度測(cè)定 實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)所有大鼠在乙醚麻醉下,眼眶靜脈叢取血,以假手術(shù)組為對(duì)照組,檢測(cè)大鼠血清Na+、K+、Cl-濃度。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果以(x±s)表示,采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行單因素方差分析和獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),以P<0.05為差異有顯著性。2 結(jié)

14、果2.1 五苓散對(duì)腎性高血壓大鼠血壓的影響 治療前血壓除假手術(shù)組顯著低于其他各組外(P<0.01),其余各組間均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。治療后五苓散高、中、低劑量組和氫氯噻嗪組血壓降低,與模型組比較,除低劑量組(P<0.05)外,其余均有非常顯著差異(P<0.01),但血壓仍高于假手術(shù)組(P<0.01);與氫氯噻嗪組比較,高、中、低劑量組無(wú)顯著差異(P>0.05)。與治療前比較,高、中劑量組和氫氯噻嗪組有非常顯著性差異(P<0.01),低劑量組有顯著性差異(P<0.05)。見(jiàn)表1。3測(cè)量所有大鼠的尿量。大鼠實(shí)驗(yàn)前禁食18h,實(shí)驗(yàn)表1 治療前

15、后各組大鼠尾動(dòng)脈收縮壓比較(x±s,mmHg)組別假手術(shù)組模型組五苓散高劑量組五苓散中劑量組五苓散低劑量組氫氯噻嗪組注:與假手術(shù)組比較,0.05,P<0.01*n108810810治療前104.6±3.83149.8±5.56*151.1±4.42*151.4±3.87*151.1±3.26*151.1±5.46*治療后106.3±4.08154.4±4.36*134.9±8.58*137.3±7.25*140.3±9.51*137.1±9.04*治療前后差值

16、-0.68±6.07-4.68±6.1916.18±8.94*14.05±5.86*10.88±9.67*14.00±10.53*P<0.01;與模型組比較,P<0.05,P<0.01;與氫氯噻嗪組比較,P<0.01;與治療前比較,P<2.2 五苓散對(duì)腎性高血壓大鼠尿量的影響 與模型組比較,五苓散高、中、低劑量組和氫氯噻嗪組均有利尿作用(P<0.05或P<0.01);但與氫氯噻嗪組比較,高、中、低劑量組差異仍有顯著性(P<0.05或P<0.01)。見(jiàn)表2。中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)2003年1

17、1月第1卷第4期 JChinIntegrMed,Nov2003,Vol.1,No.4287表2 治療期間各組大鼠用藥后6h尿量比較(x±s,ml)組別假手術(shù)組模型組五苓散高劑量組五苓散中劑量組五苓散低劑量組氫氯噻嗪組注:與假手術(shù)組比較,*<0.05,P<0.01;與氫氯噻嗪組比較,P<0.05,P<0.012.3 五苓散對(duì)腎性高血壓大鼠血清Na+、K+、Cl-濃度的影響 五苓散高、中、低劑量組及氫氯噻嗪組對(duì)血Na+、Cl-濃度均無(wú)影響(P>0.05);但氫氯噻嗪組大鼠血清K濃度降低,與假手術(shù)組及高、中、低劑量組比較有顯著差異(P<0.01),而五苓

18、散高、中、低劑量組與假手術(shù)組比較則無(wú)顯著差異(P>0.05)。見(jiàn)表3。+n108810810P<0.05,*尿量5.25±0.705.06±0.747.54±1.88*6.79±1.46*8.97±0.85*6.40±1.20*P<0.01;與模型組比較,P表3 用藥30d后各組大鼠血清Na+、K+、Cl-濃度比較(x±s,mmol/L)組別假手術(shù)組模型組五苓散高劑量組五苓散中劑量組五苓散低劑量組氫氯噻嗪組注:與假手術(shù)組比較,*n108810810Na+132.52±7.52135.27±

19、;3.40134.13±12.79131.22±7.92132.72±5.51134.48±4.81K+7.98±0.318.16±0.408.12±0.238.05±0.278.21±0.165.82±1.09*Cl-99.30±4.5297.00±4.90101.58±9.8699.29±5.4098.42±8.30104.08±9.19P<0.01;與氫氯噻嗪組比較,P<0.013 討 論G-2K1C大鼠模型普遍用于降

20、壓藥的篩選,采用絲線和細(xì)鋼絲代替腎動(dòng)脈銀夾,優(yōu)點(diǎn)在于取材方便、便宜并且容易控制,以此模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究,造模前后大鼠血壓與假手術(shù)組比較有顯著差異,說(shuō)明模型可靠,符合設(shè)計(jì)要求。高血壓屬于“眩暈”“、陽(yáng)虛水泛”等范疇,系臟腑陰陽(yáng)氣血平衡失調(diào),痰瘀交阻所致。五苓散為溫陽(yáng)利水的著名方劑。與西藥利尿藥不同的是,中藥利水滲濕不僅可去除有形水分在體內(nèi)的潴留,尚可消除痰飲等癥。五苓散方中茯苓、豬苓、澤瀉、白術(shù)均有不同程度的利尿作用;肉桂擴(kuò)張血管,改善血運(yùn),增強(qiáng)腎血流量;白術(shù)、澤瀉又有降低血中甘油三酯,抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。五藥合用可溫養(yǎng)脾腎,化氣行水,有效治療高血壓4。腎性高血壓的血壓升高,除因腎缺血激活腎素-

21、血管緊張素系統(tǒng)外,體內(nèi)水鈉潴留和血容量擴(kuò)張也是血壓升高的重要原因。在本實(shí)驗(yàn)中,五苓散高、中、低劑量均顯示利尿作用,但與氫氯噻嗪比較尚有顯著差異。利尿可造成適度的鈉和水的負(fù)平衡,使細(xì)胞外液和血容量減少,從而導(dǎo)致血壓降低。但從實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)來(lái)看,五苓散利尿效應(yīng)雖顯著弱于氫氯噻嗪,降壓作用與之比較卻并無(wú)顯著差異。由此推測(cè)五苓散的降壓作用機(jī)制,除與利尿和擴(kuò)張血管有關(guān)外,尚有其他機(jī)制參與,其確切的降壓機(jī)制,有待進(jìn)一步深入研究。以噻嗪類為首的利尿藥作為基本的降壓藥物,在WHO推薦的降壓藥物中具有不可替代的作用,但如長(zhǎng)期或大量應(yīng)用而不注意補(bǔ)充鈉、鉀、鎂等離子,則可造成電解質(zhì)紊亂等副作用。這樣的病例在臨床屢有報(bào)道5

22、。美國(guó)醫(yī)學(xué)會(huì)雜志報(bào)道有高血壓病的患者在服用噻嗪類利尿劑1個(gè)月后即出現(xiàn)了血鉀降低(由原來(lái)的4.9mEq/L降至3.5mEq/L以下)6。在本次實(shí)驗(yàn)中,我們將給藥時(shí)間設(shè)定為30d,以觀察中西藥利尿劑對(duì)大鼠體內(nèi)電解質(zhì)濃度的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在灌胃給藥30d后,氫氯噻嗪組大鼠血清K濃度降低,與五苓散及對(duì)照組比較有顯著差異。高血壓作為重要疾病(如心肌梗死、充血性心衰)的危險(xiǎn)因子,其治療的目的是為了減少并發(fā)癥,使長(zhǎng)期治療的病人避免和延緩發(fā)生嚴(yán)重的心血管事件。而低血鉀則可導(dǎo)致心律失常和室性早搏等,盡管及時(shí)補(bǔ)充電解質(zhì)可糾正這一不良反應(yīng),但其潛在的危害性仍使利尿藥在目前降壓藥物的使用中逐漸減少。目前,醫(yī)學(xué)界提

23、倡恢復(fù)利尿藥在高血壓藥物治療中的一線地位。作為中藥利尿劑的五苓散因其安全、有效的治療作用同樣不容忽視,進(jìn)行中西利尿藥治療高血壓的基礎(chǔ)理論研究,可為臨床高血壓的治療提供更多的藥物選擇。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也說(shuō)明,五苓散在腎性高血壓的實(shí)驗(yàn)治療中,在有效利尿、降壓的同時(shí)不造成電解質(zhì)紊亂,與西藥利尿藥相比,有其特有的療效和優(yōu)勢(shì),具有良好的臨床應(yīng)用前景。+288中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)2003年11月第1卷第4期 JChinIntegrMed,Nov2003,Vol.1,No.4參考文獻(xiàn)1 呂會(huì)民.五苓散加減治療高血壓病50例臨床觀察J.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2000,9(1):51-52.2 王偉新,凌樹(shù)森,曹 文.洛

24、沙坦對(duì)腎性高血壓大鼠心肌AT1amRNA、AT1bmRNA表達(dá)的影響J.中國(guó)藥理學(xué)通報(bào),2001,17(3):309-312.3 徐叔云,卞如濂,陳 修.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M.第2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1991.1052.(上接第251頁(yè))生肌散、紅油膏敷貼。月余后,潰破外口已收,肌平皮長(zhǎng)。遂擬方以益腎填精為主,少佐清熱解毒之品。方藥如下:生黃芪30g、太子參30g、白術(shù)15g、茯苓15g、生熟地各15g、鹿角片10g、龜板10g、仙靈脾10g、肉蓯蓉10g、黃精18g、補(bǔ)骨脂15g、菟絲子12g、靈芝10g、蠶繭10g、獨(dú)活10g、虎杖15g、紅棗20g、生甘草10g。守本方加減,服用2月余

25、。現(xiàn)患者精神好,納佳寐安,血紅蛋白升至60g/L。隨訪年余,其父述未再見(jiàn)感冒、發(fā)熱、頭痛等。按:石骨癥即大理石骨病,是一種少見(jiàn)的骨發(fā)育障礙性疾病,發(fā)病率約為百萬(wàn)分之五左右,多為隱性遺傳。其特點(diǎn)是由于鈣質(zhì)沉積,使骨質(zhì)硬化,骨塑性異常,進(jìn)行性貧血,肝脾腫大。唐師認(rèn)為“腎為先天之本”,本例患兒乃先天不足,腎虧絡(luò)空,復(fù)因外邪入侵,濕濁滯留為患,久而熱毒瘀阻,潰膿數(shù)月,形成牙骨槽風(fēng)。石骨癥并發(fā)牙骨槽風(fēng)(下頜骨骨髓炎)為臨床罕見(jiàn)。然治病求本,先益腎填精,和營(yíng)托毒,使膿毒得排,待潰口已收,則以補(bǔ)益先天為主,予大量滋補(bǔ)之品,使患兒精充神旺,外邪難侵,體質(zhì)得以恢復(fù)提高。2 益氣健脾,通絡(luò)利濕治療雙下肢淋巴水腫患

26、者王某,男,15歲。門(mén)診號(hào):062749。2001年10月27日初診。雙下肢浮腫,以小腿及足踝部為主,伴雙側(cè)腹股溝淋巴結(jié)腫大5年余。1998年上海市第六人民醫(yī)院放射性同位素檢查示:雙下肢淋巴回流受阻,左側(cè)完全阻塞,右側(cè)部分阻塞。后經(jīng)多家醫(yī)院診治,療效欠佳。查見(jiàn)雙下肢增粗,尤以左側(cè)為甚,苔膩,脈濡。唐師認(rèn)為,治療此病當(dāng)利濕通絡(luò)為先,佐以益氣健脾,方以萆薢滲濕湯加減為主。擬方內(nèi)服:萆薢12g、澤瀉12g、薏苡仁15g、防己12g、牛膝10g、黃芪30g、絲瓜絡(luò)12g、忍冬藤15g、地龍12g、伸筋草15g、雞血藤15g、生甘草6g。配以小金丹服用,1支/次,2次/d。1周后復(fù)診,浮腫減輕。守原方加

27、減,繼服月余,浮腫明顯減輕。遂以益氣健脾治本為主,佐以通絡(luò)利濕消腫。方藥如下:黃芪30g、太子參30g、白術(shù)15g、萆薢12g、薏苡仁12g、桃仁9g、紅花9g、全當(dāng)歸12g、土茯苓20g、野赤豆12g、伸筋草15g、牛膝9g、蠶繭10g、絲瓜絡(luò)12g、忍冬藤15g、地龍12g、生甘草6g,配以小金丹服用。至今已年余,雙下肢幾如常人。囑避免勞累,夜間抬高下肢,以利淋巴回流。按:肢體淋巴水腫俗稱象皮腫,原因是淋巴回流受阻,淺4 陳 浩.溫陽(yáng)利水法治療高血壓病48例J.陜西中醫(yī),1994,15(9):392.5 王建群.吲噠帕胺致老年低血鉀3例J.中國(guó)新藥與臨床雜志,2002,21(7):442-444.6 陳曼麗譯.老年人收縮期高血壓長(zhǎng)期噻嗪類利尿劑治療后血液動(dòng)力學(xué)反應(yīng)及副作用J.美國(guó)醫(yī)學(xué)會(huì)雜志(中文版),1985,4(1):24-29.收稿日期 2003-04-08 本文編輯 黃文華 周慶輝層軟組織內(nèi)液體和蛋白質(zhì)急劇積累,高濃度的蛋白質(zhì)造成了組織內(nèi)滲透壓的增高,從而形成水腫,并導(dǎo)致繼發(fā)性炎癥,使得筋膜及皮膚增厚