玻璃器皿的清洗包扎及高壓蒸汽滅菌

1、玻璃器皿的清洗包扎及高壓蒸汽滅菌玻璃器皿的清洗包扎及高壓蒸汽滅菌組員組員： 孫中濤17 徐州18 孫洋20 劉彩云19 戚望平21 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.掌握玻璃器皿的清洗與包扎技術(shù)。2.學(xué)習(xí)并掌握高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌的基本原理和操作方法。二、實(shí)驗(yàn)原理 （1 1）滅菌是指殺死或消滅一定環(huán)境中的所有微生物，滅菌的方法分物理和化學(xué)滅菌法兩大類。本實(shí)驗(yàn)主要介紹物理方法的一種，即加熱滅菌。 加熱滅菌包括濕熱和干熱滅菌兩種。通過加熱使菌體內(nèi) 蛋白質(zhì)凝固變性，從而達(dá)到殺菌目的。蛋白質(zhì)的凝固變性與其自身含水量有關(guān)，含水量越高，其凝固所需要的溫度越低。在同一溫度下，濕熱的殺菌效力比干熱大，因?yàn)樵跐駸崆闆r下菌體吸收

2、水分，使蛋白質(zhì)易于凝固；同時(shí)濕熱的穿透力強(qiáng)，可增加滅菌效力。（2）高壓蒸汽滅菌法：高壓蒸汽滅菌用途廣，效率高，是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中最常用的滅菌方法。這種滅菌方法是基于水的沸點(diǎn)隨著蒸汽壓力的升高而升高的原理設(shè)計(jì)的。當(dāng)蒸汽壓力達(dá)到1.05kg/cm2時(shí)，水蒸氣的溫度升高到121，經(jīng)1530min，可全部殺死鍋內(nèi)物品上的各種微生物和它們的孢子或芽孢。一般培養(yǎng)基、玻璃器皿以及傳染性標(biāo)本和工作服等都可應(yīng)用此法滅菌。（3 3）干熱滅菌法：通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后，放入電烘箱中烘烤，即加熱至160170維持12h。（4 4）火焰滅菌：直接用火焰灼燒滅菌，迅速徹底

3、。對于接種環(huán)，接種針或其它金屬用具，可直接在酒精燈火焰上燒至紅熱進(jìn)行滅菌。此外，在接種過程中，試管或三角瓶口，也采用通過火焰而達(dá)到滅菌的目的。三、實(shí)驗(yàn)器材 器皿：平皿（10個(gè)/組），1ml吸管（9支/組），試管18180（10支/組），試管（15150）（12/組），三角錐瓶500ml（3個(gè)/組）、三角錐瓶500ml（內(nèi)裝蒸餾水250ml），10ml吸管 其他：牛皮紙或報(bào)紙，酒精燈，棉花，高壓蒸汽菌鍋，電烘箱，線繩,毛刷等四、操作方法 玻璃器皿在滅菌前必須經(jīng)正確包裹和加塞，以保證玻璃器皿于滅菌后不被外界雜菌所污染。1. 將平皿用紙包扎好，以58個(gè)為一包；（一）、玻璃器皿的清洗包扎2、吸管應(yīng)在管

4、口約0.5厘米以下的地方塞入少許長約1.5厘米的棉花，以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，松緊程度以吹氣時(shí)通氣順暢而不致下滑為準(zhǔn)，管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過火焰燒去。然后，將吸管尖端放在4-5厘米寬的長條紙的一端約與紙條成45角，折疊紙條，包住吸管尖端，然后將吸管卷入紙條內(nèi)，末端剩余紙條折疊打結(jié)，待滅菌。包扎試管包扎完成 3、三角瓶在棉塞與瓶口外再包以厚紙，用棉繩以活結(jié)扎緊，以防滅菌后瓶口被外部雜菌所污染； 4、試管塞上棉花塞，多支扎成一捆外用牛皮紙或兩層舊報(bào)紙與細(xì)線包。高壓蒸汽滅菌鍋（二）、干熱滅菌 將包扎好的試管、平皿、三角錐瓶放入干燥烘箱內(nèi)，注意不要擺放太密，以

5、免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。將烘箱的溫度升至160170并恒溫12h，注意勿使溫度過高，超過170，器皿外包裹的紙張、棉花會(huì)被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120持續(xù)30分鐘即可。溫度降至6070時(shí)方可打開箱門，取出物品，否則玻璃器皿會(huì)因驟冷而爆裂。 （三）、高壓蒸汽滅菌 加水：打開滅菌鍋蓋，向鍋內(nèi)加水到水位線。立式消毒鍋?zhàn)詈糜靡阎箝_過的水，以便減少水垢在鍋內(nèi)的積存。注意水要加夠，防止滅菌過程中干鍋。 裝料、加蓋 ：將待滅菌物品放好后，關(guān)閉滅菌器蓋，采用對角式均勻擰緊鍋蓋上的螺旋，使蒸汽鍋密閉，勿使漏氣。 排氣：打開排氣口(也叫放氣閥)。用電爐加熱，待水煮沸后

6、，水蒸氣和空氣一起從排氣孔排出，當(dāng)有大量蒸汽排出時(shí)，維持5min，使鍋內(nèi)冷空氣完全排凈。 升壓、保壓和降壓 ：當(dāng)鍋內(nèi)冷空氣排凈時(shí)，即可關(guān)閉排氣閥，壓力開始上升。當(dāng)壓力上升至所需壓力時(shí)，控制電壓以維持恒溫，并開始計(jì)算滅菌時(shí)間，待時(shí)間達(dá)到要求（一般培養(yǎng)基和器皿滅菌控制在121，20min）后，停止加熱，待壓力降至接近“0”時(shí)，打開放氣閥。注意不能過早過急地排氣，否則會(huì)由于瓶內(nèi)壓力下降的速度比鍋內(nèi)慢而造成瓶內(nèi)液體沖出容器之外。五、思考題（1）吸管在滅菌前應(yīng)如何處理？ 答：吸管應(yīng)在管口約0.5厘米以下的地方塞入少許長約1.5厘米 的棉花，以拉直的曲別針一端放在棉花的中心，輕輕捅入管口，松緊必須適中，松緊程度以吹氣時(shí)通氣順暢而不致下滑為準(zhǔn)，管口外露的棉花纖維統(tǒng)一通過火焰燒去。然后，將吸管尖端放在4-5厘米寬的長條紙的一端約與紙條成45角，折疊紙條，包住吸管尖端，然后將吸管卷入紙條內(nèi)，末端剩余紙條折疊打結(jié)，待滅菌。（2