藥物分析第04章定量分析樣品前處理與分析方法驗證ppt課件

1、第四章第四章 藥物定量分析與分析方法驗證藥物定量分析與分析方法驗證本章主要內(nèi)容：本章主要內(nèi)容：第一節(jié)第一節(jié) 定量分析樣品的前處置方法定量分析樣品的前處置方法 一、概述一、概述 二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法第二節(jié)第二節(jié) 定量分析方法的特點定量分析方法的特點第三節(jié)第三節(jié) 藥品分析方法驗證藥品分析方法驗證本章主要學(xué)習(xí)目的：本章主要學(xué)習(xí)目的：1.熟習(xí)不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法；熟習(xí)不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法；2.熟習(xí)經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法；熟習(xí)經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法；3.掌握氧瓶熄滅法；掌握氧瓶熄滅法；4.掌握測定方法的效能目的。掌握測定方

2、法的效能目的。目的目的: :使待測藥物或待測元素轉(zhuǎn)化為適宜的測定方使待測藥物或待測元素轉(zhuǎn)化為適宜的測定方式式, , 從而利于分析測定。從而利于分析測定。優(yōu)點優(yōu)點: : 添加測定的專屬性和靈敏度。添加測定的專屬性和靈敏度。 第一節(jié)第一節(jié) 定量分析樣品的前處置方法定量分析樣品的前處置方法 樣品種類：樣品種類： 1. 1. 含鹵素元素含鹵素元素F F、ClCl、BrBr、I I 2. 2. 含金屬元素含金屬元素CaCa、FeFe、HgHg、ZnZn、Sn Sn 、Bi) Bi) 3. 3. 含含N N、P P、S S 等元素等元素 一含鹵素有機(jī)藥物一含鹵素有機(jī)藥物 系指藥物分子構(gòu)造中所含鹵素直接與芳

3、環(huán)系指藥物分子構(gòu)造中所含鹵素直接與芳環(huán)或脂肪鏈相連者，而不包括某些有機(jī)藥物的鹵或脂肪鏈相連者，而不包括某些有機(jī)藥物的鹵酸鹽或氫鹵酸鹽。酸鹽或氫鹵酸鹽。構(gòu)造特點：構(gòu)造特點：CX一、概一、概 述述第一節(jié)第一節(jié) 定量分析樣品的前處置方法定量分析樣品的前處置方法鹵原子的活潑性鹵原子的活潑性1 1、 鹵原子與碳原子直接相連，鹵原鹵原子與碳原子直接相連，鹵原子的活潑性和它直接相連的烴基的構(gòu)子的活潑性和它直接相連的烴基的構(gòu)造有很大關(guān)系造有很大關(guān)系. .1乙烯型鹵和芳鹵乙烯型鹵和芳鹵 不活潑不活潑CH2CH XX2烯丙型鹵和芐鹵烯丙型鹵和芐鹵 活潑活潑CH2XCH2CH CH2X3鹵代烷型鹵代烷型 介于兩者之

4、間介于兩者之間CH2CH (CH2)nX n22. 分子中所含鹵原子的個數(shù)分子中所含鹵原子的個數(shù) 分子中所含鹵原子的個數(shù)越多，活潑性越強(qiáng)，特分子中所含鹵原子的個數(shù)越多，活潑性越強(qiáng)，特別是同一碳上含多個鹵原子或一個苯環(huán)上含多個鹵原別是同一碳上含多個鹵原子或一個苯環(huán)上含多個鹵原子時，活潑性加強(qiáng)更加明顯。子時，活潑性加強(qiáng)更加明顯。3. 鹵素的種類鹵素的種類I、Br、Cl、FCCH3OHCH3CCl3CCl3Cl3C三氯叔丁醇三氯叔丁醇六氯對二甲苯六氯對二甲苯常見的含鹵素有機(jī)藥物常見的含鹵素有機(jī)藥物COOHIIINHCOCH3CH3CONH泛影酸泛影酸二含金屬有機(jī)藥物二含金屬有機(jī)藥物 含金屬的有機(jī)藥物

5、：金屬原子不與碳原子直接相含金屬的有機(jī)藥物：金屬原子不與碳原子直接相連，通常為有機(jī)酸及酚的金屬鹽或配位化合物連，通常為有機(jī)酸及酚的金屬鹽或配位化合物 。 如酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞鐵如酒石酸銻鉀、葡萄糖酸銻鈉、富馬酸亞鐵 有機(jī)金屬藥物：金屬原子直接與碳有機(jī)金屬藥物：金屬原子直接與碳原子以共價鍵相連，結(jié)合比較結(jié)實。原子以共價鍵相連，結(jié)合比較結(jié)實。 如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利CCHOCHOOOCOOSbSbOOCOOOCHOCHC2K+ 3H2O酒石酸銻鉀酒石酸銻鉀CCHCCOOOFeOMg(C17H35COO)2硬脂酸鎂硬脂酸鎂富馬酸亞鐵富馬酸亞鐵CH2OHC

6、HOHCHOCHOCHOCOO-SbOHOSbO-OCHCHCHCCHOOCH2-OOHOHONa39H2O葡萄糖酸銻鈉葡萄糖酸銻鈉含金屬或鹵素有機(jī)藥物定量分析含金屬或鹵素有機(jī)藥物定量分析前的處置方法有兩大類：前的處置方法有兩大類：1.1.不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法(3(3種方法種方法) ) 直接測定法直接測定法; ;經(jīng)水解后測定法經(jīng)水解后測定法; ;經(jīng)復(fù)原后經(jīng)復(fù)原后測定法；測定法；2.2.經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法(2(2種方法種方法) ) 濕法破壞濕法破壞( (硝酸硝酸- -高氯酸法高氯酸法; ;硝酸硝酸- -硫酸法硫酸法; ;硫酸硫酸- -硫酸鹽法等硫酸鹽

7、法等););干法破壞。干法破壞。二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法二、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法一一 直接測定法直接測定法 適用于金屬原子不直接與碳原子相連適用于金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬有機(jī)藥物或某些的含金屬有機(jī)藥物或某些CM鍵結(jié)合不結(jié)鍵結(jié)合不結(jié)實的有機(jī)金屬藥物實的有機(jī)金屬藥物,在水溶液中可電離。在水溶液中可電離。 本法主要適用于含金屬有機(jī)藥物或結(jié)合不結(jié)實本法主要適用于含金屬有機(jī)藥物或結(jié)合不結(jié)實的含鹵素等藥物的分析。的含鹵素等藥物的分析。 1 1金屬離子不直接與碳原子相連金屬離子不直接與碳原子相連 例如：乳酸鈣例如：乳酸鈣 0.3g+0.3g+水水100ml 100ml 放冷放冷+NaOH +N

8、aOH 15ml15ml EDTA EDTA鈉鹽滴定鈉鹽滴定 鈣紫紅素指示劑鈣紫紅素指示劑 ( (紫紫純藍(lán)純藍(lán)) )指示劑指示劑+堿堿指示劑指示劑-鈣鈣加熱加熱一一 直接測定法直接測定法 2 2 適用于適用于C-M (C-M (金屬原子直接與碳原金屬原子直接與碳原子相連鍵結(jié)合不結(jié)實的有機(jī)金屬藥物子相連鍵結(jié)合不結(jié)實的有機(jī)金屬藥物, ,在水溶液中可以電離。在水溶液中可以電離。例如：例如： 富馬酸亞鐵溶于熱硫酸，同時分解釋富馬酸亞鐵溶于熱硫酸，同時分解釋放出亞鐵離子，可選用鈰量法進(jìn)展測定。放出亞鐵離子，可選用鈰量法進(jìn)展測定。 例例1 富馬酸亞鐵的含量測定富馬酸亞鐵的含量測定 取本品約取本品約0.3g

9、，精細(xì)稱定，加稀硫酸，精細(xì)稱定，加稀硫酸 15ml，加熱溶解后，放冷，加新沸過的冷水，加熱溶解后，放冷，加新沸過的冷水50ml與鄰二氮菲指示液與鄰二氮菲指示液2 滴，立刻用硫酸鈰滴滴，立刻用硫酸鈰滴定液定液(0.1mol/L)滴定，并將滴定的結(jié)果用空白滴定，并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正。每實驗校正。每1ml硫酸鈰滴定液硫酸鈰滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)相當(dāng)于于16.99mg 。C4H2FeO4原理原理Fe2+ + Ce4+ Ce3+ + Fe2+ NN3Fe2+ + e-NN3Fe3+紅色紅色淺藍(lán)色淺藍(lán)色OCCHOFeHCCOOOOCCHOHCCO+Fe2+ 例2 葡萄糖酸銻鈉的測定 ChP

10、2000 取本品約0.3g，精細(xì)稱定，置具塞錐形瓶中，加水100ml、鹽酸15ml與碘化鉀試液10ml，密塞、振搖后，在暗處靜置10min，用硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定，至近終點時，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消逝，并將滴定的結(jié)果用空白實驗校正。每lml的硫代硫酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于6.088mg的Sb。 K2ISbKI2Sb23H56423222OSNaNaI2OSNa2I1.1.堿水解測定法堿水解測定法 將含鹵素的有機(jī)藥物溶于適將含鹵素的有機(jī)藥物溶于適當(dāng)溶劑如乙醇中當(dāng)溶劑如乙醇中, ,加氫氧化鈉加氫氧化鈉溶液或硝酸銀溶液后溶液或硝酸銀溶液后, ,加熱回流使加熱回

11、流使其水解其水解, ,將有機(jī)結(jié)合的鹵素將有機(jī)結(jié)合的鹵素, ,經(jīng)水解經(jīng)水解作用轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)的鹵素離子作用轉(zhuǎn)變?yōu)闊o機(jī)的鹵素離子, ,然后然后選用間接銀量法進(jìn)展測定。選用間接銀量法進(jìn)展測定。 二二 經(jīng)水解后測定法經(jīng)水解后測定法 原理原理 三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流水解，三氯叔丁醇在氫氧化鈉溶液中加熱回流水解，氯元素全部轉(zhuǎn)變成氯化鈉，然后用剩余滴定法，即于氯元素全部轉(zhuǎn)變成氯化鈉，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再參與定量過量的硝酸銀滴定水解液中加硝酸酸化，再參與定量過量的硝酸銀滴定液，使液，使Cl-生成生成AgCl沉淀，過量的硝酸銀，以沉淀，過量的硝酸銀，以Fe3+為為指示劑，用硫氰酸

12、銨液回滴定。指示劑，用硫氰酸銨液回滴定。 例例1 三氯叔丁醇的測定三氯叔丁醇的測定 例例1 三氯叔丁醇三氯叔丁醇CCl3C(CH3 ) 2 OH + NaOH (CH3 ) 2 CO+NaCl + HCOONa NaCl + AgNO3 AgCl+NaNO3 AgNO3 + NH4SCN AgSCN+NH4NO3Fe3+為指示劑為指示劑: 淡紅棕色淡紅棕色Fe3+ + SCN Fe (SCN) 2+ 定量過量定量過量 2 2、酸水解后測定法、酸水解后測定法 硬脂酸鎂與定量硫酸共沸、水硬脂酸鎂與定量硫酸共沸、水解生成硬脂酸和硫酸鎂解生成硬脂酸和硫酸鎂, ,剩余的酸剩余的酸以氫氧化鈉滴定。以氫氧化

13、鈉滴定。 Mg(C17H35COO)2 +H2SO4 MgSO4 + 2 C17HCOOH H2SO4 + NaOH Na2SO4 + H2O 三經(jīng)復(fù)原后測定法三經(jīng)復(fù)原后測定法 鹵素結(jié)合于芳環(huán)上鹵素結(jié)合于芳環(huán)上, ,由于分子碘的結(jié)由于分子碘的結(jié)合較結(jié)實合較結(jié)實, ,需在堿性溶液中加復(fù)原劑如鋅需在堿性溶液中加復(fù)原劑如鋅粉粉, ,加熱回流加熱回流, ,使碳使碳- -碘鍵斷裂碘鍵斷裂, ,構(gòu)成無機(jī)構(gòu)成無機(jī)碘化物后測定。碘化物后測定。 例例1 泛影酸的測定泛影酸的測定 ChP (2019) 取本品約取本品約0.4g，精細(xì)稱定，加氫氧化鈉溶，精細(xì)稱定，加氫氧化鈉溶液液30ml與鋅粉與鋅粉1.0g，加熱回

14、流，加熱回流30min，放冷，放冷，冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水冷凝管用少量水洗滌，濾過，燒瓶與濾器用水洗滌洗滌3次，每次次，每次15ml，洗液與濾液合并，加冰，洗液與濾液合并，加冰醋酸醋酸5ml與曙紅鈉指示液與曙紅鈉指示液5滴，用硝酸銀滴定液滴，用硝酸銀滴定液(0.1mol/L)滴定。每滴定。每1ml硝酸銀滴定液硝酸銀滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于相當(dāng)于20.46mg的的C11H9 I 3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+ 11NaOH + Zn回流回流COONaN H2 H2N+ 3NaI + 2CH3COONa+ 2Na2ZnO2 + H2O三、經(jīng)有機(jī)破

15、壞的分析方法三、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 適用于金屬原子與碳原子結(jié)合結(jié)實的有機(jī)金屬藥適用于金屬原子與碳原子結(jié)合結(jié)實的有機(jī)金屬藥物。物。一濕法破壞一濕法破壞 本法主要運用硫酸作為分解劑，常參與氧化劑作為本法主要運用硫酸作為分解劑，常參與氧化劑作為輔助分解劑。根據(jù)分解劑組合方式的不同，濕法破壞輔助分解劑。根據(jù)分解劑組合方式的不同，濕法破壞法分為假設(shè)干種，如硫酸硝酸法、硫酸法分為假設(shè)干種，如硫酸硝酸法、硫酸-高氯酸法、高氯酸法、硫酸硫酸鹽法、硫酸硫酸鹽法、 硝酸高錳酸鉀法等。硝酸高錳酸鉀法等。 1 濕法破壞法濕法破壞法 硝酸-高氯酸法 破壞力強(qiáng)，不適于含氮雜環(huán).(高價態(tài)) 硝酸-硫酸法 適于大多數(shù)有機(jī)物

16、質(zhì)破壞(高價態(tài)) 不適于含堿土金屬的藥物(M+硫酸反響) 硫酸-硫酸鹽法(如凱式定氮法) 常用于含砷、銻有機(jī)藥物(低價態(tài)) 二二 干法破壞干法破壞 適用于濕法不易破壞完全的有機(jī)物以及適用于濕法不易破壞完全的有機(jī)物以及某些不能用硫酸進(jìn)展破壞的有機(jī)藥物。不某些不能用硫酸進(jìn)展破壞的有機(jī)藥物。不適用于含易揮發(fā)性金屬如汞、砷等有適用于含易揮發(fā)性金屬如汞、砷等有機(jī)藥物的破壞。機(jī)藥物的破壞。這里分為：這里分為： a.高溫灼燒法高溫灼燒法 b. 氧瓶熄滅法氧瓶熄滅法 適用于含氮雜環(huán)適用于含氮雜環(huán)+ +含堿土金屬藥物。含堿土金屬藥物。不適于汞、砷的測定。不適于汞、砷的測定。1.1.高溫灼燒法高溫灼燒法 將有機(jī)物

17、灼燒灰化，使有機(jī)構(gòu)造分解而待測將有機(jī)物灼燒灰化，使有機(jī)構(gòu)造分解而待測元素轉(zhuǎn)化為無機(jī)元素或可溶性無機(jī)鹽，以供分析。元素轉(zhuǎn)化為無機(jī)元素或可溶性無機(jī)鹽，以供分析。常加無水碳酸鈉或輕質(zhì)氧化鎂等輔助灰化。常加無水碳酸鈉或輕質(zhì)氧化鎂等輔助灰化。濕法破壞不完全的藥物濕法破壞不完全的藥物2 2、氧瓶熄滅法、氧瓶熄滅法p84p84 將有機(jī)藥物放入充溢氧氣的密閉燒瓶中進(jìn)將有機(jī)藥物放入充溢氧氣的密閉燒瓶中進(jìn)展熄滅展熄滅, ,使有機(jī)構(gòu)造部分徹底分解為二氧化碳和水，使有機(jī)構(gòu)造部分徹底分解為二氧化碳和水，而待測元素根據(jù)電負(fù)性的不同轉(zhuǎn)化為不同價態(tài)的而待測元素根據(jù)電負(fù)性的不同轉(zhuǎn)化為不同價態(tài)的氧化物，被收于適當(dāng)吸收液中氧化物，

18、被收于適當(dāng)吸收液中, ,然后根據(jù)欲測物質(zhì)然后根據(jù)欲測物質(zhì)的性質(zhì)的性質(zhì), ,采用適當(dāng)分析方法進(jìn)展鑒別、檢查或含量采用適當(dāng)分析方法進(jìn)展鑒別、檢查或含量測定。測定。原理：原理：NaClHClOClCNaOH2 溶液點燃 適用于含鹵素、硫、氮、硒等有機(jī)藥物的分析。適用于含鹵素、硫、氮、硒等有機(jī)藥物的分析。 本法特點是簡便、快速、破壞完全，尤其適用于本法特點是簡便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析。微量樣品的分析。 1儀器安裝儀器安裝 熄滅瓶為熄滅瓶為500、1000或或2000ml無色、無色、磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃錐型瓶；瓶塞磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃錐型瓶；瓶塞空心，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺空心，

19、底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網(wǎng)狀旋狀或網(wǎng)狀,長度約為瓶身的長度約為瓶身的2/3。圖圖2 氧瓶熄滅安裝與樣品包裝操作圖氧瓶熄滅安裝與樣品包裝操作圖 A. 作用：作用： 吸收液的作用是將樣品經(jīng)熄滅分解所產(chǎn)生的各吸收液的作用是將樣品經(jīng)熄滅分解所產(chǎn)生的各種價態(tài)的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉(zhuǎn)變種價態(tài)的鹵素、硫、氮、硒等，定量地吸收并轉(zhuǎn)變?yōu)橐欢ǖ谋阌跍y定的價態(tài)。為一定的便于測定的價態(tài)。 2吸收液的選擇吸收液的選擇B. 吸收液的選擇吸收液的選擇樣品樣品吸收液吸收液產(chǎn)物吸收前狀態(tài)產(chǎn)物吸收前狀態(tài)含含F(xiàn)含含Cl含含Br含含I水水水-NaOH水水-NaOH-SO2水水-NaOH-SO2水水-NaOH+溴溴

20、-醋酸醋酸HF HCl HBr+Br2 BrHI+HIO3+HIOI-HI+HIO3+HIOHIO33樣品制備樣品制備 A. 固體樣品固體樣品 無灰濾紙無灰濾紙 B. 液體樣品液體樣品 紙袋紙袋 C. C. 軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測成軟膏類樣品：將適量樣品置不含被測成分的蠟油紙中包裹嚴(yán)密，外層再用無灰濾紙包分的蠟油紙中包裹嚴(yán)密，外層再用無灰濾紙包裹。裹。 在熄滅瓶內(nèi)參與規(guī)定的吸收液，并將瓶口用水在熄滅瓶內(nèi)參與規(guī)定的吸收液，并將瓶口用水潮濕；小心急速通氧氣約潮濕；小心急速通氧氣約1分鐘，立刻用外表皿覆蓋分鐘，立刻用外表皿覆蓋瓶口，備用；點燃包有供試品的濾紙包或紙袋尾部，瓶口，備用；點燃包

21、有供試品的濾紙包或紙袋尾部，迅速放入熄滅瓶中，按緊瓶塞，加水少量封鎖瓶口，迅速放入熄滅瓶中，按緊瓶塞，加水少量封鎖瓶口，俟熄滅終了應(yīng)無黑色碎片，充分振搖，使生成的俟熄滅終了應(yīng)無黑色碎片，充分振搖，使生成的煙霧完全吸入吸收液中，放置煙霧完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量沖洗，用水少量沖洗瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白實驗。瓶塞及鉑絲，合并洗液及吸收液，同法另做空白實驗。然后按各藥品項下規(guī)定的方法進(jìn)展鑒別、檢查或含量然后按各藥品項下規(guī)定的方法進(jìn)展鑒別、檢查或含量測定。測定。4操作方法操作方法 充氧氣要充分充氧氣要充分 使樣品熄滅完全使樣品熄滅完全, ,普通急速通氧氣普通急速通氧

22、氣1212分分鐘鐘, ,熄滅完全時沒有黑色炭化物。熄滅完全時沒有黑色炭化物。防護(hù)措施防護(hù)措施: :戴防護(hù)眼睛；瓶外包濕毛巾戴防護(hù)眼睛；瓶外包濕毛巾防爆防爆 樣品熄滅時樣品熄滅時, ,溫度很高溫度很高, ,熄滅瓶內(nèi)壓力很大熄滅瓶內(nèi)壓力很大, ,有有爆炸的能夠性爆炸的能夠性, ,必需采取防護(hù)措施。必需采取防護(hù)措施。 吸收完全吸收完全普通振搖普通振搖30,30,熄滅瓶看不到煙霧。熄滅瓶看不到煙霧。ClCl、F F白色煙霧白色煙霧 BrBr棕色棕色 I I紫色紫色例例 碘苯酯的含量測定碘苯酯的含量測定 ChP2019原理原理 碘苯酯系有機(jī)碘化物，用氧瓶熄滅分解，轉(zhuǎn)變?yōu)榈獗锦ハ涤袡C(jī)碘化物，用氧瓶熄滅分解

23、，轉(zhuǎn)變?yōu)榈饣?，繼而氧化為游離的碘，并被定量地吸收于吸收碘化物，繼而氧化為游離的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氫氧化鈉反響，生成碘化物與碘酸鹽，參與溴液中，和氫氧化鈉反響，生成碘化物與碘酸鹽，參與溴- -醋酸溶液，使全部轉(zhuǎn)變?yōu)榈馑猁}，過量的溴以甲酸及醋酸溶液，使全部轉(zhuǎn)變?yōu)榈馑猁}，過量的溴以甲酸及通空氣去除。參與碘化鉀，使與碘酸鹽反響析出游離碘，通空氣去除。參與碘化鉀，使與碘酸鹽反響析出游離碘，用硫代硫酸鈉液滴定，碘與淀粉結(jié)合所顯的藍(lán)色消逝即用硫代硫酸鈉液滴定，碘與淀粉結(jié)合所顯的藍(lán)色消逝即為終點。為終點。實例實例- - 碘苯酯的含量測定碘苯酯的含量測定C(CH2)8COOC2H5CH3I 淀粉

24、作指示劑 終點：藍(lán)色消失 樣品 0.02mol/L Na2S2O3 O2/Pt 燃燒 NaOH-H2O 吸收 Br2-HAc 甲酸 空氣 KI 溴溴- -醋酸的作用：將碘化物全部轉(zhuǎn)為碘酸鹽。醋酸的作用：將碘化物全部轉(zhuǎn)為碘酸鹽。甲酸的作用：除去過量的溴甲酸的作用：除去過量的溴22COHBrHCOOHBr1 .氧瓶熄滅法中的安裝有氧瓶熄滅法中的安裝有A. 磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶磨口硬質(zhì)玻璃錐形瓶B. 磨口軟質(zhì)玻璃錐形瓶磨口軟質(zhì)玻璃錐形瓶C. 鉑絲鉑絲D. 鐵絲鐵絲E. 鋁絲鋁絲2. 氧瓶熄滅法測定含氯有機(jī)藥物時所用的吸氧瓶熄滅法測定含氯有機(jī)藥物時所用的吸收液多數(shù)為收液多數(shù)為 A. H2O2溶液溶液 B

25、. H2O2NaOH溶液溶液 C. 水水NaOH溶液溶液 D硫酸肼飽和液硫酸肼飽和液 E. NaOH硫酸肼飽和液硫酸肼飽和液第二節(jié) 定量分析方法的特點 容量分析法也稱滴定法：是將知濃度的容量分析法也稱滴定法：是將知濃度的滴定液規(guī)范物質(zhì)溶液由滴定管滴加到被測藥滴定液規(guī)范物質(zhì)溶液由滴定管滴加到被測藥物反響完全經(jīng)過適當(dāng)方法指示，然后根據(jù)滴物反響完全經(jīng)過適當(dāng)方法指示，然后根據(jù)滴定液的濃度和被耗費的體積，按化學(xué)計量關(guān)系計定液的濃度和被耗費的體積，按化學(xué)計量關(guān)系計算出被測藥物的含量。算出被測藥物的含量。 一、定義一、定義 1、滴定度、滴定度 系指每系指每1ml規(guī)定濃度的滴定液規(guī)定濃度的滴定液所相當(dāng)?shù)谋粶y藥

26、物的質(zhì)量所相當(dāng)?shù)谋粶y藥物的質(zhì)量(用用mg表示表示)。 2、滴定度、滴定度(T)的計算的計算第三節(jié)第三節(jié) 藥品分析方法驗證藥品分析方法驗證方法驗證目的方法驗證目的: :證明采用的方法適宜于相應(yīng)檢測要求證明采用的方法適宜于相應(yīng)檢測要求. . 1 1、研討新藥時制定質(zhì)量規(guī)范分析方法；、研討新藥時制定質(zhì)量規(guī)范分析方法；2 2、藥物消費方法變卦、制劑組分變卦、藥物消費方法變卦、制劑組分變卦、原分析方法修訂。原分析方法修訂。1 1 鑒別實驗。鑒別實驗。需驗證的分析工程：需驗證的分析工程：2 2 原料藥或制劑中有效成分含量測定。原料藥或制劑中有效成分含量測定。3 3 雜質(zhì)或制劑中其他成分防腐劑等的雜質(zhì)或制劑

27、中其他成分防腐劑等的定量測定或限制檢查。定量測定或限制檢查。4 4 藥品溶出度、釋放度等功能檢查中藥品溶出度、釋放度等功能檢查中, ,其溶出其溶出量的測定方法。量的測定方法。驗證的內(nèi)容有驗證的內(nèi)容有: : 1. 1.準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度 2.2.精細(xì)度精細(xì)度 3.3.專屬性專屬性 4.4.檢測限檢測限 5.5.定量限定量限 6.6.線性線性 7.7.范圍范圍 8.8.耐用性耐用性 一 準(zhǔn)確度accuracy 準(zhǔn)確度是指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。1. 含量測定方法的準(zhǔn)確度含量測定方法的準(zhǔn)確度 a、原料藥的含量測定、原料藥的含量測定 用知純度的對照品或樣品進(jìn)展測定，或

28、用用知純度的對照品或樣品進(jìn)展測定，或用本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測定本法所得結(jié)果與已建立準(zhǔn)確度的另一方法測定的結(jié)果進(jìn)展比較。的結(jié)果進(jìn)展比較。 %100AMR 回收實驗 空白+知量A的對照品或規(guī)范品測定，測定值為M b、制劑的含量測定、制劑的含量測定 可用含己知量被測物的各組分混可用含己知量被測物的各組分混合物進(jìn)展測定，即采用在空白輔料中合物進(jìn)展測定，即采用在空白輔料中參與原料藥對照品的方法。參與原料藥對照品的方法。 如不能得如不能得到制劑的全部組分，可向制劑中參與到制劑的全部組分，可向制劑中參與知量的被測物進(jìn)展測定，或與另一個知量的被測物進(jìn)展測定，或與另一個已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果

29、。已建立準(zhǔn)確度的方法比較結(jié)果。%100APMR2雜質(zhì)定量測定的準(zhǔn)確度雜質(zhì)定量測定的準(zhǔn)確度 可向原料藥或制劑中參與知量雜質(zhì)可向原料藥或制劑中參與知量雜質(zhì)進(jìn)展測定。假設(shè)不能得到雜質(zhì)或降解進(jìn)展測定。假設(shè)不能得到雜質(zhì)或降解產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟產(chǎn)物，可用本法測定結(jié)果與另一成熟的方法進(jìn)展比較。的方法進(jìn)展比較。 3. 數(shù)據(jù)要求 規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次。 二精細(xì)度precision 精細(xì)度是指在規(guī)定條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏向d、規(guī)范偏向(SD)、相對規(guī)范偏向(RSD)變異系數(shù)，CV表示。 偏向偏向d d：丈量值

30、與平均值之差：丈量值與平均值之差：xxdi規(guī)范偏差規(guī)范偏差SDSD或或S S：12nxxSi相對規(guī)范偏差相對規(guī)范偏差RSDRSD，也稱變異系數(shù)，也稱變異系數(shù)CVCV：%100 xSRSD 1. 反復(fù)性 在一樣條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精細(xì)度；在規(guī)定的范圍內(nèi)，至少用9次測定結(jié)果評價，如制備三個不同濃度樣品各測三次或把被測物濃度當(dāng)作100%，至少測6次進(jìn)展評價。 2. 中間精細(xì)度 同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精細(xì)度。調(diào)查隨機(jī)變動要素的影響。變動要素為不同日期、不同分析人員、不同設(shè)備。 3. 重現(xiàn)性 不同實驗室，不同分析人員測定結(jié)果的精細(xì)度。當(dāng)分析方法將被法定規(guī)

31、范采用時，應(yīng)進(jìn)展重現(xiàn)性實驗。如建立藥典分析方法時經(jīng)過協(xié)同檢驗得出重現(xiàn)性結(jié)果，協(xié)同檢驗的過程、重現(xiàn)性結(jié)果均應(yīng)記載在起草闡明中。 三專屬性specificity 指有其他成分雜質(zhì)、降解物、輔料等能夠存在情況下采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性，能反映該方法在有共存物時對供試物準(zhǔn)確而專屬的測定才干。是指該法用于復(fù)雜樣品分析時相互關(guān)擾程度的度量。 四 檢測限limit of detection， LOD 檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的最低量。是限制實驗參數(shù)，無需定量測定。常用方法常用方法: : 用知濃度被測物測定出能被可靠地檢測出用知濃度被測物測定出能被可靠地檢測出的最低濃度或量的最低濃度或量.

32、.1.1.非儀器分析目視法非儀器分析目視法: :當(dāng)用當(dāng)用GCGC和和HPLCHPLC法時法時: : 普通用普通用 S/N=2 S/N=2 或或 S/N=3 S/N=3 時的相應(yīng)濃時的相應(yīng)濃度或量確定檢測限度或量確定檢測限. . S/NS/N：它指音源產(chǎn)生最大不失真聲音信號強(qiáng)度與：它指音源產(chǎn)生最大不失真聲音信號強(qiáng)度與同時發(fā)出噪音強(qiáng)度之間的比率稱為信號噪聲比同時發(fā)出噪音強(qiáng)度之間的比率稱為信號噪聲比越大越好越大越好 2.2.儀器分析時的測定方法儀器分析時的測定方法五定量限1imit of quantitation，LOQ 指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精細(xì)度。確定方法確定

33、方法: : 1 1 儀器分析儀器分析 S/N=10 S/N=10 估算估算, ,并經(jīng)配制相應(yīng)濃度確認(rèn)。并經(jīng)配制相應(yīng)濃度確認(rèn)。 2 2 非儀器分析目視法非儀器分析目視法 用知濃度的被測物實驗出能被準(zhǔn)確測定的最低用知濃度的被測物實驗出能被準(zhǔn)確測定的最低濃度或量。濃度或量。 六 線性 在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。 方法方法 作圖法作圖法 回歸方程回歸方程 Y=aX+b(r=1)Y=aX+b(r=1)規(guī)范溶液溶液濃度應(yīng)包括一定梯度的規(guī)范溶液溶液濃度應(yīng)包括一定梯度的5-85-8個濃度。個濃度。規(guī)范曲線應(yīng)覆蓋樣品能夠的濃度范圍。規(guī)范曲線應(yīng)覆蓋樣品能夠的濃度范圍。數(shù)據(jù)要求

34、：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖。七范圍七范圍 指到達(dá)一定精細(xì)度、準(zhǔn)確度和線性指到達(dá)一定精細(xì)度、準(zhǔn)確度和線性的條件下，測試方法適用的高低限濃度的條件下，測試方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間?；蛄康膮^(qū)間。 原料和制劑含量測定范圍應(yīng)為測試濃度的原料和制劑含量測定范圍應(yīng)為測試濃度的 80%-120%； 制劑含量均勻度檢查范圍應(yīng)為測試濃度的制劑含量均勻度檢查范圍應(yīng)為測試濃度的 70%-130%；八八 耐用性耐用性 指測定條件稍有變動時，結(jié)果不指測定條件稍有變動時，結(jié)果不受影響的接受程度，為常規(guī)檢驗提供受影響的接受程度，為常規(guī)檢驗提供根據(jù)。是衡量實驗室和任務(wù)人

35、員之間根據(jù)。是衡量實驗室和任務(wù)人員之間在正常情況下實驗結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。在正常情況下實驗結(jié)果重現(xiàn)性的尺度。 是評價其堅持不受參數(shù)微小變差影響的才干是評價其堅持不受參數(shù)微小變差影響的才干. .九運用九運用 P102 1 1、用于藥物鑒別實驗、用于藥物鑒別實驗 專屬性專屬性 耐用性耐用性 2 2、用于原料藥中主成分或制劑中有效成分含量、用于原料藥中主成分或制劑中有效成分含量測定方法測定方法 除不需檢測限、定量限外其他除不需檢測限、定量限外其他6 6項都需驗證。項都需驗證。3 3、原料藥中雜質(zhì)測定或制劑中降解產(chǎn)物等其他、原料藥中雜質(zhì)測定或制劑中降解產(chǎn)物等其他雜質(zhì)測定方法雜質(zhì)測定方法 用于定量用于定量

36、- - -除檢測限外其他除檢測限外其他7 7項都需驗證；項都需驗證； 用于限制檢查用于限制檢查-專屬性專屬性 耐用性耐用性 檢測限。檢測限。 不同分析方法對驗證參數(shù)的要求不同分析方法對驗證參數(shù)的要求驗證工程驗證工程鑒鑒別別雜檢雜檢含量含量測定測定定定量量限量限量-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+-+十各種含量測定方法對效能目的十各種含量測定方法對效能目的的要求的要求 1. 1. 容量分析法：用原料藥精制品容量分析法：用原料藥精制品( (含量含量99.599.5) )或?qū)φ掌氛{(diào)查方法的或?qū)φ掌氛{(diào)查方法的精細(xì)度，相對規(guī)范差普通應(yīng)不大于精細(xì)度，相對規(guī)范差普通應(yīng)不大于0.20.2；進(jìn)展回收率實驗?；厥章势胀ㄔ?；進(jìn)展回收率實驗?；厥?/p>