2022年高考生物總復習選修一全冊重點知識復習匯編（精華版）

1、選修1生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)(-)無菌操作技術(shù)實踐第一節(jié)微生物的分離與培養(yǎng)1、培養(yǎng)基：為人工培養(yǎng)微生物而制備的適合微生物生長、繁殖或積累代 謝產(chǎn)物的營養(yǎng)基質(zhì)。2、培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。 在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂(紅藻中提取的一種多糖)后，制成固 體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。 固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定。 按照成分培養(yǎng)基可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。天然培養(yǎng)基是用化 學成分不明的天然物質(zhì)配制而成，常用于實際工業(yè)生產(chǎn)，如牛肉膏蛋白 陳培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學物質(zhì)配制而成，其中成分的 種類比例明確，常用

2、于微生物的分離鑒定，如葡萄糖鐵鹽培養(yǎng)基。 按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的微生物 生長，促進所需要的微生物的生長。在選擇培養(yǎng)基的配方中，將尿素作 為培養(yǎng)基中唯二原則上只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。 培養(yǎng)基中加入囊霉素可以分離出酵母菌和霉菌、培養(yǎng)基中不加氮源可以 分離出固氮微生物、培養(yǎng)基中丕加碳遽可以分離出自養(yǎng)型微生物 3、培養(yǎng)基的化學成分包括水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等。 碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如C02、NaHCO,等無機碳 第1頁共20頁源；糖類、石油、花生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物

3、只能利用有機碳源。 氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如M 陽3、N03 NH；（無 機氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陳（有機氮源）等。只 有固氮微生物才能利用N2o4、無菌技術(shù)：獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，要注意以 下幾個方面：對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒。將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進 行。實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。 無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有 什么目的？答：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身

4、被微生物感染。6、消毒與滅菌的區(qū)別消毒指使用較為溫和的物理或化學方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部 分對人體有害的微生物（不包括芽抱和抱子）。消毒方法常用煮沸消毒法、 巴氏消毒法（對于一些不耐高溫的液體）、還有化學藥劑（如酒精、氯氣、 石炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽 抱和抱子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌（看書上的圖）。第2頁共20頁滅菌方法：接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅 菌箱；培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓 蒸汽滅菌鍋。表面滅菌和空氣滅菌等使用

5、紫外線滅菌法，所用器械是紫外 燈。比較項理化因素的作用強度消滅微生物的數(shù)量芽抱和抱子能否被消消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強烈全部微生物能7、制作固體培養(yǎng)基的方法步驟：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法：將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天，若無菌落生長， 說明培養(yǎng)基制備成功8、倒平板操作的討論(1)培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50左右時，才能用來倒平板。你怎么估計培養(yǎng)基的溫度？提示：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降 到剛剛不燙手時，就可以進行倒平板了。(2)為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。(3)平

6、板冷凝后，為什么要將平板倒置？平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比 較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可以防 止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。(4)在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部 位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好 不用該平板培養(yǎng)微生物。9、純化大腸桿菌(1)微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。 將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以 分離到由一個細

7、胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體，這就是菌落。(3)稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋 度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。分為系列稀釋 操作和涂布平板操作兩步。(4)用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微 第4頁共20頁生物分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便于純 化菌種。(5)平板劃線法操作步驟：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。將試管口通過火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰，并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃

8、三至五條平行線，蓋上皿 蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復以上操作，在三、四、五區(qū)域 內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。10、平板劃線操作的討論(1)為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在 劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng) 物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留 的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端, 從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，

9、以便得 到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避 第5頁共20頁免細菌污染環(huán)境和感染操作者。(2)在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？ 以免接種 環(huán)溫度太高，殺死菌種。(3)在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末 端開始劃線？答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一 次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少， 最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。11、涂布平板操作的步驟：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液，滴加到培養(yǎng)基表面。將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8 10so用涂布器

10、將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。第二節(jié) 土壤中微生物的分離與計數(shù)1、測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)。2、稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品 稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大 約含有多少活細菌。為了保證結(jié)果準確，一般設(shè)置35個平板，選擇菌 第6頁共20頁落數(shù)在30300的平板進行計數(shù)，并取平均值。由于待測樣品往往不易 完全分散成單個個體，長成的一個菌落，也有可能來源于樣品中的2-3 個或更多個個體，因此，涂布平板菌落計數(shù)法計數(shù)的結(jié)果與實際情況相 比往往偏低3、纖維素分解菌的篩選

11、（1）篩選方法：剛果紅染色法。能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進行篩 選。（2）剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平 板時就加入剛果紅。（二）果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵；無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵、乳酸發(fā)酵3、酵母菌是兼性厭氧型真菌；酵母菌的生殖方式：出芽生殖（主要）、抱 子生殖4、在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。方程式5、在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。方程式6、酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18-257、在葡萄酒自然發(fā)酵過程中，起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生 型酵母菌.在發(fā)酵過

12、程中，隨著酒精濃度的提高，紅葡萄皮的色素也進 第7頁共20頁入發(fā)酵液，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可 以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。8、醋酸菌是單細胞細菌（原核生物），代謝類型是異養(yǎng)需氧型，生殖方式為 二分裂9、當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少 糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?0、控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進行深層 發(fā)酵時，即使只是短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。醋 酸菌最適生長溫度為3035,控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時間縮短， 又減少雜菌污染的機會。有兩條途徑生成

13、醋酸：直接氧化和以酒精 為底物的氧化。11、實驗流程：挑選葡萄一沖洗一榨汁一酒精發(fā)酵一果酒（一醋酸發(fā)酵 一果醋）12、酒精檢驗：果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鋁酸鉀來檢驗。在酸性條件下，重鋁酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2mL,再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2soi3滴，振蕩混勻,最后滴加常溫下飽和的重鋁酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色 的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。 排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的是防止空氣中 微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用該裝置 制酒時，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時，應(yīng)該充氣

14、口連接氣泵，輸入氧氣。充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用疑難解答：（1）你認為應(yīng)該先沖洗葡萄還是先除去枝梗？為什么？應(yīng)該先沖洗，然后再除去枝梗，以避免除去枝梗時引起葡萄破損，增 加被雜菌污染的機會。（2）你認為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染？如：要先沖洗葡萄，再除去枝梗；榨汁機、發(fā)酵裝置要清洗干凈，并 進行酒精消毒；每次排氣時只需擰松瓶蓋，不要完全揭開瓶蓋等。（三）腐乳的制作1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲.霉、毛霉等，其中 起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。 生殖方式是抱子生殖。營腐生生活。2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)

15、分解成小分子 的肽和氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。3、實驗流程：讓豆腐上長出毛霉一加鹽腌制一加鹵湯裝瓶一密封腌制4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用：1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包 住豆腐使腐乳成型。后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過各種輔料與 酶的緩解作用，生成腐乳的香氣。5、將豆腐切成3cmX3cmX 1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70%左右, 水分過多則不易成形。 毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，將籠屜中的控制在15 18,并保持一定的溫度。來源：1.來自空氣中的毛霉狗子，2.直接接種優(yōu)良毛霉

16、菌種 加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加 鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽 腌制的時間約為8天左右。 用鹽腌制時，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物 的生長，可能導致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味 食鹽的作用：1.抑制微生物的生長，避免腐敗變質(zhì)2.析出水分，是豆 腐變硬，在后期制作過程中不易酥爛3.調(diào)味作用，給腐乳以必要的咸味 4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。 配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香 辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。 酒的作用：1.防止雜菌污染以防腐2.與有機

17、酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳 風味3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系，酒精含 量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過 低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗。第10頁共20頁 香辛料的作用：1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進發(fā)酵過程 防止雜菌污染：用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時，操作要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠 條將瓶口密封。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污 染。疑難解答：（1）利用所學的生物學知識，解釋豆腐長白毛是怎么一回事？ 豆腐生長的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴格地說是

18、直立菌絲，在豆腐中還有匍匐菌絲。（2）為什么要撒許多鹽，將長毛的豆腐腌起來？鹽能防止雜菌污染，避免豆腐腐敗。（3）我們平常吃的豆腐，哪種適合用來做腐乳？含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量高的豆腐制作腐乳， 不易成形。（4）吃腐乳時，你會發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮” 是怎樣形成的呢？它對人體有害嗎？它的作用是什么？“皮”是前期發(fā)酵時在豆腐表面上生長的菌絲（匍匐菌絲），對人體 無害。它能形成腐乳的“體”，使腐乳成形。（四）探究加酶洗衣粉的洗滌效果1 .加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋 白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的

19、 是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。2 .堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶 也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì)，使洗衣粉 具有更好的去污能力。3 .在本課題中，我們主要探究有關(guān)加酶洗衣粉的三個問題：一是普通洗衣粉和加酶洗衣粉對衣物污漬的洗.滌效果有什么不同；二是在什么溫度 下使用加酶洗衣粉效果最好，三是添加不同種類的酶的的洗衣粉，其洗 劑效果有哪些區(qū)別。注意事項 變量的分析和控制：影響加酶洗衣粉洗,滌效果的因素有水溫、水量、水 質(zhì)、洗衣粉的用量，衣物的質(zhì)料、大小及浸泡時間和洗滌的時間等。在 這些

20、因素中，若水溫是我們要研究的對象，則其他因素應(yīng)在實驗中保持這是因為細胞個不變。（五）酵母細胞的固定化固定化酶和固定化細胞是利用物理或化學方法將酶或 細胞固定在.一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學結(jié) 合法和物理吸附法。一般來說，酶更適合采用化學結(jié) 合法和物理吸附法固定，而細胞多采用包埋法固定化。大，而酶分子很小；個大的難以被吸附或結(jié)合，而個小的酶容易從包埋材料中漏出。固定化酶優(yōu)點:使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，還可以被反 復利用。固定化細胞優(yōu)點：成本更低，操作更容易，可以催化一系列的化學反應(yīng)。實驗步驟lo細胞的活化稱取1g干,酵母，放入50 mL的小燒杯中，加人蒸儲水10 mL,用玻 璃

21、棒攪拌，使酵母細胞混合均勻，成糊狀，放置lh左右，使其活化（讓 處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復正常生活狀態(tài)）。2o配制物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L的CaCL溶液（略）3配制海藻酸鈉溶液稱取0.7g海藻酸鈉，放入50mL小燒杯中。加人10mL水，用酒精燈 加熱，邊加熱邊攪.拌，將海藻酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸儲水 定容至10mL。注意，加熱時要用小火，或者間斷加熱，反復幾次，直到 海藻酸鈉溶化為止。4O海藻酸鈉溶液與酵母細胞混合將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加人已活化的醉母細胞，進行 充分攪拌，使其混合均勻，再轉(zhuǎn)移至注射器中。：【注】冷卻至室溫的目 的：防止殺死酵母菌5O固定化酵母細

22、胞以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCL溶液 第13頁共20頁中，觀察液滴在CaCk溶液中形成凝膠珠的情形。將這些凝膠珠在CaCk 溶液中浸泡30 min左右。6.使用固定化酵母細胞發(fā)酵a）將固定好的酵母細胞（凝膠珠）用蒸儲水沖洗2-.3次。b）將150mL質(zhì)量分數(shù)為10%的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL的錐形瓶中， 再加入固定好的酵母細胞，置于25c下發(fā)酵24h。注意事項：I.配制海藻酸鈉溶液：小火、間斷加熱、定容，如果加熱太快, 海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。2 .海藻酸鈉溶液與酶母細胞混合：冷卻后再混合，注意混合均勻，不要進 入氣泡3 .制備固定化酵母細胞：高度適宜，并勻速滴入4 .

23、剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCL2溶液，中浸泡一段時間，以便Ca2+與Na+ 充分交換，形成的凝膠珠穩(wěn)定。檢驗凝膠珠是否形成，可用下列方法： 用鏡子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手擠壓，如果不容易破裂，沒有 液體流出就表明成功地制成了凝膠珠，還可以用手將凝膠珠在實驗桌上 用力摔打，如果凝膠珠很容易彈起，也表明制備的凝膠珠是成功的。5 .凝膠珠的顏色和形狀如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉的濃度偏低， 固定的酵母細胞數(shù)目較少；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說 明海藻酸鈉的濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗試。第14頁共20頁DNA不0. 14NaCl濃度(mol/L)（六） DNA的粗提取

24、與鑒定1、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面？DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同;溶于酒精。2、DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度有何特點？要使DNA溶解，需要使 用什么濃度？要使DNA析出，又需要使用什么濃度？在0. 14mol/L時溶解度最??；較高濃度可使DNA溶解；0. 14mol/L可 使DNA析出。3、在溶解細胞中的DNA時，人們通常選用2moi/LNaCl溶液；將DNA分 子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中緩慢注入蒸儲水，以稀釋NaCl 溶液。酒精是一種常用有機溶劑，但DNA卻不能溶于酒精（特別是95% 冷卻酒精），但細胞中蛋白質(zhì)可溶于酒精。從理論上分析，預冷的乙醇

25、溶液具有以下優(yōu)點。一是抑制核酸水解酶活 性，防止DNA降解；二是降低分子運動，易于形成沉淀析出；三是低溫 有利于增加DNA分子柔韌性，減少斷裂。4、采用DNA不溶于酒精的原理，可以達到什么目的？將DNA和蛋白質(zhì)進一步分離。5、提取DNA還可以利用DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性原理。利用該 原理時，應(yīng)選用怎樣的酶和怎樣的溫度值？蛋白酶，因為酶具有專一性，蛋白酶只水解蛋白質(zhì)而不會對DNA產(chǎn)生 影響。溫度值為6080,因為該溫度值蛋白質(zhì)變性沉淀，而DNA不會 變性。補充：DNA的變性是指DNA分子在高溫下解螺旋，其溫度在80以上, 如在PCR技術(shù)中DNA變性溫度在95o6、洗滌劑在提取DNA中有何

26、作用？洗滌劑將細胞膜上的蛋白質(zhì)分解，從而瓦解細胞膜。7、當鑒定提取出的物質(zhì)是否是DNA時，需要使用什么指示劑進行鑒定？ 在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺呈現(xiàn)藍色。原理總結(jié)：通過利用不同濃度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以從細胞中 提取和提純DNA；再利用酒精進一步將DNA與蛋白質(zhì)分離開來，達到提純 的目的；最后利用二苯胺試劑鑒定提取的物質(zhì)是否是DNA。實驗步驟如下：實驗材料的選取不同生物組織中DNA含量不同。選取材料時，應(yīng)本著DNA含量高、材料 易得、便于提取的原則。本實驗選用雞血細胞的原因，一：雞血細胞核的DNA含量豐富，材料 易得；二：雞血細胞極易吸水脹破，而用動物肝臟細胞為材料常需要勻

27、漿和離心，對設(shè)備要求高，操作繁瑣，歷時較長。雞血細胞破碎以后釋放出的DNA,容易被玻璃容器吸附，所以在提取 過程中為了減少DNA的損失，最好使用塑料的燒杯和試管盛放雞血細胞 液。破碎細胞，獲取含DNA的濾液 若選用雞血和洋蔥作實驗材料，則怎樣獲取含DNA的濾液？在雞血細胞液中加入一定量蒸儲水并用玻棒攪拌，過濾后收集濾液； （具體做法：10mL雞血+ 20mL蒸儲水一同方向攪拌一3層尼龍布過濾一 濾液）切碎洋蔥，加入一定量洗滌劑和食鹽，攪拌研磨，過濾后收集濾液。為什么加入蒸儲水能使雞血細胞破裂？答：蒸儲水對于雞血細胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進入血細 胞內(nèi)，使血細胞脹裂，再加上攪拌的機械作用，就加速了雞血細胞的破 裂（細胞膜和核膜的破裂），從而釋放出DNA。來網(wǎng) 以上實驗中，加入蒸儲水、洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？過濾時 應(yīng)選用（濾紙、尼龍布）？血細胞在蒸儲水中大量吸水而張裂；洗滌劑瓦解細胞膜；食鹽溶解DNA 物質(zhì)；選用尼龍布進行過濾。 在處理植物組織時需要