臨床PCR實驗室的設(shè)計及質(zhì)量管理體系的建立

1、臨床PCR實驗室的設(shè)計及質(zhì)量管理體系的建立理想的理想的PCR實驗室設(shè)置實驗室設(shè)置A產(chǎn)物分析區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊專用走廊工作流向工作流向擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊專用走廊工作流向工作流向擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)理想的理想的PCR實驗室設(shè)置實驗室設(shè)置B門門試劑準(zhǔn)備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)產(chǎn)物

2、分析區(qū)外走廊外走廊門門門門門門門門試劑準(zhǔn)備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò) 增 及 產(chǎn) 物擴(kuò) 增 及 產(chǎn) 物分析區(qū)分析區(qū)外走廊外走廊門門門門門門門門AB“十六字口訣十六字口訣”產(chǎn)物分析區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向空氣流向緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間緩沖間專用走廊專用走廊工作流向工作流向擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增區(qū)標(biāo)本制備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)傳遞窗傳遞窗傳遞窗管理 “外部檢查”、通過“認(rèn)證”和“認(rèn)可”管理就是通過計劃、組織、領(lǐng)導(dǎo)和控制，協(xié)調(diào)以人為中心的組織資源與職能，以有效實現(xiàn)目標(biāo)的社會活動。 XXX單位XXX實驗室XXX標(biāo)準(zhǔn)操作程序編號：啟用日期：版本：

3、第 頁 共 頁一目的：二適用范圍：三職責(zé)或責(zé)任人：四（方法原理）五（檢測設(shè)備和試劑）六（所需的環(huán)境條件）七操作步驟： 1 2 3 五、本操作程序變動程序：六、相關(guān)的文件七、相關(guān)的記錄表格和報告編寫人審核人批準(zhǔn)人陽性質(zhì)控樣本測定結(jié)果偏低或為陰性結(jié)果偏低 陰性臨床標(biāo)本中無強(qiáng)陽性臨床標(biāo)本中有較強(qiáng)陽性臨床標(biāo)本中有陽性臨床標(biāo)本全為陰性 觀察臨床標(biāo)本情況所用離心管含抑制物Taq酶活性降低核酸提取試劑效率低更換進(jìn)口離心管更換Taq酶再檢測更換核酸提取試劑所有標(biāo)本重新檢測核酸提取中靶核酸丟失核酸提取中抑 抑物殘留核酸提取試劑混入擴(kuò)增儀孔間溫度差異隨機(jī)誤差檢測質(zhì)控樣本及35份已知陽性樣本質(zhì)控樣本測定正常且陽性樣

4、本有些值增加質(zhì)控及已知陽性樣本測定仍異常按系統(tǒng)誤差途徑分析重新提取或已知濃度DNA在同一孔內(nèi)擴(kuò)增結(jié)果正常結(jié)果仍低進(jìn)行擴(kuò)增儀孔溫度校準(zhǔn)后再檢測Taq酶或逆轉(zhuǎn)錄酶失活陰性質(zhì)控樣本測定為陽性臨床標(biāo)本亦全為陽性臨床標(biāo)本中有陽性也有陰性擴(kuò)增產(chǎn)物“污染”試劑“污染”同時檢測的標(biāo)本情況擴(kuò)增產(chǎn)物輕度“污染”標(biāo)本間交叉“污染”35空管室內(nèi)靜置58份水樣本檢測試劑直接擴(kuò)增檢測驗證驗證58份水樣本檢測暫停日常檢驗，實驗室清潔、通風(fēng) 更換試劑 措施有陽性，則確認(rèn)有實驗室“污染”無陽性，說明為標(biāo)本交叉“污染”改善操作措施 臨床臨床PCRPCR檢驗流程記錄表檢驗流程記錄表 檢驗日期檢驗日期 檢驗項目：檢驗項目： 擴(kuò)增儀中

5、保存文件名：擴(kuò)增儀中保存文件名： 使用說明：使用說明：1本記錄表須嚴(yán)格遵循試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)（產(chǎn)物分析區(qū)）單一流向移動，嚴(yán)禁逆向移動。2各項工作執(zhí)行后，在相應(yīng)敘述前的“”內(nèi)打“”。3本記錄表最后與相應(yīng)的標(biāo)本接收記錄等歸檔保存于擴(kuò)增區(qū)的專用文件柜內(nèi)，以備查找。實驗前準(zhǔn)備實驗前準(zhǔn)備 試劑在有效期內(nèi) 擴(kuò)增儀、加樣器和溫度計在校準(zhǔn)的有效期內(nèi) 生物安全柜的濾膜在使用有效期內(nèi) 消毒溶液在有效期內(nèi) 沖眼器內(nèi)無菌生理鹽水在有效期內(nèi) 離心管、帶濾芯吸頭已經(jīng)過質(zhì)檢合格 操作者操作者： 試劑準(zhǔn)備區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)（1 1區(qū)）區(qū)）實驗前實驗前 ： 打開通風(fēng)設(shè)備 實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭） 冰箱溫度：冷藏室

6、（28） ； 冷凍室（182） 實驗室溫度： （允許范圍：1030）；相對濕度： （允許范圍：30%70%）PCR試劑來源： （可直接列出有關(guān)廠家名稱） 批號： 檢驗項目： 本次實驗用量： 人份，剩余量： 人份。其他有關(guān)試劑配制： 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制1%含氯消毒液 毫升； 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制4NaOH溶液 毫升； 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制0.1%焦磷酸二乙酯 毫升； 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP配制 毫升； 其他： 儀器設(shè)備使用：儀器設(shè)備使用：離心機(jī)： 正常 不正常 振蕩器： 正常 不正常實驗后：實驗后： 按XXX（將

7、有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面、加樣器和離心機(jī)，并進(jìn)行紫外照射30分鐘以上。 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。 操作者：操作者： 標(biāo)本制備區(qū)（標(biāo)本制備區(qū)（2 2區(qū)）區(qū)）實驗前：實驗前： 打開通風(fēng)設(shè)備 實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭） 冰箱（柜）溫度：冷藏室（28） ； 冷凍室（182） 實驗室溫度： （允許范圍：1030）；相對濕度： （允許范圍：30%70%）陽性室內(nèi)質(zhì)控物來源： 濃度及批號： 擴(kuò)增位置： 陰性室內(nèi)質(zhì)控物來源： 批號： 擴(kuò)增位置： 所取理的標(biāo)本（對應(yīng)標(biāo)本接收的唯一編號）及擬擴(kuò)增位置：所取理的標(biāo)本（對應(yīng)標(biāo)本接收的唯一編號）及擬擴(kuò)增位置：1

8、 19 9171725252 21010181826263 31111191927274 41212202028285 51313212129296 61414222230307 71515232331318 8161624243232核酸提取及加樣過程核酸提取及加樣過程：按XXX（列出編號）SOP進(jìn)行。儀器設(shè)備使用：儀器設(shè)備使用： 生物安全柜： 正常 不正常 恒溫儀溫度校準(zhǔn)： 離心機(jī)： 正常 不正常 振蕩器： 正常 不正常實驗后：實驗后： 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設(shè)備。 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。 操作者：操作者： 擴(kuò)增及產(chǎn)

9、物分析區(qū)（擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)（3 3區(qū)）區(qū)）實驗前實驗前 打開通風(fēng)設(shè)備 實驗臺面清潔（水或70%酒精擦拭） 實驗室溫度： （允許范圍：1030）；相對濕度： （允許范圍：30%70%）擴(kuò)增儀操作： 開機(jī)自檢及運行正常 按XXX（列出編號）SOP進(jìn)行編程、參數(shù)設(shè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線計算值：標(biāo)準(zhǔn)曲線計算值：Slope值值： （ ）Intercept值值： （ ） r值值： （ ）室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果：室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果：結(jié)果： 填寫室內(nèi)質(zhì)控記錄、描質(zhì)控圖 是否失控：是否失控：否 是 實驗結(jié)果：實驗結(jié)果：見所附擴(kuò)增儀打印結(jié)果實驗后：實驗后： 按XXX（將有關(guān)SOP編號列出）SOP清潔實驗室臺面、地面及儀器設(shè)備。 按XXX（將

10、有關(guān)SOP編號列出）SOP處理實驗廢棄物。 操作者：操作者： 失控原因及分析：（失控判斷標(biāo)準(zhǔn)及原因分析按XXXSOP進(jìn)行） 臨床PCR實驗室標(biāo)本接收記錄唯一編號 姓 名 性 別 病歷號 采集時間 接收時間 標(biāo)本特性 標(biāo)本狀態(tài) 以上標(biāo)本編號從 至 ， 送檢人（簽字）： 接收人（簽字） 以上標(biāo)本編號從 至 ， 送檢人（簽字）： 接收人（簽字） 以上標(biāo)本編號從 至 ， 送檢人（簽字）： 接收人（簽字） 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 正常 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 正常 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 正常 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 正常 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 正常 姓 名 性 別 病歷號 采集時間 接收時間 標(biāo)本特性 拒收原因 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 （列出原因號） 男 女 月 日 時 月 日 時 全血 （列出原因號） 男 女 月 日 時 月 日 時 全血