高考生物一輪復(fù)習(xí)“學(xué)案”：微生物的利用ppt課件

1、前往前往 學(xué)案學(xué)案38 38 微生物的利用微生物的利用 1.1.微生物的實(shí)驗(yàn)室培育微生物的實(shí)驗(yàn)室培育1 1培育基是指人們按照微生物對(duì)培育基是指人們按照微生物對(duì) 的不同需的不同需求，配制出的供其求，配制出的供其 的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。其成分普通都的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。其成分普通都包含包含 、 、水和無(wú)機(jī)鹽。按照物理性狀可分、水和無(wú)機(jī)鹽。按照物理性狀可分為為 培育基和培育基和 培育基。培育基。2 2消毒的方法主要包括消毒的方法主要包括 、 、化學(xué)、化學(xué)藥劑消毒法和藥劑消毒法和 ；滅菌的方法主要包括；滅菌的方法主要包括 、 和和 。3 3牛肉膏蛋白胨固體培育基的制備步驟包括計(jì)算牛肉膏蛋白胨固體培育基的制備步驟包括計(jì)算

2、溶化溶化滅菌滅菌 。4 4微生物的接種方法包括微生物的接種方法包括 和和 。稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)生長(zhǎng)繁衍生長(zhǎng)繁衍碳源碳源氮源氮源液體液體固體固體煮沸消毒法煮沸消毒法巴氏消毒法巴氏消毒法紫外線消毒法紫外線消毒法灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌稱量稱量倒平板倒平板平板劃線法平板劃線法2.2.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分別與計(jì)數(shù)1 1原理：土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是由于它們?cè)恚和寥乐械募?xì)菌之所以能分解尿素，是由于它們的體內(nèi)能合成的體內(nèi)能合成 ，該物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)，該物質(zhì)在把尿素分解成無(wú)機(jī)物的過(guò)程中起到催化

3、作用。程中起到催化作用。2 2統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌普通用統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目：統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌普通用 。 3 3實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣實(shí)驗(yàn)流程：土壤取樣制備制備 微生物的培育微生物的培育與察看與察看細(xì)菌的計(jì)數(shù)。細(xì)菌的計(jì)數(shù)。3.3.分解纖維素的微生物的分別分解纖維素的微生物的分別1 1纖維素酶是一種復(fù)合酶，它包括纖維素酶是一種復(fù)合酶，它包括 、 和和 ，前兩種酶可使纖維素分解成，前兩種酶可使纖維素分解成 ，第三種酶將纖維二糖分解成第三種酶將纖維二糖分解成 。2 2 可以與纖維素構(gòu)成紅色復(fù)合物，但并不可以與纖維素構(gòu)成紅色復(fù)合物，但并不與與 發(fā)生這種反響。纖維素分解菌能產(chǎn)生纖發(fā)生這種反響。纖維素分解菌

4、能產(chǎn)生纖維素酶分解維素酶分解 ，從而使菌落周圍構(gòu)成透明圈。，從而使菌落周圍構(gòu)成透明圈。纖維素纖維素脲酶脲酶稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法培育基培育基C1C1酶酶CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖剛果紅剛果紅纖維二糖和葡萄糖纖維二糖和葡萄糖考點(diǎn)考點(diǎn)1 1 培育基的配制培育基的配制考點(diǎn)精講考點(diǎn)精講1.1.培育基的類型培育基的類型劃分標(biāo)劃分標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)培養(yǎng)基種培養(yǎng)基種類類特點(diǎn)特點(diǎn)用途用途物理性物理性質(zhì)質(zhì)液體培養(yǎng)液體培養(yǎng)基基不加凝固劑不加凝固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)固體培養(yǎng)基基加凝固劑，如加凝固劑，如瓊脂瓊脂微生物分離、微生物分離、鑒定等鑒定等劃分標(biāo)劃分標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)培養(yǎng)基培養(yǎng)基種類種類特

5、點(diǎn)特點(diǎn)用途用途用途用途選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，用種化學(xué)物質(zhì)，用來(lái)抑制不需要的來(lái)抑制不需要的微生物的生長(zhǎng)，微生物的生長(zhǎng)，促進(jìn)所需要的微促進(jìn)所需要的微生物的生長(zhǎng)生物的生長(zhǎng)培養(yǎng)和分離出特培養(yǎng)和分離出特定微生物定微生物(如分離如分離酵母菌和霉菌，酵母菌和霉菌，可以在培養(yǎng)基中可以在培養(yǎng)基中加入青霉素加入青霉素)鑒別培鑒別培養(yǎng)基養(yǎng)基根據(jù)微生物的代根據(jù)微生物的代謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)謝特點(diǎn)，在培養(yǎng)基中加入某種指基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品示劑或化學(xué)藥品鑒別不同種類的鑒別不同種類的微生物，如用伊微生物，如用伊紅紅美藍(lán)培養(yǎng)基美藍(lán)培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳鑒別飲用水或乳制品中是否含有制品中是

6、否含有大腸桿菌大腸桿菌(若有，若有，則菌落呈深紫色則菌落呈深紫色并帶有金屬光澤并帶有金屬光澤)闡明：闡明：1 1參與培育基中的凝固劑如瓊脂，普通不能參與培育基中的凝固劑如瓊脂，普通不能被微生物利用，只起到凝固作用。被微生物利用，只起到凝固作用。2 2選擇培育基中普通只能生長(zhǎng)具有特定目的的微生物，選擇培育基中普通只能生長(zhǎng)具有特定目的的微生物，鑒別培育基中可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。鑒別培育基中可以存在其他微生物，而且能鑒別特定的微生物。2.2.培育基的成分培育基的成分1 1碳源碳源含義：能提供碳元素的物質(zhì)。含義：能提供碳元素的物質(zhì)。作用：構(gòu)成生物體的物質(zhì)，異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)。作用

7、：構(gòu)成生物體的物質(zhì)，異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)。主要來(lái)源主要來(lái)源無(wú)機(jī)物：無(wú)機(jī)物：CO2CO2、NaHCO3NaHCO3。有機(jī)物：糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等。有機(jī)物：糖類、脂肪酸、石油、花生粉餅等。2 2氮源氮源含義：能提供氮元素的物質(zhì)。含義：能提供氮元素的物質(zhì)。作用：合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮代謝產(chǎn)物。作用：合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮代謝產(chǎn)物。主要來(lái)源主要來(lái)源無(wú)機(jī)物：無(wú)機(jī)物：N2N2、NH3NH3、銨鹽、硝酸鹽。、銨鹽、硝酸鹽。有機(jī)物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等。有機(jī)物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等。3 3生長(zhǎng)因子生長(zhǎng)因子含義：生長(zhǎng)不可少的微量有機(jī)物。含義：生長(zhǎng)不可少的微量有機(jī)物。作用：酶和核酸的成分。作用：酶

8、和核酸的成分。主要包括：纖維素、氨基酸、堿基等。主要包括：纖維素、氨基酸、堿基等。4 4水水含量：在生物體內(nèi)含量很高，在低等生物體內(nèi)含量更高。含量：在生物體內(nèi)含量很高，在低等生物體內(nèi)含量更高。作用：不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子構(gòu)造的作用：不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持生物大分子構(gòu)造的穩(wěn)定。穩(wěn)定。主要來(lái)源：培育基、大氣、代謝產(chǎn)物等。主要來(lái)源：培育基、大氣、代謝產(chǎn)物等。5 5無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)鹽含義：為微生物提供除含義：為微生物提供除C C、H H、O O以外的各種重要元素，包以外的各種重要元素，包括大量元素和微量元素。括大量元素和微量元素。作用：細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)理物質(zhì)；某些化能自養(yǎng)作用：

9、細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)理物質(zhì)；某些化能自養(yǎng)菌的能源、酶的激活劑。菌的能源、酶的激活劑。主要來(lái)源：培育基、大氣。主要來(lái)源：培育基、大氣。典例分析典例分析【例【例1 1】利用微生物分解玉米淀粉消費(fèi)糖漿在工業(yè)消費(fèi)上具有】利用微生物分解玉米淀粉消費(fèi)糖漿在工業(yè)消費(fèi)上具有 寬廣的運(yùn)用前景，但現(xiàn)有野生菌株對(duì)淀粉的轉(zhuǎn)化效率低，寬廣的運(yùn)用前景，但現(xiàn)有野生菌株對(duì)淀粉的轉(zhuǎn)化效率低， 某同窗嘗試對(duì)其進(jìn)展改造，以獲得高效菌株。某同窗嘗試對(duì)其進(jìn)展改造，以獲得高效菌株。 1 1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)?zāi)康模?。 2 2實(shí)驗(yàn)原理：略實(shí)驗(yàn)原理：略 3 3實(shí)驗(yàn)步驟：實(shí)驗(yàn)步驟： 配制固體培育基。該培育基中除了必需以配制固體培育基。該培育基

10、中除了必需以 作為碳作為碳 源外，還必需求有源外，還必需求有 成分。培育基的滅菌處成分。培育基的滅菌處 理要求通常是理要求通常是 。 將野生菌株接入已滅菌的培育基平板上。接種時(shí)應(yīng)首將野生菌株接入已滅菌的培育基平板上。接種時(shí)應(yīng)首 先將接種環(huán)在火焰上灼燒并冷卻后才干接種的緣由是先將接種環(huán)在火焰上灼燒并冷卻后才干接種的緣由是 。 接種后立刻用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是接種后立刻用適當(dāng)劑量的紫外線照射，其目的是 。 接種操作后須將培育皿倒置培育的緣由是接種操作后須將培育皿倒置培育的緣由是 。 菌落構(gòu)成后，參與碘液，察看周圍培育基的顏色變化和變菌落構(gòu)成后，參與碘液，察看周圍培育基的顏色變化和變 化范

11、圍的大小，周圍出現(xiàn)化范圍的大小，周圍出現(xiàn) 景象的菌落即為初選菌景象的菌落即為初選菌 落。初選菌落經(jīng)落。初選菌落經(jīng) 、 后才干到達(dá)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。后才干到達(dá)實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹? 4實(shí)驗(yàn)景象分析：略實(shí)驗(yàn)景象分析：略解析：微生物生長(zhǎng)普通需求碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)解析：微生物生長(zhǎng)普通需求碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子和水；固體培育基的制造要參與瓊脂；微生物的培育因子和水；固體培育基的制造要參與瓊脂；微生物的培育要留意消毒和滅菌。要留意消毒和滅菌。答案：答案：1 1利用人工誘變培營(yíng)養(yǎng)別分解玉米淀粉的高效利用人工誘變培營(yíng)養(yǎng)別分解玉米淀粉的高效菌株菌株3 3玉米淀粉玉米淀粉 氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子、瓊脂氮源、無(wú)機(jī)鹽、

12、水、生長(zhǎng)因子、瓊脂 121 121 下滅菌下滅菌15153030分鐘分鐘 經(jīng)過(guò)灼燒殺滅接種環(huán)帶有的其經(jīng)過(guò)灼燒殺滅接種環(huán)帶有的其他微生物，以免污染培育基；冷卻后接種的目的是防止殺滅他微生物，以免污染培育基；冷卻后接種的目的是防止殺滅待接種的微生物待接種的微生物 誘導(dǎo)基因突變誘導(dǎo)基因突變 防止冷凝水污染培育物防止冷凝水污染培育物 顏色變淺的區(qū)域顏色變淺的區(qū)域 分別分別 純化純化【知識(shí)鏈接】消毒與滅菌的比較【知識(shí)鏈接】消毒與滅菌的比較消毒消毒滅菌滅菌條件條件較為溫和的物理或較為溫和的物理或化學(xué)方法化學(xué)方法強(qiáng)烈的理化因素強(qiáng)烈的理化因素常用方常用方法法巴氏消毒法、煮沸巴氏消毒法、煮沸消毒法、紫外線消消毒

13、法、紫外線消毒法、化學(xué)藥物消毒法、化學(xué)藥物消毒法毒法灼燒滅菌法、干熱灼燒滅菌法、干熱滅菌法、高壓蒸汽滅菌法、高壓蒸汽滅菌法滅菌法結(jié)果結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)殺死物體表面或內(nèi)部一些對(duì)人體有害部一些對(duì)人體有害的微生物（不包括的微生物（不包括芽孢和孢子）芽孢和孢子）殺死物體內(nèi)外所有殺死物體內(nèi)外所有的微生物（包括芽的微生物（包括芽孢和孢子）孢和孢子）對(duì)應(yīng)訓(xùn)練對(duì)應(yīng)訓(xùn)練1.1.以下關(guān)于微生物培育與運(yùn)用的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是以下關(guān)于微生物培育與運(yùn)用的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是 A.A.經(jīng)過(guò)消毒不能殺死物體內(nèi)一切的微生物經(jīng)過(guò)消毒不能殺死物體內(nèi)一切的微生物 B.B.利用平板劃線法可以統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目利用平板劃線法可以統(tǒng)計(jì)

14、樣品中活菌的數(shù)目 C.C.微生物培育用的培育基的成分和植物組織培育用的培育基微生物培育用的培育基的成分和植物組織培育用的培育基 的成分不同的成分不同 D.D.平板劃線法和稀釋涂布平板法常用于微生物的接種平板劃線法和稀釋涂布平板法常用于微生物的接種解析：消毒是指殺死病原微生物，但不一定能殺死細(xì)菌芽解析：消毒是指殺死病原微生物，但不一定能殺死細(xì)菌芽孢，故孢，故A A正確；統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目要用稀釋涂布平板法，正確；統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)目要用稀釋涂布平板法，故故B B錯(cuò)誤；不同的培育對(duì)象所需的成分不同，培育基中所參錯(cuò)誤；不同的培育對(duì)象所需的成分不同，培育基中所參與的物質(zhì)也就不同，故與的物質(zhì)也就不同，

15、故C C正確；微生物接種最常用的方法是正確；微生物接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，故平板劃線法和稀釋涂布平板法，故D D正確。正確。B B考點(diǎn)考點(diǎn)2 2 微生物的培育技術(shù)微生物的培育技術(shù)考點(diǎn)精講考點(diǎn)精講1.1.原理：在培育基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)原理：在培育基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞，使其長(zhǎng)成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。成單個(gè)的菌落，這個(gè)菌落就是純化的細(xì)菌菌落。2.2.微生物的接種方法微生物的接種方法1 1平板劃線法：平板劃線法中細(xì)胞的分別和稀釋過(guò)程發(fā)平板劃線法：平板劃線法中細(xì)胞的分別和稀釋過(guò)程發(fā)生在固體平板外表上的劃線和挪動(dòng)過(guò)程中。在線的開(kāi)場(chǎng)部分，

16、生在固體平板外表上的劃線和挪動(dòng)過(guò)程中。在線的開(kāi)場(chǎng)部分，微生物往往連在一同生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最微生物往往連在一同生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后能夠構(gòu)成純種的單個(gè)菌落。常見(jiàn)的幾種劃線方法如下圖。后能夠構(gòu)成純種的單個(gè)菌落。常見(jiàn)的幾種劃線方法如下圖。2 2稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法1010倍系列稀釋操作：如下圖倍系列稀釋操作：如下圖將分別裝有將分別裝有9 mL9 mL水的水的6 6支試管滅菌，并按支試管滅菌，并按101101106106的順序的順序編號(hào)。編號(hào)。用移液管汲取用移液管汲取1 mL1 mL培育的菌液，注入培育的菌液，注入101101倍稀釋液的試管倍稀釋液的試管中。用

17、手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸中。用手指輕壓移液管上的橡皮頭，吹吸3 3次，使菌液與水充次，使菌液與水充分混勻。分混勻。從從101101倍稀釋的試管中汲取倍稀釋的試管中汲取1 mL1 mL稀釋液，注入稀釋液，注入102102倍稀釋倍稀釋的試管中，反復(fù)步混勻操作。依次類推，直到完成最后的試管中，反復(fù)步混勻操作。依次類推，直到完成最后1 1支支試管的稀釋。試管的稀釋。典例分析典例分析【例【例2 2】如圖是微生物平板劃線表示圖，劃線】如圖是微生物平板劃線表示圖，劃線 的順序?yàn)榈捻樞驗(yàn)?234512345。以下操作方法正確的選項(xiàng)是。以下操作方法正確的選項(xiàng)是 A.A.操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌操

18、作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌 B.B.劃線操作不用在火焰旁進(jìn)展劃線操作不用在火焰旁進(jìn)展 C.C.在在5 5區(qū)域中才可以得到所需菌落區(qū)域中才可以得到所需菌落 D.D.在在1 1、2 2、3 3、4 4、5 5區(qū)域中，劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌區(qū)域中，劃線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌解析：此題調(diào)查平板劃線的操作方法。每次劃線前后都解析：此題調(diào)查平板劃線的操作方法。每次劃線前后都要對(duì)接種環(huán)進(jìn)展滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼要對(duì)接種環(huán)進(jìn)展滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應(yīng)是在火焰上灼燒，接種時(shí)劃線操作要在火焰邊進(jìn)展的。在燒，接種時(shí)劃線操作要在火焰邊進(jìn)展的。在5 5個(gè)區(qū)域中，個(gè)區(qū)域中，只需有單個(gè)活細(xì)菌，經(jīng)過(guò)培育即

19、可獲得所需菌落。只需有單個(gè)活細(xì)菌，經(jīng)過(guò)培育即可獲得所需菌落。D D【知識(shí)鏈接】平板劃線操作第一次劃線及每次劃線之前都需【知識(shí)鏈接】平板劃線操作第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒滅菌，劃線操作終了仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如灼燒滅菌，劃線操作終了仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒的目的如下表：下表：第一次灼燒第一次灼燒每次劃線之前每次劃線之前灼燒灼燒劃線結(jié)束劃線結(jié)束目的目的避免接種環(huán)避免接種環(huán)上可能存在上可能存在的微生物污的微生物污染培養(yǎng)物染培養(yǎng)物灼燒殺死上次灼燒殺死上次劃線結(jié)束后接劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的種環(huán)上殘留的菌種，使每次菌種，使每次劃線的菌種來(lái)劃線的菌種來(lái)自上次劃線末自上次劃線末端端劃線結(jié)束后

20、殺劃線結(jié)束后殺死接種環(huán)上殘死接種環(huán)上殘留的菌種，避留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作境和感染操作者者對(duì)應(yīng)訓(xùn)練對(duì)應(yīng)訓(xùn)練2.2.以下關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)以下關(guān)于制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是是 A. A.操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、倒平板、滅菌 B. B.將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯將稱好的牛肉膏連同稱量紙一同放入燒杯 C. C.等培育基冷卻至等培育基冷卻至50 50 左右時(shí)進(jìn)展倒平板左右時(shí)進(jìn)展倒平板 D. D.待平板冷卻凝固待平板冷卻凝固5 510 min10 min后將平板倒過(guò)來(lái)放置后將平

21、板倒過(guò)來(lái)放置解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的步驟是計(jì)算、稱解析：制備牛肉膏蛋白胨固體培育基的步驟是計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒；牛肉膏容易吸潮，量、溶化、滅菌、倒平板，不能顛倒；牛肉膏容易吸潮，所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分別后，用玻璃棒取出稱量所以當(dāng)牛肉膏溶化并與稱量紙分別后，用玻璃棒取出稱量紙；待培育基冷卻至紙；待培育基冷卻至50 50 時(shí)，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，時(shí)，用手觸摸錐形瓶剛剛不燙手，并且培育基處于溶化形狀時(shí)倒平板；平板冷卻幾分鐘后還并且培育基處于溶化形狀時(shí)倒平板；平板冷卻幾分鐘后還需倒置。需倒置。A A考點(diǎn)考點(diǎn)3 3 微生物的挑選與計(jì)數(shù)微生物的挑選與計(jì)數(shù)考點(diǎn)精講考

22、點(diǎn)精講1.1.挑選菌株挑選菌株1 1原那么：人為提供有利于目的菌生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑原那么：人為提供有利于目的菌生長(zhǎng)的條件，同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。2 2菌株挑選原理的比較菌株挑選原理的比較土壤中分解尿素的細(xì)菌土壤中分解尿素的細(xì)菌分解纖維素的微生物分解纖維素的微生物選擇培養(yǎng)基的成分：選擇培養(yǎng)基的成分：尿素作為唯一的氮源尿素作為唯一的氮源鑒定方法：在培養(yǎng)基鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，指示劑變紅，pH升高，升高，說(shuō)明細(xì)菌能分解尿素說(shuō)明細(xì)菌能分解尿素選擇培養(yǎng)基的成分：選擇培養(yǎng)基的成分：纖維素作為唯一的碳源纖維素作為唯一的碳源鑒

23、定方法：剛果紅染鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被分解后，培養(yǎng)纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈為中心的透明圈2.2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的方法1 1顯微鏡直接計(jì)數(shù)法顯微鏡直接計(jì)數(shù)法原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡原理：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。下計(jì)算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。方法：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。缺陷：不能區(qū)分死菌與活菌。缺陷：不能區(qū)分死菌與活菌。2 2間接計(jì)數(shù)法間接計(jì)數(shù)法原理：當(dāng)樣

24、品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基外表生長(zhǎng)的一原理：當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培育基外表生長(zhǎng)的一個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的個(gè)菌落，來(lái)源于樣品稀釋液中的一個(gè)活菌，經(jīng)過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少個(gè)活菌。菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少個(gè)活菌。計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)= =C CV VM M，其中，其中，C C代代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V V代表涂布平板時(shí)代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積所用的稀釋液的體積mLmL，M M代表稀釋倍數(shù)。代表稀釋倍數(shù)。操作：設(shè)置反復(fù)組，加強(qiáng)實(shí)

25、驗(yàn)的壓服力和準(zhǔn)確性。同時(shí)操作：設(shè)置反復(fù)組，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的壓服力和準(zhǔn)確性。同時(shí)為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，普通選擇菌落數(shù)在為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，普通選擇菌落數(shù)在3030300300的平板進(jìn)展計(jì)的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)。數(shù)。典例分析典例分析【例【例3 3】以下關(guān)于】以下關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)操作的表達(dá)，錯(cuò)檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)實(shí)驗(yàn)操作的表達(dá)，錯(cuò) 誤的是誤的是 A. A.用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基，經(jīng)高溫、高壓滅菌用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培育基，經(jīng)高溫、高壓滅菌 后倒平板后倒平板 B. B.取取104104、105105、106106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各0.1 mL0.1 mL，分，分 別涂布

26、于各組平板上別涂布于各組平板上 C. C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37 37 恒溫培育恒溫培育24244848小時(shí)小時(shí) D. D.確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在300300以上的實(shí)驗(yàn)組平板以上的實(shí)驗(yàn)組平板 進(jìn)展計(jì)數(shù)進(jìn)展計(jì)數(shù)解析：此題以解析：此題以“土壤中細(xì)菌的計(jì)數(shù)為命題點(diǎn)，調(diào)查土壤中細(xì)菌的計(jì)數(shù)為命題點(diǎn)，調(diào)查學(xué)生對(duì)根底知識(shí)的識(shí)記。在計(jì)數(shù)細(xì)菌時(shí)，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，學(xué)生對(duì)根底知識(shí)的識(shí)記。在計(jì)數(shù)細(xì)菌時(shí)，為保證結(jié)果準(zhǔn)確，普通選擇菌落數(shù)目在普通選擇菌落數(shù)目在3030300300的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)。的平板進(jìn)展計(jì)數(shù)。D D【知識(shí)鏈接】微生物分別的常用方法【知

27、識(shí)鏈接】微生物分別的常用方法1 1改動(dòng)培育基中的營(yíng)養(yǎng)成分可到達(dá)分別微生物的目的。改動(dòng)培育基中的營(yíng)養(yǎng)成分可到達(dá)分別微生物的目的。如培育基中缺乏氮源時(shí)，可以分別出固氮微生物；石油作為如培育基中缺乏氮源時(shí)，可以分別出固氮微生物；石油作為獨(dú)一碳源時(shí)，抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，可以利用獨(dú)一碳源時(shí)，抑制不能利用石油的微生物的生長(zhǎng)，可以利用石油的微生物可以生存，由此可到達(dá)分別能消除石油污染的石油的微生物可以生存，由此可到達(dá)分別能消除石油污染的微生物的目的。微生物的目的。2 2當(dāng)培育基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有當(dāng)培育基的某種營(yíng)養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時(shí)，也具有分別效果。例如，參與青霉素可以分別出

28、酵母菌和真菌；參分別效果。例如，參與青霉素可以分別出酵母菌和真菌；參與高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的參與是在與高濃度的食鹽可以得到金黃色葡萄球菌。這里的參與是在主要營(yíng)養(yǎng)成分完好的根底上參與。主要營(yíng)養(yǎng)成分完好的根底上參與。3 3改動(dòng)微生物的培育條件，也可以到達(dá)分別微生物的目改動(dòng)微生物的培育條件，也可以到達(dá)分別微生物的目的。如將培育基放在高溫環(huán)境中培育，只能得到耐高溫的微的。如將培育基放在高溫環(huán)境中培育，只能得到耐高溫的微生物。生物。對(duì)應(yīng)訓(xùn)練對(duì)應(yīng)訓(xùn)練3.3.有三位同窗，利用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)有三位同窗，利用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì) 菌數(shù)。在對(duì)應(yīng)稀釋菌數(shù)。在

29、對(duì)應(yīng)稀釋106106倍的培育基中，得到下表所示的結(jié)果。倍的培育基中，得到下表所示的結(jié)果。 他以為以下數(shù)據(jù)中最接近真實(shí)值的是他以為以下數(shù)據(jù)中最接近真實(shí)值的是 同學(xué)同學(xué)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)平均值平均值甲甲230230乙乙21 212 256163丙丙222 260241A.230A.230B.163B.163C.241C.241D.236D.236解析：用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌落，每個(gè)稀釋濃度下至少涂解析：用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)活菌落，每個(gè)稀釋濃度下至少涂布三個(gè)平板，所以甲和丙的結(jié)果不可靠；乙雖然涂布了三個(gè)平板，布三個(gè)平板，所以甲和丙的結(jié)果不可靠；乙雖然涂布了三個(gè)平板，有一個(gè)平板的菌落數(shù)有一個(gè)平板的

30、菌落數(shù)2121和另外兩個(gè)相差甚遠(yuǎn)，且不在和另外兩個(gè)相差甚遠(yuǎn)，且不在3030300300之間，之間，2121這個(gè)數(shù)據(jù)不能用。要得到較準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)把甲、這個(gè)數(shù)據(jù)不能用。要得到較準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)把甲、乙、丙三位同窗所做的符合要求的數(shù)據(jù)一同統(tǒng)計(jì)，即乙、丙三位同窗所做的符合要求的數(shù)據(jù)一同統(tǒng)計(jì)，即230+212+256+222+260230+212+256+222+2605=2365=236。D D1.1.以下有關(guān)平板劃線操作的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是以下有關(guān)平板劃線操作的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是 A.A.第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上能夠存在的微生物第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上能夠存在的微生物 污染培

31、育物污染培育物 B.B.每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終了后接種環(huán)每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線終了后接種環(huán) 上殘留的菌種上殘留的菌種 C.C.在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液在第二區(qū)域內(nèi)劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于菌液 D.D.劃線終了后灼燒接種環(huán)能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，防止劃線終了后灼燒接種環(huán)能及時(shí)殺死接種環(huán)上的菌種，防止 細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者解析：純化大腸桿菌的平板劃線中，接種環(huán)取菌種前灼解析：純化大腸桿菌的平板劃線中，接種環(huán)取菌種前灼燒的目的是防止接種環(huán)能夠存在的微生物污染培育物；以燒的目的是防止接種環(huán)能夠存在的微生物污

32、染培育物；以后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌后每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線后殘留的菌種；劃線終了仍需灼燒接種環(huán)，是為了防止細(xì)菌污染環(huán)境種；劃線終了仍需灼燒接種環(huán)，是為了防止細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者；從第二次劃線開(kāi)場(chǎng)，每次劃線時(shí)接種環(huán)上和感染操作者；從第二次劃線開(kāi)場(chǎng)，每次劃線時(shí)接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。的菌種直接來(lái)源于上次劃線的末端。C C2.2.鑒定纖維素分解菌時(shí)，可以運(yùn)用剛果紅對(duì)其構(gòu)成的菌落進(jìn)展鑒定纖維素分解菌時(shí)，可以運(yùn)用剛果紅對(duì)其構(gòu)成的菌落進(jìn)展 染色，用剛果紅染色有兩種常用方法，兩種剛果紅染色法的染色，用剛果紅染色有兩種常用方法，兩種剛果紅染色法的

33、 最終結(jié)果是最終結(jié)果是 A.A.均會(huì)出現(xiàn)透明圈均會(huì)出現(xiàn)透明圈 B.B.均不會(huì)出現(xiàn)透明圈均不會(huì)出現(xiàn)透明圈 C.C.方法一出現(xiàn)，方法二不出現(xiàn)方法一出現(xiàn)，方法二不出現(xiàn) D.D.方法一不出現(xiàn)，方法二出現(xiàn)方法一不出現(xiàn)，方法二出現(xiàn)解析：兩種剛果紅染色法雖然程序不同，但最終都能構(gòu)解析：兩種剛果紅染色法雖然程序不同，但最終都能構(gòu)成以纖維素分解菌為中心的透明圈。其原理都是剛果紅與成以纖維素分解菌為中心的透明圈。其原理都是剛果紅與纖維素構(gòu)成紅色復(fù)合物，一旦纖維素被分解，剛果紅纖維素構(gòu)成紅色復(fù)合物，一旦纖維素被分解，剛果紅纖纖維素復(fù)合物就不能構(gòu)成，便會(huì)構(gòu)成透明圈，因此項(xiàng)正確。維素復(fù)合物就不能構(gòu)成，便會(huì)構(gòu)成透明圈，因

34、此項(xiàng)正確。A A3.3.下面是探求如何從土壤中分別自生固氮菌并計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)，下面是探求如何從土壤中分別自生固氮菌并計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)， 完成以下問(wèn)題：完成以下問(wèn)題： 1 1實(shí)驗(yàn)原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比實(shí)驗(yàn)原理：農(nóng)田的表層土壤中，自生固氮菌的含量比 較多。將用表層土制成的稀泥漿，接種到無(wú)氮培育基進(jìn)展較多。將用表層土制成的稀泥漿，接種到無(wú)氮培育基進(jìn)展 培育。在這種情況下，只需自生固氮菌才干生長(zhǎng)繁衍。用培育。在這種情況下，只需自生固氮菌才干生長(zhǎng)繁衍。用 這種方法，可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌別分開(kāi)來(lái)。這種方法，可以將自生固氮菌與其他細(xì)菌別分開(kāi)來(lái)。 2 2資料器具：農(nóng)田的表層土壤、無(wú)氮培育基、牛肉膏蛋資料器具：農(nóng)田的表層土壤、無(wú)氮培育基、牛肉膏蛋 白胨培育基、盛白胨培育基、盛10 mL10 mL無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂無(wú)菌水的試管、無(wú)菌吸管、無(wú)菌涂 布器、無(wú)菌培育皿、盛布器、無(wú)菌培育