液相色譜法與幾種檢測器

1、組員：李歡歡、戴雅吉、郭宣宣組員：李歡歡、戴雅吉、郭宣宣施香琴、馬婷婷施香琴、馬婷婷 2內(nèi)容介紹內(nèi)容介紹 液相色譜法的簡單介紹液相色譜法的簡單介紹 檢測器的原理及應(yīng)用范圍檢測器的原理及應(yīng)用范圍 應(yīng)用實(shí)例及發(fā)展應(yīng)用實(shí)例及發(fā)展 參考資料參考資料3液相色譜法：液相色譜法：簡單的說就是用液體作為流動相的色譜法。1903年俄國化學(xué)家M.C.茨維特首先將液相色譜法用于分離葉綠素。4液相色譜法的分離機(jī)制液相色譜法的分離機(jī)制 液相色譜法的分離機(jī)理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。5 根據(jù)固定相的不同， 液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。應(yīng)用最廣的是以硅膠為填料的液固色譜和以微硅膠為基質(zhì)的鍵合相

2、色譜。 根據(jù)固定相的形式液相色譜法可以分為 柱色譜法、紙色譜法及 薄層色譜法。按吸附力可分為吸附 色譜、分配色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜。6常用的液相色譜儀常用的液相色譜儀高效液相色譜儀由輸出泵、進(jìn)樣裝置、 色譜柱 、梯度沖洗裝置、檢測器及數(shù)據(jù)處理和微機(jī) 控制單元組成。7常見的幾種檢測器的原理及應(yīng)用范圍常見的幾種檢測器的原理及應(yīng)用范圍檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化檢測器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的變化轉(zhuǎn)化為可供檢測的信號。為可供檢測的信號。分類：分類：A.A.選擇性檢測器：組分性質(zhì)選擇性檢測器：組分性質(zhì)1.1.紫外可見吸收檢測器紫外可見吸收檢測器(UVD)(UV

3、D)2.2.熒光檢測器熒光檢測器(FD)(FD)B.B.通用型檢測器：總體性質(zhì)通用型檢測器：總體性質(zhì)3.3.蒸發(fā)光散射檢測器（蒸發(fā)光散射檢測器（ELSDELSD）4.4.電化學(xué)檢測器電化學(xué)檢測器(ED)(ED)5.5.示差折光檢測器示差折光檢測器(RID)(RID) 8檢測器一檢測器一1.紫外可見吸收檢測器(ultravioletvisibledetector，UVD)是HPLC中應(yīng)用最廣泛的檢測器之一，幾乎所有的液相色譜儀都配有這種檢測器。特點(diǎn)：靈敏度較高，線性范圍寬，噪聲低，適用于梯度洗脫，對強(qiáng)吸收物質(zhì)檢測限可達(dá)1ng，檢測后不破壞樣品，可用于制備，并能與任何檢測器串聯(lián)使用。但是只能用于檢

4、測有紫外吸收的物質(zhì)，且流動相的選擇有一定限制，流動相的截止波長必須小于檢測波長。9檢測器二檢測器二 熒光檢測器(fluorescencedetector，F(xiàn)D)熒光檢測器是一種高靈敏度、有選擇性的檢測器，可檢測能產(chǎn)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可通過化學(xué)衍生化生成熒光衍生物，再進(jìn)行熒光檢測。 特點(diǎn)：其最小檢測濃度可達(dá)0.1ngml，適用于痕量分析；一般情況下熒光檢測器的靈敏度比紫外檢測器約高2個(gè)數(shù)量級，但其線性范圍不如紫外.10檢測器三檢測器三 ELSD是一種通用型檢測器，定量依據(jù)為峰面積（峰高）或其比值的對數(shù)與進(jìn)樣量或濃度的對數(shù)成正比。 原理：首先將柱洗脫液霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂

5、移管中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射檢測池中得到檢測。 應(yīng)用范圍包括：碳水化合物，藥物，脂類，甘油三脂，未衍生的脂肪酸和氨基酸，聚合物，表面活化劑，營養(yǎng)滋補(bǔ)品，及組合分子庫等。111213141516應(yīng)用實(shí)例及發(fā)展應(yīng)用實(shí)例及發(fā)展高效液相色譜熒光檢測法檢測雞蛋中阿莫西林殘留 雞蛋經(jīng)乙腈提取，飽和二氯甲烷萃取，水楊醛酸性條件下沸水浴衍生化后，以0.01mol/L的磷酸二氫鉀溶液(A)和乙腈溶液(B)為流動相，流速為1.0mL/min，熒光檢測激發(fā)波長為354nm, 發(fā)射波長為445nm。阿莫西林在5.0800ng/mL質(zhì)量濃度范圍內(nèi)，本方法線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)為0.9997。分析

6、：所建立的方法簡便、快速、靈敏度高，適用于雞蛋中阿莫西林殘留的高靈敏度檢測。17HPLC-UV-ELSD法同時(shí)測定青蒿中青蒿素、青蒿乙法同時(shí)測定青蒿中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量素和青蒿酸的含量 用HPLC-UV-ELSD法同時(shí)測定青蒿藥材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。采用NucleodurC18色譜柱(250 mm4.6 mm,5m ID);以乙腈-0.1%乙酸水(5050)為流動相;紫外檢測波長209 nm,蒸發(fā)光散射檢測器漂移管溫度50。分析：青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸能夠達(dá)到很好分離。本法簡單、準(zhǔn)確、快速,可同時(shí)測定青蒿藥材中青蒿素、青蒿乙素和青蒿酸的含量。1819參考資料參考資料1、中藥制劑分析第二版蔡寶昌2、謝愷丹,陳學(xué)森,徐東等.高效液相色譜熒光檢測法檢測雞蛋中阿莫西林殘留J. 食品科學(xué), 2