論文資料：MCPIP 1蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能的研究進展

1、MCPIP 1蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)、功能的研究進展摘要ZC3H12A是免疫系統(tǒng)中的一個重要基因，其編碼的蛋白質(zhì)ZC3H12A/MCPIP 1在免疫相關(guān)疾病，尤其是自身免疫病和炎癥反應中發(fā)揮重要的抑制效應。ZC3H12A的表達能夠被多種炎癥相關(guān)細胞因子所誘導。近來的研究報道，MCPIP 1具有轉(zhuǎn)錄因子、RNA酶、去泛素化酶等作用，其在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄、mRNA降解、多聚泛素鏈的去除、細胞凋亡、細胞自噬、炎癥抑制、細胞分化、血管生成等方面都有重要作用?；蚯贸∈蠡加袊乐氐母呙庖咔虻鞍籽Y、淋巴結(jié)腫大、漿細胞和記憶細胞的積聚及自身抗體的大量產(chǎn)生等免疫功能紊亂疾病。本文較為系統(tǒng)地闡述了ZC3H12A基因的克隆、M

2、CPIP 1蛋白的結(jié)構(gòu)及功能，從時間的維度觀其主要研究歷程，以及對免疫系統(tǒng)的重要影響。大體上淺析了MCPIP 1從其發(fā)現(xiàn)至今的探索情況。【關(guān)鍵詞】 ZC3H12A Zc3h12a MCPIP 1 RNA酶 凋亡 去泛素化酶1 簡介ZC3H12A/MCPIP是一種鋅指蛋白。它的全名是具有CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)12A（Zinc finger CCCH domain-containing protein 12A），簡稱ZC3H12A1，又稱MCP-1誘導蛋白（MCP1-induced protein，MCPIP 1）2。MPCIP的編碼基因是ZC3H12A，它屬于ZC3H12基因家族，該家族中共

3、有4個成員，分別編號為ZC3H12A、ZC3H12B、ZC3H12C、ZC3H12D1。此家族保守性很強，在很多物種（包括果蠅、秀麗線蟲、小鼠和大鼠等）中都有發(fā)現(xiàn)其同源序列1。MCPIP 1最初被發(fā)現(xiàn)于經(jīng)MCP-1處理的人外周血單核細胞中2，而后又在經(jīng)IL-1刺激的人單核細胞來源的巨噬細胞中被發(fā)現(xiàn)3。在TNF、MCP-1、IL-1或LPS等細胞因子的作用下，該基因的轉(zhuǎn)錄水平被顯著激活1, 2, 3, 4, 5, 6。同時，具有CCCH鋅指結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)在巨噬細胞相關(guān)的器官（如胸腺、脾臟、肺、小腸和脂肪組織等）中表達水平很高6。對于Zc3h12a基因敲除小鼠的表型分析表明4, 7，該基因的缺陷與自

4、身免疫疾病的發(fā)生相關(guān)，在炎癥相關(guān)的生理和病理過程中具有重要意義。 克隆發(fā)現(xiàn)該基因的發(fā)現(xiàn)單核細胞趨化蛋白質(zhì)1（monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)，它能夠招募并激活單核/巨噬細胞，是使單核/巨噬細胞遷移的主要趨化因子。MCP-1與靶細胞膜上的CCR2結(jié)合，啟動了一系列的信號通路，導致單核/巨噬細胞向MCP1高濃度處趨化性遷移8，9。用MCP-1刺激人外周血單核細胞后，提取細胞內(nèi)的總mRNA。將測序結(jié)果與基因注釋數(shù)據(jù)庫中的數(shù)據(jù)進行序列比對后發(fā)現(xiàn)了一些未被注釋的基因。其中表達差異最顯著的一個基因是目前未知功能的基因，在EST數(shù)據(jù)庫中查找到了與之相對應的序

5、列，同時在GeneBank數(shù)據(jù)庫中查找到了對應的人cDNA克隆。（GeneBank序列號AW206332）研究者將它命名為人MCP1誘導蛋白（MCP-induced protein， MCPIP 1）2。對蛋白質(zhì)序列分析發(fā)現(xiàn)，MCPIP 1有599個氨基酸，分子質(zhì)量約為65.8kD，有兩個脯氨酸富集區(qū)，一個核定位序列，和一個CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域2。而后發(fā)現(xiàn)其序列中還存在一個PIN結(jié)構(gòu)域4和一個泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域7。由于該蛋白質(zhì)具有CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域，因而被命名為具有CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)12a（ZC3H12A）1。序列比對發(fā)現(xiàn)，人MCPIP 1與小鼠中的同源蛋白質(zhì)的氨基酸組成有82%的相似度，c

6、DNA的核苷酸序列組成有80%的相似度2。該基因家族的發(fā)現(xiàn)將MCPIP1蛋白質(zhì)序列輸入GeneBank數(shù)據(jù)庫，在人中查找到另外3個與之相似度很高的序列。研究者將它們歸屬于同一家族，分別命名為MCPIP1、MCPIP2、MCPIP3、MCPIP4，其相對應的基因分別被命名為ZC3H12A (位于染色體 1p34.3)、ZC3H12B(位于染色體Xq12)、ZC3H12C(位于染色體1q22.3)，以及ZC3H12D(位于染色體6q25.1)。這一家族的成員間的共同特點為，它們都含有一個CCCH型鋅指結(jié)構(gòu)。同時，在小鼠中也發(fā)現(xiàn)了這四個基因的同源基因1。基因與蛋白質(zhì)概況基因定位通過對基因組序列比對分

7、析，ZC3H12A位于人染色體1p35.3-p33上，Zc3h12a位于小鼠4號染色體上?；蚪Y(jié)構(gòu)ZC3H12A的大小約為9860 bp，有6個外顯子。第一個外顯子是非編碼序列，轉(zhuǎn)錄從第二個外顯子開始。啟動子位于該基因上游-7660bp，具有一個Elk-1結(jié)合位點和一個SRF結(jié)合位點10。增強子位于第二個內(nèi)含子中，具有4個NF-kB結(jié)合位點5。該基因上有61個已被描述的SNP。在這些SNP中，11個是非同義的SNP，其中1個位于啟動子中，2個位于第二個內(nèi)含子上的增強子中。在這11個非同義SNP中，有2個是標簽SNP。蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)ZC3H12A編碼的蛋白質(zhì)MCPIP 1有599個氨基酸，其分子質(zhì)量

8、為65.8 kd。對MCPIP 1的序列分析表明，該蛋白質(zhì)中含有CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域（能夠介導蛋白質(zhì)與核酸的作用）、核定位序列、脯氨酸富集區(qū)（介導蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用）、PIN結(jié)構(gòu)域（具有RNA酶活性）、以及泛素結(jié)合結(jié)構(gòu)域等。這些特征性序列模體為MCPIP 1功能的研究指明了方向。通過同源性分析，研究者在小鼠基因組中發(fā)現(xiàn)了與MCPIP 1同源的基因序列。在核苷酸水平上它們的相似度有80%,在蛋白質(zhì)水平上它們的相似度有82%。通過序列比對分析發(fā)現(xiàn)，MCPIP家族在進化上有很高的保守性，在很多動物中（包括果蠅、秀麗線蟲、小鼠、大鼠）都存在與該家族成員高度同源的cDNA序列1。CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域C

9、CCH結(jié)構(gòu)是鋅指的一種類型，主要的作用是結(jié)合RNA6, 11, 12，調(diào)控mRNA的加工。哺乳動物有1%的基因編碼鋅指蛋白13。目前所知，共有至少14種鋅指，CCHH型和CCCC型鋅指較為常見，CCCH型鋅指較少見，只占鋅指蛋白的約0.8% 11, 12, 14。CCCH鋅指結(jié)構(gòu)由17到25個氨基酸組成。CCCH蛋白的特點是包含1到6個CCCH型（C-X415-C-X46-C-X3-H）鋅指結(jié)構(gòu)域，同時也富含甘氨酸和苯丙氨酸。CCCH鋅指結(jié)構(gòu)域十分保守，在植物、無脊椎動物、脊椎動物中都有發(fā)現(xiàn)。15鋅指蛋白通常是DNA結(jié)合蛋白。鋅指也能調(diào)節(jié)該蛋白與RNA、蛋白質(zhì)、脂質(zhì)的作用。CCCH鋅指蛋白中的

10、大多數(shù)能與RNA結(jié)合，調(diào)控mRNA的加工，包括mRNA成熟、出核、修飾、降解11, 12。該類型的蛋白質(zhì)在巨噬細胞相關(guān)的器官內(nèi)表達量很高，如胸腺、脾臟、肺、小腸和脂肪組織等6。目前研究較充分的CCCH型鋅指蛋白是TTP（tristetraprolin）家族，包含4個成員，分別是TTP (Zfp36)、Zfp36l1、Zfp36l2以及Zfp36l3。該家族成員都包含兩個串聯(lián)的CCCH型鋅指結(jié)構(gòu)域，能夠與mRNA的3端非轉(zhuǎn)錄區(qū)（3-untranslated region，3-UTR）的AU富集區(qū)（AU-rich element，ARE）結(jié)合，從而導致該mRNA的poly（A）尾的降解，進而使整個

11、mRNA降解16, 17, 18。MCPIP 1的CCCH鋅指結(jié)構(gòu)是C(X)5C(X)5C(X)3H 型鋅指結(jié)構(gòu)，與TTP中的兩個鋅指結(jié)構(gòu)有些許不同，TTP中的鋅指結(jié)構(gòu)是C(X)8C(X)5C(X)3H型1。在多個數(shù)據(jù)庫中搜索，發(fā)現(xiàn)了58個小鼠CCCH鋅指基因和55個人CCCH鋅指基因。在這58個小鼠基因中，有26個是已研究過的基因，其中20個與RNA代謝相關(guān)，如前體mRNA的剪切、mRNA轉(zhuǎn)移出核、細胞定位、穩(wěn)定性（降解）等6。用系統(tǒng)進化軟件分析發(fā)現(xiàn)，無論從蛋白質(zhì)氨基酸序列全長還是僅從CCCH結(jié)構(gòu)域序列來看，Zc3h12家族都與Zfp36家族劃于一類6。這很大程度上說明此二者在結(jié)構(gòu)、功能上可

12、能具有很多共同點。脯氨酸富集區(qū)Zc3h12a有2個脯氨酸富集區(qū)，分別位于第100126位氨基酸（脯氨酸占37%）和第458536位氨基酸（脯氨酸占28%）2。脯氨酸富集區(qū)通常調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用，說明ZC3H12A可能通過此結(jié)構(gòu)域，與其他蛋白質(zhì)有相互作用。PIN結(jié)構(gòu)域PIN結(jié)構(gòu)域（PIN-like domain）位于ZC3H12A蛋白氨基酸序列的第130280位。多數(shù)具有該結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)都有RNA酶活性。在該結(jié)構(gòu)域中有4個經(jīng)典的保守的酸性氨基酸，分別是D141、E185、D226、D244，它們形成一個帶負電的袋子狀的空間結(jié)構(gòu)，能夠與Mg2+結(jié)合，從而發(fā)揮降解mRNA的作用4。該RNA

13、酶結(jié)構(gòu)域在Zc3h12家族4個成員間是保守的，并且在多種物種中都找到了其同源序列4。DUB結(jié)構(gòu)域MCPIP1的去泛素化酶（deubiquitinating enzyme，DUB）結(jié)構(gòu)域位于N端，與去泛素化功能相關(guān)7。人類基因中有100個DUB19，這些DUB被分為5個家族：泛素羧基末端水解酶家族（ubiquitin C-terminal hydrolases，UCHs）、泛素特異性蛋白酶家族（ubiquitin-specific proteases，USPs）、卵巢腫瘤蛋白酶（otubain proteases，OTU）、MJD蛋白酶（Machado-Joseph disease protea

14、ses）和具有JAB1/PAB1/MPN結(jié)構(gòu)域的金屬蛋白酶（JAB1/PAB1/MPN domaincontaining metalloenzymes）。每個家族都含有一種特殊的但保守的DUB結(jié)構(gòu)域20。序列比對發(fā)現(xiàn)MCPIP1序列中不存在上述已知的任何一種DUB結(jié)構(gòu)域。然而序列比對發(fā)現(xiàn)，該蛋白質(zhì)N端具有一個泛素相關(guān)結(jié)構(gòu)域（ubiquitin association domain，UBA）。該結(jié)構(gòu)域在多種物種的MCPIP1蛋白質(zhì)序列中保守7。實驗發(fā)現(xiàn)，該結(jié)構(gòu)域具有結(jié)合泛素的作用7。同時，通過序列分析發(fā)現(xiàn)，該蛋白質(zhì)的N端具有一段在多種物種中都十分保守的區(qū)域（N-terminal conserve

15、d region，NCR）。該區(qū)域中含有1個半胱氨酸盒（Cys box）和1個天冬氨酸盒（Asp box）7，這兩段保守序列在很多DUB中都存在。通過體外捷短實驗發(fā)現(xiàn)，NCR具有去泛素化酶的活性，該段區(qū)域與一種DUB結(jié)構(gòu)域UCH具有27%的序列相似度。MCPIP1的去泛素化酶活性與很多其它的去泛素化酶都有相似的特點。如含有兩個保守的序列模體半胱氨酸盒（Cys box）和天冬氨酸盒（Asp box）；作為半胱氨酸蛋白酶，MCPIP1的去泛素化酶活性會被一種半胱氨酸蛋白酶抑制劑NEM完全抑制；其去泛素化酶活性并不依賴于Mg2+和ATP，但是Zn2+和Mn2+卻會對該酶活性產(chǎn)生抑制作用。序列分析發(fā)現(xiàn)

16、，MCPIP1中的去泛素化酶結(jié)構(gòu)域與RNA酶結(jié)構(gòu)域都位于NCR區(qū)域。Asp box中的D141、Cys box中的C157和鋅指結(jié)構(gòu)域中的C306是DUB活性的關(guān)鍵位點。D141也是RNA酶活性的關(guān)鍵位點。D141、C157、C306和D278/D279的突變會影響MCPIP1對NF-B信號通路的抑制活性。C157的突變也會導致MCPIP1對JNK信號通路活性及LPS誘導的炎癥細胞因子產(chǎn)物的抑制效應的喪失。這些結(jié)果都說明，MCPIP1對炎癥信號通路的抑制效應與DUB活性息息相關(guān)7。蛋白質(zhì)的亞細胞定位對MCP-1轉(zhuǎn)基因小鼠的表型分析發(fā)現(xiàn)，MCPIP 1主要定位于心肌細胞的細胞核中2，而隨后對小鼠

17、巨噬細胞中MCPIP 1表達情況的研究表明MCPIP1定位于細胞質(zhì)1, 4，而后對HepG2細胞的研究表明MCPIP1定位于細胞骨架及以顆粒的形式位于細胞質(zhì)中3?；虻慕M織特異性表達情況Northern Blot分析表明，ZC3H12A基因的mRNA在白細胞中含量最高，其次是在心臟組織和胎盤，在脾臟、腎臟、肝臟和肺中稍低。在腦、胸腺、肌肉組織、小腸和結(jié)腸中基本上沒有其轉(zhuǎn)錄本的存在。據(jù)MCPIP1的mRNA在白細胞中的高含量推測其在免疫系統(tǒng)中具有重要作用3?；蚯贸∈蟊硇蚙c3h12a敲除小鼠表現(xiàn)為生長遲緩，且大多數(shù)在12周內(nèi)自發(fā)死亡。敲除小鼠患有嚴重的脾腫大和淋巴結(jié)腫大。肺部漿細胞浸潤、膽管

18、和胰腺的副上皮化（paraepithelium）。漿細胞在淋巴結(jié)和脾臟中大量聚積。在淋巴結(jié)內(nèi)，肉芽腫的形成導致巨噬細胞融合形成巨細胞。Zc3h12a敲除小鼠患有嚴重的貧血，以及白細胞和血小板的升高。并患有高免疫球蛋白血癥，肺間質(zhì)組織中有漿細胞浸潤，并產(chǎn)生大量的IgG和IgA。在小鼠中發(fā)現(xiàn)抗核抗體和抗雙鏈DNA抗體。70%的CD19+B細胞是IgM-IgD-，而不是免疫球蛋白+，說明大多數(shù)的B細胞在脾臟內(nèi)發(fā)生類型轉(zhuǎn)換。CD138+CD19dull的漿細胞在脾臟中很多。另外在脾臟CD3+T細胞中CD69的表達上調(diào)，在外周，CD44highCD62L-T細胞積聚。然而，CD4+Foxp3-調(diào)節(jié)性T細

19、胞的比例沒有變化。用抗CD3的抗體刺激脾臟T細胞后，IFN的產(chǎn)量增加，但IL-17沒變。在脾臟中，Ter119+的有核紅細胞的量很高，可能是由于貧血的緣故。然而，脾臟中B和T細胞的比例、CD4+和CD8+細胞的比例沒有變化。通過將基因敲除小鼠的骨髓轉(zhuǎn)入經(jīng)輻照的正常小鼠中，發(fā)現(xiàn)受體小鼠表現(xiàn)出延遲但顯著的淋巴結(jié)腫大、漿細胞和記憶細胞的積聚。這說明是造血細胞導致小鼠免疫功能紊亂的發(fā)生。以上這些表型說明，Zc3h12a在防止以能分泌免疫球蛋白的漿細胞數(shù)量的增加及肉芽腫形成為標志的重癥自身免疫性疾病的發(fā)展中發(fā)揮重要作用。用TLR的配體，MALP-2（TLR2）、poly(I:C)（TLR3）、LPS（T

20、LR4）、R-848（TLR7）和CpG-DNA（TLR9），刺激基因敲除小鼠的巨噬細胞后，IL-6和IL-12p40的表達水平升高，但是TNF水平?jīng)]有變化。經(jīng)LPS刺激后，巨噬細胞表達的IL-6的 mRNA顯著增加，但TNF、Cxcl1、NF-B的mRNA水平?jīng)]有變化。IL-6、IFN-、Calcr和Sprr2d的mRNA在敲除小鼠巨噬細胞中的表達顯著升高。用LPS刺激后，Zc3h12a敲除小鼠和正常小鼠的巨噬細胞相比，NF-B或（activator protein 1，AP-1）沒有顯著變化，說明MCPIP1沒有參與調(diào)節(jié)TLR初始信號通路?；蚯贸∈笱獫{中的TNF和MCP-1含量顯著增加

21、。無論是在正常培養(yǎng)條件下還是在LPS誘導條件下，骨髓來源的巨噬細胞分泌的促炎細胞因子的水平都有很大程度的提高，如TNF、IL-1、IL-6和MCP-1。LPS刺激后的骨髓來源的巨噬細胞產(chǎn)生的炎癥細胞因子的mRNA也有很大程度的提高，包括TNF、IL-1和IL-6。在小腸、肺和胸腺中的炎癥細胞因子的表達都有很大程度的提高，包括TNF、IL-1、IL-6和iNOS （inducible nitric oxide synthase，可誘導的一氧化氮合成酶）。敲除小鼠自發(fā)地患有致死性的炎癥綜合癥。其巨噬細胞和脾臟細胞中炎癥相關(guān)基因的表達有顯著提高，JNK和IB激酶的活性升高，TNF受體相關(guān)因子的多聚泛

22、素化升高?；蚯贸∈蟮难装Y相關(guān)細胞因子的表達增強。骨髓來源的巨噬細胞對LPS的刺激更為敏感。這些結(jié)果都說明12a基因是炎癥反應和免疫自穩(wěn)態(tài)的重要調(diào)控因子4, 7?；蚬δ茏鳛檗D(zhuǎn)錄因子，能夠激活凋亡相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄MCPIP 1是具有CCCH鋅指結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子，能夠激活凋亡相關(guān)基因的表達，從而導致細胞凋亡。通過TUNEL分析發(fā)現(xiàn)，過表達ZC3H12A的HEK-293細胞中，caspase-3被激活，隨后細胞發(fā)生凋亡。而用Z-VAD-fmk 作用于該細胞后，發(fā)現(xiàn)細胞凋亡情況得到緩解。同時，在體外通過熒光素酶報告基因?qū)嶒灠l(fā)現(xiàn)，MCPIP 1鋅指結(jié)構(gòu)域的突變和脯氨酸富集區(qū)的突變，會影響熒光素酶報告基因

23、的轉(zhuǎn)錄。同時，這些結(jié)構(gòu)域的突變也會導致細胞凋亡的減少。這說明MCPIP 1中，轉(zhuǎn)錄因子功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)域，與誘導凋亡相關(guān)的結(jié)構(gòu)域相同。也就是說，MCPIP 1誘導轉(zhuǎn)錄的基因即為凋亡相關(guān)的基因2。這說明作為轉(zhuǎn)錄因子，MCPIP 1能夠激活細胞凋亡相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，從而誘發(fā)細胞凋亡。通過對MCPI-1轉(zhuǎn)基因小鼠的表型分析，發(fā)現(xiàn)MCPIP 1在心肌細胞中高度表達，且主要集中于細胞核中。在人中，對做過心臟移植手術(shù)患者的心臟組織的研究發(fā)現(xiàn)，與未患有缺血性心臟病的患者相比，患有缺血性心臟病的患者，其心肌細胞中MCPIP 1的mRNA含量很高。同時在小鼠模型中和人中都發(fā)現(xiàn)，患有缺血性心臟病的個體，MCPIP 1

24、在心肌組織中都高度表達。由于MCPIP 1會激活一系列凋亡相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄，導致細胞凋亡，從而推測其在缺血性心臟病的發(fā)展中具有重要意義2。氧化脅迫（oxidative stress）會誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脅迫（ER stress），21進而導致細胞自噬22，而后細胞發(fā)生死亡23。對于心肌成肌細胞（cardiomyoblast）的研究表明，MCP-1的刺激會誘導MCPIP 1的表達，而產(chǎn)生氧化脅迫，從而導致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)脅迫，進而引發(fā)細胞自噬，最終致使心肌成肌細胞死亡。而ZC3H12A基因knockdown后該效應減弱。MCPIP1能夠激活可誘導的一氧化氮合成酶（inducible NO synthase，iNOS

25、）的表達，使NADPH氧化酶亞單位phox47從細胞質(zhì)遷移到細胞膜，誘導反應活性氧（reactive oxygen species，ROS）的生成，誘導ER脅迫標志物熱激蛋白40（heat-shock protein 40，HSP40）、PDI（protein disulde-isomerase）、GRP78（guanine-nucleotide-releasing protein 78）以及IRE1（inositol-requiring enzyme 1）的表達。MCPIP1也能引發(fā)細胞自噬，通過誘導自噬標志物beclin-1、剪切LC3（microtubule-associated pro

26、tein 1 light chain 3）以及誘發(fā)自噬溶酶體的形成。同時，研究發(fā)現(xiàn)，在MCPIP1誘發(fā)細胞死亡的過程中，caspase 2/12、JNK（c-JunN-terminal kinase）、p38、p53和PUMA（p53 up-regulated modulator of apoptosis）都被激活。這些結(jié)果說明，MCPIP1誘導了ROS /RNS （reactive nitrogen species，反應活性氮）的產(chǎn)生，從而導致ER脅迫，進而通過caspase 2/12和IRE1-JNK/p38-p53-PUMA信號轉(zhuǎn)導通路引發(fā)細胞自噬和凋亡24。作為轉(zhuǎn)錄因子，能夠抑制炎癥相

27、關(guān)基因啟動子的活性脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）是革蘭氏陰性菌細胞壁的主要成分，LPS可作用于TLR4并激活MyD88，后者可聚集并結(jié)合IRAK1和IRAK2，作用于腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6），進而激活MAPK和NF-B信號轉(zhuǎn)導通路?；罨腗APK和NF-B信號轉(zhuǎn)導通路是LPS所導致的細胞反應與炎癥細胞因子（如TNF-，IL-6和IL-8等）產(chǎn)生的重要分子機制17。在經(jīng)LPS刺激的小鼠巨噬細胞系Raw264.7和人急性單核細胞白血病細胞系（the human acute monocytic leukemia cell line）THP-1來源的巨噬細胞中，

28、MCPIP1的mRNA和蛋白質(zhì)水平都有顯著升高。過表達MCPIP1后，LPS刺激后的巨噬細胞分泌的炎癥細胞因子及氮氧化物的水平卻顯著下降。而用siRNA干擾掉Zc3h12a基因后，這些炎癥細胞因子和氮氧化物的水平相比于正常情況有顯著增加。這說明MCPIP1會抑制LPS誘導的炎癥細胞因子（如TNF、IL-1、IL-6、MCP-1）以及iNOS的表達1。LPS能夠通過某些細胞信號轉(zhuǎn)導途徑激活腫瘤壞死因子（TNF）及iNOS啟動子的活性。而實驗發(fā)現(xiàn)MCPIP 1能強烈地抑制LPS誘導的TNF及iNOS啟動子的活性。TNF和iNOS啟動子可以被NF-B信號途徑所激活。而過表達MCPIP1顯著抑制了p6

29、5誘導的TNF啟動子、iNOS啟動子的活性。LPS能夠激活NF-B信號途徑。而過表達MCPIP1強烈地抑制了LPS誘導的NF-B小啟動子的活性。這些說明MCPIP1可能是NF-B信號轉(zhuǎn)導通路的一個負向調(diào)節(jié)因子1。作為轉(zhuǎn)錄因子，能夠誘導細胞分化研究報道，在NT2神經(jīng)母細胞（neuroprogenitor cells）中，MCPIP 1的激活了神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acid protein，GFAP）的表達，并導致細胞形態(tài)學的變化，進而致使細胞分化為神經(jīng)膠質(zhì)細胞25。在脂肪細胞形成的過程中，C/EBP轉(zhuǎn)錄因子家族（C/EBP，C/EBP，C/EBP）以及PPAR誘

30、導一系列基因的轉(zhuǎn)錄，從而使細胞分化為脂肪細胞。PPAR是脂肪細胞形成的重要轉(zhuǎn)錄因子26，因為所有其他轉(zhuǎn)錄因子必須在PPAR的存在下，才會誘導脂肪細胞的形成27。然而，對PPAR-/- 的小鼠胚胎成纖維細胞的研究發(fā)現(xiàn)，強制表達MCPIP 1后，細胞會在沒有PPAR的情況下，產(chǎn)生大量C/EBP轉(zhuǎn)錄因子家族成員，并分化為脂肪細胞。同時，對3T3-L1細胞的研究發(fā)現(xiàn)，強制表達MCPIP 1后，C/EBP轉(zhuǎn)錄因子家族、PPAR的表達增強28。這兩項研究說明，MCPIP 1通過誘導基因的轉(zhuǎn)錄，進而調(diào)控某些細胞的分化。作為轉(zhuǎn)錄因子，能夠誘導血管生成研究發(fā)現(xiàn)，MCPIP 1的過表達會增強人胚胎血管內(nèi)皮細胞（h

31、uman umbilical vein endothelial cells，HUVEC）的凋亡、增殖、遷移和血管生成相關(guān)基因的表達，進而導致血管生成。N-鈣黏附分子（cadherin）在內(nèi)皮細胞間黏著斑（橋粒，adherence junction）的形成中起重要作用29，它能夠通過調(diào)控黏著斑的形成和內(nèi)皮細胞的行為，進而導致血管形成30。對HUVEC細胞的研究發(fā)現(xiàn)，過表達MCPIP 1能誘導鈣黏附分子基因cdh12和cdh19的表達以及血管生成。同時染色質(zhì)免疫共沉淀實驗證明，在體內(nèi)鈣黏素（cadherin，cdh）12和cdh19能夠與MCPIP 1結(jié)合。相反，cdh12或cdh19 knock

32、down后抑制了MCPIP 1的誘導血管生成作用，同時，MCPIP 1 knockdown后也抑制了MCP-1誘導的cdh12和cdh19的表達。這說明，MCP-1能夠誘導MCPIP 1的生成，而作為轉(zhuǎn)錄因子的MCPIP 1能夠通過激活血管生成相關(guān)基因（如cdh12和cdh19）的轉(zhuǎn)錄，進而誘導血管生成31。作為RNA酶，能夠降解mRNA實驗發(fā)現(xiàn)，MCPIP1具有降解炎癥相關(guān)細胞因子如IL-2、IL-6、IL12p40、Calcr、IL-1的mRNA的作用，即它是一個RNA酶3, 4。在該基因敲除小鼠中，自身免疫病的發(fā)生大大提高4，說明這種降解功能在阻止自身免疫功能紊亂中發(fā)揮重要作用?；蚯贸?/p>

33、小鼠的巨噬細胞中，IL-6的mRNA半衰期大大延長。相反，過表達Zc3h12a極大地增強了IL-6的mRNA的降解。同時，研究發(fā)現(xiàn)，用siRNA干擾掉MCPIP 1基因表達后，LPS刺激后的人成纖維細胞中，IL-1的轉(zhuǎn)錄水平顯著提高。然而，過表達MCPIP 1后，產(chǎn)生了相反的效應。體外實驗證實，MCPIP1能與IL6和IL-1的3UTR結(jié)合3, 4。對IL-6 mRNA的研究發(fā)現(xiàn)，其3UTR序列中含有5個AU富集區(qū)（adenine-uridine-rich elements，ARE）32，以及一個在物種間非常保守的由30個左右的核苷酸組成的元件33。ARE是一種經(jīng)典的，與mRNA不穩(wěn)定性有關(guān)的

34、結(jié)構(gòu)，存在于很多細胞因子（如TNF、GM-CSF、CXCL1等）的mRNA 3UTR中34。TTP能夠識別這些細胞因子的ARE結(jié)構(gòu)，進而招募去腺苷化酶（deadenylase），后者會移除mRNA的poly(A)尾，進而使mRNA被核酸外切酶降解。然而，在IL-6和IL-1的mRNA中，與mRNA不穩(wěn)定性相關(guān)的結(jié)構(gòu)并非是ARE，而是其保守元件3, 4。該保守元件能形成一個RNA二級結(jié)構(gòu)的莖環(huán)（stem-loop）結(jié)構(gòu)，研究發(fā)現(xiàn)該莖環(huán)結(jié)構(gòu)的存在對于mRNA的穩(wěn)定具有重要意義3, 35。MCPIP 1中CCCH鋅指結(jié)構(gòu)的突變或缺失，對IL6 mRNA的降解活性沒有顯著影響。這說明CCCH結(jié)構(gòu)對于M

35、CPIP1降解IL6 mRNA只起部分作用。序列比對發(fā)現(xiàn)，MCPIP1的N端有一段保守序列（139-297AA），與PIN（PilTN-terminus）結(jié)構(gòu)域有一定的同源性。該結(jié)構(gòu)域中有4個重要的酸性氨基酸位點（D141、E185、D226、D244），它們在空間上形成一個保守的帶負電的袋子結(jié)構(gòu)，能夠與Mg2+結(jié)合，發(fā)揮RNA酶功能。對D141的突變使MCPIP1喪失降解IL6 mRNA的RNA酶的能力，說明該PIN結(jié)構(gòu)域?qū)τ贛CPIP 1 RNA酶功能的發(fā)揮具有重要意義3, 4。且過表達PIN結(jié)構(gòu)域突變或完全缺失的MCPIP 1，對IL-1的mRNA也不再具有降解作用3。同時，序列分析發(fā)現(xiàn)

36、，PIN結(jié)構(gòu)域在ZC3H12家族的四個成員間是保守的4。與TTP對比發(fā)現(xiàn)，MCPIP1雖然也能使mRNA降解，但它們的降解機制卻有很大的不同。如TTP能降解TNF、GM-CSF、CXCL1等細胞因子的mRNA，而對IL6的mRNA沒有影響。相反，MCPIP1不影響TNF等細胞因子的mRNA1，但能使IL6、IL12p40、IL-1的mRNA降解。這說明它們對不同的細胞因子的mRNA起作用。另外，TTP是通過mRNA的3UTR的ARE結(jié)構(gòu)起作用，而MCPIP1則是通過mRNA的3UTR的保守元件起作用。另外，TTP招募去腺苷化酶（deadenylase），從而移除mRNA的poly(A)尾，進而

37、使mRNA被核酸外切酶降解；而MCPIP1本身即有核酸內(nèi)切酶的活性。且體外實驗表明，MCPIP1的核酸內(nèi)切酶活性所針對的RNA不具有序列特異性。其體內(nèi)的靶mRNA序列特異性可能是由MCPIP1的結(jié)合蛋白質(zhì)決定的，或是該蛋白在體內(nèi)特定的環(huán)境條件下，對mRNA的序列具有一定的偏好。這都說明MCPIP1對mRNA的降解機制與TTP存在很大區(qū)別4。另外，體外實驗表明，MCPIP 1能夠與MCPIP 1自身的mRNA結(jié)合，并能調(diào)控其降解3。這一反饋環(huán)路的存在使得MCPIP 1的調(diào)節(jié)能力更加精細。MCPIP 1針對這些細胞因子的RNA酶功能，使MCPIP 1成為炎癥過程的一個重要的調(diào)控因子。作為去泛素化酶

38、泛素-蛋白酶體途徑是細胞內(nèi)ATP依賴的蛋白質(zhì)選擇性降解的主要途徑。通過對底物蛋白的多聚泛素化并經(jīng)蛋白酶體降解，可以影響或調(diào)節(jié)多種細胞活動，包括：基因轉(zhuǎn)錄、細胞周期調(diào)節(jié)、免疫反應、細胞受體功能及腫瘤生長、炎癥過程等19。泛素是真核生物中高度保守的蛋白，由76個氨基酸組成。泛素有7個賴氨酸，通過不同的連接，可形成具有不同拓撲結(jié)構(gòu)和功能的多聚泛素鏈。去泛素化酶能水解底物蛋白上的多聚泛素鏈之間的鏈接，起到去泛素化的作用，對蛋白降解進行反向調(diào)節(jié)，從而影響蛋白質(zhì)的功能，如影響或調(diào)節(jié)細胞的生長發(fā)育、信號轉(zhuǎn)導和神經(jīng)病變或腫瘤等許多細胞生理和病理過程19。NF-B（核因子-B）屬于轉(zhuǎn)錄因子家族，具有調(diào)節(jié)免疫，炎

39、癥和細胞存活的作用。NF-B抑制蛋白（inhibitors of NF-B，I-B）可與NF-B的二聚體緊密結(jié)合形成無活性的大蛋白復合體而停留在胞漿中。當NF-B信號傳導途徑激活時， I-B激酶（I-B kinase complex，IKK）被激活，從而導致I-B的磷酸化，繼而使其受到泛素化修飾，最后在蛋白酶體內(nèi)降解。I-B降解后，NF-B的核定位信號暴露，NF-B可進入細胞核內(nèi)，與DNA上的特定部位結(jié)合，促進特異基因的轉(zhuǎn)錄。Lys48（K48）結(jié)合的多聚泛素鏈優(yōu)先降解I-B；而Lys63（K63）結(jié)合的多聚泛素鏈則調(diào)節(jié)TAK1和IKK的活性，最終活化NF-B。腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子（TRA

40、Fs）被認為是將活化的受體連接到下游激酶的銜接蛋白，放大激酶信號。TRAFs參加了大量受體家族的信號轉(zhuǎn)導，主要包括（IL-1 receptors，IL-1R），Toll樣受體（Toll-like receptors，TLR），T細胞受體（T-cell receptors，TCR）和B細胞受體（B-cell receptors，BCR）。TRAF2是NF-B信號轉(zhuǎn)導途徑中的一員，TRAF2如果發(fā)生Lys48（K48）相互連接的多聚泛素化，則導致其自身的降解；如果發(fā)生Lys63（K63）相互連接的多聚泛素化，則能開啟NF-B的下游信號通路37。c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-termina

41、l kinase，JNK）家族是絲裂原激活的蛋白激酶（MAPK）超家族成員之一。該家族的其它成員包括，細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK12）、p38以及ERK5。JNK信號通路可被細胞因子、生長因子、應激等多種因素激活。JNK活化在細胞增殖、細胞凋亡、應激反應以及多種人類疾病的發(fā)生與發(fā)展中起著重要的作用38。實驗觀測到，MCPIP1過表達的細胞，其TRAF2、TRAF3、TRAF6、RIP以及IB的泛素化水平顯著降低。相反，MCPIP1缺陷的細胞中，基礎和LPS誘導的TRAF2、TRAF3和TRAF6的泛素化水平顯著升高。由于TRAF2和TRAF6是RIP（受體相關(guān)蛋白，receptor inter

42、acting protein）和IB的上游影響因子，因而推測MCPIP1對RIP和IB去泛素化的影響是間接的，對TRAF家族成員的去泛素化影響則是直接的。該蛋白質(zhì)通過移除TRAF2、TRAF3以及TRAF6等蛋白質(zhì)的多聚泛素鏈，從而負向調(diào)節(jié)炎癥信號通路JNK和NF-B的活性7。MCPIP1在LPS及IL-1誘導的JNK激活過程中是一個效力強大的抑制因子。然而，它對LPS誘導的IKK激活過程的抑制效應卻不是很顯著。而且它對IL-1誘導的IKK激活過程基本無影響。然而過表達MCPIP1能顯著抑制LPS和細胞因子誘導的NF-B依賴的報告基因的活性，這就說明MCPIP1也能夠作用于NF-B信號通路的下

43、游效應分子。在基因敲除小鼠的肺部發(fā)現(xiàn)，JNK和IKK都被結(jié)構(gòu)性激活；而在骨髓來源的巨噬細胞中沒有發(fā)現(xiàn)此現(xiàn)象，只有在LPS刺激下，JNK和IKK才被激活7。MCPIP1能夠通過選擇性地剪切TRAFs、RIP和NEMO的K63相互連接的多聚泛素鏈，從而負向調(diào)節(jié)JNK和NF-B的信號通路。同時，在體外該蛋白質(zhì)也能剪切K48相互連接的多聚泛素鏈。實驗表明，該蛋白質(zhì)能夠顯著地影響細胞中所有蛋白質(zhì)的泛素化7。MCPIP1作為RNA酶，能夠通過降解炎癥相關(guān)細胞因子（如IL-6、IL-1等）的mRNA，抑制炎癥的發(fā)展；同時，作為去泛素化酶，該蛋白質(zhì)能夠通過去掉TRAF的泛素，負向調(diào)控JNK和NF-B的信號通路

44、，從而發(fā)揮抑炎效應。因而MCPIP 1可以通過多種機制來調(diào)控炎癥反應，維持免疫自穩(wěn)態(tài)。因而它在炎癥疾病的治療中的作用將不容忽視7。調(diào)節(jié)研究發(fā)現(xiàn)，MCP-1、LPS、IL-1、TNF以及PMA（phorbol 12-myristate-13-acetate）都能誘導MCPIP 1的表達1, 2, 3, 4, 5。IL-1對ZC3H12A的調(diào)節(jié)IL-1是促炎細胞因子，在多種應激過程的早期就會產(chǎn)生。它可以多種方式作用于多種細胞。IL-1與IL-1受體（IL-1R）的結(jié)合激活了TAK1激酶，最終導致了NF-B的激活以及MAPK（即ERK、p38、JNK）的激活。研究發(fā)現(xiàn)，在經(jīng)IL-1刺激的單核細胞、成

45、纖維細胞和肝癌HepG2細胞中，MCPIP 1轉(zhuǎn)錄本的含量迅速升高。IL-1能夠通過激活NF-B通路和MAPK通路，進而激活ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄5, 10。.實驗發(fā)現(xiàn)，與相比，抑制掉NF-B通路的HepG2細胞在IL-1的刺激下，其ZC3H12A轉(zhuǎn)錄本的水平要遠遠低于野生型HepG2細胞。這說明IL-1能夠通過激活NF-B通路，進而激活ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄5。在HepG2細胞系和人單核來源的巨噬細胞中都發(fā)現(xiàn)，IL-1能夠通過激活ERK（MAPK）通路，使轉(zhuǎn)錄因子Elk-1磷酸化并與ZC3H12A的啟動子結(jié)合，從而激活ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄。Elk-1是一個重要的轉(zhuǎn)錄因子，它能調(diào)控許多早期基因（i

46、mmediate-early genes），尤其是轉(zhuǎn)錄因子基因的表達。這些早期基因進而調(diào)控一系列在細胞對環(huán)境變化的響應中發(fā)揮重要作用的蛋白編碼基因的表達。通過構(gòu)建帶有熒光素酶報告基因及ZC3H12A調(diào)控序列不同長度片段的質(zhì)粒，研究者發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)錄因子Elk-1對ZC3H12A轉(zhuǎn)錄的調(diào)控是通過ZC3H12A序列的-76到+60位實現(xiàn)，即該處存在受Elk-1調(diào)控的啟動子（136 bp）。序列分析發(fā)現(xiàn)，該區(qū)域存在一個ets結(jié)合位點（CAGGAA）和一個CArG盒-SRF結(jié)合位點（CArG box-SRF binding site，CCATATAAAGG）。在HepG2細胞系中發(fā)現(xiàn)，活化的內(nèi)源性的Elk-

47、1與其協(xié)助作用因子SRF（serum response factor）能夠直接與該區(qū)域結(jié)合，進而啟動ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄。對該區(qū)域的突變導致啟動子活性降低，但并未完全消失，提示該區(qū)域中的2個NF-B結(jié)合位點在對ZC3H12A轉(zhuǎn)錄的激活中，可能也起一定的作用10。IL-1能夠通過NF-B通路和MAPK通路激活MCPIP 1的轉(zhuǎn)錄，同時，作為RNA酶，MCPIP 1能夠降解IL-1的mRNA3。這兩方面現(xiàn)象說明存在一個精密的自我調(diào)控環(huán)路，即IL-1能夠調(diào)控MCPIP 1的表達，反過來MCPIP 1也能調(diào)控IL-1 mRNA的降解10。這說明MCPIP 1作為一個負向調(diào)節(jié)因子，能夠限制促炎細胞因子I

48、L-1的產(chǎn)生，從而將炎癥反應限制在一定程度內(nèi)進行，避免其對機體自身的損傷。另外，IL-1能夠通過NF-B通路激活MCPIP 1的轉(zhuǎn)錄5，同時，作為轉(zhuǎn)錄因子，MCPIP 1能夠反過來抑制NF-B通路的活性1, 5。這些事實說明體內(nèi)存在一個包含MCPIP 1的精密環(huán)路，能夠抑制炎癥反應的程度，維護機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。對于MCPIP 1的序列分析發(fā)現(xiàn)，其第二個內(nèi)含子中存在4個NF-B結(jié)合位點。通過染色質(zhì)免疫共沉淀實驗、突變實驗以及凝膠阻滯實驗（EMSA）發(fā)現(xiàn)，IL-1的刺激可以通過NF-B通路激活此區(qū)域，從而增強ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄。即此區(qū)域是MCPIP 1的增強子序列5。實驗發(fā)現(xiàn)，多種細胞因子（LP

49、S、IL-1、TNF）能夠激活ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄，而它們同時也是NF-B通路的激活物，所以這些細胞因子很可能也是通過NF-B通路激活此增強子，進而增強ZC3H12A的轉(zhuǎn)錄的。因而，IL-1能夠通過多條信號轉(zhuǎn)導通路，作用于ZC3H12A的啟動子和增強子，從而激活MCPIP 1的轉(zhuǎn)錄。MCP-1對ZC3H12A的調(diào)節(jié)用MCP-1刺激人單核細胞來源的巨噬細胞后，檢測到ZC3H12A轉(zhuǎn)錄本的含量升高，同時MCPIP 1蛋白質(zhì)的含量也大大提高2。用MCP-1刺激人臍帶血管內(nèi)皮細胞（human umbilical vein endothelial cells）后也得到同樣結(jié)果31。LPS對ZC3H12A

50、的調(diào)節(jié)在經(jīng)LPS刺激的小鼠巨噬細胞系Raw264.7和THP-1來源的巨噬細胞中，MCPIP1的mRNA和蛋白質(zhì)水平都有顯著升高1。這說明LPS可以誘導Zc3h12a的表達。然而，過表達MCPIP1后，LPS刺激后的巨噬細胞分泌的細胞因子（如TNF、IL-1、IL-6、MCP-1）及氮氧化物的水平卻顯著下降。而用siRNA干擾掉Zc3h12a基因后效果則完全相反。同時，MCPIP 1能強烈地抑制LPS誘導的TNF及iNOS啟動子及NF-B小啟動子的活性。這說明MCPIP1能顯著抑制LPS的誘導效應1。這些現(xiàn)象說明LPS可以誘導MCPIP1的表達，相反，MCPIP 1的表達會抑制LPS的誘導效應

51、。即MCPIP 1可能是LPS刺激通路上的一個負向調(diào)控因子。TNF對ZC3H12A的調(diào)節(jié)在炎癥細胞因子（如TNF、IL-1、干擾素）刺激下，內(nèi)皮細胞（endothelial cells，ECs）會經(jīng)歷炎癥激活過程，致使表面黏附分子表達升高，如血管細胞黏附分子（vascular cell adhesion molecule，VCAM-1）細胞間黏附分子（intercellular adhesion molecule，ICAM-1）以及選擇素E（E-selectin）。這導致了炎癥細胞穿越血管壁被招募到炎癥部位。在經(jīng)TNF刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細胞（human umbilical vein endot

52、helial cells，HUVECs）中，MCPIP1的mRNA和蛋白質(zhì)水平都有顯著升高。這說明TNF可以誘導ZC3H12A的表達。然而，過表達MCPIP1后，TNF刺激后的HUVEC表達的黏附分子（VCAM-1）減少，同時阻止了單核細胞與內(nèi)皮細胞的黏附。而干擾掉MCPIP1的表達后，結(jié)果完全相反。這說明MCPIP1能顯著抑制TNF的誘導效應。這些現(xiàn)象說明MCPIP 1是TNF刺激通路上的一個負向調(diào)控因子，可以抑制細胞因子誘導的內(nèi)皮細胞炎癥38?？偨Y(jié)本文較為系統(tǒng)地闡述了ZC3H12A基因的克隆、MCPIP 1蛋白的結(jié)構(gòu)及功能，從時間的維度觀其主要研究歷程，以及對免疫系統(tǒng)的重要影響。大體上淺析

53、了MCPIP 1從其發(fā)現(xiàn)至今的探索情況?；蚯贸∈缶哂腥绱吮姸嗟呐c免疫系統(tǒng)相關(guān)的表型變化，同時，目前的研究表明，MCPIP 1具有轉(zhuǎn)錄因子、RNA酶、去泛素化酶等作用，其在調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄、mRNA降解、多聚泛素鏈的去除、細胞凋亡、細胞自噬、炎癥抑制、細胞分化、血管生成等方面都有重要作用。另外，對于MCPIP 1的序列比對發(fā)現(xiàn)，該序列在多種物種中都存在，且高度保守。由上述的種種事實可以預見，MCPIP 1在免疫系統(tǒng)中應該具有至關(guān)重要的作用。然而，目前對MCPIP 1的研究還僅限于固有免疫系統(tǒng)，該蛋白質(zhì)在固有免疫炎癥反應之外的其它作用效果及機制的研究還很少見。同時，該蛋白質(zhì)的上游調(diào)控因子及相關(guān)作用

54、機制的研究并不透徹，與該蛋白質(zhì)具有相互作用的其它蛋白質(zhì)、mRNA等的研究還不夠明了。而且MCPIP 1在臨床方面的研究并不是很多，作為如此重要的一種蛋白質(zhì)，可以想見，其定會有作為臨床治療靶點的一天?？傊?，由于MCPIP 1是新近（2006年）剛發(fā)現(xiàn)的一種蛋白質(zhì)，對其的研究報道目前為止還并不是多見。因而對MCPIP 1在上述這些方面的深入研究有待進行。參考文獻1Liang J, Wang J, Azfer A, et al., A novel CCCH-zinc finger protein family regulates proinflammatory activation of macro

55、phages. JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, MAR 7 2008. 283(10): p. 6337-6346.2Zhou LM, Azfer A, Niu JL, et al., Monocyte chemoattractant protein-1 induces a novel transcription factor that causes cardiac myocyte apoptosis and ventricular dysfunction. CIRCULATION RESEARCH, MAY 12 2006. 98(9): p. 1177-1

56、1853Mizgalska D, Wegrzyn P, Murzyn K, et al., Interleukin-1-inducible MCPIP protein has structural and functional properties of RNase and participates in degradation of IL-1 beta mRNA. FEBS JOURNAL, DEC 2009. 276 (24): p. 7386-7399.4Matsushita K, Takeuchi O, Standley DM, et al., Zc3h12a is an RNase

57、essential for controlling immune responses by regulating mRNA decay.NATURE, APR 30 2009.458 (7242): p. 1185-U124.5Skalniak L, Mizgalska D, Zarebski A, et al., Regulatory feedback loop between NF-kappa B and MCP-1-induced protein 1 RNase. FEBS JOURNAL, OCT 2009. 276 (20): p. 5892-5905. 6Liang J, Song

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