丙種球蛋白的制備方案

1、任務(wù)1 1 丙種球蛋白分離制備方案的制定目錄u 丙種球蛋白的基本概述u 丙種球蛋白的作用u Sephadex G-50分離制備丙種球蛋白u(yù)丙種球蛋白的日常應(yīng)用u丙種球蛋白的臨床實(shí)踐 丙種球蛋白預(yù)防傳染性肝炎，預(yù)防麻疹等病毒性疾病感染，治療先天性丙種球蛋白缺乏癥 ，與抗生素合并使用，可提高對(duì)某些嚴(yán)重細(xì)菌性和病毒性疾病感染的療效。 預(yù)防傳染性肝炎，如乙肝、甲肝等。 用于麻疹、水痘、帶狀皰疹等病毒感染和菌感染的防治。 用于哮喘、過(guò)敏性鼻炎等內(nèi)源性過(guò)敏性疾病 與抗生素合并使用，可提高對(duì)某些嚴(yán)重細(xì) 菌性和病毒性疾病感染的療效。 主要治療先天性丙種球蛋白缺乏癥和免疫缺陷病。 Sephadex G-50分離

2、制備丙種球蛋白 一、簡(jiǎn)介 SephadexSephadex是由葡聚糖通過(guò)環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)形成的三維網(wǎng)狀凝膠顆粒。 SephadexSephadex凝膠按交聯(lián)度不同，用Sephadex GSephadex G加一個(gè)數(shù)字來(lái)區(qū)別型號(hào)，數(shù)字越小，表示介質(zhì)交聯(lián)度越大，分級(jí)范圍越小，反之亦然。 1、實(shí)驗(yàn)器材 層析柱（玻璃柱）、鐵架臺(tái) 2、實(shí)驗(yàn)材料 樣品液：0.05%核黃素(VitB2)與6%丙種球蛋白等量混合置4oC保存。 3、實(shí)驗(yàn)試劑： (1) 洗脫液(pH7.2 ;0.1mol/L磷酸鹽緩沖液）:取0.1mol/L磷酸氫二鈉720ml和0.1mol/L磷酸二氫鈉280ml,混勻。 五、實(shí)驗(yàn)過(guò)程 1 、

3、取直徑0.81.2cm，長(zhǎng)度為25cm的層析柱，在上口箍橡皮筋，出口處裝上乳膠管，柱內(nèi)加注蒸餾水23ml，排出乳膠管內(nèi)的氣泡，抬高乳膠管防止柱內(nèi)的蒸餾水排空。自頂部緩緩加入經(jīng)膨脹的葡聚糖G-50懸液。待底部凝膠沉積23cm時(shí)將乳膠管放低，仍繼續(xù)加入上述懸液至凝膠層積至18cm高度即可。操作過(guò)程中，應(yīng)防止氣泡與分層現(xiàn)象的發(fā)生。讓凝膠自然下沉，使表層平整。待凝膠柱層穩(wěn)定后，以洗脫液(蒸餾水)洗柱5分鐘，調(diào)節(jié)流速至4滴每分鐘。 2. 待蒸餾水流至柱面平時(shí)，(注意，不可使柱面干掉)，馬上沿層析柱內(nèi)壁小心加4滴樣品于柱床面，注意盡量不使床面攪動(dòng)，馬上加入12倍于樣晶體積的蒸餾水，反復(fù)兩次后，可加大量蒸餾

4、水連續(xù)洗脫，這樣可以使樣品稀釋最小。 3樣品一旦加入后馬上用量筒或刻度離心管收集流出液，柱床上不斷加蒸餾水，待紅色(血紅蛋白)流出一半時(shí)記錄毫升數(shù)，此為血紅蛋白Ve也為Vo。繼續(xù)收集流出液，待黃色(核黃素)流出一半時(shí)記錄體積，此為核黃素Ve。 4測(cè)出柱床體積(Vt)，外水體積(Vo)內(nèi)水體積(Vi)，及核黃素的洗脫體積(Ve)。并計(jì)算出Hb及魚精蛋的分配系數(shù)(Kd)。 5用蒸餾水反復(fù)加在柱床上面，洗柱10分鐘然后將柱內(nèi)凝膠回收入凝膠瓶?jī)?nèi)。 應(yīng)用 靜注丙種球蛋白治療小兒病毒性心肌炎 靜注丙種球蛋白治療格林一巴利綜合癥 靜脈注射用丙種球蛋白治療慢性結(jié)腸炎 靜脈注射丙種球蛋白防治早產(chǎn)兒高膽紅素血癥的臨床研究 靜注丙種球蛋白輔治嬰幼兒肺炎的臨床及免疫功能觀察 丙種球蛋白預(yù)防傳染性肝炎，預(yù)防麻疹等病毒性疾病感染，治療先天性丙種球蛋白缺乏癥 ，與抗生素合并使用，可提高對(duì)某些嚴(yán)重細(xì)菌性和病毒性疾病感染的療效。Sephadex G-50分離制備丙種球蛋白 一、簡(jiǎn)介 SephadexSephadex是由葡聚糖通過(guò)環(huán)氧氯丙烷交聯(lián)形成的三維網(wǎng)狀凝膠顆粒。 SephadexSephadex凝膠按交聯(lián)度不同，用Sephadex GSephadex G加一個(gè)數(shù)字來(lái)區(qū)別型號(hào)，數(shù)字越小，表示介質(zhì)交聯(lián)度越大，分級(jí)范圍越小，反之亦然。 4測(cè)出柱床體積(Vt)，外水體積(Vo)內(nèi)水