微生物檢測(cè)技術(shù)和相關(guān)儀器習(xí)題

1、第八章 微生物檢測(cè)技術(shù)和相關(guān)儀器習(xí)題參考答案一、名詞解釋1自動(dòng)血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)：主要由培養(yǎng)系統(tǒng)和檢測(cè)系統(tǒng)組成。培養(yǎng)系統(tǒng)包括培養(yǎng)基、恒溫裝置和震蕩培養(yǎng)裝置。檢測(cè)系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)控制，對(duì)血培養(yǎng)實(shí)施連續(xù)、無(wú)損傷瓶外監(jiān)測(cè)。通過(guò)自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO2的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢測(cè)微生物的存在。2檢測(cè)導(dǎo)電性和電壓的血培養(yǎng)系統(tǒng)：血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一定導(dǎo)電性。微生物在生長(zhǎng)代謝的過(guò)程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán)（例如在液體培養(yǎng)基內(nèi)CO2轉(zhuǎn)變成CO3），通過(guò)電極檢測(cè)培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)。3應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)：許多細(xì)菌

2、生長(zhǎng)過(guò)程中，常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象，如很多需氧菌在胰酶消化大豆肉湯中生長(zhǎng)時(shí)，由于消耗培養(yǎng)瓶中的氧氣而首先表現(xiàn)為吸收氣體。而厭氧菌生長(zhǎng)時(shí)最初均無(wú)吸收氣體現(xiàn)象，僅表現(xiàn)為產(chǎn)生氣體（主要為CO2），因此可利用培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力的改變檢測(cè)微生物的生長(zhǎng)情況。4采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng)：微生物在代謝過(guò)程中必然會(huì)產(chǎn)生終代謝產(chǎn)物CO2，引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改變。利用光電比色檢測(cè)血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變，可判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)。5BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)：該系統(tǒng)在每個(gè)培養(yǎng)瓶底部裝置一帶含水指示劑的CO2感受器，當(dāng)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)有微生物生長(zhǎng)時(shí)，其釋放出的CO2可滲透至感受器，并與感受器指示劑上飽和

3、水發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生游離氫離子使pH值降低，感受器上的指示劑由綠變黃。感受器上方的光發(fā)射二極管每10min發(fā)一次光投射到感受器上，再由一光電探測(cè)器測(cè)量其產(chǎn)生的反射光。反射光強(qiáng)度傳送至微機(jī)后，會(huì)自動(dòng)連續(xù)記憶并繪成生長(zhǎng)曲線圖，由微機(jī)分析判斷陰性或陽(yáng)性，以此確定是否有微生物生長(zhǎng)。6Bactec9000自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)：系統(tǒng)利用熒光法作為檢測(cè)手段，其CO2感受器上含有熒光物質(zhì)。當(dāng)培養(yǎng)瓶中有微生物存在時(shí)，產(chǎn)生的CO2可與感受器中的水發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生H+，使pH值降低，酸性環(huán)境促使感受器釋放出熒光物質(zhì)。從光發(fā)射二極管發(fā)射的光激發(fā)熒光感受器而產(chǎn)生熒光。光電比色檢測(cè)儀每10min直接對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)，此熒光強(qiáng)度隨

4、CO2的產(chǎn)生量增多而增強(qiáng)。數(shù)據(jù)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)后，生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)根據(jù)熒光的線性增加或熒光產(chǎn)量的增加等特有標(biāo)準(zhǔn)，分析細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，最終判斷陽(yáng)性或陰性。7Vital血培養(yǎng)系統(tǒng)：系統(tǒng)采用同源熒光技術(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)微生物的生長(zhǎng)。與培養(yǎng)基結(jié)合的熒光分子在最初具有一定熒光值，當(dāng)有微生物存在時(shí)，其生長(zhǎng)代謝過(guò)程中或產(chǎn)生CO2、或發(fā)生pH值改變、或氧化還原使電位改變等，均可導(dǎo)致液體培養(yǎng)基內(nèi)的熒光分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而成為無(wú)熒光的化合物，即發(fā)生熒光衰減。通過(guò)光電比色計(jì)檢測(cè)熒光衰減水平，可判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)。8微生物自動(dòng)鑒定分析系統(tǒng)：將物理和化學(xué)分析方法相結(jié)合，根據(jù)細(xì)菌不同的生物學(xué)性狀和代謝產(chǎn)物的差異，在微量快速培養(yǎng)基和微量生化反

5、應(yīng)系統(tǒng)的基礎(chǔ)上，將細(xì)菌對(duì)底物的生化類(lèi)型與已建立數(shù)據(jù)庫(kù)類(lèi)型相比較，即可得出鑒定結(jié)果。9微生物數(shù)碼鑒定：指通過(guò)數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫(kù)或編成檢索本。通過(guò)對(duì)未知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字（編碼），查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫(kù)，得到細(xì)菌名稱(chēng)。10自動(dòng)化抗生素敏感性試驗(yàn)：其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)。將抗生素微量稀釋在條孔或條板中，加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育，儀器每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度，或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。得出待檢菌在各藥物濃度的生長(zhǎng)斜率，經(jīng)回歸分

6、析得到最低抑菌濃度MIC值，并根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)得到相應(yīng)敏感度。11VITEK自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)：鑒定原理是根據(jù)不同微生物的理化性質(zhì)不同，采用光電比色法，測(cè)定微生物分解底物導(dǎo)致pH值改變而產(chǎn)生的不同顏色，來(lái)判斷反應(yīng)的結(jié)果。VITEK系統(tǒng)可快速鑒定500多種臨床病原菌。具有20多種藥敏測(cè)試卡、90多種抗生素和測(cè)定超廣譜-內(nèi)酰胺酶測(cè)試卡。還有根據(jù)細(xì)菌耐藥規(guī)律而設(shè)定的專(zhuān)家系統(tǒng)，可幫助校正和修改結(jié)果。12MicroScan Walk/ Away自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)：系統(tǒng)除采用傳統(tǒng)呈色反應(yīng)法外，同時(shí)采用敏感度極高的快速熒光測(cè)定技術(shù)來(lái)檢測(cè)細(xì)菌胞外酶。鑒定板有普通板和快速板兩種，普通

7、板獲得結(jié)果需要1618h，快速板測(cè)定只需23.5h，可鑒定近800種細(xì)菌。藥敏部分采用比濁法進(jìn)行測(cè)定。13Biolog微生物鑒定系統(tǒng)：其原理是利用微生物對(duì)不同碳源代謝率的差異，通過(guò)檢測(cè)微生物細(xì)胞利用不同碳源進(jìn)行新陳代謝過(guò)程中產(chǎn)生的氧化還原酶與顯色物質(zhì)發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致的吸光度以及由于微生物生長(zhǎng)造成的濁度差異，與標(biāo)準(zhǔn)菌株數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì)，即可得出最終鑒定結(jié)果。二、選擇題【A型題】1B 2D 3 C 4E 5A 6C 7B 8D 9E 10C 11A 12B 13C 14D 15E 【X型題】1BD 2ABCDE 3ABC 4ABCD 5BDE6ABCD 7ACD 8ABCDE 9ABCDE 10ABC

8、DE11BCDE 12BCDE 13ABCDE 14ABCDE 15ABCDE三、簡(jiǎn)答題1. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化血培養(yǎng)儀培養(yǎng)系統(tǒng)的特點(diǎn)。答：培養(yǎng)系統(tǒng)包括培養(yǎng)基、恒溫裝置和震蕩培養(yǎng)裝置。具有培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富，檢測(cè)靈敏度高，檢出的時(shí)間短，檢出病原菌的種類(lèi)多，抗干擾能力強(qiáng)、污染明顯減少等特點(diǎn)。2. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化血培養(yǎng)儀檢測(cè)系統(tǒng)的工作原理。答：檢測(cè)系統(tǒng)由計(jì)算機(jī)控制，對(duì)血培養(yǎng)實(shí)施連續(xù)、無(wú)損傷瓶外監(jiān)測(cè)。其工作原理主要是通過(guò)自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基（液）中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO2的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢測(cè)微生物的存在。3. 自動(dòng)化血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)按檢測(cè)原理可分為哪幾類(lèi)，各類(lèi)型的工作原理是什么

9、？答：以檢測(cè)培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓為基礎(chǔ)的血培養(yǎng)系統(tǒng)：血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一定導(dǎo)電性。微生物在生長(zhǎng)代謝的過(guò)程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán)，通過(guò)電極檢測(cè)培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)；應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng):許多細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中，常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象，因此可利用培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)壓力的改變檢測(cè)微生物的生長(zhǎng)情況；采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng):微生物在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的CO2引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改變。利用光電比色檢測(cè)血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變，可判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)。4. 簡(jiǎn)述自動(dòng)血培養(yǎng)儀的基本結(jié)構(gòu)及其功能。答：主要培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)等三部分組成。培養(yǎng)瓶:通

10、常為一次性無(wú)菌培養(yǎng)瓶，提供不同細(xì)菌繁殖所必需的增菌液體培養(yǎng)基和適宜的氣體成分，并且含有不同的指示系統(tǒng)；培養(yǎng)儀：設(shè)有恒溫、振蕩培養(yǎng)裝置及監(jiān)測(cè)裝置,培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行培養(yǎng)及連續(xù)監(jiān)測(cè)，并給予提示信息；數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)：收集并分析來(lái)自培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù)，以及將患者和培養(yǎng)瓶的資料存入數(shù)據(jù)庫(kù)。5. 采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng)，按檢測(cè)手段可分為哪幾類(lèi)？答：采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng)，按檢測(cè)手段可分成BioArgos系統(tǒng)、BacT/Alert系統(tǒng)、Bactec9000系列和Vital系統(tǒng)等四類(lèi)。6. 簡(jiǎn)述BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。答：該系統(tǒng)在每個(gè)培養(yǎng)瓶底部裝置一帶含水指示劑的CO2感受器，當(dāng)培養(yǎng)

11、瓶?jī)?nèi)有微生物生長(zhǎng)時(shí)，其釋放出的CO2可滲透至感受器，并與感受器指示劑上飽和水發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生游離氫離子使pH值降低，指示劑由綠變黃。感受器上方的光發(fā)射二極管每10min發(fā)一次光投射到感受器上，再由一光電探測(cè)器測(cè)量其產(chǎn)生的反射光。產(chǎn)生的CO2越多，則被反射的光就越多。反射光強(qiáng)度傳送至微機(jī)后，會(huì)自動(dòng)連續(xù)記憶并繪成生長(zhǎng)曲線圖，由微機(jī)分析判斷陰性或陽(yáng)性，以此確定是否有微生物生長(zhǎng)。7. 簡(jiǎn)述Bactec自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。答：BACTEC系統(tǒng)利用熒光法作為檢測(cè)手段，其CO2感受器上含有熒光物質(zhì)。當(dāng)培養(yǎng)瓶中有微生物存在時(shí)，產(chǎn)生的CO2可與感受器中的水發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生H+，使pH值降低，酸性環(huán)境促使感受器

12、釋放出熒光物質(zhì)。從光發(fā)射二極管發(fā)射的光激發(fā)熒光感受器而產(chǎn)生熒光。光電比色檢測(cè)儀每10min直接對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行檢測(cè)，此熒光強(qiáng)度隨CO2的產(chǎn)生量增多而增強(qiáng)。數(shù)據(jù)傳輸?shù)接?jì)算機(jī)后，生長(zhǎng)監(jiān)測(cè)系統(tǒng)根據(jù)熒光的線性增加或熒光產(chǎn)量的增加等特有標(biāo)準(zhǔn)，分析細(xì)菌的生長(zhǎng)情況，最終判斷陽(yáng)性或陰性。8. 簡(jiǎn)述Vital自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)工作原理。答：該系統(tǒng)采用同源熒光技術(shù)來(lái)監(jiān)測(cè)微生物的生長(zhǎng)。也就是說(shuō)，與培養(yǎng)基結(jié)合的熒光分子在最初具有一定熒光值，當(dāng)有微生物存在時(shí)，其生長(zhǎng)代謝過(guò)程中或產(chǎn)生CO2、或發(fā)生pH值改變、或氧化還原使電位改變等，均可導(dǎo)致液體培養(yǎng)基內(nèi)的熒光分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變而成為無(wú)熒光的化合物，即發(fā)生熒光衰減。通過(guò)光電比色計(jì)檢

13、測(cè)熒光衰減水平，可判斷有無(wú)微生物生長(zhǎng)。9. 簡(jiǎn)述BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的主要組成部分及相應(yīng)功能。答： BacT/Alert自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的主要組成部分有培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。培養(yǎng)瓶為一次性無(wú)菌培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶底部都包含一個(gè)檢測(cè)CO2的傳感器，通過(guò)檢測(cè)CO2變化作為微生物生長(zhǎng)狀況的指示器；培養(yǎng)儀中設(shè)有恒溫裝置、振蕩培養(yǎng)裝置及監(jiān)測(cè)裝置。培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行培養(yǎng)并借助固相反射光光度計(jì)連續(xù)監(jiān)測(cè)每個(gè)培養(yǎng)瓶的狀態(tài)。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)由主機(jī)、監(jiān)視器、鍵盤(pán)、條形碼閱讀器及打印機(jī)等組成。主要功能是收集并分析來(lái)自BacT/Alert血培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù)，并將患者和培養(yǎng)瓶的資料存入數(shù)據(jù)庫(kù)。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)可根

14、據(jù)各實(shí)驗(yàn)室的要求追蹤大量的信息，根據(jù)病區(qū)、微生物類(lèi)型及時(shí)間追蹤分析結(jié)果。10. 簡(jiǎn)述BACTEC9000系列自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的主要組成部分及相應(yīng)功能。答：主要組成部分有培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)儀和數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。培養(yǎng)瓶針對(duì)微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)和氣體環(huán)境的要求懸殊較大，包括患者的年齡和體質(zhì)差異以及之前是否服用抗菌素等要素。BACTEC9000系統(tǒng)可提供多種專(zhuān)用封閉式培養(yǎng)瓶；各種儀器的培養(yǎng)儀結(jié)構(gòu)基本相同，主要由轉(zhuǎn)動(dòng)體、鍵盤(pán)、條形碼閱讀器、液晶顯示屏、計(jì)算機(jī)及外部接口等組成。培養(yǎng)瓶放入儀器后進(jìn)行轉(zhuǎn)動(dòng)，恒溫培養(yǎng)，并連續(xù)監(jiān)測(cè)每個(gè)培養(yǎng)瓶熒光信號(hào)的變化；數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)獲取、整理、處理并分析來(lái)自BACTEC9000系列培養(yǎng)儀的數(shù)據(jù)信息

15、，以及將患者相關(guān)信息和培養(yǎng)瓶資料存入數(shù)據(jù)庫(kù)，并進(jìn)行管理。11. 第三代自動(dòng)血培養(yǎng)儀有哪些性能特點(diǎn)？答：（1）培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富；（2）以連續(xù)、恒溫、振蕩方式培養(yǎng)，細(xì)菌易于生長(zhǎng)；（3）培養(yǎng)瓶多采用不易碎材料制成，提高了使用的安全性；（4）采用封閉式非侵入性的瓶外監(jiān)測(cè)方式，避免標(biāo)本交叉感染，且無(wú)放射性污染；（5）自動(dòng)連續(xù)監(jiān)測(cè)，縮短了檢測(cè)時(shí)間，陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)可快速、準(zhǔn)確；（6）結(jié)果報(bào)告及時(shí)，85%以上的陽(yáng)性標(biāo)本能在48小時(shí)內(nèi)被檢出；（7）培養(yǎng)瓶多采用雙條形碼技術(shù)，只需用電腦上的條碼閱讀器掃描報(bào)告單上的條碼，就可直接查詢(xún)到病人的結(jié)果及生長(zhǎng)曲線；（8）培養(yǎng)瓶可隨時(shí)放入培養(yǎng)系統(tǒng)，并進(jìn)行追蹤檢測(cè)；（9）數(shù)據(jù)處理功

16、能較強(qiáng)，數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)隨時(shí)監(jiān)測(cè)感應(yīng)器的讀數(shù)，依據(jù)數(shù)據(jù)的變化來(lái)判定標(biāo)本的陽(yáng)性或陰性，并可進(jìn)行流行病學(xué)的統(tǒng)計(jì)分析；（10）設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng)，可保證儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)；（11）可進(jìn)行血液及所有無(wú)菌體液的細(xì)菌培養(yǎng)檢測(cè)。12. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化血培養(yǎng)檢測(cè)和分析系統(tǒng)常見(jiàn)故障及維護(hù)。答：溫度異常：多數(shù)情況下是由于儀器門(mén)打開(kāi)的次數(shù)太多引起，應(yīng)盡量減少儀器門(mén)開(kāi)關(guān)次數(shù)，并確保培養(yǎng)過(guò)程中儀器門(mén)是緊閉的。應(yīng)經(jīng)常進(jìn)行溫度核實(shí)。瓶孔被污染：如果培養(yǎng)儀瓶孔內(nèi)的培養(yǎng)瓶破裂或泄漏，需按各儀器要求及時(shí)進(jìn)行清潔和消毒處理。數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)與培養(yǎng)儀失去信息聯(lián)系或不工作：此類(lèi)故障只可能在微機(jī)與培養(yǎng)儀儀器相對(duì)獨(dú)立的系統(tǒng)中出現(xiàn)。因此必須注意放置培養(yǎng)瓶時(shí)，

17、需先掃描條形碼，再將它放入啟用的瓶孔內(nèi)，患者、檢驗(yàn)號(hào)、培養(yǎng)瓶的信息要等到微機(jī)系統(tǒng)工作之后才能輸入。儀器對(duì)測(cè)試中的培養(yǎng)瓶出現(xiàn)異常反應(yīng)：卸出培養(yǎng)瓶，重新掃描后裝入到另一孔內(nèi)，然后對(duì)異常孔作質(zhì)控。13. 簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定的工作原理。答：采用微生物數(shù)碼鑒定原理，這是自動(dòng)化鑒定系統(tǒng)的基礎(chǔ)。數(shù)碼鑒定是指通過(guò)數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫(kù)或編成檢索本。通過(guò)對(duì)未知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字（編碼），查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫(kù)，得到細(xì)菌名稱(chēng)。其基本原理是計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)每個(gè)細(xì)菌條目對(duì)系統(tǒng)中每個(gè)生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻率總和。14. 簡(jiǎn)述自動(dòng)化

18、抗生素敏感性試驗(yàn)的檢測(cè)原理。答：自動(dòng)化抗生素敏感性試驗(yàn)使用藥敏測(cè)試板（卡）進(jìn)行測(cè)試，其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀釋試驗(yàn)。將抗生素微量稀釋在條孔或條板中，加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接孵育，儀器每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度，或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒光原性物質(zhì)的水解，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。得出待檢菌在各藥物濃度的生長(zhǎng)斜率，經(jīng)回歸分析得到最低抑菌濃度MIC值，并根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)得到相應(yīng)敏感度：敏感“S”、中度敏感“MS”和耐藥“R”。15. 簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)與相應(yīng)功能。答：（1）測(cè)試卡（板）：是系統(tǒng)的工作基礎(chǔ)，各種不同的測(cè)試卡（板）具有不同的功能。最基本的測(cè)試

19、卡（板）包括革蘭氏陽(yáng)、陰性菌鑒定卡（板），革蘭氏陽(yáng)、陰性菌藥敏試驗(yàn)卡（板）。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)涂片和革蘭氏染色結(jié)果進(jìn)行選擇。（2） 菌液接種器：可分為真空接種器和活塞接種器，以真空接種器較為常用?？蓪⑴浜玫木航臃N至測(cè)試卡中。（3）培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)系統(tǒng)：測(cè)試卡（板）接種菌液后即可放入孵箱/讀數(shù)器中進(jìn)行培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)。監(jiān)測(cè)系統(tǒng)每隔一定時(shí)間對(duì)每孔的透光度或熒光物質(zhì)的變化進(jìn)行檢測(cè)，并將檢測(cè)數(shù)據(jù)傳送給數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。（4）數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)：數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)就象整個(gè)系統(tǒng)的神經(jīng)中樞，始終保持與孵箱/讀數(shù)器、打印機(jī)的聯(lián)絡(luò)，控制孵箱溫度，自動(dòng)定時(shí)讀數(shù)，負(fù)責(zé)數(shù)據(jù)的轉(zhuǎn)換及分析處理。16.簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的鑒定卡類(lèi)型及工作原理。答：微

20、生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的鑒定卡通常包括常規(guī)革蘭氏陽(yáng)（陰）性卡和快速熒光革蘭氏陽(yáng)（陰）性卡兩種。常規(guī)革蘭氏陽(yáng)（陰）性卡對(duì)各項(xiàng)生化反應(yīng)結(jié)果（陰性或陽(yáng)性）的判定是根據(jù)比色法的原理，系統(tǒng)以各孔的反應(yīng)值作為判斷依據(jù)，組成數(shù)碼并與數(shù)據(jù)庫(kù)中已知分類(lèi)單位相比較，獲得相似系統(tǒng)鑒定值；快速熒光革蘭氏陽(yáng)（陰）性板則根據(jù)熒光法的鑒定原理，通過(guò)檢測(cè)熒光底物的水解、熒光底物被利用后的pH值變化、特殊代謝產(chǎn)物的生成和某些代謝產(chǎn)物的生成率來(lái)進(jìn)行菌種鑒定。17簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的藥敏卡類(lèi)型及工作原理。答：藥敏測(cè)試板分為常規(guī)測(cè)試板和快速熒光測(cè)試板兩種。常規(guī)測(cè)試板的檢測(cè)原理為比濁法，在含有抗生素的培養(yǎng)基中，濁度的增加提示細(xì)菌生長(zhǎng)，根

21、據(jù)判斷標(biāo)準(zhǔn)解釋敏感或耐藥；快速熒光測(cè)試板的檢測(cè)原理為熒光法，在每一反應(yīng)孔內(nèi)參入熒光底物，若細(xì)菌生長(zhǎng)，表面特異酶系統(tǒng)水解熒光底物，激發(fā)熒光，反之無(wú)熒光。以最低藥物濃度仍無(wú)熒光產(chǎn)生的濃度為最低抑菌濃度(MIC)。18簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的性能特點(diǎn)。答：（1）自動(dòng)化程度較高，可自動(dòng)加樣、聯(lián)機(jī)孵育、定時(shí)掃描、讀數(shù)、分析、打印報(bào)告等；（2）功能范圍大，包括需氧菌、厭氧菌、真菌鑒定及細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)、最低抑菌濃度（MIC）測(cè)定；（3）檢測(cè)速度快，快速熒光測(cè)試板的鑒定時(shí)間一般為24小時(shí)，絕大多數(shù)細(xì)菌的鑒定可在46小時(shí)內(nèi)得出結(jié)果；（4）系統(tǒng)具有較大的細(xì)菌資料庫(kù)，鑒定細(xì)菌種類(lèi)可達(dá)100700余種不等

22、，可進(jìn)行數(shù)十甚至100多種不同抗生素的敏感性測(cè)試；（5）使用一次性測(cè)試卡或測(cè)試板，可避免由于洗刷不潔而造成人為誤差；（6）數(shù)據(jù)處理軟件功能強(qiáng)大，可自動(dòng)檢測(cè)結(jié)果作出統(tǒng)計(jì)和組成多種統(tǒng)計(jì)學(xué)報(bào)告；（7）軟件和測(cè)試卡（板）大多可不斷升級(jí)更新，使設(shè)備功能不易老化；（8）設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng)，保證儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。19簡(jiǎn)述微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的維護(hù)。答：（1）嚴(yán)格按手冊(cè)規(guī)定進(jìn)行開(kāi)、關(guān)機(jī)及各種操作；（2）定期清潔比濁儀、真空接種器、封口器、讀數(shù)器及各種傳感器，避免由于灰塵而影響判斷的正確性；（3）定期用標(biāo)準(zhǔn)比濁管對(duì)比濁儀進(jìn)行校正，用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株測(cè)試各種試卡，并作好質(zhì)控記錄；（4）建立儀器使用以及故障和維

23、修記錄，詳細(xì)記錄每次使用情況和故障的時(shí)間、內(nèi)容、性質(zhì)、原因和解決辦法；（5）定期由工程師作全面保養(yǎng)，并排除故障隱患。20臨床常見(jiàn)的自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)分成哪幾類(lèi)？ 答：臨床常見(jiàn)的自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)分成VITEK 系統(tǒng)、MicroScan Walk/Away系統(tǒng)、PHOENIX 系統(tǒng)和SENSITITRE ARIS系統(tǒng)等四類(lèi)。21. 簡(jiǎn)述VITEK 系統(tǒng)的鑒定原理及特點(diǎn)。答：VITEK 系統(tǒng)的鑒定原理是根據(jù)不同微生物的理化性質(zhì)不同，采用光電比色法，測(cè)定微生物分解底物導(dǎo)致pH值改變而產(chǎn)生的不同顏色，來(lái)判斷反應(yīng)的結(jié)果。VITEK系統(tǒng)可快速鑒定約500種臨床病原菌。具有20多種藥敏測(cè)試卡、90多種抗生素和測(cè)定超廣譜-內(nèi)酰胺酶測(cè)試卡，快